‘壹’ 目前，将目的基因导入动物细胞最常用和最有效的方法是
我觉得这四个答案里A最合适了。请先看四种方法的定义：
A:显微注射法（microinjection）是利用管尖极细（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射针，将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中，然后借由宿主基因组序列可能发生的重组（rearrangement）、缺失（deletion）、复制（plication）或易位（translocation）等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。
B:农杆菌转化法是将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。
C:基因枪法又称粒子轰击(particle
bombardment)，高速粒子喷射技术(High-velocity
particle
microprojection)或基因枪轰击技术(gene
gun
bombardment)，是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于1983年研究成功。主要适用于单子叶植物。[1]
但转化效率较低。
D:花粉管通道法：在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。
所以，BCD都是专门针对比较难于转入外源基因的植物细胞的，排除法就可以选A。
另外，我觉得还有一种方法更为可靠，那就是转染。
‘贰’ 植物组织培养一般方法
植物组织培养可以分为四个阶段：
（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。
（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根。
（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。
‘叁’ 植物组织培养中 灭菌的方法主要有哪些
1.湿热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，穿透力强，温度高，灭菌效果最好。
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气。有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多。在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除。否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底。
2.紫外线 杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制。
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关。
我国规定紫外灯照射强度距离1m处不低于70μw/cm2。一般紫外灯使用超过100h，则应更换。表面有尘土，降低灭菌效果。紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜。
3干热灭菌法。灼烧与火焰灭菌：灼烧主要是用于工具灭菌，在火焰上灼烧即可达到彻底灭菌，火焰灭菌通常用于无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，阻止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。
4干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌。一般将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，均可在烤箱内干热灭菌。通常加热至160℃，保温2h可完全灭菌。但不宜超过170℃，玻璃量具易变形。降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂。干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底
‘肆’ 什么是动物组织培养法
烧伤病人需要大量的皮肤移植，过去是从自己身上完好的皮肤处取下来，剪成一小块一小块，然后移植到没有皮肤的地方，让其不断增殖，向四周扩张。如果是一位体表80%～90%的皮肤都已经烧焦的病人，靠仅存的10%～20%皮肤进行移植是不够的。因此，为了抢救烧伤病人，需要解决皮肤的离体培养问题。即从病人身上取下一块完好的皮肤，在培养基上进行培养，让它分裂繁殖，使皮肤面积不断增大，这样便可以满足植皮需求。那怕只有拇指甲那么大一块皮肤，我们的科学家就能使它几十倍、几百倍地扩张，保证移植皮肤时能供应。
现在，这种在体外培养皮肤的办法找到了，这就是动物组织培养法。皮肤作为一种组织细胞的集合体，对它的培养并不复杂，关键是培养基。不同组织培养，对培养基的要求是不一样的。例如，培养海拉细胞，与培养皮肤细胞的培养基就有比较大的区别。因为海拉细胞需要的营养成分与皮肤细胞需要的营养成分不同。
科学家从烧伤病人身上取下一块很小的皮肤，放在培养基上进行培养，一个月以后，变成一块相当大的皮肤，足够供应医生们移植之用。据报道，一位烧伤外科医生用体外培养的皮肤，抢救了烧伤面积达97%的两兄弟的生命。体外培养的皮肤来源于自身，所以移植到身上，不会出现排异现象。
‘伍’ 组织培养中常用的促进生根的措施有哪些
促进插条生根的方法很多，目前使用最广的是用植物生长激素处理。此外还有环剥和其他药剂处理法。
（1）激素处理
常用的激素有：吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚丁酸、萘乙酸、2，4-D等。其中效果较好的是吲哚乙酸、吲哚丁酸及萘乙酸。这些有机酸类可促使对生根有促进作用的有机物在插穗下部积累，从而促进发根。具体的处理方法有：
水剂处理：将插穗下端浸在生长素的水溶液或酒精溶液中。又可分为浓液速蘸法和溶液浸渍法。浓度较高用速蘸法，一般在溶液中浸5秒左右，然后扦插。浓度较低用浸渍法（一般10～100毫克/千克），将插穗茎部（2.5厘米）浸在溶液中经24～48小时后扦插。
粉剂处理：将插穗的下端蘸于生长素与木炭、滑石粉或其他粉末的干混合粉剂中，然后进行扦插。具体操作为：将插穗茎部（1.5～3厘米处）先行沾湿，滴去多余水分，然后蘸以粉剂即可马上扦插。
吲哚乙酸、吲哚丁酸及萘乙酸均难溶于水，所以在配制时应溶于开水或溶于95%浓度的酒精中，然后再用水稀释到所需浓度。粉剂的配制则可直接将生长素的结晶混入定量的木炭粉、滑石粉中，放在研钵中碾碎搅拌后使用。
配好的溶液和粉剂应保存在密闭的玻璃器皿中，放干燥、黑暗、冷凉的地方，吲哚乙酸在水溶液中易失效，应临时配制，萘乙酸，2，4-D可保持较长时间，粉剂在阴凉处可保持数月。
扦插时使用的浓度主要视树种、枝条木质化程度及处理时间而异。此外，气温高低、土壤酸碱度等均有一定影响。针叶树类一般要求较其他种类浓度高，用吲哚丁酸药剂处理浓度为20～80毫克/千克。吲哚乙酸溶液及萘乙酸溶液，对大多数种类宜用40～100毫克/千克，浸24小时。落叶乔灌木及藤本：浓度因插条木质化程度而异，对大部分易发根种类的半熟枝，可用10～12毫克/千克的吲哚乙酸溶液处理24小时，过浓则往往有药害。难发根的种类可用80～200毫克/千克浓度。粉剂则用4000毫克/千克浓度。若用溶液速蘸法处理，则浓度为2000～5000毫克/千克。
（2）高锰酸钾处理
高锰酸钾蘸根后可分解为氧气、二氧化锰、氧化钾等，氧气可促进氧化，增强呼吸作用，使插条内部的养分变为可给态，从而促进发根。二氧化锰能杀菌、有防腐作用。一般使用浓度为0.3%～0.1%。
（3）环剥处理
对不易生根的树种，在生长季环剥，到休眠期在该处剪下扦插。由于伤处养分集中而利于生根、发芽。
先确定你要研究哪个植物的组培，然后再查这个植物或者相关植物的他人组培研究（可通过知网、维普网等），至于常用方法一两句话说不清楚，你到网络文库了下载几篇植物组培论文就行了，里面一般都有方法的，植物组培大体要经历：外植体取材、消毒、无菌操作、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽、温室大棚管理等，
‘柒’ 植物组织培养、动物细胞培养的目的和用途分别是什么
理论基础：植物细胞的全能性。
植物组织培养
植物组织培养技术的应用范围：快速繁殖、培育无病毒植物，通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。
植物体细胞杂交
植物体细胞杂交是用两个来自于不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。
动物细胞工程
常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等（动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础）
动物细胞培养
动物细胞能够分泌蛋白质，如抗体等。但是单个细胞分泌的蛋白质的量是很少的，要借助于大规模的动物细胞培养获得大量的分泌蛋白。
动物细胞培养技术的应用
生产许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。动物细胞融合
‘捌’ 动物组织培养原理
细胞培养(cell
culture):
动植物细胞在体外培养的条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织。
细胞培养分为动物细胞培养和植物细胞培养，其中动物细胞培养是指在体外无菌条件下，模拟体内正常生理状态下的基本条件和环境，分离培养机体组织细胞或建立细胞系，并使得细胞在体外培养容器中长期生长或繁殖的方法；而植物细胞培养是在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于
液体培养基中进行震荡培养，得到分散成游离
的悬浮细胞，通过继代培养使
细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。根据培养对象
，植物细胞培养主要有单细胞培养，单倍体培养，原生质体培养等
。按照培养系统可分为悬浮培养、液体培养、固体培养、固定化培养等。
植物细胞培养是将离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。依据的原理是植物细胞的全能性
植物细胞培养主要有如下几种技术：
1．
组织培养：诱发产生愈伤组织，如果条件适宜，可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异；进行无性繁殖；制取代谢产物。
2．
悬浮细胞培养：在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养，制取植物代谢产物。
3．
原生质体培养：脱壁后的植物细胞称为原生质体（protoplast），其特点是：①比较容易摄取外来的遗传物质，如dna；②便于进行细胞融合，形成杂交细胞；③与完整细胞一样具有全能性，仍可产生细胞壁，经诱导分化成完整植株：
4．
单倍体培养：通过花药或花粉培养可获得单倍体植株，经人为加倍后可得到完全纯合的个体。
‘玖’ 组织培养的具体方法是什么
一、培养基配制 配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。 自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。为了方便起见，现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。 1．配制几种母液 1．配制MS大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。 分别称取 NH4NO3 165g KH2PO4 17g KNO3 190g CaCl2·2H2O 44g MgSO4·7H2O 37g 各自配成1L的母液。倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 2．配制MS微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液。 依次称取 KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025g H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025g MnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025g ZnSO4·7H2O 0.86g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。 分别称取 CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g 各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。 3．配制MS有机母液 一般配制成100倍MS有机母液。 依次称取 肌醇 10g 盐酸硫胺素（VB1） 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇（VB6） 0.05g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 4．配制MS铁盐母液 一般配制成100倍MS铁盐母液。 依次称取 EDTA二钠3.73g FeSO4·7H2O2.78g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 2．配制培养基 以配置1L MS培养基为例，按顺序进行如下操作： 1．先在烧杯中放入一些蒸馏水。 2．分别取上面八种母液10ml倒入。 3．一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。 4．加蒸馏水用量筒定溶至1L。 5．按设计好的方案添加各种激素，由于激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。 6．用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。（有条件的话使用酸度计，比较精确） 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。 1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液。 7．称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。 8．稍微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。 9．放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。 10．灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。 二、灭菌 灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是：凡是暴露在空气中的物体，接触自然水源的物体，至少它的表面都是有菌的。依此观点，无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表，如整个消化道、呼吸道，即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。 这里所指的菌，包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。菌的特点是：极小，肉眼看不见。无处不在，无时不有，无孔不入。在自然条件下忍耐力强，生活条件要求简单，繁殖力极强，条件适宜时便可大量滋生。 无菌的范畴是：经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体，经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体（当然这些方法必须已经证明是有效的），高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部，强酸强碱，化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的。从以上可以看出：在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多。 灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。与此相关的一个概念是消毒，它指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用，显然经过消毒，许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死，即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物，所以通过严格灭菌的操作空间（接种、超净台等）和使用的器皿，以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行的操作，就叫做无菌操作。 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的，甚至超过微生物的培养要求，这是因为培养基含有丰富的营养，稍不小心就引起杂菌污染。要达到彻底灭菌的目的，必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌，才能保证培养时不受杂菌的影响，使试管苗能正常生长。 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 1．培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 注意完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。 关阀再通电后，压力表上升达到0.1MPa时，开始计时，维持压力0.1-0.15MPa，20分钟。 按容器大小不同，保压时间有所不同，见表。该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字，如果容器体积较大，但是放置的数量很少，也可以减少时间。