㈠ 植物体细胞杂交的第一步是去除细胞壁，分离出有活力的原生质体，目前比步骤最常用的是酶解法，也就是在温
细胞壁的主要成分是果胶和纤维素 所以用果胶酶和纤维素酶
㈡ 简述原生质体分离培养的主要过程解答
（1）纤维素酶 果胶酶 （2）细胞膜、细胞质、细胞核 （3）生长素 细胞分裂素 （4） B （5）植物体细胞杂交植物细胞的质壁分离和复原
㈢ 提取原生质体的方法有哪些
酶解法，植物细胞用纤维素酶和果胶酶
㈣ 酶解分离原生质体有哪些常用的方法
分离常用方法：分离原生质体时，首先要使酶制剂大量吸附到细胞壁上去。
因此，一般先将材料分离成单细胞，然后分解细胞壁。采用将酶液减压渗入组织，或将组织切成薄片等方法，都可增加酶液与纤维素分子接触的机会。用酶法分离原生质体可以采用以下两种不同的方法路线。两步法或顺序法：首先用离析酶或果胶酶处理组织使胞间层降解，把细胞分开再用纤维素酶处理这些游离的细胞，使原生质体释放出来。
一步法或同时法：即把一定量的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶组成混合酶溶液，将材料置于其中处理，一次即可得到分离的原生质体。因为一步法方便省力，因此很常用。
㈤ 酶解分离原生质体需要哪些植物材料
植物材料：一般来说，植物各个器官，如根、茎、花、果实、种子及愈伤细胞和悬浮细胞等都可作为分离原生质体的材料，但是，要获得高质量的原生质体，则须选用生长旺盛、生命力强的组织作材料。材料的生理状况是原生质体质量的决定性因素之一。
A.细胞悬浮培养物：在建立细胞悬浮培养物之前，需提前培养愈伤组织。即取用成熟种胚、未成熟胚、幼穗、花药、胚芽鞘或幼叶等，经无菌消毒后，在培养基上，诱导愈伤组织，每隔24d转接一次，从中选出增殖较快而且呈颗粒状的愈伤组织，或经继代培养一次后，转移到液体培养基中进行悬浮培养，经过悬浮培养34个月后，悬浮培养细胞的大小变得较为一致，且细胞质变得较浓时，可用作分离原生质体。
B.叶肉细胞：利用叶片不需要杀死植株就可以分离到大量一致的原生质体，而且叶肉细胞排列松散，酶试剂很容易达到细胞壁，因此叶肉细胞是分离原生质体的最好材料。用叶片薄壁组织作为材料，既要考虑植株的生长环境，又要考虑叶片的年龄及其生理状态对原生质体分离的影响。一般取生理状态适宜的叶片，有利于原生质体的细胞再生和细胞分裂。
植物的其他器官也可用于分离原生质体，如用花粉四分体、花粉壁细胞、愈伤组织或细胞悬浮培养物等，愈伤组织或细胞悬浮培养物等应当是处于生长早期或指数生长期的，而且经验表明采用淀粉含量低的易碎组织，分离结果往往较好。
㈥ 请分析回答下面问题：植物叶肉细胞原生质体的分离和培养主要过程可用图解简单表示：（1）原生质体的结构
（1）原生质体是植物细胞去除细胞壁后剩余的部分，由细胞膜、细胞质、细胞核三部分构成．
（2）培育胚状体需要利用植物组织培养技术；植物组织培养过程需要在无菌条件下进行，因此需要对培养基进行严格的灭菌；决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要．
（3）将叶片的叶肉细胞培养成完整的植株体现了细胞全能性．
（4）从叶片的叶肉细胞经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化才能获得胚状体，该过程中细胞通过有丝分裂方式增殖，故选：C．
（5）决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，所以图中需要在培养基中加入激素调整细胞分裂分化的是c、d阶段；若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到愈伤组织；通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，所以为了获得三七的人工种子，则需要培养到胚状体．
（6）将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法．
故答案为：
（1）细胞膜、细胞质、细胞核
（2）植物组织培养 细胞分裂素和生长素 灭菌
（3）细胞全能性 C
（4）CD 愈伤组织 胚状体
（5）农杆菌转化法、基因枪法
㈦ 关于植物原生质体提取，请做过这方面实验的高手指教~
1 黄化苗对有的植物来说只会更有利做原生质体，比如玉米。
2 酶液均要过0.45的膜， 过滤灭菌。
3 老的方法要撕下表皮，现在常用手术刀片切，要极细的长条。
4 不会，黄化苗的原生质体在显微镜下会成浅浅的黄色，还是能分辨出来的。
你所描述的情况有可能的原因：1 酶失活。2 叶子切得不够细，起码要1mm。3 我觉得你调的渗透压有点高，一般植物0.5-0.6
给你个网址 哈佛大学 Professor shen 的lab， 做原生质体最牛的人，上面有视屏和Protocol, 希望对你有用。（一般做原生质体都是先从拟南芥开始，先练练手，在此基础上建立感兴趣植物的protocol）
http://genetics.mgh.harvard.e/sheenweb/protocols_reg.html
㈧ 原生质体分离
原生质分离：酶（纤维素酶，离析酶）
步骤：叶片表面消毒→去除表皮→叶碎片漂浮在含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→培育→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基→除去小的个体，用血球计计数→调整到合适的密度重悬浮于培养基。
原生质体的培养：
培养基：MS＋NAA 2.0ppm＋BA 0.5ppm＋3％蔗糖＋9％甘露醇
注意：1、原生质体分离后，非常脆弱，需要渗透压保护剂的保护直到细胞壁形成。
2、针对不同的研究对象，培养基中生长素和细胞分裂素的水平要做适当调整。
影响原生质体培养的因素：营养需求（NH4＋不能过多），渗压剂，培养密度（105/mL），
贮藏条件（通常在黑暗处）。
培养方法：液体基质培养法，半液体基质培养法，固体基质培养法，看护培养。
固体培养的步骤：原生质体移入培养基→1体积含原生质体的培养基与1体积含琼脂糖（40℃）的培养基混和→倒转培养皿在25℃下培养→原生质体重新产生细胞壁并分裂成细
胞团→细胞团于琼脂糖基质中传代培养，培养基中应减少渗压剂以利于愈伤组织的形成→诱导分化成植物的根，茎。
原生质体分离培养的意义：1、除去了细胞壁为植物细胞之间的融合扫平了障碍，同时叶为制造新杂种开辟了道路。2、原生质体可摄入外源DNA，细胞器、细菌或病毒颗粒，这些特性与植物全能性相结合为高等植物的遗传饰变打下基础。3、获得细胞无性系和选育突变体的优良起始材料。
㈨ “在植物原生质体的分离与纯化甘露醇起什么作用”
甘露醇(ganluchun)从褐藻细胞中提制的一种脱水剂,可用于医疗上。当用其20%的溶液注进静脉后,由于它在体内很少被分解,造成一时性的血液渗透压提高,以...
如果开了花呗和借呗，是不能自己关闭的，如果不想使用就不要使用就可以了。但是如果触犯支付宝的某些底线，花呗和借呗是会被永久关闭的，但是不建议被永久关闭，花呗和借呗的计算规则跟个人的信用有关，关闭会影响个人信誉。
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(9)最常用的植物原生质体分离方法扩展阅读：
其他使用花呗和借呗的时候需要注意的地方：
1、经常更换手机号：如果经常更换手机，那么支付宝可能会认为用户的支付宝账号存在风险，那样很可能关闭花呗和借呗，所以不要经常更换自己的支付宝手机号；
㈩ 原生质体是怎样分离的
获得大量而有活力的原生质体是原生质体培养能否成功的关键。要分离植物原生质体，必须去掉由果胶质、纤维素、半纤维素及木质素和少量蛋白质等构成的细胞壁。