A. 如何用显微镜观察人血涂片
用显微镜观察人血涂片的步骤:
1.右手握住镜臂,左手托住镜座。
2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘7厘米左右
处)。安装好目镜和物镜。
3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘
米的距离)。
4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以看到白亮的视野。
5.把所要观察的玻片标本(也可以用印有“6”字的薄纸片制成)放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。
6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。
7.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
8.移动装片,使要观察的目标移到视野中央。
9.转运转换器,换用高倍镜。
10.调节细准焦螺旋,直到看到清晰的物像。
B. 显微镜下进行血细胞分类时应观察的部位及方式
应该观察血涂片上体尾交界处的血细胞,在这一块区域血细胞单层分布,排列较均匀,形态典型,有利于观察计数。常见使用“城垛式”的观察方式,或者说弓字形的观察方式。
C. 求观察人血涂片的详细步骤!!
1.右手握住井壁,左手托住镜座。
2.把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处,略偏左。安装好目镜和物镜。
3.移动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜前端与在物台要保持2厘米距离)
4.把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目境内,另一只眼睁开。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。
5.把所要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。
6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(此时眼睛一定要看着物镜)。
7.一只眼项目镜内看,同时逆时针方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升直到看清物象为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物象更加清晰。
注意事项:
实验完毕,把显微镜的外表擦拭干净。如需擦拭目镜和物镜,请用擦镜纸。转动转换器,把两个物镜偏到两边,并将物镜缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里,送回原处。
D. 血涂片染色检查原虫的方法和步骤
方法和步骤如下:
一、玻片清洁
玻片清洁。清洁的玻片无油脂,无划痕,无灰尘,玻片
上有油迹,使厚血膜容易脱落,薄血膜涂布不均匀。在用手
指持玻片时,只能夹持玻片的两侧边缘,不要接触玻片的表
面以避免手指上的油污染污玻片。
1.新的载玻片先用热肥皂水洗涤,再用清水冲洗,然后
用软而洁净的毛巾擦干待用。
2.使用过的载玻片的清洁方法有两种:
①5%的肥皂水煮沸法
将洗衣肥皂削成小片,加水配成约5%的肥皂 水,煮沸
后将玻片一张一张地平放进肥皂水内,微火煮约一刻钟,然
后灭火待肥皂水稍冷后,用清洁干毛巾擦净后待用。
②清洁液浸泡法清洁液配制如下
重铬酸钾 80g
浓硫酸 100ml
水(清净水)1000ml
配制时须先将重铬酸钾研细放入水中,慢慢加温到全部
溶解为止,然后缓缓加入浓硫酸,待溶液冷却后倒入有盖的
大口玻璃缸内。清洁玻片时,将待洗的玻片逐张放入清洁中
浸泡一两天后,取出清水冲洗至完全没有黄色为止。浸泡前
最好用二甲笨除去镜油,清洁液颜色变为墨绿色后即失去清
洁作用,不能再用。
二、制片
1.薄血膜涂制
(1)先用75%酒精棉球将耳垂消毒,待酒精干后用采血针
迅速刺入耳垂近下端边缘处。
(2)用左手的拇指与食指以及右手的中指向相对的方向
将耳垂轻轻挤压出血。
(3)取一张洁净的载玻片,将它的左1/3的表面接触耳垂
上的血滴不要将玻片接触耳垂上的皮肤,使一小滴血在
玻片上。血量1-1.5mm
3
.1/4.火柴头大小。
(4)将推片臵于血溶之前与血液相接触,待血液沿推片边
缘展开后,将推片与载玻片保持30角度,用力均匀迅速将
推片由右向左推出而制成薄血膜。涂制得较好的薄血膜只有
一层血球,血球的分布排列比较均匀,血膜的末端突出如舌
状。
若取的血滴太大,则涂制的血膜太宽太厚,若推时用力
不均匀,则易成梯田状
若用力太大,则血膜两端过厚,若涂片上有油污,则血
膜成多孔状。
2.厚血膜涂制,薄血膜涂好后,再轻挤耳垂挤出约火柴
头大一血滴,将这一滴血滴在玻片的中心1/3处然后用推片
的一角由血滴中央向周围旋转涂成直径约一厘米的圆形血
膜,旋转涂制时间不宜过短,以免形成纤维蛋白束,遮盖了
疟原虫。
厚血薄涂好后,应平放待干,防苍蝇舔食血膜或灰尘落
在上面。受检者的编号可用铅笔或钢笔写在薄血膜的边缘
上,也可用蜡笔写在厚血膜一端。
三、染色
常用的染色方法有姬姆萨氏和瑞氏两种
(一)吉氏染色法,吉氏染剂是最可靠的血膜染剂其优
点是易于掌握很少染色过度,染好后的血膜褪色较慢
1.吉氏染剂的配制
吉氏染剂粉 0.5g
甘油,中性,25ml
甲醇,纯,分析纯,25ml
将吉氏染剂粉0.5臵于乳钵中,加少许甘油充分研磨
再加甘油研磨,直至25甘油加完为止。将充分研磨的吉氏
甘油液倒入无水,干净的棕色玻塞瓶中,然后分次加甲醇于
乳钵洗出染剂倒入瓶中,直至25甲醇将乳钵洗净并全部倒
入瓶中,塞紧,充分摇匀,放臵室内一星期,每天摇动数次
以后即可使用.
2.缓冲液的配制;
为了保证染色良好,使疟原虫的核和胞浆红兰分明,感
染的红血球上的薛氏小点清楚,在稀释染剂厚液时所用的
蒸馏水必须加缓冲液,缓冲蒸馏水。新鲜蒸馏水可能接近
中性,但贮存在一个时期后,由于吸收了空气中的 而变为
酸性,因此蒸馏水中必须加缓冲液,使其达到我们需要的效
果。
缓冲液配制
磷酸氢二钠,无水 9.5g
蒸馏水 1000ml
磷酸二氢钾 9.07g
蒸馏水 1000ml
将上二液分别贮存于紧塞的玻瓶中。
稀释染剂所用的蒸馏水的ph以7.0-7.2为最适宜现
用现配可按下表配制缓冲蒸馏水的配制(ml)
ph 磷酸二氢钠液 磷酸二氢钾液 蒸馏水
6.6 37 63 900
6.8 49 51 900
7.0 63 37 900
7.2 73 27 900
E. 观察血细胞常用的方法是什么
制作血涂片,显微镜下观察
F. 怎么制作血涂片
血常规是医院常作的检查项目,但是由于大部分的医院用的都是三分类的血球仪(五分类血球仪价格太高),在分析上存在一定的缺陷,而血涂片则能在一定程度上很好的补偿,使得三分类的血球仪也能起到五分类的效果。而且血涂片的作用还不仅于此,它还能更直观的放映细胞的形态,以及血液的一种状态。现在就血涂片的制作和应用做一个介绍。
血涂片的制作:
血涂片的制作方法很多,但需要的材料也都是一样的,载玻片和(或)盖玻片。现在介绍一种我们医院常用的涂片方法:
1、首先左手持一载玻片,将采到的血(做血常规剩下的血)滴一滴到载玻片一端:
细胞分类计数器
(细胞分类计数器)
通过这样的方法,我们就可以得到白细胞下各个种类的比例,结合血常规的白细胞数目就可以得到一个五分类的项目,这对于分析动物的身体状况更加的全面和科学。如上图的结果是:嗜中性粒细胞百分比:70%(分叶:57%,杆状:13%);淋巴性细胞百分比:25%;单核细胞百分比:3%;嗜酸性粒细胞百分比:2%;嗜碱性粒细胞百分比:0。
再简单举例说一下血涂片在临床上的应用,也是结合血常规的分析。如下图为一只犬的血常规结果:
从结果上看,RBC(红细胞)下降,HGB(血红蛋白)下降,HCT(红细胞压积)下降。很明显的可以判定为贫血。但是贫血也分很多种的,到底是否为再生性,又或者是否是出血或溶血造成的。然后根据血涂片可以知道:
从该血涂片我们可以看到,红细胞中间淡然区明显扩大,说明了这是正红细胞低色素性贫血,也就是由于缺铁性贫血,需要补充铁元素,增强营养。一方面我们知道动物的具体情况,可以针对性的帮助解决问题。
当然,血涂片在临床上的作用不仅仅如此,我们不仅可以用来来计数分类白细胞,还可以观察红细胞的形态来判断如果出现异性红细胞的原因,白细胞形态异常的原因,还可以看到血液寄生虫如:巴贝斯焦虫,血吸虫的微丝蚴。而且对于血常规仪器还可以起到一种验证的作用,就是说如果血常规的结果与你在显微镜下看到的结果出入较大的时候,如果你保证你血涂片的制作和观察都没问题的话,就要怀疑机器的判读有问题了。比喻抽血过程比较慢,导致血凝的出现而使得机器读书的血小板极低,以及由于猫的血小板和红细胞体积较近而出现的判读等都可以用血涂片来纠正和验证。
G. 某同学用显微镜观察自制的血涂片,请根据所学知识回答以下问题: (1)如图(一)是推血涂片的几种方法
(1)沾一滴血在干净载玻片右端,取一边缘光滑平齐的玻片作为推片,推片与载片约成20~30°,并与血滴接触,使血滴在玻片边缘散开,迅速将玻片推向左方.作成一均匀和厚度适中的血涂片.故丙正确. (2)图(二)中B血小板能止血和加速凝血. (3)我们在显微镜下看到的物像是上下左右均颠倒的物像,所以我们移动玻片标本时,标本移动的方向正好与物像移动的方向相反.如我们向右移动玻片标本,而在显微镜内看到的物像则是向左移动的.所以A物像位于视野左上方,要想把它移到视野中央,应该向左上方移动玻片标本,物像才向右下方移动移到视野中央. (4)图(三)中Ⅰ是用高倍镜观察的情景,Ⅱ是用低倍镜观察的情景.所以观察范围内细胞个体较小的是Ⅱ,换成高倍镜后,视野较暗,所以视野较暗的是Ⅰ. 故答案为:(1)丙; (2)B; (3)往左上方移动玻片; (4)ⅡⅠ |
H. 血涂片的血涂片-实验步骤
4.1ABO血型鉴定
4.1.1取一块清洁玻片,用记号笔标上记号。
4.1.2用小滴管吸A型标准血清(抗B)一滴加入左侧,用另一小滴管吸B型标准血清(抗A)一滴加入右侧
4.1.3以穿刺法自左手无名指指尖取血,在玻片的每侧各放入一小滴血,用牙签搅拌,使每侧抗血清和血液混和。每边用一支牙签,切勿混用。
4.1.4静置室温下10—15min后,观察有无凝集现象,并据此判断血型。
4.2血涂片的制作及血细胞观察
4.2.1取末捎血一滴置于玻片的一端,左手持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴,血滴即沿推片散开。然后便推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一薄层血膜
4.2.2血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动,使血膜迅速干燥,以免血细胞皱缩.
4.2.3用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液溢出,然后将血膜平放在染色架上.加瑞氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜,固定0.5-1.0分钟.滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水,与染料混匀染色5-10分钟.
4.2.4用清水冲去染液,待自然干燥后或用吸水纸吸干,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。
4.2.5白细胞分类计数。
选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数100个红细胞,按其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值。
1.瑞氏染液:瑞氏染料1g加甲醇(AR)600ML。将瑞氏染料放在清洁干燥乳钵中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解.将已完全溶解的部分倒入棕色试剂瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解于甲醇为止。新配制的染料偏碱,须在室温和37℃下一定时间待染料成熟,主要美蓝逐渐增多为天青B后才能使用.贮存时间越久染色效果越好,因此,Deamgilliland等采用吸光度比值(rA)作为瑞氏染料的质量规格.rA测定方法如下:取瑞氏染液15-25ul(视染液浓度而定)加甲醇10ml稀释,混匀后以甲醇为空白管分别以波长650nm,525nm比色,rA=A650/A525。因为美蓝吸收峰为波长650nm,伊红吸收峰波长为525nm,天青B吸收峰也为650nm,但吸光度A约为美蓝的一半.所以新配制染料的RA接近2,随着美蓝逐渐氧化为天青B,RA也相应下降,RA下降达1.3±0.1即可使用.瑞氏染料在贮存过程中必须塞严,以防甲醇挥发和氧化为甲酸.有人主张配方中加入30ml甘油,防止甲酸挥发,并可使细胞染色清晰.甲醇必须纯净,如甲醇中丙酮含量过多,染色偏酸,使细胞着色不良。磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8):磷酸二氢钾0.3g加磷酸氢二钠0.2g再加蒸馏水至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整PH,如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。
I. 我要最标准的观察人血涂片的实验操作,找的过程一定要具体啊,谢了,会有加分的
1.右手握住镜臂,左手托住镜座。
2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘7厘米左右
处)。安装好目镜和物镜。
二、对光
3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘
米的距离)。
4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后
同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以
看到白亮的视野。
三、观察
5.把所要观察的玻片标本(也可以用印有“6”字的薄纸片制成)放在
载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。
6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼
睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。
7.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直
到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
四 用高倍镜观察
8.移动装片,使要观察的目标移到视野中央
9.转运转换器,换用高倍镜
10,调节细准焦螺旋,直到看到清晰的物像
(换高倍镜切不可动粗准焦)
给我分吧,谢了!
J. 观察血细胞常用的方法有哪些
做血涂片在显微镜下观察,加入化学物质使反应或染色在镜下观察
因为太小了,只能在镜下观察啊