❶ 凝胶电泳条带怎么分析
凝胶电泳条带怎么分析?相关内容如下:
1. 观察和记录条带:
在电泳完成后,打开电泳仪,将凝胶板取出。将凝胶置于透明的凝胶成像仪(或透光板)上,使用紫外线或蓝光照射,观察凝胶上的条带。用相机或专业的凝胶成像系统拍照记录条带图像。
5. 分析条带的强度:
凝胶电泳图像上的条带强度通常反映了样品中分子的数量。较深、较亮的条带表示相应分子的数量较多,而较浅、较暗的条带则表示分子数量较少。
6. 标记和记录:
对不同样品的条带进行标记和记录,包括迁移距离、大小估计、强度等信息。这些数据对于后续的实验分析和结果解释非常重要。
7. 定量分析(可选):
如果需要定量分析,可以使用专业的图像分析软件,对条带进行定量测量。这种方法可以提供更精确的分析结果。
❷ Gelred核酸凝胶染料的使用方法
A. 预制凝胶法
将GelRed(10,000X)以1:10,000比例加入熔化的凝胶中,混合均匀,等待凝胶冷却至45℃左右时添加GelRed。倒胶,室温放置等待凝固,然后常规上样电泳。观察染色凝胶使用标准的透照仪(302或312 nm),成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR或GelStar滤光器凝胶成像可以得到很好的结果。未使用的含有GelRed的预制凝胶可以重新熔化做胶,为保证最佳荧光信号,酌情添加适量染料。不建议长期储存含有GelRed熔化形式的琼脂糖。含有GelRed的预制胶可以保存在4℃供下次使用。
B. 泡染法
进行凝胶电泳,稀释 GelRed :用水将10,000X储备液稀释3300倍制成3X染色液。通常情况下50mL染色液足够染一小块凝胶。把凝胶放于聚丙烯染色托盘中,添加足量的3X染色液至浸没凝胶。室温缓慢振荡染色30min,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同略有不同。对于含3.5-10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min至1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。不必脱色,必要的话可以水洗以降低背景值。使用标准的透照仪(302或312 nm)观察染色凝胶,成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR 或 GelStar滤光器凝胶成像也可以得到很好的结果。染色液可重复使用2-3次,室温下避光保存。