⑴ em菌种养殖使用方法
EM菌在水产养殖中有着普通药物不可替代的作用,为了降低养殖成本,我们可以在池塘边自己配制EM菌。
首先,准备一个容量1000公斤且下边带有水龙头的白色塑料桶(两个可装500公斤的塑料桶也可),然后用井水将塑料桶内壁冲洗干净晾干待用,晾干后的塑料桶放在合适方便的地方,底部用砖块垫稳、垫牢。桶内加入四分之三的井水,放置24小时后等待加入EM菌种和培养基。
将准备好的60斤红糖加入桶内充分溶解、搅匀,然后加入专用培养基,搅拌20分钟后加入菌种,再次搅拌10分钟盖上盖子让其自然发酵。
加入菌种后的第1~3天,每天早上7时左右,拧开盖子放气20分钟,同时用棍子搅拌发酵中的菌液15~20分钟,然后拧紧盖子让菌液继续发酵。第4~7天每天早上7时左右和下午3时左右各拧开盖子放气20分钟,同时用棍子搅拌发酵中的菌液15~20分钟,然后拧紧盖子让菌液继续发酵。
第四天开始检测pH值,达3.8以下完成培育,未达到继续培育,合格后密封保存或使用。培育中产生悬浮物是正常现象,一般温度高容易产生。如果温度偏低,培育的EM气体将减少。培育成功菌液可发出酸甜的酒香味,菌液表层有一层菌斑是正常现象。培育中有异味是很正常的,如pH检测合格可透气两天,如果异味还很严重,有可能是培育失败了。(想了解更多,请关注公众号slsjt666)
⑵ 平菇菌种(母种)如何使用
母钟使用方法:
母种培养基配制;
母种分离;
母种扩大培养。
⑶ 四川养蚕的em菌液菌种怎样使用
em菌种菌液在蚕养殖上有很多的饮用,主要用法如下:
1、雾喷桑叶喂蚕方法:用井水稀释农盛乐EM菌液(若用自来水应放置24小时后用),细雾喷湿桑叶,稍干后饲喂。
⑴、2-3龄蚕:按1:200配成稀释液,即1瓶盖(5ml)+水2斤左右,每天1-2餐。
⑵、4-5龄蚕:按1:300配成稀释液,即1瓶盖(5ml)+水3斤左右,每天两餐。可将桑叶撒于蚕座,喷雾桑叶。
⑶、刚买回大蚕,可按1:200饲喂一天,以增强抗病能力;发现病蚕,选出隔离,好蚕按1:300饲喂。
注意:1、饮用农盛乐EM原菌后可增加蚕的采食量。2、专用喷壶,禁粘农药、油污。一张蚕种用农盛乐EM菌液400—600ml,效果最佳。用太少,效果不明显;量太大,成本高。
2、桑叶保鲜:按1:300配成稀释液,即1瓶盖+水3斤,均匀喷湿桑叶,装入无毒塑料袋或缸桶中,24小时内不发黄不变质。
3、桑树抗病增产:
⑴、新购进桑苗,用1:300稀释液蘸根栽种,提高桑树成活率,促进发芽及壮苗;
⑵、每隔10-15天按1:500喷洒桑园,给桑树提供营养,促进光合作用,增加叶绿素含量,桑树长势旺盛,叶肥厚大色泽浓绿,质量好产量高,抗病力特强,减少发病率(有人坚持喷洒,桑园基本无病树)。
⑶、夏砍或冬伐后,按菌液1:红糖(黄、白糖)1:水100:农家肥500盖上薄膜堆沤(夏6天,冬10天),可与磷肥、钾肥混合施用,促使桑田土质疏松肥沃,提高桑树抗旱抗冻能力,减少桑树受病菌侵害,延长桑树旺盛期。
农盛乐em菌液是由放线菌、乳酸菌、芽孢杆菌、枯草杆菌、光合细菌、酵母菌等单一菌种经特殊工艺研制而成的高效复合微生物菌液,每毫升含有益总菌数≥200亿CFU。农盛乐EM菌液一箱12瓶,一瓶1公斤重,零售220元一箱,EM菌液拿回去可以直接使用,适合小规模客户和初次使用者。量大的话建议使用EM菌种,自己培育EM菌液。一瓶菌种30元,可以培育一箱的菌液,更经济划算。具体您可以咨询农盛乐技术员,网络上搜下农盛乐就能找到技术员。
农盛乐EM菌液养蚕中的重大作用:
(1)快吃快长 农盛乐EM菌液含有大量氨基酸、有机酸、多醣类、蛋白质和各种维生素、各种生化酶、促生长因子,甜酸可口,极大刺激蚕的食欲,撒上桑叶,蚕宝就抢着吃(叶脉都吃完),蚕儿吃好吃饱,发育健壮,缩短生长期,节约桑叶。
(2)抗菌防病 农盛乐EM菌液菌群能快速繁殖生长,攻击力强,致使蚕脓病、软化病、僵病、痢病、胃肠病等有害病菌失去生存的基质(食物)而死亡;农盛乐EM菌液含有大量抗生素和抗病毒物质,提高蚕的免疫抗病功能,健胃消食,促使蚕健康成长(有人从1-5龄餐餐喷喂农盛乐EM菌液,蚕儿基本无病)。
(3)提高产量和蚕茧等级 用农盛乐EM菌液养蚕,蚕茧产量提高20-30%;蚕茧大、白、厚,外观漂亮,出售等级高。实验表明:一张蚕种用农盛乐EM菌液400-600ml,花8-15元,高产量加高等级,可增收250-350元。
(4)去味除臭 消除蚕室内的氨臭味和有害气体,改善蚕农工作环境和蚕宝生长环境。
(5)防治桑树病虫害 对烂根、枯心、苗蔫、叶黄等病状有良好的康复作用,促使桑树根系发达,枝叶茂盛。
祝您生活愉快,工作顺利!!
⑷ 常用的菌种保存方法有哪些
菌种保藏是食用菌产业的一项基础工作,是确保野生种质资源基因留存和现有生产用种遗传性能相对稳定的必要手段。菌种保藏的方法多种多样,有的虽然保藏效果好,但投资高或操作繁杂。在生产实践中,更需要设备投入少,能保障菌种不死亡、不污染、最大限度地保持优良种性的简便方法,如斜面低温短期保藏和自然基质较长期保藏相结合的方法。
一般而言,对母种进行长期保存,对原种进行短期保存。须保证优良菌种的性状和活力不发生变异,不死亡,不被污染,确保其纯度。因此,保存方法应具备取材容易、操作方便、菌种不易退化、长期保存不污染杂菌等优点。常用的菌种保存方法如下:
(一)斜面低温保藏 该法的优点是保藏方便且所占空间较小。具体做法是:菌丝长满斜面后,放在0~5℃保存。以后每隔一定时间(2~3个月)转管一次。转管保存不能长期用PDA培养基,否则种性易退化,灰树花降解木质纤维素的能力减弱。因此隔一定时间(1年左右)须把菌种转接到木屑培养基上复壮,之后挑选健壮无污染的菌丝再转回PDA培养基保存。在长期保存过程中,要防棉塞受潮滋生杂菌。菌种试管口最好用蜡烫封,以防培养基内水分过快蒸发。增加琼脂用量(2.5%~3%)可减缓水分蒸发。还要防止菌种管上的标签脱落而造成种系混杂。
斜面低温保藏方法简便易行,能随时观察保藏菌株的活力和纯度,一旦染杂,肉眼能及时发现。
(二)自然基质保藏 此法是根据灰树花的特性,利用自然基质保藏其菌种的方法。灰树花是木腐菌,可以采用以木屑为主料的培养基。自然基质营养全面,且大部为缓释养分,不易产生营养过剩或饥饿;其次,培养基理化性状好,可吸收或缓冲菌丝代谢出的有害物质,水分与通气协调平衡,部分菌丝扎入基质内生长,不裸露于空气中,菌丝呼吸强度低,生命力强。
1.原料与配方 粗、细木屑比例适当,采用板栗树木屑最佳,粗木屑粒径为2毫米左右,细木屑为一般圆盘锯屑,粗、细的比例为1∶2,添加干木屑重量20%的麸皮和1%的糖,含水率为60%左右。这样的基质通气性好,营养丰富且供菌丝分解利用的时间长,长到基质内部的菌丝比包裹在基质外部暴露于空气中的菌丝耐受性强。不同粒径的基质比例适当,还能协调气与水的矛盾。粗粒过多,架空菌丝多;细粒过多,透气性差,菌丝生长慢。应用配方如下:
栗木屑78%,麸皮20%,石膏1%,蔗糖1%,水65%配料,装入较粗大的试管中,装料量为试管的1/3~1/2,1.5千克/厘米2灭菌1.5小时。冷却后,接入需保藏的菌种,在28℃下培养,待菌丝长满木屑培养基时取出换上无菌橡皮塞,在0~5℃冰箱内保藏1~2年转管一次。
2.容器与装量 采用容量250毫升的葡萄糖玻璃瓶,清洗洁净,装量一般不超过玻璃瓶容量的3/5,填料不能过满,瓶壁所残留的颗粒须擦拭干净,否则保藏的菌种易引起污染。
3.灭菌和冷藏 灭菌时若采用棉塞封口,基质表层易失水,接种成活率低,即使菌丝复活,生长也很缓慢,所以最好采用聚丙烯膜封口,接种后换用无菌棉塞培养,待菌丝长满后再换成有孔灭菌胶塞冰箱保藏。
用上述方法保藏的菌种经3年贮放后,接出成活率均达90%以上,出菇验证产量及子实体形态特征均无明显变化。因此,自然基质保藏法具有保存期长,菌种遗传性能相对稳定的特点。
(三)木粒PDA斜面保藏 灰树花在自然状态下易发生于栗树根部,这说明其营养需求较为特殊。根据灰树花这种习性,在PDA基础上添加适量的栗树木粒制成母种培养基。在多年的使用中发现,用该培养基培养的母种生长势好,在转接原种时,适应能力强,萌发定植快;用作菌种保藏基质时,保藏时间长,并能很好保持菌种的优良性状。
1.木粒PDA的制作 选取栗树边材,加工成0.3~0.5厘米的颗粒,及时烘干或晒干备用。称取葡萄糖10克,KH2PO41克,1溶解于1升清水中配制成营养液。将营养液倒入盛有木粒的小铝锅中,营养液以完全浸没木粒为准。煮沸10分钟,以加快木粒对营养液的吸收速度,起锅静置30分钟让木粒吸足营养液。捞出木粒,沥掉表面的水,装入试管,装量为试管长的1/6,最多不得超过试管长的1/5,否则在摆制斜面时,不易使木粒均匀分散于斜面的表面上。
选取新鲜的马铃薯,去皮并切成薄片,称取200克放入小铝锅中,加入1升清水,文火煮沸30分,趁热过滤取汁,并补足1升的体积。称取琼脂20克,葡萄糖20克,KH2PO4 2克,MgSO47H2O 2克。先将琼脂剪碎,加入到马铃薯滤液中,继续用文火加热,使琼脂溶化。待琼脂完全溶化后,加入称好的其他3种营养成分,搅拌使这些物质溶解均匀,趁热装入已装有木粒的试管中,装至试管长的1/3处,塞上棉塞。
在0.8~1千克/厘米2蒸气压下灭菌40分,待气压降至0时,开盖取出,趁热轻轻抖拍试管,使木粒分散后即可摆制斜面,并使木粒呈半裸状分布于斜面上,待凝固后便制成了木粒PDA培养基。
2.生长及保藏效果 木粒PDA斜面上培养的灰树花母种,菌丝生长迅速、良好,12天即可长满试管,但菌丝的后期生长势更为粗壮、浓密,后劲足。转接原种时,菌种适应力强,定植快。这表明,灰树花菌丝的生长速度、生长势不仅取决于本身的遗传性,而且很大程度上取决于培养基的营养。常规PDA的营养成分,主要是可溶性的速效性营养,前期营养丰富,营养利用直接,因而前期菌丝生长迅速、良好,后期营养则不足,菌丝生长不良,长势欠佳。木粒PDA由于在增添了木粒这一缓效性营养,就木腐性的灰树花而言,营养配伍合理,补充了菌丝生长后期所需的营养,因此后劲足。
菌丝体对基质的分解利用是通过菌丝细胞分泌的胞外酶,将基质中的大分子营养分解成小分子营养后才被吸收利用的,而这些胞外酶大多为诱导酶,其合成与分泌受基质的诱导和分解产物阻遏机制调节。就纤维素酶而论,许多易代谢碳源(如葡萄糖等)具有引起酶合成阻遏作用,同时伴随着菌丝体的旺盛生长,酶的大量合成则出现在易代谢碳源基本耗尽之后,且受到基质纤维素的诱导,常规PDA基质,到葡萄糖等易代谢碳源基本耗尽的后期,由于营养的缺乏,菌丝生理机能下降,酶的合成量减少。而木粒PDA不仅含有易代谢碳源——葡萄糖,又含有木粒这一缓效性营养,前期葡萄糖促进了菌丝体旺盛生长,获取了大量的菌丝体,表现为菌丝粗壮、浓密。到了易代谢碳源耗尽的后期,木粒一方面补充了后期所需的营养,使菌丝的生埋机能维持在一定的水平;另一方面木粒的纤维素激活菌丝细胞纤维素酶的诱导机制,合成了大量的酶,保持了木腐生性灰树花较强的分解木材的能力,因此,用该培养基培养的母种在转接原种时适应力强,萌发定植快。因部分菌丝长入木粒内部,抵抗不良环境的生存能力增强,种质不易退化。木粒PDA灰树花菌种,在0~5℃保藏2~3年再转管活化,成活率仍达到90%左右。此外,木粒PDA应用于木腐性灰树花种的提纯复壮,效果也较理想。
(四)石蜡隔氧封藏 具体做法是将液态石蜡分装入三角瓶内,装量达瓶空间的1/3,塞好棉塞,于121℃灭菌2小时,然后置40℃温箱中,使其水分蒸发,或置于干燥器内数日以除去水分,石蜡呈透明状为宜。在无菌条件下,用无菌吸管装入已长好菌丝的斜面试管,使液面高出斜面顶部1厘米左右。塞上无菌橡皮塞,竖直保存。此法可使菌种存活3年以上,但以1~2年移植一次为好。移植时不必倒出石蜡,用接种钩取一块菌丝即可。因转移时带有石蜡,菌丝生长弱,需要再转管1~2次,方能复壮。
⑸ "保存在甘油管中的菌种使用前要如何处理"
我菌株保存的方法是把500μL30%的甘油和
500μL菌悬液混合于1.5ml的离心管中,
在-20℃的冰箱中保存,菌液没有结冰,
⑹ 食用菌的菌种有哪些保藏方法各有什么特点
(1)斜面低温保藏。是一种最常用、最简便的菌种保藏方法。首先将需要保藏的菌种接到斜面培养基上,在适宜的温度条下培养,当菌丝健壮地长满斜面时,即将此试管菌种取出,放置于4 ℃的冰箱中保藏。特点:
①简单易行,适用于各类菇类菌种保藏,是目前生产及科研普遍采用的一种方法;②保藏时间短,需6个月转接一次,转管次数多菌丝变异的可能性大;③如改用橡皮塞并用石蜡扣,可保藏1年~3年。
(2)液体石蜡保藏。液体石蜡保藏也称为矿油保藏,即用矿油覆盖试管斜面试管保藏的方法。矿油是指无色、透明、黏稠、性质稳定、不易被微生物分解的石蜡油和液体石蜡,将其覆盖在斜面菌种之上,可以隔绝空气,防治培养基水分蒸发,抑制微生物的代谢活动,推迟细胞老化,从而达到长期保藏菌种的目的。特点:
①方法简便易行,保藏条件不严格,保藏时间长,可作为长期保藏菌种的方法;②菌种必须垂直放,放置不方便。
(3)滤纸保藏。滤纸保藏是一种以无菌滤纸作为食用菌孢子吸附载体长期保藏菌种的方法,又称滤纸孢子保藏法。特点:技术要求高,设备费用大,菌种不易衰老退化,菌种保藏时间长很少变异。
(4)自然基质保藏。自然基质保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含营养的自然生长的基质作培养基来保藏菌种的方法。自然基质很多,食用菌常用的自然基质有发酵的粪草、木屑及枝条基质等,取材方便,制作方法简便,保藏时间也较长。使用时,只需取一块、一粒或一条培养物放在新鲜的培养基上,并在适温下培养即可。特点:方法简便易行,保藏时间长。
⑺ 菌种转种、传代的要求和操作步骤是什么
定期移植法,亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。
操作步骤如下:
1 培养基制备
1.1 器皿准备
培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等,经洗涤、干燥、包装、灭菌后使用。
1.2 溶解培养基配料
先在烧杯中放适量水,按培养基配方称取各项材料,依次将缓冲化合物、主要元素、微量元素、维生素等材料加入水中溶解,最后加足水量,搅拌均匀。
1.3 调pH值
配料溶解后将培养基冷却至室温,根据要求加稀酸(0.1mol/L盐酸)或稀碱(10%氢氧化钠)调pH值。加酸或碱液时要缓慢、少量、多次搅拌,防止局部过碱或过酸而导致测量不准确和营养成分被破坏。
1.4 加凝固剂
配制固体培养基时需加凝固剂,如琼脂、明胶等。将凝固剂加入液体培养基中,加热并不断搅拌至融解,再补足所蒸发水分。
1.5 过滤分装
在二层纱布中间夹入脱脂棉,将配好的培养基趁热过滤并分装。斜面培养基分装量约为试管高度的四分之一(4~5mL),穿刺培养基分装量以试管高度的二分之一为宜。分装过程中勿使培养基沾污管口,以免弄湿棉塞造成污染。
1.6 包扎标记
将试管加棉塞,外面包扎一层牛皮纸或铝箔并注明培养基名称及配制日期。
1.7 灭菌
根据要求将培养基灭菌,通常蒸汽灭菌为121℃,15~20min。
1.8 斜面摆放
灭菌后及时摆放斜面,斜面长度不超过试管管长的二分之一为宜。
1.9 无菌检查
将灭菌的培养基放入培养箱中作无菌检验,通常30℃培养1~3天。无菌检查合格后将其保存于4℃下备用。
2 接种
2.1 斜面接种
2.1.1 点接
把菌种点接在斜面中部偏下方处。适用于扩散型生长及绒毛状气生菌丝类霉菌(如毛霉、根霉等)。
2.1.2 中央划线
从斜面中央自下而上划一直线。适用于细菌和酵母菌等。
2.1.3 稀波状蜿蜒划线法
从斜面底部自下而上划“之”字形线。适用于易扩散的细菌,也适用于部分真菌。
2.1.4 密波状蜿蜒划线法
从斜面底部自下而上划密“之”字形线。能充分利用斜面获得大量菌体细胞,适用于细菌和酵母菌等。
⑻ 益生菌的使用方法
服用温度应低于体温,以免活菌被杀死。服用时不要加热,粉剂的只能冲入凉水,也可以倒入口中,直接冲凉水喝下。为保持菌群活性及浓度,建议冲调水量不超过80ml,且冲泡完成后,请在半小时内服用完。益生菌饮料从冰箱内拿出后可直接饮用。
最好饭后20分钟后服用,因饭后胃酸浓度降低,更有利于让活菌顺利到达肠道发挥作用。进入胃的食物可消耗大部分胃酸,更有利于让大部分益生菌活着进入小肠,否则即使是被选出的已确定能到达小肠的益生菌菌株也难免会遭受损失,令其功效打折。
避免与抗生素一起服用,若使用抗生素需间隔2-4小时后服用。抗生素不仅会杀死有害菌也会杀死益生菌,因此在连续使用抗生素后,易发生肠胃菌群不平衡。实践证明,投入抗生素造成肠胃菌群不平衡后再投入益生菌,不如两者同时使用的效果好,不过要记得服用时间间隔开哦。
坚持服用10天以上会有较明显的效果,如巩固效果最好连续服用1-2个月,并在之后保持良好均衡的饮食及生活习惯。服用初期发生一些腹胀、放屁、大便数量次数增多甚至轻度腹泻的症状,都是肠道调节的正常反映,此时不应停止服用益生菌。
⑼ 菌种使用前应怎样处理
菌种使用前先用高锰酸钾溶液或酒精进行表面消毒,搬进接菌室内连同栽培袋及工具进行第二次消毒。如果菌种瓶是用棉塞封口的,一定要严格检查棉塞下方是否染有杂菌。因菌种培养时间长达1个月左右,其棉塞内常因培养料水分蒸发而受潮,或棉塞过松使杂菌侵入,而在棉塞下方滋生杂菌。如果在接菌室内拔出污染的棉塞必然将杂菌传播在室内造成污染。因此使用前一定要严格检查。一经发现,弃之不用。