A. 菌种保存的方法有哪些,菌种传代操作规程
二、菌种传代操作规程
1、点燃酒精灯,在火焰旁的上方灼烧接种环。
2、将原有的菌种斜面培养基(菌种管)和待接种的新斜面培养基(接种管)用左手的拇指、食指和中指夹住,菌种管在前,接种管在后,然后斜持试管(45°),让试管内斜面向上,两个试管的口子平齐。
3、右手在火焰旁边转动两管的棉塞,然后右手拿着接种环的柄端,垂直将接种环在火焰上灼烧,顶端的环必须烧红,而且凡是接种时进入试管的部分,均应通过火焰灼烧。
4、使用右手的小指和手掌之间以及无名指和小指之间,将两管的棉塞拔出,拿住,然后将试管在火焰上通过。
5、将接种环插入菌种管内,接触无菌苔生长的培养基,待冷后,从斜面上挑取少许菌苔,然后迅速插入接种管,在斜面上轻轻划线接种(由下而上划直线,然后由下往上划曲线)。
6、接种完毕后,将管口通过火焰灭菌,并将棉塞塞上。
B. 保藏菌种的方法有哪些
1、传代培养保藏法:包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等,培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法:液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间。
3、载体保藏法:载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法。
4、寄主保藏法:寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物。
5、冷冻干燥保藏法:先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),其中真空冷冻干燥法最常见。
菌种保藏的原理:
菌种保藏有多种方法,其原理大多大同小异,主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢,达到延长生命,减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。
低温主要对菌种产生两方面的影响,首先,较低的温度可以减缓机体细胞的酶活,降低新陈代谢,达到保藏菌种的目的。其次,低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制,如果降温过程失误,同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。