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2.4 化学和微生物分析
在试验日粮干物质和粗蛋白含量的分析中，排泄物和益生菌产品是根据AOAC（1990）方法（分别为930.05和976.05 ）分析。使用弹式量热计（model 1261, Parr Instrument Co., Moline, IL）测定总能量，根据芬顿博士（1979）的使用自动化分光光度计确定铬浓度。
第14和28天排泄物样本和第28天的肠道消化物的微生物分析，将样品在不同培养基中培养，测定总厌氧菌（胰酶解物大豆琼脂),双歧杆菌（MRS培养基），乳杆菌种（MRS培养基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸盐酸盐水化合物），梭菌属某些种（TSC培养基）和大肠杆菌群（紫色红胆汁琼脂）。通过培养技术对"益生菌"产品进行了微生物分析。嗜酸乳杆菌用MRS培养基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸盐酸盐水化合物培养，枯草芽孢杆菌通过琼脂培养基平板计数，酵母菌和米曲霉菌通过薯仔葡萄糖培养基计数。通过使用厌氧袋厌氧系统创造厌氧条件，(BBL, No. 260678; Difco, Detroit, MI)。大豆胰酶解物的琼脂(No.236950)，MRS琼脂培养基(No. 288130)，结晶紫中性红胆盐琼脂(No.216695)，平板计数琼脂(No. 247940)，和马铃薯葡萄糖培养基(No. 213400)的使用是从Difco实验室（(Detroit,MI)购买的，和TSC培养基是从Oxoid (Hampshire, UK)购买的。益生菌产品的pH值由pH计(Basic pH Meter PB-11, Sartorius,Germany).测定。
2.5 小肠形态学
每个肠道样本取三横截面，使用标准的石蜡包埋程序与天青A和曙红染色。共有10个完好无损，良好的导向隐窝绒毛单位被选定为每个肠道截面，每个样品一式三份的 (Jin et al.2008)。从绒毛尖端绒毛到隐窝交界处测量绒毛高度，这个被定义为相邻绒毛内陷深度和隐窝深度。所有形态测量（绒毛高度和隐窝深度）通过使用一个图像处理的分析系统（擎天柱软件版本6.5，网络媒体遗传学，北读，MA），增量为10-μm。
② 如何培养厌氧菌
有几种密封方法：
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境。
至于厌氧培养基怎么配我就不太清楚了，不过就是按一般要的各种营养，灭菌即可，个人看法