Ⅰ 检查蠕虫卵的方法主要有哪几种
一.内容:
1.沉淀法
(1)自然沉淀法
(2)离心沉淀法
2.尼龙筛兜集卵法
3.虫卵计数法
(1)斯陶尔氏法
(2)麦克马斯特氏法
4.幼虫检查法
(1)漏斗幼虫分离法(贝尔曼氏法)
(2)平皿法(法依德氏幼虫分离法)
5.测微法
二.目的:掌握粪便中虫卵检查和幼虫分离法,培养幼虫及虫卵计数法的操作技术,并学会测微器的使用及测微方法。
三.参考资料:
(一).蠕虫虫卵检查法(之二)
1.沉淀法 采用普通清水处理被检粪便,使虫卵沉淀集中,便于检查。本法适合检查各种虫卵,而比重较大的虫卵,如吸虫卵、棘头虫卵等尤宜采用此法。
①自然沉淀法
取粪便5~10克,放入干净的烧杯内加水100毫升以上,搅匀成粪液,通过40、60目铜丝筛过滤。滤液收集于三角烧瓶或烧杯中,静置沉淀20~30分钟后,倾去上层液,保留沉渣,再加水混匀,再沉淀。如此反复直到上层液体透明为止,倒去上清液,吸取沉渣涂片镜检。此法特别适用于检查吸虫卵。
②离心沉淀法
取粪便1~2克,放在干净的小烧怀内,约加10倍量的水,充分混匀成悬浮液,再用40、60目铜丝筛过滤至另一干净的离心管中,放入离心机内。也可用自然沉淀法处理过的滤液倒入离心管中,放在离心机内,以1500转/分的速度离心2~3分钟。此时,因虫卵比重大,经离心后沉于管底,然后倒去上清液,取沉渣镜检。
2.尼龙筛兜集卵法
取粪便5~10克,加水搅匀,先通过40、60目的铜丝筛过滤,滤下液再通过260目尼龙筛过滤,并在尼龙筛兜中连续加水冲洗,直到洗出液透明为止,而后挑取兜内粪渣做成抹片检查。此法适用于宽度大于60微米的虫卵,如片形吸虫、姜片吸虫、同盘科吸虫、日本分体吸虫等的虫卵。通过以上处理,粗大粪渣被铜丝筛滤除,纤细的粪渣(直径小于40微米)和可溶性色素均被冲洗走而使虫卵集中。
3.虫卵计数法:测定家畜每克粪便的虫卵数(EPG)
虫卵计数法是测定每克家畜粪便中的虫卵数,而以此推断家畜体内某种寄生虫的寄生数量,有时尚以使用驱虫药前后虫卵数量的对比,以检查驱虫效果。
虫卵计数所得数字,受很多因素影响。因此只能对寄生虫的寄生量做一个大致的判断。影响虫卵计数精确性的因素,首先是虫卵在粪便内的分布不匀,因此测定少量粪便内的虫卵量以推算全部粪便中的虫卵总量就不会准确。此外寄生虫的年龄、宿主的免疫状态、粪便的浓稠度、雌虫的数量,驱虫药的服用等很多因素均影响着排出虫卵的数量和体内虫体数量的比例关系。虽然如此,虫卵计数仍被用作某种寄生虫感染强度的指标。
(1)斯陶尔氏法(Stell's metheod)
在一小玻璃容器上(如小三角烧杯或大试管)的56毫升和60毫升处各做一标记,先取0.4%的氢氧化钠溶液注到容器56毫升处,再加入被检粪便完全破碎混匀,接着在混匀的情况下,以1毫升吸管取粪便液0.15毫升,滴下2~3张载玻片上,覆以盖玻片,在显微镜下秩序检查,统计其中虫卵总数(注意不可遗漏和重复)。因0.15毫升粪液中实际含原粪量是0.15×4/60=0.01克。因此所得虫卵总数乘100即为每克粪便中的虫卵数。本法适用于大部分蠕虫卵的计数。
寄生虫常见的就是做粪便检测。现在的检测方法有以下5种:
1.直接涂片法
直接将标本涂抹于载玻片上进行检查的方法。方法简便,连续制作3次涂片,可以提高检出率,是目前大部分医院所采用的检测方法。
优点:操作简便、报告迅速
缺点:样本量小,气味难闻,容易漏检,检出率不高
2.水洗沉淀法
采用普通清水处理被检粪便,使虫卵沉淀集中,便于检查。本法适用于检查比重较大的虫卵,如吸虫卵,棘头虫卵等适合采用此法。
优点:对于虫卵较大的寄生虫检出率高
缺点:操作复杂、耗时长、气味难闻、检测种类有限
3。饱和盐水浮聚法
浮聚法是利用某些蠕虫卵的比重小于饱和盐水,虫卵可浮于水面的原理。此法适用于检查各种线虫卵,尤以检查钩虫卵的效果最好,也可检查带绦虫卵和微小膜壳绦虫卵,但不适宜检查吸虫卵和原虫包囊。
优点:对于虫卵比重小于饱和盐水的寄生虫检出率高
缺点:操作复杂、耗时长、气味难闻、检测种类有限
4.改良加藤法
改良加藤法是利用粪便定量或定性厚涂片,以增加视野中虫卵数,经甘油和孔雀绿处理,使粪膜透明,从而使粪渣与虫卵产生鲜明的对比,便于光线透过和镜检。适用于检查各种蠕虫卵。
优点:虫卵不会散失,检出率高
缺点:保存时间短、操作复杂、耗时长、检测种类有限
5.液基富集虫卵法
液基富集虫卵法是近年在寄生虫领域新起的一种检测方法,根据虫卵的比重来进行检测,也是世界卫生组织推荐的检测方法。液基试剂具良好的富集性,主要用于粪便标本的采集、传递、储存、去渣、灭活病毒等处理。
1、可自行在家取样 ,自由方便
2、样本保存期可达30天且不影响寄生虫形态
3、操作简单,检出率高
4、防止病毒、细菌经“气溶胶”传播,几乎全程“无气味”
具体检测方法对比如下:
Ⅲ 怎么检查狗狗便便中的寄生虫卵
定期驱虫是防止寄生虫的主要方法
寄生虫过多容易导致狗狗出现营养吸收不良,狗狗偏瘦等问题。除了需要定期地为狗狗驱虫之外,也可以自己为狗狗检查,看看便便中是否带有虫卵,如果有虫卵且数量较多的话,就需要尽早为狗狗驱虫。如果长期无出好伏如寄生虫问题,那么驱虫的时间可以适当地延长一些。
1.直接涂片检查:这样的检查法,对饲主以及设备需要一定的要求。首先在载玻片上滴上一些甘油与水的等量混合液,再用牙签或火柴棍挑取少量粪便,加入其中,混匀,嫁娶较大或过多的粪渣,使玻片上留下一层均匀粪液,以能透视书报字迹为宜。在粪膜上覆以载玻片,放在显微镜下检查。检查时应顺序地检查遍盖玻片下的所有部分。有时候体内寄生虫不多,粪便中虫卵少的话就比较难查出虫卵,不过这也说明了狗狗本身寄生虫的问题并不是很严重。
2.集卵法:
①沉淀:去粪便5g,加清水10ml以上,然后搅拌均匀,然后进行过滤,滤液收集于三角烧瓶或烧杯中(自己找容器也可以),然后静置20-40min左右,随后倒去上层液,保留沉渣,再加水搅匀,再沉淀,可以看看之前的沉淀里有无虫卵,没有的话再友启吸取沉渣检查,看看有无虫卵。
②漂浮:该方法适用于检查线虫卵、绦虫卵和球虫卵囊。取粪便10g,加饱和食盐水100ml,混合,然后过滤,静止半小时,有虫卵的话,虫卵会上浮;用铁丝圈与液面平行接触蘸取表面液膜,抖在载玻片上检查。
以厅姿上的两种方法,都要使液体静置,然后等到他自然下沉或上浮。如果不想确定是哪一种寄生虫,那么看到漂浮物有虫卵就行,因为大多数的驱虫药并不是只针对一种,所以即使不能很明确的确定是哪一种寄生虫。但是做好驱虫工作,还是能够较好地对其进行预防的。
Ⅳ 一般粪便检查为什么难于查到牛或猪带绦虫
通过粪检可查到虫卵甚至孕节,但采用肛门拭子法查到虫卵的机会更多。还可采用粪便淘洗法寻找孕节和头节,以判定虫种和明确疗效。因为牛带绦虫无子宫孔,虫卵不能直接排入肠道,只有在妊娠节片伸缩蠕动或破裂而将虫卵播散到粪便中。大多数患者粪便中可找到虫卵,但并非每位患者都可以在粪便中找到虫卵。
1)粪便或拭子涂片检查:用棉花拭子法作肛门涂片检查,可检获虫卵。方法简便,阳性率与沉淀法大致相等,可用于普查。发现的绦虫卵,不能鉴别其虫种,因为牛带绦虫与猪带绦虫卵极相似,两者难以区别。虫卵(egg)呈园球形或近球形,直径36μm~42μm,黄褐色,卵壳很薄,自孕节内散出后多已破裂而脱落。一般在粪检中所见到的实际上是由胚膜包绕的六钩蚴。胚膜上有放射状条纹。六钩蚴呈球形,直径约14μm~20μm,具有三对小钩。
2)厚涂片法、沉淀法和漂浮浓集法等可以检查出虫卵,其中Hein厚涂片法3次检出率可达97%。
(2).头节检查 驱虫治疗后24h,留取全部粪便检查头节可帮助考核疗效和鉴别虫种。可将粪便置一大容器中用清水反复漂洗直至粪液澄清,将沉渣转到玻璃容器中衬以黑色背景,仔细查找头节。如遇虫体纠结应小心解开并顺链体向细端寻找。牛带绦虫的头节呈近四方形,较大而无顶突与小钩,猪带绦虫头节呈圆形,较小且具顶突,其上有两排小钩。头节被驱出表明治疗彻底。如有多虫感染可能时应注意链体条数与头节数是否一致。
(3).询问病史:对发现牛带绦虫病十分重要,牛带绦虫孕节常逸出肛门引起患者注意。病人常自带排出的孕节前来就诊。观察孕节的方法与猪带绦虫相同,根据子宫分支的数目和特征可将两者区别。若节片已干硬,可用生理盐水浸软,或以乳酸酚浸泡透明后再观察。牛带绦虫妊娠节片子宫分支数为15~30个,呈对分支状,猪带绦虫妊娠节片子宫分支为7~13个,呈树枝状。将混在粪便中的节片挑出并用清水洗净,夹于两载玻片之间,对着光线肉眼即可分辨子宫分支数目与形状。
3、分子生物学检查 检测牛带绦虫卵可通过DNA-DNA斑点印渍法。近年有用聚合酶链反应(PCR)来检测人体内牛带绦虫或猪带绦虫成虫扩增,主要是在粪便中虫卵或虫体脱落的外被体表物质的微量种特异性DNA序列,此法特异性与灵敏性均很高。
4、免疫学检查 用虫体匀浆或虫体蛋白质作抗原进行皮内试验、环状沉淀试验、补体结合试验或乳胶凝集试验可检测体内抗体,阳性符合率为***~***。用酶联免疫吸附试验也可检测宿主粪便中特异性抗原,灵敏性可达100%,且具有高度特异性,与蛔虫、微小膜壳绦虫、钩虫和鞭虫无交叉反应。
牛带绦虫病重要的并发症有肠穿孔及继发性腹膜炎、阑尾炎、肠梗阻等,多因链体或节片阻塞所致。可能发生体液和电解质的丢失、肠壁循环障碍、坏死和继发感染,极少导致死亡。