血图片程序及观察方法制作

‘壹’ 猪血制作过程

具体步骤如下：

1、取一个干净的盆，盆中放3勺盐后加入纯净水。然后加入猪血。

‘贰’ 我要最标准的观察人血涂片的实验操作，找的过程一定要具体啊，谢了，会有加分的

1．右手握住镜臂，左手托住镜座。
2．把显微镜放在实验台上，略偏左（显微镜放在距实验台边缘7厘米左右
处）。安装好目镜和物镜。

二、对光
3．转动转换器，使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘
米的距离)。

4．把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开，便于以后
同时画图)。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，可以

看到白亮的视野。

三、观察
5．把所要观察的玻片标本（也可以用印有“6”字的薄纸片制成）放在
载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。

6．转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（眼
睛看着物镜，以免物镜碰到玻片标本）。

7．左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直
到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
四 用高倍镜观察
8.移动装片，使要观察的目标移到视野中央
9.转运转换器，换用高倍镜
10，调节细准焦螺旋，直到看到清晰的物像
（换高倍镜切不可动粗准焦）
给我分吧，谢了！

‘叁’ 编写使用油镜观察血涂片中白细胞的详细操作步骤

（一）样本采集
将静脉血采集于EDTA－K2抗凝剂中（浓度为每毫升血液含1.5～2.2mg EDTA－K2·H2O）。采血后立即混匀，应拒绝分析有肉眼可见凝块的样本。
（2）血涂片制备
血涂片制备是否合格、染色的好坏直接关系到检验结果的质量。
1、要求所用玻片清洁、干燥、无尘，大小为25 mm×75mm，厚度为0.8～1.2mm。使用载玻片时， 不要用手触及玻片表面。
2、做好明确标记。
3、使用EDTA－K2抗凝血液样本时，应在采集后4小时内制备血涂片。在制片前，样本应充分混匀。注意，样本不能冷藏。
4、每份样本制作3张血涂片。
5、如果样本中白细胞数量少时，需要制备更多血涂片（如6张）。
6、用楔形技术制备血涂片。在玻片近一端1/3处，加一滴（约0.05ml）充分混匀的血液，握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片，从血滴前沿方向接触血液，以30o～45o角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至玻片的另一端。
7、血细胞比容与涂片关系。血细胞比容高于正常时，红细胞较多，血液粘度较高，用较小的角度涂片，可获得满意的血膜。相反，血细胞比容低于正常时，血液粘度较低，需用较大角度涂片。
8、良好血涂片的要求
1) 血膜至少长25mm，至玻片两侧边缘的距离至少为5mm。
2) 血膜边缘要比玻片边缘窄，且边缘光滑，适用于油镜检查。
3) 血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布，末端呈方形或羽毛状。
4) 血膜末端无粒状、划线或裂隙。所有这些情况会使白细胞集中在这些区域内。
5) 在镜检区域内，白细胞形态应无人为异常改变。通常，随着保存时间的延长，抗凝血会造成白细胞形态的改变，如胞浆内形成空泡，核分解破裂等。应将抗凝血液保存时间的影响减小到最低限度。除部分淋巴细胞增生性疾病外，镜检区域内破损白细胞量应<2％。
6) 无人为污染。
9、 血膜必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落

‘肆’ 血涂片的血涂片-实验步骤

4.1ABO血型鉴定
4.1.1取一块清洁玻片，用记号笔标上记号。
4.1.2用小滴管吸A型标准血清（抗B）一滴加入左侧，用另一小滴管吸B型标准血清（抗A）一滴加入右侧
4.1.3以穿刺法自左手无名指指尖取血，在玻片的每侧各放入一小滴血，用牙签搅拌，使每侧抗血清和血液混和。每边用一支牙签，切勿混用。
4.1.4静置室温下10—15min后，观察有无凝集现象，并据此判断血型。
4.2血涂片的制作及血细胞观察
4.2.1取末捎血一滴置于玻片的一端,左手持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，血滴即沿推片散开。然后便推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一薄层血膜
4.2.2血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动,使血膜迅速干燥,以免血细胞皱缩.
4.2.3用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液溢出,然后将血膜平放在染色架上.加瑞氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜,固定0.5-1.0分钟.滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水,与染料混匀染色5-10分钟.
4.2.4用清水冲去染液,待自然干燥后或用吸水纸吸干,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。
4.2.5白细胞分类计数。
选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数100个红细胞,按其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值。
1.瑞氏染液:瑞氏染料1g加甲醇(AR)600ML。将瑞氏染料放在清洁干燥乳钵中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解.将已完全溶解的部分倒入棕色试剂瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解于甲醇为止。新配制的染料偏碱,须在室温和37℃下一定时间待染料成熟,主要美蓝逐渐增多为天青B后才能使用.贮存时间越久染色效果越好,因此,Deamgilliland等采用吸光度比值(rA)作为瑞氏染料的质量规格.rA测定方法如下:取瑞氏染液15-25ul(视染液浓度而定)加甲醇10ml稀释,混匀后以甲醇为空白管分别以波长650nm,525nm比色,rA=A650/A525。因为美蓝吸收峰为波长650nm,伊红吸收峰波长为525nm,天青B吸收峰也为650nm,但吸光度A约为美蓝的一半.所以新配制染料的RA接近2,随着美蓝逐渐氧化为天青B,RA也相应下降,RA下降达1.3±0.1即可使用.瑞氏染料在贮存过程中必须塞严,以防甲醇挥发和氧化为甲酸.有人主张配方中加入30ml甘油,防止甲酸挥发,并可使细胞染色清晰.甲醇必须纯净,如甲醇中丙酮含量过多,染色偏酸,使细胞着色不良。磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8)：磷酸二氢钾0.3g加磷酸氢二钠0.2g再加蒸馏水至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整PH,如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。

‘伍’ 求观察人血涂片的详细步骤!!

1.右手握住井壁，左手托住镜座。
2.把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。安装好目镜和物镜。
3.移动转换器，使低倍物镜对准通光孔（物镜前端与在物台要保持2厘米距离）
4.把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目境内，另一只眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。
5.把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6.转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛一定要看着物镜）。
7.一只眼项目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物象为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物象更加清晰。

注意事项：

实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。如需擦拭目镜和物镜，请用擦镜纸。转动转换器，把两个物镜偏到两边，并将物镜缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。