‘壹’ 果胶的提取方法有哪些各有何优缺点果胶作为食品添加剂,有哪些功效
从植物体中提取果胶的过程,是将果胶与其紧密相连的纤维素、半纤维素等物质分离,将果胶转移到溶液中,然后经过沉淀将果胶析出。目前,果胶提取方法主要有:酸提取法、微波提取法、离子交换法和酶提取法。
3.1.1 酸提取法
酸提取法是传统的工业果胶生产方法,是目前果胶提取工艺中应用较多的一种方法。其原理是利用果胶在稀酸溶液中水解的性质,将果皮中的原果胶质水解为水溶性果胶,使果胶从果皮中转到水相中,形成果胶水溶液,再用醇将果胶析出。
3.1.2 微波提取法
微波是一种频率为300 MHz~300 GHz的电磁波,其对应的波长为l mm~lm,比可见光的波长长,属高频波段的电磁波。它具有电磁波的反射、透射、干涉、衍射、偏振以及伴随着电磁波的能量传输等波动特性,还具有高频特性、热特性及非热特性。由于果胶胶质与细胞壁内的其它成分紧密连接从而抑制释放浸提,用微波法提取果胶时,微波辐射与细胞壁中的物质相互作用,不仅可以实现快速加热,还会破坏细胞壁将不同化学组成的成分分开来,使其进入溶液当中,微波辐射还能抑制皮内果胶酶作用避免果胶被酶解。
3.1.3 离子交换法
离子交换法是利用溶液中各种带电粒子与离子交换剂之间结合力的差异进行物质分离的操作方法。由于果皮中含有钙、镁等离子及其它杂质,会影响果胶的纯度和质量,利用离子交换树脂可去除杂质提高果胶的质量。
3.1.4 酶提取法
酶法提取果胶是继酸提取法、微波提取法之后出现的一种果胶提取新方法。酶法提取果胶用酶根据果皮成分的构成进行选择,采用最多的有纤维素酶、半纤维素酶和糖苷酶,使用这些酶将与果胶紧密相连的其它组分酶解,从而将果胶单独分离出来。
3.1.5 果胶沉淀方法
果胶的沉淀法分为乙醇沉淀法和盐析沉淀法。这两种方法都是利用果胶在醇和盐溶液中生成沉淀的原理。盐析法通常采用明矾作为沉淀剂,由于明矾溶液中的 Al3+带有与果胶中的游离羧基相异的电荷,从而将果胶溶液酸胺化后与果胶羧基反应生成果胶酸盐[92].乙醇沉淀法是最常用的果胶析出方法,在果胶提取液中加入无水乙醇充分搅拌可生成沉淀。
盐沉淀法生产成本较低,但产品的灰分含量较高且色泽较深,品质较次。而乙醇沉淀法所生产的果胶灰分含量少、凝胶度高且色泽浅,品质好,虽然乙醇使用量较大,但是如果对废乙醇进行回收利用和循环使用,则可以降低生产成本。
本章通过设计四因素三水平正交试验,确定从柚子皮提取果胶的最佳工艺条件,并测定了从柚子皮中所提取的果胶的酯化度。
‘贰’ 求几种植物总DNA抽提方法和优缺点
1、植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。拆厅明多用于核基因组提取。
2、SDS提取法伏判:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。
3、简易旅告“一管法”提取方法:
4、PCR研究的快速提取法:以上两者方法简单,快速,但污染多,不适合做酶切等操作。
5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:多酚多糖去除效果好,但操作步骤较多。
‘叁’ (1)提取挥发油常用方法有哪几种哪种方法较好,为什么
挥发油的提取方法主要有1、水蒸气蒸馏法 2、浸取法 3、冷压法 在应用上各有特点:1、水蒸气蒸馏法的特点: ①混合物的沸点比任一单一液体的沸点低; ②分馏比不变; (即:蒸出油的质量与水蒸汽用量成正比) ③沸点高的可被水蒸气蒸馏出来.2、浸取法的特点;防止氧化、热解及提高品质; 所得芳香挥发油气味与原料相同. 工艺技术要求高,设备费用投资大.3冷压法特点:保持原有的新鲜香味 缺点可溶出原料中不挥发性物质. 如:柠檬油常溶出原料中的叶绿素,而使柠檬油 呈绿色.
‘肆’ 提取制备RNA常用的方法有哪几种,各有何优缺点
常见的RNA提取方法有苯酚法、阴离子去污剂法、LiCl一尿素法、改良的Gomez法、异硫氢酸胍法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、TRIZOL试剂快速提取法。
RNA提取时,就变性剂的选择来说,CTAB(CTAB法)比异硫氰酸胍(RIZOL试剂法)和SDS(改良热硼酸法)更有效;就CTAB法来说,由于以CTAB为变性剂,同时加入PVP和β一巯基乙醇共同作用变性蛋白、抑制RNase的活性,使用无水乙醇或异丙醇沉淀杂蛋白和总核酸等,然后再选择性地分离出RNA。
‘伍’ 植物萃取的优缺点 植物萃取的方法和优缺点
1、超声提取
超声波空化作用,加速植物有效成分的浸出。
优点:提取时间短,提取方法简单,提取率高,提取温度低,避免高温高压对有效成分的破坏。
缺点:容器要求较高、噪声、设备放大等问题。
2、微波提取
在微波场中,物质吸收微波能力有差异,某些组分能被选择性加热,被萃取。
优点:提取时间短,设备简单,投资较少。
缺点:萃取机理不明。
3、超临界萃取
以超临界流体代替常规有机溶剂进行萃取和分离。常用于挥发性成分、脂溶性物质、高热敏性物质以及贵重药材。
优点:温度低,保留有效码咐销成分,无溶剂残留,纯度高,操作简单。
缺点:高压设备,一次性投资较大,运行成本高。
4、膜分离
优点:高效的分离效果,低能耗,无相变化,接近室温的迟游工简滚作温度,纯物理过程,工艺简化,可连续化操作。
缺点:膜污染需要定期更换。
‘陆’ 传统的植物提取方式有那些优缺点新兴的植物提取方式有那些
传统提取方法:
1.溶剂法(包括浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法等)
优点:方法简便、设备要求低、成本低廉。
缺点:提取效率低、资源浪费严重。
2.水蒸气蒸馏法
优点:可以把极低含量的挥发性有机物质浓缩数千倍。
缺点:提取不完全。
3.升华法
优点:简单易行。
缺点:升华不完全,产率低,有时还伴有分解现象。
新兴的植物提取方法:
1.超临界流体萃取
2.微波提取
3.超声波提取
4.酶法提取
5.半仿生提取法
6.破碎提取法
7.空气爆破法
8.亚临界流体萃取
‘柒’ 提取基因组DNA的方法有哪些各有何优缺点
1、苯酚氯仿抽提法
优点是采用了实验室常见的试剂和药品,做起来成本比较低廉。
缺点是由于使用了苯酚、氯仿等试剂,毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响,而且核酸的回收率较低,损失量较大,由于操作体系大,不同实验人员操作重复性差,不利于保护RNA,很难进行微量化的操作。
2、离心柱法
离心柱法DNA提取它的优点是比传统的酚氯法提取的纯度高,有利于RNA保护,而且能进行微量操作,以其低廉的价格和相对便捷的操作,渐逐取代了传统DNA提取方法,被高校科研所等市场普遍接受。
离心柱法DNA提取的缺点是需要较多的样本,耗材多,对于珍稀样本无能为力,特别是在法医、考古等领域显得力不从心。
同时离心柱法DNA提取需要反复离心,不便于高通量、自动化操作,与现代生物学实验的高通量、自动化要求格格不入,特别是在基因诊断、疾病检测、转基因检测等领域,离心柱法DNA提取需要大量的操作人员及仪器设备。
当面对突发疫情时,更是需要有高通量的DNA提取设备与方法才能更有效准确的监测疫情、控制疫情。
3、磁珠法
磁珠法是纳米科技与生物技术的完美结合,具有其他DNA提取方法无法比拟的优势,主要体现在:
(1)能够实现自动化、高通量操作,配合96孔的核酸自动提取仪,在以往做一个样品的提取时间内可同时实现对96个样品的处理,效率直接提高96倍,满足了当前生物学高通量操作的要求,使得在大规模疫情爆发时能够进行快速筛查原因,这个优点是其他方法难以赶超的。
(2)操作简单、用时短,整个提取流程只有裂解、结合、洗涤、洗脱四步短时间内即可完成。
(3)安全无毒,不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂,对实验操作人员的伤害少,保护了实验人员的身体健康。
(4)磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。
(5)灵敏度高,适合法医样本等痕量DNA提取。
(7)常用提取方法及其优缺点扩展阅读:
磁珠法的原理是在磁珠表面修饰有对核酸有吸附作用的特定活性官能基团,通过不同的裂解液结合液洗涤液在特定的条件下能够与目的物质进行特异性结合,同时利用磁珠自身的磁性,在外磁场的作用下可以方便地实现定向移动与富集,从而达到核酸与杂质分离的目的,进而实现对目标物质的分离纯化,获得纯化核酸。