‘壹’ 细菌和病毒的培养方法
1繁殖方式:前者复制,后者二分裂;生活方式:前者寄生,离开宿主细胞无法生活,且对宿主有害,后者可寄生,腐生或自生,寄生时可能对寄主有益也可能有害;结构:前者无细胞结构,后者有;遗传物质:前者是DNA或RNA,后者只有DNA;变异速度:前者特别是RNA病毒变异速度极快,后者较为缓慢,突变率低.2培养基制作过程较繁琐,自己找相关资料.3病毒利用特异性的宿主,培养基中营养条件取决于宿主,细菌利用特异性的培养基,营养条件取决于自身.4.同2.5.寄主是否有相应的抗原;环境条件是否适宜;是否有一定的群体使大量细胞死亡,从而使器官失去相应功能.6外毒素:由细菌所分泌、能在局部及全身产生毒性效应的蛋白质成分.
内毒素:只在细菌被破坏时才被释放的细菌毒素.
类毒素:由于变性或化学修饰而失去毒性的毒素,但仍保留其抗原性.
7.特异性的培养基分别筛选,不同菌种有不同的鉴定方法
‘贰’ 常见病毒的培养方法 及其具体的过程!
我见过的有鸡胚胎法。
病毒研究的发展常常与病毒培养和检测方法的进步有密切的关系,特别在脊椎动物病毒方面,小鼠和鸡胚接种、组织培养、超速离心、凝胶电泳、电子显微镜和免疫测定等技术,对病毒学的发展具有深刻的影响。
噬菌体的培养和检测方法最为简单。将噬菌体接种到易感细菌的肉汤培养物中,经18~24小时后,混浊的培养物重新透明,此时细菌被裂解,大量噬菌体被释放到肉汤中,再经除菌过滤,即为粗制噬菌体。为了测定其中噬菌体的数量,将粗制噬菌体稀释到每一接种量含100个左右,与过量的细菌混合,然后铺种于琼脂平皿上,在温箱中培养过夜,细菌繁殖成乳白色衬底,被噬菌体裂解的区域则在此衬底上表现为圆形的透明斑,称为噬斑。噬斑数代表该接种量中有活力的噬菌体数量。如果挑出单个噬斑来培养,就能获得由单个噬菌体所繁殖的后代,达到分离纯化的目的。
动物病毒(见脊椎动物病毒)的培养可在自然宿主、实验动物、鸡胚或细胞培养中进行,以死亡、发病或病变等作为病毒繁殖的直接指标,或以血细胞凝集、抗原测定等作为间接指标。收获发病动物的组织磨成悬液或有病变的细胞培养液,即为粗制病毒。测定活病毒数量可采用空斑法,其原理与噬斑法相同,但以易感的动物单层细胞代替细菌,在接种适当稀释的病毒后,用含有培养液和中性红的琼脂覆盖,使病毒感染局限在小面积内形成病变区,衬底的健康细胞被中性红染成红色,病变区不染色而显示为空斑。
至今植物病毒的培养和检测大都是在整株植物上进行的。从捣碎的病叶汁中制备病毒,常用枯斑法检测。用手指蘸上混有金刚砂的稀释病毒在植物叶片上轩轻磨擦,经一定时间后出现单个分开的圆形坏死或退绿斑点,称为枯斑。
除了利用病毒的致病性定量检测病毒外,还可应用物理方法,如在电子显微镜下计数病毒颗粒,或用紫外分光光度计测定提纯病毒的蛋白和核酸量,这些方法所测得的数据包括了有感染性和无感染性的病毒粒。
应用电子显微镜不但能看清病毒粒的大小、形态,还可以分辨其表面的蛋白亚单位和内部的核壳等超微结构。
‘叁’ 防治病毒病的方法有哪些
防治病毒病的主要方法主要靠早发现、早隔离、早烧毁,以防止病毒的传播和蔓延。采用经脱除病毒的优质组织培养无性繁殖种苗,是防止大面积病毒病发生的有效措施。要及时杀灭害虫,做好修剪器具的消毒,防止交互感染。
‘肆’ 有什么方法杀病毒
干扰素就是特异的杀死病毒的手法,可以抑制病毒核酸逆转录酶的活性,不会逆转录的病毒基本上也就不存在了(没法繁殖)。
实验中分离出的病毒是不用特地杀死的,病毒必须在活细胞里寄生,离开活体组织在短时间内就会因为环境条件(高温低温,低湿度,射线等等)解体,可以说,病毒离体几乎不能生存。这也是为什么培养病毒时我们经常用活鸡胚进行培养,离体的病毒十分脆弱,无法培养。
人体内的病毒说实话很难通过直接方法杀死,免疫系统还是杀死病毒的重要一环。
体内的一种T细胞能够识别被病毒核酸镶嵌的体细胞,并把它当做“异己”,分泌信息物质启动细胞程序性死亡,讲解感染细胞的遗传物质,从而将病毒的DNA等讲解。
‘伍’ 病毒常用的培养方法有哪些
适龄鸡胎接种,传代培养,组织细胞培养,易感动物接种。
‘陆’ 病毒鉴定常用方法有哪些
寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应,目前主要采用病毒核酸检测。
开展蚊媒寨卡病毒检测时,对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。
开展寨卡病毒实验室检测时,应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。
(一)临床标本检测。
1.病原学检测
病原学检测主要适用于急性期血液标本,一般认为发病7天内检测阳性率高。
(1)核酸检测:采用荧光定量RT-PCR方法,是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。
(2)病毒分离:将标本接种于蚊源细胞(C6/36)或哺乳动物细胞(BHK21、Vero)进行分离培养,出现病变以后,用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。
2.血清学检测
(1)血清特异性IgM抗体:发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体,但发病7天后检出率高。可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性,提示患者可能新近感染寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应,易于产生假阳性。
(2)中和抗体:采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒感染,可以确诊。
(二)媒介标本检测。
1.标本处理
将分类后的伊蚊成蚊或幼虫,按照采集地点,每10~20只为一份进行研磨处理。
2.病毒核酸检测
用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测
3.病毒分离
病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。
‘柒’ 目前病毒分离培养的主要方法是哪一种
1.动物接种
这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种部位。
2.鸡胚接种鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上。
3.组织培养
将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒,根据细胞的来源,染色体特性及传代次数又可分为下列类型:原代和次代细胞培养,二倍体细胞株和传代细胞系。
‘捌’ 病毒的培养方法有哪些为什么不能用一般培养基来培养病毒
适龄鸡胎接种,传代培养,组织细胞培养,易感动物接种。不可以。病毒是寄生在活体上的生物,而培养基是没有生命的有机物或无机物,病毒在上面不能生存。
病毒的结构是有一个DNA,和蛋白质外壳,和其它功能性的附属结构。
病毒不能自己生产蛋白质,它只有在寄生在活体上之后,把自己的DNA,注入到寄主细胞内,和寄主DNA结合,然后表达,利用寄主的蛋白质、DNA的和成功能,和成自己的蛋白质外壳,DNA,然后这些DNA和外壳在及主细胞破裂之后溢出,重新组合成好多病毒,感染其它细胞或寄主。 可以看出,这个细胞必须有生命(新陈代谢,能合成蛋白质DNA等),培养基是不行的。
‘玖’ 培养流感病毒的方法有哪几种
鸡胚传代培养、MDCK细胞培养、本动物回归培养。