❶ 分离培养酵母菌的培养基什么方法灭菌
（1）在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养基的pH调至酸性．对培养基进行灭菌常采用高压蒸汽灭菌法．
（2）在选择培养并获得酵母菌单菌落的过程中，可采用平板划线或稀释涂布平板法将含酵母菌的样液接种于固体培养基表面，对获得的菌种可采用甘油管藏的方法长期保存．
（3）在无氧条件下，酵母菌将丙酮酸分解成酒精和CO 2 ，在发酵结束前，接种在果汁中的酵母菌种群数量呈现S型增长．
（4）醋酸菌在O 2 充足条件下可将果酒中的乙醇变为乙醛，再变为醋酸．
故答案为：
（1）酸性 高压蒸汽灭菌法
（2）平板划线或稀释涂布平板 甘油管藏
（3）酒精和CO 2 S型
（4）O 2 乙醛
❷ 分离纯化微生物的方法有哪些各方法适用分离什么菌种
主要有
1、稀释倒平板法
首先把微生物悬液作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1000、1:10000），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。
2.、稀释涂布平板法
将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的微生物悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。
3、平板划线法
将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离。
4、稀释摇管法
先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右，将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀，冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。
❸ 破碎酵母细胞的方法
酵母细胞破碎方法很多。有化学、生化、超声波、机械研磨，使用果汁匀浆机匀浆破碎，以及近几年诞生的纳米级微生物细胞破碎机的广泛应用。1、化学法破碎酵母细胞
使用NaOH水解酵母细胞。细胞浓度10%，水90%，碱解24h，50·C，pH值为碱性，结果见表1。当酵母细胞浓度10%，水90%，温度为50%，pH2（3、4）时见表2。
由表1、表2可以看出，碱解、酸解酵母细胞在啤酒、酱油生产上影响物理化学指标，啤酒辅料可以增加，但口味变坏，虽说酱油发酵周期可缩短但氯化物含量超标。
2 生化法破碎酵母细胞，一是自溶，二是酶解 自溶法破碎酵母细胞，表面上看很经济，但保湿操作需要保湿设备而且作用时间长，条件要求高。试验结果见表3。
由于破碎率低总氮低，在啤酒、酱油生产上应用没有好的效果，氯化完全、硫酸盐不高，经济效益不明显，再加上自溶时间长，很难与生产同步
生产方法2 主要是使用酶制剂破碎酵母细胞。在水、酵母中加0.1%的A酶，0.1%的F酶，0.05%。A+0.05%。F分别做试验。此时酵母浓度10%，水90%，pH7.0，温度68·C，作用时间2h，结果见表4。
从表4可知，酶解时间较长，破液对啤酒、酱油质量没有影响，需较高保湿条件，否则很难在生产中应用
3 珠磨机与超声波破碎酵母细胞试验
珠磨机破碎率较低，在12h～24h内研磨，破碎率最高可达80%，产量小很难工业化生产，超声波破碎只能在试验室内进行，不能用于生产，两者均属试验室设备
4 高压匀浆机与纳米级微生物细胞破碎机破碎 高压匀浆机结构如图1所示
高压液流夹带酵母进到喷嘴3碰撞到匀浆阀1后折弯，碰撞到耐磨壁2上，酵母细胞发生破碎。在酵母破碎后，胞内粘和物符到阀1和耐磨壁，呈现较大缓冲作用，影响细胞破碎，这种机械需多次反复破碎才会有较好的效果，破碎率不会超过80%。
纳米级微生物细胞破碎机结构如图2。
1 对撞室，2 振荡片，3 左喷嘴，4 右喷嘴
图2 纳米级微生物细胞破碎机结构图
当高压液流夹带酵母细胞进入左右喷嘴3和4，在对撞室1中相撞，之后碰撞到震荡片2上，使酵母细胞在对撞室和发出2x10 4HZ频率的震荡片上实现两级瞬时破碎，破碎率可达97.8%，对撞室和震荡片上不存在粘稠物，有利酵母细胞破碎
在匀浆机工作中，假设有一质点，附着阀1上，受到冲力
该质点质量，1g,即0.001kg
流体速度，
❹ 微生物的分离与纯化的常用方法有哪些
分离：
稀释倒平皿法
平板划线法
单细胞挑取法
利用选择培养基分离法
纯化：
1、若是你不知道你所要纯化的微生物的特征，最简单的不知道它的菌落特征和形态大小，那现根据你要分离菌的特性，找适合的初筛培养基，找到你要纯化的菌。如纤维素菌，你在培养基中加纤维素粉或CMC-Na作碳源，这样就可以筛选出分解纤维素的菌。然后再用下面的方法继续纯化。
2、若你知道目标菌的形态，可以直接挑混合菌划平板，直到长出当个菌落，并且在镜下没有杂菌即可；或者挑菌稀释涂布得到当个菌落也行。