血球计数板的使用方法

1. 血球计数板的使用说明

以计数酵母菌为例
(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可。
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内。
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞)。
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式：
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式：
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数
4.血球计数板的清洁
血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。

2. 血球计数板使用条件是什么

血球计数板使用条件的话是在一定条件下，比如说空腹啊或者是其他的环境。

3. 血球计数板使用时的注意事项都有哪些

取样要均匀，要将悬液摇匀。加样时要注意用滴管从两侧沟槽内沿盖破片的下缘滴入一小滴，不能从玻片上滴。计数时，注意不能重复计数，一般记上不记下、记左不记右。

4. 血球计数板是什么样的,怎么用呢

在玻片上有规则的小格子，通过显微镜数每个小格子里有多少个细胞，以此计算溶液中细胞浓度

5. 血球计数板怎么用啊

拿一个计数板，他中间不是有个计数的小方格么？在那上面盖上盖玻片，必须先盖上，在方格旁边的槽里滴加样液，然后让样液自己流入方格中，你就可以在显微镜下计数了

6. 血球计数板怎么洗

可以用洗涤剂，不过一般用蒸馏水冲洗，软毛刷不算硬物，如果粘性较大，就用软毛刷。

1、血球计数板常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。

2、利用血球计数板在显微镜下能直接数出每个小方格中的微生物的个体数目，根据该小格所占的体积，快速地推算出单位体积的溶液中含有的微生物总数。

(6)血球计数板的使用方法扩展阅读：

血球计数板的注意事项：

1、镜检计数室。因前一次清洗不到位，或者保存过程中存在污染，更或者因操作不当导致的计数室存在划痕，若不及时清洗或更换，则会对后期实验计数产生极大影响。

2、摇匀后取液。在吸出培养液进行计数之前，需轻轻震荡试管，使菌体分布均匀，防止聚沉淀，从而提高计数的代表性和准确性 。

3、静置片刻再计数。静置5 min，待菌悬液不再漂浮流动，酵母菌全部沉降后再将血球计数板放到显微镜下进行计数。先在低倍镜下找到需要观察计数的大方格及中方格，将中方格移到视野中央，然后拨动转换器移至高倍镜进行计数 。

4、掌握计数原则。一般选择观察的菌液浓度控制在每个小方格内有4或5个菌体为宜，若其浓度太高，可适当稀释；并采用“计上不计下，计左不计右”的计数原则 。

7. 血球计数板的使用方法

使用方法如下：

1.视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。

2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。

3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。

4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。

5．计数时若计数区是由16个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100小格）的菌数。如果是25个中方格组成的计数区，除数上述四个中方格外，还需数中央1个中方格的。

菌数（即80个小格）。为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。即位于本格上线和左线上的细胞计入本格，本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。见右图：即本格中计数细胞为3个。

6．对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品重复计数2-3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），按公式计算出每mL（g）菌悬液所含细胞数量。

7．测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。

(7)血球计数板的使用方法扩展阅读:

计数公式

红细胞数(RBCs)/L=N/5×25×10×106×200

N为：五个中方格的RBC总数

N/5为：5个中方格（粉红色区域）的平均RBC数量（然后推及至中央大方格中每一个中方格RBC的数量）

N/5×25为：中央大方格RBC总数（即：0.1mm3（ul）的RBC总数）

N/5×25×10为：1mm3（ul）RBC总数

N/5×25×10×106为：1L的RBC总数

200为：血液的稀释倍数

公式简化后：红细胞数/L=N×5×107×稀释倍数

公式前面部分都是换算成每微升血多少该计数细胞；最后都是由微升换算到升，乘以10的6次方

(1)目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微尺格数

(2)以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度.

(3)如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数.若更换物镜,目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定.

参考资料:血球计数板-网络

8. 血球计数板的构造使用

血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3。
计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图。

9. 简述血球计数板的结构和计数原理

用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。在血球计数板上，刻有一些符号和数字，XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格。

计数原理：在血球计数板上，刻有一些符号和数字，XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格。

计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm，每个小方格的面积为1/400mm。盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm，每个小方格的体积为1/4000mm。

(9)血球计数板的使用方法扩展阅读

误差控制：

血细胞计数的误差分别来源于技术误差和固有误差。其中由于操作人员采血不顺利，器材处理、使用不当，稀释不准确，细胞识别错误等因素所造成的误差属技术误差；而由于仪器（计数板、盖片、吸管等）不够准确与精密带来的误差称仪器误差，

由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差（filederror）。仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正，但细胞分布误差却难于彻底消除。

10. 血球计数板的使用方法

（1）构造：血球计数板是一块特制的载玻片，它的上表面有4条下凹的槽，构成3个平台，中间的平台又被一短横槽隔为两半，每半边各有一个方格网，每个方格网上有9个大小相等的大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用，这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3。

（2）规格：

一种是大方格内分为25中方格，每一中格又分为16小方格；另一种是大方格内分为16中方格，每一中方格又分为25小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图：

（3）使用方法

①取清洁干燥的血球计数板，加盖玻片盖住网格和两边的槽。

②将待测菌液充分摇匀后，用无菌吸管吸少许，由盖玻片边缘或槽内加入计数板，使其自行渗入计数室内，计数室内不能有气泡。静置5-10分钟。

③在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。即数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。

④计数时，若使用刻度为25中方格×16小方格的计数板，计数四个角的4个中方格，及中央1个中方格的菌数（即80小方格）；若使用刻度为16中方格×25小方格的计数板，就数四个角的4个中方格（即100小方格）内的菌数。每小方格中菌数以5-10个为宜，如菌液过浓可适当稀释。

⑤每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。

刻度为25中方格×16小方格的计数板：

刻度为16中方格×25小方格的计数板：

⑥试验结束后要清洗和整理试验用具，特别注意血球计数板不能用试管刷蘸洗涤剂擦洗，正确的做法是浸泡和冲洗，洗后自行晾干或用吹风机吹干。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。