食用菌液体菌种的制做方法

❶ 液体香菇菌种怎么制作

液体菌种的制作及使用方法液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。 液体发酵技术是现代生物技术之一，起源于美国。它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。一、液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。若少量生产，可以用摇瓶培养法。深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。天然培养基的组成均为天然有机物。合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。在生产上，还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。游肢但无论如何划分，厅磨凯每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。 1.1、碳、氮比(C/N)碳、氮比指碳源及氮源在培养基中的含量比。构成菌丝细胞的碳、氮比通常是：8~12:1。由于菌丝生长过程中，一般需50%的碳源作为能量供给菌丝呼吸，另50%的碳源组成菌体细胞。因此培养基中理想碳、氮比的理论值为16~24:1。在液体培养中以菌丝增殖为目的的培养，通常碳、氮比以20:1为宜。虽然食用真菌的液体培养一般要求较高的碳与氮比，即C:N＝20:1左右生长较好，但许多菌种也能在较宽的碳、氮比范围内生长。不同的菌种所要求合适的碳、氮比，可通过实验求得。 1.2、无机盐与微量元素许多无机盐及微量元素对菌种的生理过程的影响与其浓度有关。不同的菌种，对无机盐及微量元素要求的最适浓度也不同。 1.2.1．磷 磷是细胞中核酸、核蛋白等重要物质的组成部分，又是许多辅酶(或辅基)高能磷酸键的组成部分。磷是食用菌液体发酵不可缺少的物质，常加入磷酸二氢钾以提供磷，加入量大约为0.1%~0.15%。1.2.2．镁 镁在细胞中起着稳定核蛋白、细胞膜和核酸的作用，而且是—些重要酶的活化剂，是食用真菌液体培养中不可缺少的营养成分。一般通过加入硫酸镁以提供镁，浓度通常是0.05%~0.075%。1.2.3．钾、钙、钠 钾不参与细胞结构物质的构成，但控制原生质的胶态和细脑膜的透性。钙离子与细胞透性有关。钠离子能维持细胞渗透压，钠离子可以部分代替钾离子的作用。三种物质需求量甚微，若采用天然培养基，可不必另加。1.2.4．硫、铁 硫是菌体细胞蛋白质的组成部分(胱氨酸、半胱氨酸及蛋氨酸中皆含硫)，铁是细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的组成部分，亦是菌体有氧代谢扮唤中不可缺少的元素。1.2.5．锌、锰、钴、铜 锌、锰、钴等离子是某些酶的辅基或激活剂。铜是多元酚氧化酶的活性基。在配制培养基时应注意，镁和磷的添加不宜过多，否则会带来危害。菌体对锌、锰、钴、铜等微量元素的需求量甚少，一般天然有机原料中均有，不必另加。碳酸钙本身不溶于水，但可以调节培养其中的酸碱度。磷酸盐与碳酸钙不宜混合灭菌，否则会形成不溶于水的磷酸盐，使可溶性的磷酸盐浓度大大降低。 1.3、维生素维生素在细胞中作为辅酶的成分，具有催化功能。大多数食用真菌的培养都与B族维生素有关，维生素B1是目前已知对绝大多数食用真菌生长有利的维生素。其适宜浓度在50~1000μg/L之间。 2、摇瓶振荡培养技术培养液配制好后，装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为100mL，并加入0～15粒小玻璃珠，加棉塞后再包扎牛皮纸封口，在1.5kg/cm2压力下灭菌30分钟，取出冷却到30℃以下时，接入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养48小时，再置往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80～100次/分，振幅6cm～10cm。如果用旋转式摇床，振荡频率为200～220转／分。摇床室温控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是在7天左右。培养结束的标准是：培养液清澈透明，液中悬浮着大量小菌丝球，并伴有各种菇类特有的香味。二、液体菌种的检验方法对液体菌种进行检验可采用感官检查和取样测验相结合的方法。2.1. 感官检查 可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。看：将样品静置桌上观察。一看菌液颜色和透明度，正常发酵醪液呈黄色或黄褐色，清澈透明，菌丝颜色因菌种而异，老化后颜色变深；染杂菌的醪液则混浊不透明。二看菌丝形态和大小，正常的菌丝大小一致，呈球状、片状、絮状或棒状，菌丝粗壮，线条分明；而染杂菌后，菌丝纤细，轮廓不清。三看上清液与沉淀的比例，菌丝体占比例越大越好，较好的液体菌种，在瓶中所占比例可达80%左右。四看pH值指标是否变色，在培养液中加入甲基红或复合指标剂，经3～5天颜色改变，说明培养液pH值到达4.0左右，为发酵点；如果在24小时内即变色，说明因杂菌快速生长而使培养液酸度剧变。五看有无酵母线，如果在培养液与空气交界处的瓶壁上有灰色条状附着物，说明为酵母菌污染所致，此称为酵母线。旋：手提样品瓶轻轻旋转一下，观其菌丝体的特点。醪液的粘稠度高，说明菌种性能好；稀薄者表明菌球少，不宜使用。菌丝的悬浮力好，放置5分钟不沉淀，表明菌种生长力强；反之，如果菌丝极易沉淀，说明菌丝已老化或死亡。再次观其菌丝状态，大小不一，毛刺明显，表明是供氧不足；如果菌球缩小且光滑，或菌丝纤细并有自溶现象，说明污染了杂菌。嗅：在旋转样品后，打开瓶盖嗅气味。培养好的优质液体菌种，均具有芳香气味；而染杂菌的培养液则散发出酸、甜、霉、臭等各种异味。2.2. 取样测验 可取液体菌种进行称重检查和粘度检查；生长力测定和出菇试验；化学检查，包括测pH值、糖含量和氧含量等；显微检查，包括细胞分裂状态观察、普通染色和特殊染色等。三、液体菌种的使用方法液体菌种可作原种使用，也可作栽培使用。3.1. 作原种 取一支100ml。兽用注射器，去掉针尖，换一根内径1mm～2mm，长100mm～120mm的不锈钢钢管，制成一个菌种接种器。使用前，洗净接种器并用纱布包好，经高压蒸汽灭菌，冷却后抽取液体菌种即可进行接种。经灭菌待接入菌种的原种瓶，先要在无菌条件下去掉棉塞，并改换无菌薄膜包扎瓶口。接种时，将针管插入瓶口上的薄膜，每瓶接种量为10mL～１5ml，要注意使液体菌种均匀分布在培养基表面，拔出针管后要立即用胶布贴封针孔，竖放在培养室的床架上进行培养。3.2. 作栽培种或直接进行栽培 液体菌种在作栽培使用时，瓶栽的每瓶接种量为10mL～15mL；熟料袋栽的每袋接种量为，小袋10mL～15mL，大袋的20mL～30mL；开放式床栽的，每平方米接种量为500mL～1000mL，不需要接种针筒，可直接均匀洒在培养料面，或进行穴播。

❷ 液体菌种制作

液体菌种生产与固体培养不同，是以液体做培养基，通过多级发酵培养得到菌液，发酵菌液中含有大量的菌丝体，可直接做液体菌种。目前，液体菌种发酵生产的工艺流程有：一是摇瓶培养工艺，即斜面母种→一级摇瓶种子→二级摇瓶种子→三级摇瓶种子；二是深层发酵罐培养工艺，即斜面母种→种子罐→发酵罐→液体菌种。少量可用摇瓶震荡培养，大量的才用发酵罐通气培养。在农村庭院菇场，一般规模厂（场）及有条件的专业户都可采用摇瓶培养，这种方式培养设备简单，投资较少，技术不太复杂，有一般技术的人员均可采用，易于推广应用。

❸ 北虫草母种菌种怎样制作液体菌种

2、配制方法：大米或小麦按每袋50克或100克分装入塑料袋。将1.5升50℃的热水倒入干净盆内，将虫草专用防污剂放入热水中，搅至完全溶解即成营养液。按料水比（即大米或小麦与营养液的用量比）1克：1.5毫升称取营养液倒入装好大米的塑料袋内。分装完后用塑料绳将每个塑料袋中部和口部各扎一道。
3、灭菌：灭菌锅内加适量水，把培养料袋放入灭菌锅，升温至100℃，保持1小时。取出，冷却后移入接种室。用优质气雾消毒剂或常规方法密闭消毒30分钟，即可穿戴消毒衣服进入接种室接种。
4、接种：进入接种室应迅速关好门（防止含有杂菌的空气进入）。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或浸沾消毒。现介绍易推广的用固体大米菌种接种的方法：
①试管原种的转扩栽培：拔去试管塞后用消毒的接种钩挖取豆粒大小的菌种2-3块，接入培养基面上，稍扎紧袋口即可。
②用原种转扩栽培袋时，先将菌种捣成指头或豆粒大小块状，每袋接入5-10克菌种，均匀分布在料面上。如条件允许可适当增加接种量，以利菌丝较快生长。接种完后按原扎口方法稍扎紧袋口，即可移入经杀菌和防虫处理的培养室内培养。
③采用液体菌种接种方式的，在无菌条件下，打开封口材料，用接种枪将液体种喷匀即可。接种量视容器大小而定，也有在液体菌种中加入一定比例的无菌水再接种的。

❹ 白灵菇液体菌种，培养基配方是什么

多种食用菌如平菇金针菇香菇灵芝白灵菇蛹虫草等都可以液体培养。我在安徽省金农食用菌技术公司学习过食用菌简易液体制种技术，可以根据自己的生产需要培养出一流的液体菌种，不需要特殊设备，资金也很少。方便易操作。各食用菌品种菌丝生长和子实体生长所需的碳氮比是不同的。应该根据选择的品种来确定。首先要熟悉菌株的碳氮比，然后合理分配。金针菇液体菌种配方由玉米粉3%、马铃薯15%、葡萄糖0.5%、磷酸二氢钾0.02%、磷酸氢二钾0.08%、硫酸镁0.05%组成。

产量较高由于液体菌生长活力较高，菌种强度较好，出菇菌菌丝生长范围更加一致，生长周期差异较小，使用质量较好，产量比固体菌高10%以上。质量较好的白灵菇液体菌种菌丝生长势强，污染率低，病害轻，基本不使用农药。传统的成本较低的蘑菇无法避免备料、搅拌、装袋、杀菌、接种和培养细菌的步骤，而白灵菇液体蘑菇完全可以依靠自动化技术在同一个罐中完成整个生产操作，可以大大降低生产成本，节省劳动力。

❺ 液体菌种如何培养制作

液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、银耳、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等，其中应用多的是香菇和平菇。

(一)液体菌种的培养方法

常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。若少量生产，可以用摇瓶培养法。深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。

1.液体菌种培养基配方

(1)葡萄糖 3% 豆 粉 2%玉米粉 1% 硫酸镁 0.05%磷酸二氢钾 0.1% 酵母粉 0.5% 其余为水 pH值 自然 本配方适用于多种食用菌的液体培养。

(2)可溶性淀粉 3～6% 蔗糖 1%硫酸镁 0.15% 酵母膏 0.1% 其余为水 pH值调至6 本配方适用于平菇、香菇、草菇、猴头和黑木耳等的液体培养。

(3)玉米淀粉 3% 磷酸二氢钾 0.1%玉米浆 1.2% 硫酸镁 0.07% 其余为水 pH值调至5 本配方适用于香菇。

(4)玉米粉 50g 麦芽汁 100ml琼脂 0.5g 维生素B1 100ug水 850ml pH值自然 本配方适用于平菇。

2.摇瓶振荡培养技术

培养液配制好后，装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为100mL，并加工0～15粒小玻璃珠，加棉塞后再包扎牛皮纸封口，在1.5kg/cm2压力下灭菌30分钟，取出冷却到30℃以下时，接入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养48小时，再置往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80～100次/分，振幅150px～250px。如果用旋转式摇床，振荡频率为200～220转／分。摇床室温控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是在7天左右。培养结束的标准是：培养液清澈透明，液中悬浮着大量小菌丝球，并伴有各种菇类特有的香味。

❻ 食用菌的液体培养基如何配制~

每个食用菌品种的菌丝体生长和子实体生长所需要的碳氮比有所不同.应该根据选择的品种来确定.首先应该熟知该菌种的碳氮比是多少.然后进行合理配置。
金针菇液体菌种配方.玉米粉3%,薯仔15%,葡萄糖0.5%,磷酸二氢钾0.02%,磷酸氢二钾0.08%,硫酸镁0.05%。
香菇液体菌种配方,玉米粉2%,葡萄糖1%,麦麸2%,酵母膏0.3%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.1%。

❼ EM菌液的制作方法

EM菌液制作方法如下：

1.菌种活化：取EM菌种10克、红糖0.1公斤、食盐1克、尿素1克、1公斤无菌水（开水放凉就可以）。注：（先把水加热到100°C后加入红塘，而后继续加热5分钟。冷却到40°C时加入EM菌种、食盐、尿素），密闭发酵(35°C—37°C温度)2天，打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用。

2.制作原液：将活化好的1公斤液体菌种加入二级发酵罐( 密闭容器 )( 加水比例按1：17的比例加入 ) 。二级发酵时培养基的配方：（10%的红糖--必须添加、10克尿素、10克食盐或10克磷酸二氢钾！发酵温度35-37度！发酵时间2-3天！），从第二天开始可以隔一天松动容器口放气减压一次，打开容器口时闻到有刺鼻子的酸甜味即发酵扩培成功。 成品发酵液标准:（气味：酸甜， PH值：3.0-4.0， 活菌含量：大于100亿/ml ）

(7)食用菌液体菌种的制做方法扩展阅读：

EM菌液的效用如下：

1.用于家庭及人体保健：治疗消化系统（肝、胆、肝腹水、胃肠炎、便秘、腹泻等）、循环系统（气管炎、肺气肿、哮喘、咽炎、喉干口苦等）、多数癌症（包括放疗及化疗者）、风湿、类风湿、神经衰弱、皮肤病、手足癣、妇科病、灰指甲等多方面的疾病，也可用于消炎、治疗烫伤、促进伤口快速愈合等。内服或外擦，立见神效。也可用于蔬菜、水果保鲜、清洗以及去污等。

2.用于养殖业：一切畜禽及特种养殖。包括猪、狗、牛、羊、狐兔、貂、鸡、鸭、鹅、鸽、蚯蚓等。能有效防止疾病，促进生长。

3.用于种植业：各种农作物，包括稻、麦、豆、薯、玉米、油料、棉、麻、蔗、烟、蔬菜、花卉、茶叶、果树、药材、食用菌等。可使农作物稳产高产、有效防止病虫害。

4.用于水产业：鱼、鳖、虾、鳗、鳝、螺、蚌、泥鳅等。能提高生命力、缩短生长周期、提高产量。

5.用于环保业：治理污水、改善环境。

❽ 液体菌种培养基配方有哪些

大家对食用菌的培养基配方都非常熟悉，但是却没有将培养基配方统一归纳出来，在此跟大家一起分享常见的几种食用菌液体菌种培养基配方。

(1) 平菇培养基配方。马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸30克，蛋白胨1.5克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然;

(2) 金针菇培养基配方。马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然;

(3) 白灵菇培养基配方。马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然; (4)香菇培养基配方。马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然;

(4) 杏鲍菇培养基配方。马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然; (6)鸡腿菇培养基配方。马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖12克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然; (7)黑木耳培养基配方。马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然。