Ⅰ 炭疽病的检查
1.周围血象
白细胞总数大多增高(10~20)×109/L,少数可高达(60~80)×109/L,分类以中性粒细胞为高。
2.涂片检查
取水疱内容物、病灶渗出物、分泌物、痰液、呕吐物、粪便、血液及脑脊液等作涂片,可发现病原菌,涂片中发现病原菌时可作革兰或荚膜染色,亦可作各种特异性荧光抗体(抗菌体,抗荚膜、抗芽胞、抗噬菌体等)染色检查。
3.培养
检材应分别接种于血琼脂平板、普通琼脂平板、碳酸氢钠平板。血标本应事先增菌培养。如见可疑菌落,则根据生物学特征及动物试验进行鉴定,如青霉素串珠和抑制试验、噬菌体裂解试验等。
4.动物接种
取患者的分泌物、组织液或所获得的纯培养物接种于小白鼠或豚鼠等动物的皮下组织,如注射局部处于24小时出现典型水肿,动物大多于36~48小时内死亡,在动物内脏和血液中有大量具有荚膜的炭疽杆菌存在。
5.鉴定试验
用以区别炭疽杆菌与各种类炭疽杆菌(枯草杆菌、蜡样杆菌、蕈状杆菌、嗜热杆菌等),主要有串珠湿片法、特异性荧光抗体(抗菌体、抗荚膜、抗芽胞、抗噬菌体等)染色法,W噬菌体裂解试验、碳酸氢钠琼脂平板CO2培养法、青霉素抑制试验、动物致病试验、荚膜肿胀试验、动力试验、溶血试验、水杨酸苷发酵试验等。
6.免疫学试验
有间接血凝法,ELISA(酶联免疫吸附实验)法、酶标-SPA法、荧光免疫法等,用以检测血清中的各种抗体,特别是荚膜抗体及血清抗毒性抗体,一般用于回顾性诊断和流行病学调查之用。阿斯可里沉淀试验,对已腐败或干涸的标本,作细菌培养有困难时可采用本试验。如患者、病畜的病灶痂皮、尸体组织及血液、染菌的皮毛及其制品等标本,加水经煮沸或高压提出抗原成分与炭疽沉淀素血清作环状沉淀试验,以间接证明有无炭疽杆菌感染,但本法常出现一些假阳性,对其结果判定应慎重。
Ⅱ Ascoli沉淀实验是怎样的
vAscoli试验(炭疽热沉淀反应):
炭疽杆菌菌体多糖抗原能耐热、耐腐败,对于不适合进行炭疽芽胞杆菌培养的陈旧标本或已腐败的尸体脏器标本,经长时间煮沸,仍可与相应免疫血清(抗体)发生沉淀反应。
常用于皮革检疫。
Ⅲ 肺炭疽的检查
1.实验室检查
(1)周围血象 白细胞计数和中性粒细胞增高,可有类白血病反应。
(2)病原学检查 取患者的病灶性渗出物、痰液、分泌物、血及脑脊液等作涂片或培养,可发现病原菌。可作荚膜染色,特异性荧光抗体染色以进一步鉴定,上述检材可培养或接种于豚鼠等动物的皮下组织分离炭疽杆菌。
(3)血清学 酶联免疫吸附测定传统阿斯可里沉淀试验敏感性和特异性都不高。间接免疫荧光法荧光抗体检测有较高的敏感性、特异性。
2.其他辅助检查
X线表现除显示肺炎外,胸腔积液,典型表现为纵隔增宽。
Ⅳ 炭疽病是什么样的
(1)叶枯或叶腐 即通常所谓的急性型炭疽病,常发生在新梢嫩叶上,病斑常从叶尖开始,初为水渍状暗褐色,似开水烫伤,后变为黄褐色、云纹状,病斑边缘不明显。病部组织枯死后,常呈V形斑块,其上也可产生细小的黑色小粒点,病叶很快脱落。
(2)梢枯 刚抽生的新梢上,初生水渍状,很快变黑褐色,继而枯死,幼叶随之凋萎脱落。
(3)果梗枯 通常在9月份,果实开始成熟后发生,受害果梗褪绿发黄,变褐,最后变灰白色干枯,当病斑扩展到果蒂,引起蒂枯,果实提早转色并脱落,造成采果前的大量落果。
Ⅳ 临床上常用的血清学检查方法有哪几种
主要有沉淀试验、凝集试验、补体结合试验、中和试验及与标记抗体有关的试验。
(1)凝集试验
包括玻板凝集法、全血平板凝集法、试管凝集法和琼脂扩散法。
①全血平板凝集反应
此法常用于传染性鼻炎、鸡白痢、鸡伤寒、鸡慢性呼吸道病等禽病的检疫和监测。
②琼脂扩散反应
当适当比例的抗原抗体在含有电解质的琼脂网状基质中自由扩散相遇时,形成肉眼可见的白色沉淀线。此法常用于鸡传染性法氏囊病、鸡马立克氏病、禽流感、禽脑脊髓炎、禽腺病毒感染等病的诊断,还常用于抗体监测和血清学流行病学调查。
(2)血凝与血凝抑制试验
试验原理:某些病毒能够与人或动物的红细胞发生凝集,称为血凝反应(HA)。这种凝集反应可被加入的特异性血清所抑制,称为红细胞凝集抑制试验,即血凝抑制反应(HI)。
此方法常用于鸡新城疫、禽流感、鸡产蛋下降综合征等病毒的诊断和血清学监测。
Ⅵ 叙述炭疽杆菌的微生物学诊断方法
炭疽的微生物学检查
1、标本的采集:分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液等,严禁宰杀解剖死畜。
2、标本的处理:液体标本取沉渣分离培养;固体标本用生理盐水浸泡,水浴杀死非芽胞菌;血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养。
3、涂片染色:革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞—初步报告。荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验
4、核酸检测:核酸杂交
5、分离培养:BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。 2%兔血清肉汤增菌→分离培养
6、鉴定试验:
①串珠试验:接种于含青霉素(0.05~0.5U/ml)的肉汤中,37℃培养6h,形成大而均匀成串的圆球状菌体,与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关,类炭疽无此现象。
②青霉素抑制试验:接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板,37℃培养24h。后两者不生长,前者生长。
③串珠和青霉素抑制联合试验
7、其他试验
①噬菌体裂解试验:AP631炭疽噬菌体
②NaHCO3毒力试验:接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板,10%CO2、37℃、24~48h,有毒株形成荚膜 — 黏液型菌落,无毒株不形成荚膜 — 粗糙型菌落
③毒素动物试验:小鼠、家兔或豚鼠皮下接种
④植物凝集素试验:荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应
⑤Ascoli 热沉淀试验:可作追溯性诊断