食用菌母种鉴定方法

1. 食用菌母种

食用菌母种：子实体中分得的菌种称为母种。
可以找专门做食用菌的实验室帮你做。一般用PDA培养基或者水琼脂培养基就可以。
仪器设备有：75%和95%的酒精，次氯酸钠，超净工作台，平皿，试管，滤纸，解剖刀，镊子，干热或湿热灭菌设备。
方法：
1 制备培养基：称马铃薯200g，琼脂20g，蔗糖或葡萄糖20g，琼脂20g，取马铃薯削皮洗净，切成拇指大的小块，加入1000ml水煮至马铃薯块一触即烂，用四层纱布过滤，将滤液继续加热放入琼脂并搅拌直至琼脂完全溶解，加入蔗糖，装置容器内（一般为三角瓶，如是试管可直接分装）灭菌。
2 灭菌后，如是试管直接摆斜面，如是平皿在超净工作台内分装，待培养基凝固即可用。
3 开始分离母种：将采集到的野生菌，与要用的所有仪器试剂一起放入超净工作台内，紫外杀菌30mim，采用子实体分离方法，用酒精盯烧过的镊子和刀取菌种中未接触到空气的部分，黄豆粒大小，放入平皿培养基内，封号口放入26度的培养箱内3-5天，如未染菌，则在菌肉周围会有菌丝长出，此为母种。在超净工作台内，用接种针将菌丝挑出，放入试管中，继续纯化培养，放入恭喜你，分离成功！！！
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2. 怎样做蘑菇菌种（新手要详细）

在自然界里，食用菌都不是单独存在的，而是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的。所谓菌种分离，就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来，通过培养，获得纯的优良菌种。菌种分母种、原种、栽培种。
(一）母种的分离培养

食用菌母种的分离，可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。
1.孢子分离法
孢子分离法，是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝，培养成菌种的方法。这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差异，且自然分化现象较严重，变异大，需经出菇试验才能在生产上应用。
（l）单孢分离法：是每次或每支试管只取一个担孢子， 让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。蘑菇和草菇用单孢分离得到的菌丝，有结实能力，可采用此法分离生产纯菌种。单孢分离生产上较少采用，而且技术复杂，一般采用多孢分离法。
（2）多孢分离法：就是把许多孢子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。具体操作方法，有以下几种：
①种菇孢子弹射法：选择个体健壮、朵形圆正，无病虫害、出菇均匀、高产稳产，适应性强的八九分成熟的种菇，切去大部分，菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。在接种箱或无菌室内，把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面，漏斗倒盖在培养皿上面；上端小孔用棉花塞住。培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上，静置12～20小时，菌褶上的孢子就会散落在培养皿内。形成一层粉末状孢子印（平菇极淡紫色，蘑菇、草菇 为褐色，香菇、金针菇孢子印白色）。用接种针沾取少量孢子在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。待孢子萌发，生成菌落时，选孢子萌发早、长势好的菌落进行试管培养。
还可用孢子采集器收集孢子。方法是选好种菇后，按上述程序，轻轻掀开玻璃钟罩，将种菇柄朝下插在孢子采收器的钢丝架上，放在培养皿正中央。随即盖好玻璃罩，用纱布将钟掌周围塞好。并在纱布上倒少许升汞或无菌水。移入 20℃左右恒温箱培养。
②褶上涂抹法：按无菌操作分离时；应选择成熟的种菇，用接种针直接插入褶片之间，轻轻抹取褶片表面子实体尚未弹射的孢子，再在培养基上划线接种。
③钩悬法：取成熟菌盖的几片菌褶或一小块耳片（黑木耳、毛木耳、白木耳〕，用无菌不锈钢丝（或铁丝、棉线等其他悬挂材料）悬挂于三角瓶内的培养基的上方，勿使接触到培养基或四周瓶壁。置适宜温度下培养、转接即可。
④贴附法：按无菌操作将成熟的菌褶或耳片取一小块， 用溶化的琼脂培养基或阿拉伯胶、浆糊等贴附在配管斜面培养基正上方的试管壁上。经6～12小时的培养，待孢子落在斜面上，立即把孢子连同部分琼脂培养基移植到新的试管中培养即可。
孢子分离得到的母种、必须进一步提纯复壮，当母种定植一星期左右，菌丝布满斜面时，选择菌丝健壮、生长旺盛无老化、无感染杂茵的母种试管，进而转管扩大，一般到栽培种，转管不宜超过5次。
孢子分离得到的母种，必须通过出菇试验，鉴定为优质菌种后，才可供生产使用。
一般菌类如蘑菇、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多孢分离法获得母种。

3. 什么是食用菌母种、原种和栽培种

母种:从蘑菇上直接分离得到的菌种(试管种,用培养基培养)。

原种:由母种扩大繁殖得到的菌种(瓶装种,用培养料培养,一般多拿罐头瓶或者小袋子培养)。

栽培种:由原种扩大繁殖得到的菌种(袋装种,用培养料培养,一般都拿蘑菇袋子培养)。

母种用来保存菌种,原种用来扩大菌种,栽培种用来生产的。

组织分离法组织分离法是通过切取菌索、子实体、菌核的新鲜幼嫩的组织进行分离，以获取纯菌丝的方法，是最常用的菌种分离法之一 。

子实体、菌索等实际就是双核菌丝的纽结物，具有很强的再生能力。因分离时所 选择的材料不同 ，该方法又可分为菌索组织分离法、子实体组织分离法及菌核组织分离法。

在实践中，子实体组 织分离法是最有效、最常用的方法。但对于胶质菌，由于其子实体中所含的菌丝量比较低 ，如黑木耳、银耳等，利用组织分离培养难度较大。

组织分离属于无性繁殖的范畴，能保持原菌株的特性，遗传稳定变异小，不仅适于孢子不易收集或萌发的食用菌，也适于稳定优良品种的遗传性。

孢子分离法 孢子分离法，是采取子囊果或子实体中成熟的子囊孢子或有性孢子萌发成纯菌丝，再进一步培养成菌种的方法。

由此法可以获得强活性、短菌龄的菌丝，该方法的另外一个优点是分离得到的有性孢子兼有双亲的遗传特性，可用于杂交育种和选育新种中。

只是孢子间不仅存在个体差异，还存在较普遍的自然分化现象，出现的变异较大，必须经过出菇试验后才能用于生产中团。对于产孢子的真菌，一般其分离法多采用孢子分离法。

以上内容参考：网络-食用菌菌种

4. 如何鉴别和培养优质食用菌菌种

保证食用菌菌种质量主要包括三个方面：一是正确鉴定菌种种类；二是保证菌种纯度、长势和菌龄；三是扩大培养优质菌种。
一、正确鉴定菌种种类
最可靠的方法是做出菇试验，即小型栽培，根据子实体特征鉴别种类。有些食用菌菌丝的形态和生理特征比较特殊，靠专业人员经验可以鉴定，如竹荪、猴头、银耳和草菇能够在实验室目视准确判断。
二、保证菌种纯度、长势和菌龄。
1、纯度。菌种要求是纯培养，不能混有杂菌和其他食用菌。可从菌落形态，特别是从菌落颜色上区别，如毛霉、根霉菌丝稀疏、生长快，青霉、曲霉、木霉聚集。许多杂菌区别于食用菌的白色呈特殊的颜色。
2、长势。不同食用菌菌丝的生长速度、旺盛程度、浓密度有明显的差别。在鉴别菌丝长势时，要注意培养基及培养条件的因素，在条件适宜的前提下，选用菌丝生长旺盛、生长量多和生产快的菌种。
3、菌龄。老化菌种生活力弱，不宜在生产中使用。不同食用菌老化的表现不大一样，就大多数食用菌来说，白色的菌种变黄或吐黄水，培养基收缩，形成了大的子实体，都是培养时间过多的菌种，不能使用。
三、扩大培养优质菌种
1、提供菌种所需要的营养物质。菌种生长需要的营养物质要齐全，掌握好碳氮比、无机盐、水的浓度，配制培养基一般碳源百分之几至十几，氮源千分之几至十几，大量元素的化合物是千分之五以下至万分之几，微量元素是十万分之几至百万分之几。
2、保证适宜的环境条件。已大量栽培的食用菌需要的温、湿、气、光等环境条件都很清楚，力求用量适宜的条件培养菌种。刚接好的菌种应取最适生长温度中的上限温度，促其萌发，培养2-3天菌丝深入培养基后，使培养温度稍低于最适生长温度，菌丝才会茁壮生长。一般应避光和适当通气。
3、防杂菌污染
⑴灭菌要彻底。灭菌不彻底，培养基中未杀死的杂菌在培养菌种时生长繁殖，菌种不能用。
⑵接种时严格无菌操作。杂菌进入培养基的机会有接种室（箱）灭菌不彻底、无菌操作不当、接种速度快等。
⑶环境消毒。对环境进行必要的药物消毒，最好是不同药物交替使用。不能随便丢弃有杂菌的菌种袋、瓶和栽培袋，防止成为食用菌栽培的重要污染源。
⑷做好菌种培养基的管理。菌种培养2-3天要逐个瓶（袋）检查，将生有杂菌的菌种拿到远处深埋或烧掉。如果不及时捡出生有杂菌的菌种，很快被迅速生长的食用菌菌丝掩盖，已无法识别，使用后损失更大。培养室消毒、避高湿，防大风直接吹进培养室，都是防菌种被污染的重要措施。
⑸轻拿轻放菌种。保证瓶、袋完好无损，包括装料、灭菌、运输、接种、培养管理等过程中防磨破、碰破、挤破、压破、扎破菌种瓶或菌种袋。运输时用洁净布覆盖，防落尘土和杂菌。
4、防菌种过期。过期的菌种老化变黄，培养基脱水，或形成子实体消耗了大量营养物质，菌种生活力降低。食用菌的种类和培养料不同，母种、原种和栽培种培养天数和使用期也不一样，母种长满试管应立即使用。平菇母种一般培养7天，有的平菇品种多培养一夜菌丝就变黄。木屑、棉籽壳为主料的原种、栽培种，外观长满菌丝后，中心部位还没有长好，在室温下有5天左右的"后熟期"内部也就长好了，这时应及时使用。（来源：《中国农村科技》2003.3期）

5. 香菇菌种怎样培养出来的

自然界里，食用菌都不是单独存在的，而是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的。所谓菌种分离，就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来，通过培养，获得纯的优良菌种。菌种分母种、原种、栽培种。
(一)母种的分离培养
食用菌母种的分离，可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。
1.孢子分离法
孢子分离法，是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝，培养成菌种的方法。这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差异，且自然分化现象较严重，变异大，需经出菇试验才能在生产上应用。
(l)单孢分离法：是每次或每支试管只取一个担孢子，
让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。蘑菇和草菇用单孢分离得到的菌丝，有结实能力，可采用此法分离生产纯菌种。单孢分离生产上较少采用，而且技术复杂，一般采用多孢分离法。
(2)多孢分离法：就是把许多孢子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。具体操作方法，有以下几种：
①种菇孢子弹射法：选择个体健壮、朵形圆正，无病虫害、出菇均匀、高产稳产，适应性强的八九分成熟的种菇，切去大部分，菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。在接种箱或无菌室内，把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面，漏斗倒盖在培养皿上面;上端小孔用棉花塞住。培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上，静置12～20小时，菌褶上的孢子就会散落在培养皿内。形成一层粉末状孢子印(平菇极淡紫色，蘑菇、草菇
为褐色，香菇、金针菇孢子印白色)。用接种针沾取少量孢子在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。待孢子萌发，生成菌落时，选孢子萌发早、长势好的菌落进行试管培养。
还可用孢子采集器收集孢子。方法是选好种菇后，按上述程序，轻轻掀开玻璃钟罩，将种菇柄朝下插在孢子采收器的钢丝架上，放在培养皿正中央。随即盖好玻璃罩，用纱布将钟掌周围塞好。并在纱布上倒少许升汞或无菌水。移入
20℃左右恒温箱培养。
②褶上涂抹法：按无菌操作分离时;应选择成熟的种菇，用接种针直接插入褶片之间，轻轻抹取褶片表面子实体尚未弹射的孢子，再在培养基上划线接种。
③钩悬法：取成熟菌盖的几片菌褶或一小块耳片(黑木耳、毛木耳、白木耳〕，用无菌不锈钢丝(或铁丝、棉线等其他悬挂材料)悬挂于三角瓶内的培养基的上方，勿使接触到培养基或四周瓶壁。置适宜温度下培养、转接即可。
④贴附法：按无菌操作将成熟的菌褶或耳片取一小块，
用溶化的琼脂培养基或阿拉伯胶、浆糊等贴附在配管斜面培养基正上方的试管壁上。经6～12小时的培养，待孢子落在斜面上，立即把孢子连同部分琼脂培养基移植到新的试管中培养即可。
孢子分离得到的母种、必须进一步提纯复壮，当母种定植一星期左右，菌丝布满斜面时，选择菌丝健壮、生长旺盛无老化、无感染杂茵的母种试管，进而转管扩大，一般到栽培种，转管不宜超过5次。
孢子分离得到的母种，必须通过出菇试验，鉴定为优质菌种后，才可供生产使用。
一般菌类如蘑菇、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多孢分离法获得母种。
现就银耳孢子分离略述于下：
按无菌操作获取种耳后，悬挂种耳的三角瓶经12小时培养后，瓶底培养基表面就有"孢子印"。取出种耳，置
20℃—25℃温箱培养2～3天，培养基表面会出现乳白色透明的糊状小菌落，就是银耳的酵母状分生孢子形成的少量银耳菌丝。此时移接入试管斜面培养基上，待长满斜面后，再移接入营养丰富，且表面比较干燥的培养基上。经30天左右，菌落长出白色菌丝。
银耳的酵母状分生孢子、菌丝只有与羽毛状菌丝的子囊菌(香灰菌丝)混合培养时，由后者帮助分解木材及其他一些纤维物质，提供营养，才能利于银耳孢子萌发，菌丝的定植和子实体的形成。
在两种菌丝交会时，先选出两种纯菌丝。
羽毛状菌丝要纯化选育，一般要选取生长迅速，爬壁力强的试管斜面或种瓶，取先端菌丝，转管移接，置25℃—28℃上培养，重复转管几次即可得到优良纯种。
银耳菌丝的特点，菌丝生长缓慢，担孢子也不易萌发。在进行两菌混合时，先取经8～IO天培养的银耳菌丝斜面，按无菌操作方法在该斜面上距银耳菌丝约0.5厘米处接入一
小块羽毛状菌丝。置25℃下培养1周即得到混合好的银耳母种。
2.组织分离培养法
利用子实体内部组织，进行无性繁殖而获得母种的简便方法，即组织分离。该法操作简便，菌丝生长发育快，品种特性易保存下来，特别是杂交育种后，优良菌株用组织分离法能使遗传特性稳定下来。常采用以下分离方法。
(l)子实体分离：种菇要选朵大盖厚，柄短，八九分成熟的优良品种。切去菇两基部，在无菌箱内以0.1%的升汞水浸几分钟，再用无菌水冲洗并揩干或用75%酒精棉球擦拭菌盖与菌柄2次，进行表面消毒。接种时，只要将种菇撕开，在萌盖和菌柄交界处或菌褶处，挑取一小块组织;移接
到PDA培养基上。置25℃左右温度下培养3-5天，就可以看到组织上产生白色绒毛状菌丝，转管扩大即得到菌种。如香菇、平菇等可以用此方法。
(2)菌核分离：茯苓、猪苓、雷丸等菌的子实体不易采集。而常见的是它贮藏营养的菌核。用菌核分离，同样可以获得菌种。方法是将菌核表面洗净，用酒精或升汞消毒后，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA
培养基斜面上，保温培养。应注意的是，菌核是贮藏器官，大部分是多糖类物质，只含有少量的菌丝，因此挑取的组织块要大一些，如果组织块过小，则不易分出菌种。
(3)菌素分离：有一部分子实体不易找到，也没有菌核，可以用菌素进行分离。如蜜环菌、假蜜环菌。其操作方法是先用酒精或升汞将菌素表面黑色皮层轻轻擦拭2～3次，
然后去掉黑色外皮层(菌鞘)，抽出白色菌髓部分;用无菌剪刀将菌髓剪一小段，接种在培养基上，保温培养，即得该菌菌种。
菌素分离要注意：因菌素比较细小，分离素也比较细小，分离时极易污染杂菌，所以要严格操作。
3.基内菌丝分离培养法
利用食用菌生育的基质作为分离材料，来得到纯菌种的一种方法，叫基内菌丝分离法。
此种分离方法是适宜只有在特定的季节才出现，而且是朝生暮死，不易采得的子实体。基内分离法与组织分离法不同之点是，干燥的菇木或耳木中的菌丝常呈休眠状态。接种后有时并不立刻恢复生长。因此，有必要保留较长的时间(约1个月)，以断定菌丝是否能成活。基内菌丝分离法又可分为，材中菌丝分离(即菇木或耳木分离法)及土中菌丝分离法等。
(1)材中菌丝分离法：就是菇木或耳木分离法，为了减少杂菌的感染，菇(耳)木在分离之前，必须进行无菌处理。可以把菇(耳)水表面用酒精灯火焰轻轻烧过，以烧死霉菌的孢子，或再用0.1%的升汞水浸孢几分钟，然后用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干。接种块切取时应注意。接种块必须在该菌菌丝分布的范围内切取。所以，菌丝生长缓慢的种类应浅取;菌种生长快的种类可以深取。同时。还应根据菇菌的种类、木材质地、菇(耳)木粗细、发育时间的长短来确定菌丝分布的范围。然后用一把利刀进行切取。接种块应尽量小些，以减少杂菌感染机会，提离菌种的纯度。接种块移到培养基上，就应该放到适合菌丝生长的22℃～26℃
的温室或温箱中培养，使菌丝恢复生长。
(2)土中菌丝分离：食用菌种类很多，许多土生的食用菌;孢子不易萌发。组织分离也不易成功，用土中菌丝分离获得纯种的方法，叫土中菌丝分离。
土中菌丝分离时要注意，由于土中菌丝体的周围生活着多种多样的土壤微生物，因此分离时必须尽可能避开这些微生物的干扰，尽可能批取清洁菌丝素的尖端、不带杂物的菌丝接种，反复用无菌水冲洗，在培养基中加入一些抑制细菌
生长的药物，如
40微克/升的链霉素或金霉素。如发现感染细菌，可以把菌落边缘的菌丝挑出来，接种到木屑培养基中。因细菌没有分解木质素的能力，因此在木屑培养基中不易扩展;只局限于接种处。待菌丝长出感染区后，就可以再进行扩大提纯了。
(3)子实体基部分离：从瓶栽、袋栽或大床栽培的子实体基部分离出新菌丝的方法，叫子实体基部分离，现以袋栽银耳为例说明：
从出耳早、出耳率离、无病虫害的栽培室中;选择生活力最强的幼耳5袋，移到气候温和，有散射光的野外场所进行后期培养，以增强菌丝体的生活力。经培养7～10天后，待子实体直径达4～5厘米时便可取回，作为分离的母体。再从中筛选最理想的一朵，用利刀割掉银耳子实体，放置于
0℃的冰箱或有敌敌畏的容器中过夜，以便杀死瓶中的害虫。然后用75%酒精或升汞擦洗耳基和袋子外边的杂质，连同接种工具、接种培养基等移进无菌室。经灭菌后，用接种刀把袋口上部约15毫米厚的老菌根挖除，并进行培养。待袋口露出白色菌丝时，用接种针挑取一块半粒米大的白色菌结体，迅速移入母种试管培养基的中央，轻轻地脱去接种针，
塞上棉塞。
为了能够获得较多的母种，一次接种量要有100—200支试管，以便从中选择。分离后应及时移入22℃—24℃恒温箱或温室中培养。由于培养基内水分较多，菌丝恢复要比耳木分离得快。经2-3天后，分离物的边缘就可看
到白色菌丝。每天要至少观察两次，以便提纯。观察、提纯方法与耳木分离法担同。经适温培养10-15天后，当接种块扭结团出现红、黄色水珠时，即可扩大原种。
(二)原种和栽培种的接种培养
母种获得以后，为了满足菌种生产的需要。应选出优良、纯度高的母种进一步扩大为原种。
原种培养基一般采用棉籽壳、木屑、草类等培养基。
瓶装或袋装的原种培养基灭菌后，可送入灭过菌的接种箱内，待瓶中的培养基冷至30℃以下，可按照无菌操作程序进行接种。
菌种瓶(袋)放入培养室时，要经常进行检查，一经发现杂菌污染，立即取出。培养成的原种，菌丝体必须健壮有力，紧贴瓶壁而不干缩，颜色纯正，具有一定清香味，生活力强，扩制成栽培种时吃料快。
栽培种就是将原种进一步扩大培养成三级种，它和原种的接种及培养相同。一般香菇、平菇、冬菇、猴头、木耳、银耳的栽培种多用锯木、棉皮作培养基。蘑菇多用粪草做培养料。
栽培种要求料块不脱水干缩。菌丝体健壮有力、颜色纯正，有清香味，无老化现象，无杂菌污染，有的种许可有少量原基，接入栽培料后，发菌快，长势好，生活力强。
原种在接栽培种时，原种瓶口的一层菌丝体应挖去不用。
(三)液体种的简单培养
目前，用液体深层发酵法生产菌种，具有生产量大、周期短、菌龄整齐、成本低廉、接种方便等特点，是实现食用菌工厂化生产的目标。现将液体种培育过程简述于后，供参考。
简言之就是将纯正优良的菌种，接入液体培养基(固体培养基不加凝固剂)，使菌丝繁殖形成大量小菌球，然后将这种培养基拌入木屑或棉籽皮料内，制成菌块、培养其形成子实体。还可用于制原种、栽培种。
培养液体菌种，可将培养液装入三角瓶中，约占空瓶的五分之一重量。用摇瓶机(也称摇床)来培养。摇瓶机有旋转式和往复式两种，一般多用往复式。液体培养基可用马铃薯汁(加糖)，麦芽汁配制，也可用玉米粉、豆饼粉、糖、无机盐等配制。可以混合培养基，因适用于多种食用菌和药用菌的培养，均有好效果。组分：豆饼粉2%，玉米粉1%，
葡萄糖3%，酵母粉0.5%，磷酸二氢钾0.1%，碳酸钙 0.2%， pH自然， 12℃灭菌半小时。然后接种培养。
如果生产量较大，在三角瓶的基础上，再逐级扩大种子缸，发酵罐中进行液体深层通气发酵，产生大量菌种。但由于生产中要求设备繁多，技术性强，我们还应创造条件;实现食用菌栽培的现代化。
(四)菌种质量的鉴定
菌种质量鉴定最好的方法是，做出菇试验。但是时间比较长。在购置菌种时，或在菌种生产中，如何能知菌丝生长情况，快速判断菌种质量?我们介绍几种方法：
1.肉眼观察：优良菌种菌丝浓白，绒状，粗壮密集，生长整齐，速度快，香味浓厚。
2.优良菌种标准可归纳为："纯、香、正、壮、润"五个字。检查时，打开瓶塞，从菌种瓶中部取出小块菌丝体，观察色泽，闻其气味，手捏料块检查其含水量，看是否符合上述要求标准。
3.显微镜检查：挑取少量菌丝，置显微镜上观察其形态，菌丝分枝，分隔情况，锁状联合，细胞膜的厚薄。
培养观察：从菌种瓶中挑取小块菌丝体，接种斜面试管培养基上，置23℃～25℃恒温中培养，经五周后检查菌种生活力。如果菌丝生长快，旺盛纯一，健壮浓厚，长且整齐，则表示菌种的生活力强。
4.分块法：在桌上放一张白纸，把菌龄相同的菌种从瓶内取出一大块，用手分成2块，再把2块分成4块，4块
分成8块，依次进行。优良菌种整块多，碎渣少。劣次菌整块少，碎渣多。
5.液体菌种鉴别：当三角瓶或发酵缸培养3-7天后，如液面出现气泡，产生"油皮"、混浊等现象，说明菌种本
身带有杂菌。如菌块上浮，或迟迟长出很薄的菌丝层，则说明菌种生活力弱。白块四周的菌丝生长快、浓白、棉絮状，表明菌种生命力强。
(五)菌种生产过程中的杂茵防治
在生产菌种时，要时刻注意杂菌污染，以防为主，一旦发生，根治很不容易。所以整个制种过程都必须在无菌条件下进行。接种箱及所有分离、接种的用具、器皿，都要进行严格的消毒灭菌。工作人员的双手要用消毒剂清洗，并穿戴消过毒的工作服、帽和口罩，动作要敏捷、准确，尽量不要讲话走动，以防空气中的杂菌感染。
分离母种时，选择出菇早、生活力强，第一潮菇是关键，因它生活力强，接种后迅速占领阵地，无杂菌侵入的机会。
被污染的菌种，原因是多方面的，一般是灭菌不彻底所致，或因接种时无菌操作不严、瓶盖不合适造成的。所以灭菌一定要彻底，最好在接种萌将培养基置25℃左右温箱中做效果检查，经2天不长杂菌，说明彻底，可以使用，接种过程中一定要严格无菌操作。
污染杂菌另一个原因可能是分离母种时感染杂菌，因种菇表面带菌，消毒不彻底，通过组织块将杂菌带入培养基。
总之，污染机会很多，要注意环境消毒，按无菌操作规程彻底灭菌，层层把关，环环抓紧，严加注意;提离菌种质量。

6. 如何鉴定菌种

在杏鲍菇、白灵菇生产中，只有具备优良的菌种，通过科学的培育管理，才能实现优质、高产、高效。因此菌种的优劣是事关千家万户的切身利益和菌种生产厂家信誉的大事。在现实生产中，也常发现有的菌种厂以赢利为目的，粗制滥造。加之有些菇农对菌种质量缺乏识别能力，致使在生产中减产、绝收，造成巨大的经济损失。因此严格菌种质量，加强对菌种的鉴定和识别是当前食用菌发展中的首要任务，也是最主要的技术环节和要求。
菌种质量的鉴定，严格地讲，应从形态、生理、栽培和经济效益等方面进行综合检测和评价。但要完成各种指标，除了需掌握一定的基础知识和基本技术外，还需具备一定的仪器设备及人力物力和时间。因此，一般生产者是很难完成的。这里仅将几种常用、简便、易行的方法予以介绍，供生产者参考。
（1）直接观察。
对引进的母种，首先要用肉眼观察包装是否符合要求，棉塞有无松动，试管有无破损，棉塞中有无杂菌和病虫害侵染，菌丝色泽是否正常、有无老化等现象。购进或自制的原种，瓶内菌丝应粗壮整齐、分枝浓密、色浓白呈绒毛状，说明生长旺盛。如瓶底出现黄水、菌丝萎缩与瓶壁脱离，或出现原基扭结，说明菌种老化应淘汰。（2）菌种纯度检查。
杏鲍菇菌丝是纯白色的，白灵菇菌丝较杏鲍菇菌丝稍浅些。如在菌种管或菌种瓶中出现其他颜色的菌丝或孢子（绿色、黄色、黑色等），则说明菌种不纯，被杂菌污染不能使用。如果在接菌时发现菌种有异味也说明菌种被杂菌污染，不能使用。（3）吃料能力鉴定。
将母种接入最佳配方的原种培养基中，或将原种接入栽培袋中观察菌丝生长情况。经1周的培养，如果菌种块能很快萌发并迅速向四周的培养料中生长伸展，说明菌种的吃料能力强。反之，菌种块萌发后生长缓慢，迟迟不向四周和料层深处伸展，则表明菌种对培养料的适应能力差。（4）观察菌丝长势。
可先将供测的菌种接入其适宜的试管培养基上进行培养，如果菌丝生长整齐浓密、健壮有力，则表明为优良菌种。若菌丝生长缓慢或长速太快，稀疏无力，参差不齐，容易衰老，则表明菌种质劣。（5）栽培试验观察。
这是菌种质量鉴定最可靠的方法。通过一定的栽培试验，凡具备优质高产、抗杂能力强和遗传性稳定的菌株，才是优良和可推广应用的品种。

7. 食用菌母种有哪些质量鉴别方法

1 菌丝洁白浓密无杂菌污孝岁档染 2 培养基没巧乱有与试管壁分离 3.是我自己的看法 从培养基底部向菌丝面看是否有斑点 如果有则是有雀陆杂菌污染 尤其是平菇母种有杂菌有些也可长满斜面，

8. 请问食用菌的母种是怎么做出来的

食用菌母种一般生长在玻璃试管内的斜面固体培养基上为一级菌种，用它繁殖扩大成为原种，再用原种扩繁成为栽培种。

9. 常见食用菌品种母种的培养特征有哪些

正常的菌种都有一派没些共同的可供观察和识别的特征，根据这些生长特征，能在较短的时间内识别出你所需要的菌种与生产的菌种是否对应。作为菌种生产者、使用者对菌种的鉴定，一般不是对其品种种性，而是在确定种性的前提下，对大量扩繁后的菌丝体生长状况的检查和优劣的鉴别。外观特征只有在品种、培养基、培养条件等大致相同的前提下，才有可比性。

（1）双孢蘑菇

菌丝纤细、稀疏、灰白，优良菌丝上下均匀，没有生长很快的扇形变异；一般22～24℃，15天以上才能长满斜面。若超过28℃，菌丝生长就会受抑制而发黄。若菌丝倒伏、发黄或形成黄白色菌被，则不能用于生产。

气生型：气生菌丝生长旺盛，白色或灰白色，尖端清晰整齐、挺拔有力，密度均匀，基内菌丝较发达，一般15～25天长满试管斜面。

半气生型、匍匐型：菌丝紧贴培养基斜面表面呈索状生长，挺拔有力，但生长缓慢，排列稀疏、清晰，常呈扇形生长，数日后多出现细细的菌索；菌丝纤细、微黄，气生菌丝很少，不易形成“菌被”，在适宜的培养基和环境条件下一般22～26天长满斜面州返。

[镜检] 菌丝有隔膜和分枝，节间短，分枝多，节间处膨大，形似腊肠，不产生锁状联合（图2-9）。

图2-10 香菇母种的培养特征

[镜检] 菌丝粗壮，粗细比较均匀，具隔膜和分枝，粗2～4微米，有明显的锁状联合。有的锁状突起，顶部宽平；有的呈半圆形，大小不一。

（3）平菇

菌丝洁白、浓密、粗壮、整齐、有光泽、匍匐状；气生菌丝发达，多的可布满试管空间，不产生色素，爬壁能力强。接种块周围无菌丝稀疏区。菌册羡饥丝生长速度快，在适温20～22℃下，一般6～8天长满试管斜面，低温保存能产生珊瑚状子实体原基。耐高温，短时间在34℃下正常生长。有些菌株气生菌丝过多，形成很厚的菌被将管壁布满，很容易在种块或管壁上形成原基，因此老化或多次转管的菌种，不宜使用。有些菌株在高于28℃的温度下培养或培养时间过长，气生菌丝顶端往往会变成橘红色，并产生分泌物，这虽不影响使用，但已不宜扩大培养；气生菌丝过多的母种也不宜扩大培养。

[镜检]菌丝粗细不匀，分枝性强。在显微镜视野中，锁状联合比比皆是；锁状突起呈半圆形，大小不一；常在菌丝分枝处有两个锁状联合在上下垂直方向邻生。

（4）金针菇

菌丝白色或浅灰白色，细绒毛状，初期较蓬松，后期气生菌丝紧贴培养基表面，稍有爬壁现象。菌丝生长速度较快，黄色品种在适温20～22℃下，一般10～12天长满斜面；白色品种稍慢。黄色品种常在培养后期出现黄褐色色素，使菌丝不再洁白，老化时表面出现淡污褐色斑块；白色品种不如此。时间较长的菌种分泌色素，如菌丝由白色变为灰白或略带黄色，在管壁出现许多粉状物（粉孢子），说明菌种开始老化，粉孢子多的菌株，品质一般不理想。低温贮存时有细水珠出现，斜面上形成少量子实体。

[镜检] 菌丝较粗壮，粗细均匀，有锁状联合。菌丝易断裂成节孢子，有时产生粉孢子成串着生于菌丝上，产生稀薄分布的粉状物。锁状突起一般为半圆形，相当数量的为半抱握形。抱握膨起部分细胞质浓稠，相对部分则现透明。

（5）草菇

菌丝生长初期纤细、无色透明，多分枝，似蚕丝，有金属光泽，后期呈淡白色、银灰色，老时呈灰黄色。菌丝生长速度快，在30～32℃条件下，6天即可长满斜面，再培养2～3天开始出现厚垣孢子，呈链状，初为灰白色、淡黄色，后渐变成褐色至锈红色（20多天），最后培养基表面出现紫红色。多为气生菌丝，气生菌丝爬壁能力强，在试管内生长蓬乱，布满整个试管空间，但每根都清晰可见，且不易变黄，斜面上也不产生子实体；若菌丝变为淡黄褐色，则为是老化的表现。不产生厚垣孢子的菌种一般不具结菇能力；若厚垣孢子出现过早过多，则是种性开始老化。若菌丝密集，颜色洁白，可怀疑混有杂菌。

[镜检]菌丝粗壮、透明，有分枝（多呈直角形），有明显的隔膜，形如毛竹，节节分明，但粗细不均匀。厚垣孢子圆形，带有红褐色的金属光泽，无锁状联合。

（6）木耳

初级菌丝纤细、透明，洁白至米黄色；二级菌丝生长均匀一致、短密、洁白，呈棉絮状，平贴培养基表面，整齐、匐匍生长，生长边缘整齐有力，不爬壁，生长速度为0.5±0.1厘米/天；有气生菌丝，但较短而稀疏；后期颜色加深，菌块分泌褐色色素，出现污黄色斑块，培养基会因此而变成茶褐色。培养过程中有时会形成浅褐色颗粒状胶质耳基，这是老化的表现。在综合PDA培养基上，黑暗恒温25℃下培养，12～14天长满斜面。

[镜检] 菌丝纤细，粗细不匀，分枝性强，常呈根状分枝。长相屈曲，有锁状联合，但锁状联合像骨节抱握状，且数量也没有香菇那样多而明显。初次分出来的菌种，可以看到担孢子发芽时所产生的钩状或马蹄铁状、比细菌略大的分生孢子。

（7）鸡腿菇

菌丝浅灰白色，浓密，棉絮状，生长旺盛，边缘整齐有力，基内菌丝分泌色素，使斜面培养基颜色加深，部分呈黑褐色。菌丝生长速度较快，适温25℃，10天左右菌丝即可长满试管斜面。菌丝随培养时间延长而变灰色，这是鉴别鸡腿菇的重要特征。

（8）银耳

有芽孢、银耳纯菌丝、香灰菌丝及银耳香灰混合菌种等几种形态。

芽孢：是银耳的孢子，在PDA培养基上不能萌发成菌丝，而是繁殖成酵母状物。幼龄芽孢菌落稀糊状，乳白色，表面光滑，半透明，边缘整齐，平铺于培养基表面；随着培养时间的延长，表面出现皱纹，变为淡棕色。在PDA培养基上菌落黏稠度小，能在培养基表面上流动；在合成培养基上，菌落较干燥，有时表面有疣点；在营养丰富的培养基上，黏度适中，边缘能形成放射状暗花纹。生长速度快，适温培养4～5天就可长满培养基斜面。

银耳纯菌丝：白色、淡黄至鹅黄色，直立或平贴，短而细密，生长缓慢，呈白毛团状，菌丝前端整齐，生长速度极慢，在适温22℃下日生长速度为1毫米左右，不分泌色素。后期在白毛团周围有一圈紧贴培养基的晕环，不易胶质化的适于做段木种，易胶质化的适于做袋料种；有无色或淡黄色水珠，在特殊培养基上由芽孢萌发得到，单一菌丝无生产价值。镜检时菌丝纤细，有锁状联合。

香灰菌丝：初为无色，大量生长时白色，有特别细长的主干和对称的侧生分枝，似羽毛状，且均匀，故又名羽毛状菌丝。生长快，爬壁能力强，在适温26～28℃下，一般5～6天长满斜面。老龄菌丝淡黄或棕色，基内有时带暗绿色。气生菌丝灰白色，细绒状，表面有碳质黑疤，并间有黄绿色分生孢子，菌丝能分泌黑色色素，培养时间长的会使培养基变成黑褐色。镜检时菌丝纤细，粗细均匀，有锁状联合，锁状突起小而少。

混合菌种：菌种中同时存在银耳和香灰菌丝。从种木中分离出来的母种，香灰菌丝生长占满斜面，接种块处为一簇浓白、密集的菌丝团，称之为“白毛团”，其他部位均为生长均匀的菌丝体。香灰菌丝深入基内，使培养基变黑，白毛团分泌淡黄色至淡褐色水珠，很快胶质化成为银耳原基。

（9）灵芝

菌丝纤细、平坦、致密、洁白、均匀、整齐，匍匐生长，几乎不见气生菌丝。随着菌丝的生长，菌落的扩展，近接种块处的菌丝逐渐老化而形成坚韧的菌皮，并随菌皮的老化，色泽逐渐为淡黄色。菌丝不分泌色素，易形成有菌管的子实体原基。在综合PDA培养基上，28～30℃黑暗培养，一般8～11天长满斜面。

[镜检] 菌丝较纤细，粗细不均匀，有锁状联合。菌丝表面覆有白色结晶物（草酸钙），旺盛时，充满菌丝之间的间隙。锁状突起中等大小，数量较多。

（10）猴头

菌丝生长不均匀，白色至灰白色、微黄色，线绒状，短而稀疏，紧贴在培养基表面，不爬壁，气生菌丝粗、短、少，基内菌丝多；常不规则地形成索状物，并在其上形成小子实体原基，外观上似小疙瘩，较老的菌丝形成节孢子，后期会分泌棕褐色色素，使斜面培养基呈茶色。颜色过深的基内菌丝活力下降而不宜使用。多次转管后生活力明显下降，当菌丝呈线粒状时，很难继续生长；转接后菌丝恢复慢，萌发后菌丝呈线绒状，向四周作放射状延伸。在综合PDA培养基上，黑暗恒温25℃下培养，一般14～20天长满斜面。在酸性培养基上生长快、旺盛；若使用有麦芽糖的猴头专用培养基，菌丝生长会大大改善，菌丝长速大大加快且浓密洁白，不再形成菌索和原基。

[镜检] 菌丝粗壮，粗细较均匀，分枝性强，长相屈曲，锁状联合多而大。

（11）滑子菇

菌丝较细，气生菌丝短而少，白色至淡黄色，棉绒状。菌丝平铺于培养基表面生长，菌丝生长整齐舒展、致密，菌落较薄、微黄色，不形成菌皮，菌丝管壁常有网状菌丝束，分泌黄褐色色素。在综合PDA培养基上，黑暗恒温23℃下培养，14天左右长满斜面。镜检有锁状联合。

（12）阿魏菇

该种不同品种间差异显着，有的品种菌落致密、微黄，生长缓慢，在综合PDA培养基上要3周左右长满斜面；有的品种菌落舒展、洁白，菌丝也较稀疏，生长较快，在综合PDA培养基上2周左右即可长满斜面。

（13）灰树花

菌丝半絮状、致密洁白，气生菌丝多寡不同，菌落生长不甚整齐，培养后期菌丝不甚洁白，稍有污白色，气生菌丝交织而形成不坚韧的疏松的菌皮。在综合PDA培养基上，黑暗恒温25℃下培养，一般14～16天长满斜面。不同品种菌落形态和长速不尽相同。

（14）竹荪

菌丝体生长初期白色，粗壮、浓密，尖端呈扇形、束状。气生菌丝浓密、纯白，爬壁力强，见光或损伤后呈粉红色、紫色或淡褐色。后期出现菌丝束，并产生色素。长裙竹荪呈粉红色，间有紫色；短裙竹荪多为紫色或紫蓝色；红托竹荪为粉红色；棘托竹荪菌丝束为粉红色、淡紫色或黄褐色。棘托竹荪菌丝生长速度快于其他品种。老化的菌种气生菌丝消失，菌丝呈暗红色，自溶并产生黄水。

（15）榆黄蘑

菌丝绒毛状，不舒展，具浓密而短的气生菌丝，生长不甚均匀，易形成有韧性的菌苔。在综合PDA培养基上，黑暗恒温25℃下培养，10天左右长满斜面。

（16）鲍鱼菇

菌丝均匀纤细，气生菌丝较少，表面有棒状分生孢子梗和黑色分生孢子团。在综合PDA培养基上生长缓慢，在黑暗且27℃条件下培养，20天左右长满斜面。

（17）姬松茸

菌丝微黄而纤细，有细细的菌索于表面，气生菌丝较少，生长整齐。在双孢蘑菇专用培养基上，黑暗恒温25℃下培养，16～20天长满斜面。

（18）真姬菇

菌丝浓密洁白，气生菌丝旺盛，表面呈绒毛状，生长不甚均匀，在加入有两种碳源的培养基上生长较好。在马铃薯酵母粉综合培养基上，黑暗恒温24℃下培养，14～17天长满斜面（不同品种间长速有异）。

（19）蜜环菌

在琼脂培养基上菌丝棉絮状，灰白色，后期淡红棕色，生长较慢，具轮廓分明的边缘。接种后48小时左右开始萌发，并随培养基表面菌丝的生长，7～9天后，在絮状菌丝中心出现褐色色素，且颜色逐渐加深，向四周扩散。13～15天后，形成菌索，呈树根状，并向培养基中生长，初期白色，后变为深褐或黑色。产生色素，并溶于培养基，使其变红褐色。菌丝和幼嫩核辐射束产生荧光。在木屑浸出汁综合培养基上，黑暗恒温25℃下培养，2周左右根状菌索蔓延至整个培养基。镜检无明显锁状联合。