‘壹’ 实验动物常用的采血方法有哪些各有何优缺点
1、简单随机抽样 优点:当总体内观察单位数与样本例数都不大时拥有实施,均数及其标 准误的计算也比较简单。 2、分层抽样 优点:易于理解、简单易行。容易得到一个按比例分配的样本。 3、系统抽样 优点:由于分层后各层内的个体同质性质增强,使得抽样误差比较小。 4、整群抽样 优点:便于组织,节省人力、物力、时间,容易控制调查质量。
‘贰’ 【转】研究动物激素的几种常用实验方法
一、实验方法 1.切除法:切除动物的某种内分泌腺,通过观察该动物的异常反应来验证该腺体所分泌激素的功能。如手术摘除成年狗的甲状腺,狗会发生身体臃肿,食欲不振,行动呆笨而迟缓,精神萎靡。如手术摘除蝌蚪的甲状腺,蝌蚪就不能变态发育为青蛙,从而证明了甲状腺激素具有促进新陈代谢、促进生长发育、提高神经系统兴奋性、加速物质氧化分解等功能。各种内分泌腺均可通过切除法证明其产生激素的功能。 2.饲喂法:用含有某种激素的食物或水喂养动物,一段时间后,观察动物的异常生理变化,从而推断出该激素的功能。如用甲状腺制剂饲喂蝌蚪,结果蝌蚪短时间内发育成青蛙,说明该激素能促进幼小动物的发育。饲喂法只适用于研究甲状腺激素、性激素等小分子激素的功能。 3.注射法:向动物体内注射某激素(或某腺体提出物)后,观察该腺体分泌的激素增加的结果。如将饥饿了一天的小白鼠注射一定剂量的胰岛素后,小白鼠逐渐反应迟钝、活动减少以至昏睡,甚至出现惊厥、昏迷等症状,从而证明胰岛素具有降低血糖作用。注射法适用于各种激素。 4.阉割移植法:阉割移植法只适用于研究性腺和性激素的功能。如摘除成年公鸡的睾丸后,雄性第二性征逐渐消退,移植卵巢后,雌性第二性征慢慢出现;如摘除成年母鸡的卵巢后,雌性第二性征逐渐消退,移植睾丸后,雄性第二性征慢慢出现,从而证明了性腺分泌的性激素具有激发并维持第二性征的功能。 5.同位素示踪法:用放射性同位素标记所要观察的激素,然后用放射性探测仪器就可以追踪激素在体内的动态,从而可以研究与该激素有关的内分泌腺活动的规律和激素在体内的代谢情况等,如应用放射性同位素131I研究甲状腺的功能就是一个典型的例子。 6.切除注射法:向切除某种内分泌腺的动物体内注射某种激素或该腺体的提取物后,观察治疗效果,看其丧失的功能是否恢复。如切除小白鼠垂体后,发现小白鼠生长停滞,注射一定剂量生长激素后,又逐渐恢复生长,说明垂体分泌的生长激素能促进动物的生长。各种内分泌腺均可通过切除法与注射法配合,证明其功能及产生的激素功能。
‘叁’ 开展动物药效实验的动物实验室需在省药监局备案吗
开展动物药效实验的动物实验室需在省药监局备案
整体动物实验一般应用小鼠、大鼠、兔、猫、猴、狗,根据不同情况可用正常动物、麻醉动物、病理模型动物。
1.观察药物对猜简动物行为影响穗绝裤,是研究中枢神经系统药物作用的基该方法之一。最常用正常动物。如将动物的行为分级,对用药组和对照组动物进行细心观察,并按分级法打分,求出平均数,进行显着性测验,从而可判定新药是中枢抑制作用还是中枢兴奋作用。用转棒法观察动物的协调运动,是测定新药对中枢神经系统抑制作用和对骨骼肌松弛张作用的最简单而经典的方法。观察药物对记忆力和影响,以及测定药物的依赖性实验都是用正常动物。
2.观测药物对疾病的疗效,则常用病理模型动物。
⑴研究抗精神病药:常用去水吗啡造成大白鼠舔、嗅、咬等定向行为,从而观测新药的安定作用。
⑵研究抗惊厥药物时:常用电惊厥法,化学物质引起的惊厥法,如戊四唑、苦味毒等造成动物惊厥模型,从而观测药物的抗惊厥作用。
⑶研究镇痛药物时:常用热刺激法,如小白鼠热板法,电刺激小白鼠尾部法以及化学刺激法,如用酒石酸锑钾腹腔注射造成扭体反应,从而观测镇痛药的作用。
⑷研究抗炎药物:用定量的致炎剂如鸡蛋清、右旋糖酐等注入大白鼠踝部皮下,造成关节肿胀,测定用药前后的肿胀程度,从而观测抗炎药物的作用。
⑸研究抗高血压药物:用线结扎狗或家兔肾动脉,造成肾性高血压。或使大白鼠长期处在噪音刺激中,以诱发神经源性高血压等,是观察抗高血压药物的最常用方法。
⑹研究抗心律失常药物:用氯仿、肾上腺素、乌头碱等诱发小白鼠或大白鼠心律失常,或将电析直接联在心房或心室诱发房颤或室颤,是评价抗心心律失常药的常用新方法。
⑺抗溃疡药物的研究和评价:常采用大白鼠宏兄或豚鼠制备实验性溃疡模型。方法有应激性刺激法(如将大白鼠浸于20℃水中)、组织胺法、幽门结扎法等诱发溃疡。其中以应激法较优,成功率达100%,更为常用。
⑻研究镇咳药:猫静脉注射致咳物二甲苯基哌嗪,引起咳嗽发生咳嗽次数在一定范围内与致咳物剂量呈线性关系。这是研究评价镇咳药的好方法。
⑼研究抗糖尿病药:给兔、大白鼠、狗、猫、猴、羊静脉注射四氧嘧啶,选择性地损伤胰腺β-细胞,引起实验动物糖尿病,是经典的研究抗糖尿病的方法。
⑽研究抗肿瘤病药:动物移植肿瘤,用来评价研究肿瘤药,是目前发现肿瘤药最多的途径。
⑾研究抗微生物药:将致病微生物接种小白鼠、计数死亡数,是抗微生物药实验室评价的常用方法。
‘肆’ 动物学常用的研究方法有哪些
动物学常用的方法有1、观察法2、调查法3、实验法4、标本采集与制作,这些方法。
‘伍’ 动物实验设计的对照方法有哪些有何作用
(1)空白对照 指不做任何实验处理的对照组。 (2)自身对照 指实验与对照在同一对象上进行,即不另设对照组。例如“植物细胞质壁分离和复原”实验,自身对照,方法简便,关键是要看清楚实验处理前后现象变化的差异,实验处理前的对象状况为对照组,实验处理后的对象变化则为实验组。 (3)相互对照 指不另设对照组,而是几个实验组相互对照,能较好的抵消无关变量的影响,使实验结果更具有说服力
‘陆’ 毒理学试验方法有哪些
现代毒理学的研究方法,由于其本身包括众多的分支学科,分别在相应的学科领域里建立了自己的研究方法,现归纳为两大类。(一)实验研究(微观研究)动物实验的方法仍是现代毒理学实验的重要方法之一,传统的毒理学通过整体动物实验已为人类提供了大量的以剂量-效应(反应)为主的数据库,结合人群接触水平对许多化学物质进行了安全性(危险度)评价。
由于外源物的数量巨大,整体动物实验需要消耗大量的时间和经费,也不能满足数以万计的外源化学物质的毒性评价要求,另一方面为了保护动物,尽量减少动物的使用,所以由过去以整体动物试验占主导地位的观念,转向以体外试验为主导地位的趋势。但也需指出,体外试验的发展并不排斥整体实验的重要性,两者相互补充,互为验证才能为科学研究提供可靠数据,随着生命科学的发展,分子生物学的理论及技术被引入现代毒理学,近年来在分子水平上建立了许多新方法。
1.体内试验
哺乳动物体内试验,也称整体动物实验,一般包括:急性毒性试验、亚急性毒性试验、亚慢性毒性试验及慢性毒性试验。还有特殊毒性实验,如哺乳动物致突变试验、致畸试验、致癌试验。以上试验在毒理学中统称“三性”和“三致”试验。
常用的试验动物:大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、家兔、狗、猴等。检测环境污染物的毒性试验,常选用鱼、蚤类或其他水生生物。还可用鸟类、昆虫进行试验。
近年来为了从分子水平探讨致突、致癌机制,转基因动物已开始在毒理学试验中应用。
转基因动物是一种集整体水平、细胞水平和分子水平于一体的实验动物,更能体现生命整体研究的效果,它是把经典的与现代的毒理学研究方法相结合,无疑会推动现代毒理学实验研究的发展。
2.体外试验
利用游离器官、培养的细胞、细胞器以及利用微生物等进行毒性研究的方法为体外试验,此方法多用于观察外源物对生物体特殊毒性的初步筛检及作用机制和代谢转化过程的深入研究。
体内与体外试验各有优点和局限性,应根据试验目的和要求,选择一组试验,才能互相弥补优缺点。(二)人群调查(宏观研究)人群调查也称为人群毒理学,是在人群中研究外源物对人体产生毒作用的规律,为人群检测和制订预防措施提供比动物试验更直接更可靠的毒理学资料,主要包括以下3个方面:
1.中毒临床观察
常见于偶然发生的事故,如误服、自杀、毒性灾害等,通过急性中毒事故的处理和治疗,可直接观察到中毒的症状并分析可能的毒效应的靶器官。
2.志愿者试验
在不损害人体健康的原则下,有时可设计一些不损害人体健康的受控试验,仅限于低剂量、短时期的接触毒性作用可逆的化学品,目前国际上提倡健康志愿者的毒性试验,减少由动物试验结果外推于入的不确定性,特别是一些神经毒物出现的毒性效应,如头晕、目眩、复视等需要表达的中毒症状,只有人才能真实地反映出来,所以国外健康志愿者的毒理学研究资料倍受重视。
3.流行病学调查
将动物试验的结果,进一步在人群调查中验证,可以从人群的直接观察中,取得动物试验所不能获得的资料,优点是接触条件真实,观察对象是一个大的群体,为人群检测和防治措施提供比动物试验更直接、更可靠的科学资料,但是也存在许多难点:①人群中观察外源物的毒性效应大多数为慢性毒性效应,特别是人类致癌物质其致癌效应所需时间过长;②接触人群中所用的观察指标是非特异性的,与对照人群比较需要足够例数:③外环境因素混杂,外源物的种类繁多而且多种化学物质可出现联合作用,难以确定某种特定的化学物质毒性效应和其因果关系。
近年来由于分子生物学的发展和渗透,在传统流行病学调查方法中引进了细胞、分子水平的人群检测方法,如生物标志物作为癌症早期判断的信息,把分子生物学与流行病学结合为一体发展为分子流行病学。这门新兴学科利用分子生物学、分子遗传学、生物化学、免疫学等手段研究,评价不同人群或个体致癌危险度及其机制,从而使现代毒理学由实验动物研究发展到人群和个体易感性研究的新阶段。
它可以解答人体从接触化学物质到发生疾病的过程中所发生的一系列连续性的变化,从中提取更多的癌前病变的信息,为癌症的早期判断、早期防治提供科学依据。可以预测,分子流行病学在21世纪将会得到更大的发展。
综上所述,正确的方法是将宏观研究与微观研究有机地结合起来,宏观研究为微观研究提供线索,微观研究为宏观研究提供依据,两者结合起来才能对外源化学物质作出准确的危险度评价。
‘柒’ 生物制品鉴别实验包括以下哪些方法
二、 生物学测定常用方法
生物学测定系指采用生物学方法,以反映被测物的生物学特性为目的的测定方法。以下为生物学测定常用方法,根据具体情况,在产品的常规质控时可采用其中的一种或几种。鉴于一种测定方法仅能反映制品某一方面的特性,且方法的变异一般较大,为更好控制产品质量,必要时需同时采用多种方法进行测定。
(一)、酶反应试验
是指在体外能促进酶分子的活化或本身具备酶的活性,通过底物的变化检测酶活性。主要用于酶、辅酶、激酶、激活剂、抑制剂等的活性测定。这类方法的变异相对较小,结果比较准确。
(二)、结合试验
是基于产品与某种物质的结合特性而设计的试验,如免疫结合试验。目前主要用于生物制品的鉴别。由于在结合试验中测定的分子不一定都具有生物活性,所以一般不用作制品的活性(或效力)测定。这类方法的变异也相对较小。
(三)、细胞测定试验
是指产品可以诱导细胞产生可测定的应答,如细胞增殖、聚集、分化、死亡、迁移或产生特定的化学物质等。细胞测定试验一般能较好地反映制品的生物学活性,常用于各种生物制品的活性(效力)测定。与上述两类方法相比,这类方法的变异较大。与使用传代细胞相比,使用原代细胞的方法变异更大。
(四)、动物试验
是指以整体动物为试验材料检测制品生物学活性(或效力)的试验方法,如动物保护力试验,一般用于疫苗的效力测定。由于动物实验的成本高、周期长和变异大,所以一般仅用于成品检定。对于某些治疗用的制品,由于其作用机理或本身化学性质的原因,难以建立体外测活的方法,也可以采用动物试验方法测定,但由于这类方法的变异一般相对较大,在进一步的研究中应尽可能以体外法代替。
‘捌’ 常用动物实验基本技术有哪些
常用的动物实验基本技术有很多比如跑电泳还有一些pcr检测他的DNA技术等等,还有很多检测蛋白质的凝胶电容法以及其他的淳化。
‘玖’ 生物实验有多少种实验方法
1.显微观察法:如“观察细胞有丝分裂”“观察叶绿体和细胞质流动”“用显微镜观察多种多样的细胞”等.
2.观色法:如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”“观察动物毛色和植物花色的遗传”“DNA和RNA的分布”等.
3.同位素标记法(元素示踪法):如“噬菌体浸染细菌的实验”“恩格尔曼实验”等.
4.补充法:如用饲喂法研究甲状腺激素,用注射法研究动物胰岛素和生长激素,用移植法研究性激素等.
5.摘除法:如用“阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素或生长激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在发育着的种子”等.
6.杂交法:如植物的杂交、测交实验等.
7.化学分析法:如“番茄对Ca和Si的选择吸收”“叶绿体中色素的提取和分离”等.
8.理论分析法:如“大、小两种草履虫的竞争实验”“植物向性动物的研究”等.
9.模拟实验法:如“渗透作用的实验装置”“分离定律的模拟实验”等.
10.引流法:临时装片中液体的更换,用吸水纸在一侧吸引,于另一侧滴加换进的液体.
‘拾’ 药效学的研究方法
药效学研究方法很多,概括讲可分综合和分析法。所谓综合法是指在整体动物身上进行,是在若干其它因素综合参与下考察药物作用,根据实验动物情况不同,可分为正常动物法和实验治疗法。医学教|育网整理所谓分析方法是采用离体脏器,例如离体肠管、离体心脏、血管、子宫及离体神经肌肉制备等,单一地考察药物对某一部分的作用。深入研究还包括细胞水平、分子水平的分析研究