中药化学常用检出试剂配制方法

Ⅰ 《中国药典》纯化水2010年版二部用试剂怎么配制。

酸碱度：取本品10ml,加甲基红指示液2滴，不得显红色滚慧扰；另取10ml,加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不碧历得显蓝色（指示剂配，甲基红指示液取甲基红0. lg，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7. 4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH4. 2〜6. 3(红—黄）。溴廨香草酚蓝指示液取溴麝香草酚蓝O.lg ，加0. 05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml,即得。变色范围 pH6. 0〜7. 6(黄—蓝）。 ）
硝酸盐：取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液（1g氯化钾融入10ML水中）0.4ml与0. 1%二苯胺硫酸溶液（0.01g二苯胺融入10ML硫酸中）0. lml,摇匀，缓缓滴加硫酸5ml,摇匀，将试管于50°C水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液〔取硝酸钾0. 163g,加水溶解并稀释至100ml,摇匀，精密量取lml,加水稀释成100ml,再精密量取10ml,加水稀释成100ml,摇匀，即得（每lml相当于l微克 N03)}0. 3ml,加无硝酸盐的水4.7ml,用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0. 000 006%)。
亚硝酸盐：取本品10ml,置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1 — 100) lml与盐酸萘乙二胺溶液（0. 1 —100)lml,产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0. 750g(按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取lml,加水稀释成100ml,摇匀，再精密量取lml,加水稀释成50ml,摇匀，即得（每lml相当于1微克NO2)}0.2ml,加无亚硝酸盐的水9. 8ml,用同一方法处理后的颜色比较，不得更深(0. 000 002%)。
氨：取本品50ml,加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31. 5mg,加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml)l. 5ml,加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深(0. 000 03%)。{碱性碘化汞钾试液：取碘化钾10g，加水10ml溶解后，缓
缓加入二氯化汞的饱和水溶液，随加随搅拌，至生成的红色沉淀不再溶解，加氢氧化钾30g，溶解后，再加二氯化汞的饱和水溶液lml或lml以上，并用适量的水稀释使成200ml,静置，使沉淀，即得。用时倾取上层的澄明液应用。〔检査〕取本液2ml,加人含氨0. 05mg的水50ml中，应 即时显黄棕色。}
电导率：应符合规定（附录)。
总有机碳：不得过0.50mg/L(附录)。
易氧化物取本品100ml,加稀硫酸10ml,煮沸后，加高锰酸钾滴定液（0. 02mol/L)0. 10ml,再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。
以上总有机碳和易氧化物两项可选做一项。
不挥发物：取本品100ml,置105°C恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105°C干燥至恒重，遗留残渣不得过lmg。
重金属：取本品100ml,加水19ml,蒸发至20ml，放冷，加大旦醋酸盐缓冲液（pH3. 5)2ml与水适量使成25ml，加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液1. 0 ml加水19ml用同一方法处理后的颜色比较，不得更深(0. 000 01%)。
微生物限度：取本品，采用薄膜过滤法处理后，依法检查(附录XI J)，细菌、霉菌和酵母菌总数每lml不得过100个。
其实有些试剂可以在药典后面的附录里面找到的，都很简单，记得采纳啊

Ⅱ 中药化学成分沉淀分离法的基本原理及具体方法

指于中药提取液中加入某些试剂或溶剂，使某些成分溶解度降低而沉淀，使所要成分与杂质分离的方法。依据加入试剂或溶剂不同，分为下述五种方法。
1
水醇沉淀法：
水提醇沉法：于水提浓缩液中加入乙醇使含醇量达60%以上，可使多糖、蛋白质沉淀。
醇提水沉法：于醇提取浓缩液中加入10倍量以上水，可沉淀亲脂性成分。
2
铅盐沉淀法：
利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅在水或稀醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐沉淀而分离的方法。中性醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基和羧基的成分；碱式醋酸铅的沉淀范围较广，可沉淀含酚羟基和羧基及中性皂苷等。
3
酸碱沉淀法：
酸提取碱沉淀：用于生物碱的提取分离。
碱提取酸沉淀：用于酚、酸类成分和内酯类成分的提取、分离。
4
专属试剂沉淀法
某些试剂能选择性地沉淀某类成分，称为专属试剂沉淀法。如雷氏铵盐能与水溶性生物碱类生成沉淀，可用于分离水溶性生物碱与其它生物碱；胆甾醇能和甾体皂苷沉淀，可使其与三萜皂苷分离；明胶能沉淀鞣质，可用于分离或除去鞣质等。
5
盐析法
于中药水提取液中加入某些无机盐至一定浓度或达到饱和状态，可使某些成分由于溶解度降低而沉淀析出。常用的无机盐有NaCl、Na2SO4等。

Ⅲ 常用化学实验试剂的配制与应用有哪些

楼主你好：
一、通用试剂
1、碘试剂
检查一般有机化合物。
（1）碘蒸气 预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。
（2）0.5％碘的氯仿溶液 喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。
2、硫酸试剂
查一般有机化合物。
5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后，置空气中干燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。
3、重铬酸钾—硫酸试剂
检查一般有机化合物。
5g重铬酸钾溶于l00ml40％硫酸中。喷该试剂后，150℃加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。
4、磷钼酸试剂
检查还原性成分。
5％磷钼酸乙醇溶液。喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点。
5、磷钨酸试剂
检查还原性成分
20％磷钨酸乙醇溶液。喷洒后，120℃烘烤，还原性物质呈蓝色斑点。
6、硝酸银—氢氧化铵试剂
检查还原性成分。
溶液I：0.1mol／L硝酸银溶液。溶液Ⅱ：10％氢氧化铵溶液。临用前溶液I和Ⅱ以
1︰5混合。喷洒后105℃加热5~l0min，至深黑色斑点出现。
7、中性高锰酸钾试剂
检查易还原性成分。
0.05％高锰酸钾溶液。喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。
8、碱性高锰酸钾试剂
检查还原性成分。
溶液I：1％高锰酸钾溶液。溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液。溶液I和Ⅱ等量混合使用，喷洒后，粉红背景上显黄色斑点。
9、四唑蓝试剂
检查还原性成分。
溶液I：0．5％四唑蓝甲醇溶液。溶液Ⅱ：25％氢氧化钠溶液。临用前两液等量混合。喷洒后，微热或室温放置显紫色斑点。
10、荧光素—溴试剂
检查不饱和化合物。
溶液I：0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中。溶液Ⅱ：5g溴溶于l00ml四氯化碳中。先喷洒溶液I，然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内，黄色斑点出现后，于紫外光灯下检视，红色底板上显黄色荧光斑点。更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中检所标准品对照品 www.rmhot.com
11．荧光显色试剂
检查一般有机化合物。
（1）0.2％2，7--'氯荧光素乙醇溶液。
（2）0.01％荧光素乙醇溶液。
（3）0.1％桑色素乙醇溶液。
（4）0.05％罗丹明B乙醇溶液。
喷洒任一溶液，不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点。
二、苷类鉴定试剂
1、糖鉴定试剂
（1） －萘酚－硫酸试剂
检查还原糖。
①溶液I：10％ —萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ：硫酸。取lml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液Ⅱ，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。
②15％ —萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混匀后使用。喷洒于薄层板上，100℃烤3～6min，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色，所显颜色于室温可稳定2天～3天。
（2）斐林试剂
检查还原糖。 ‘
溶液I：6.93g结晶硫酸铜溶于l00ml水中。溶液Ⅱ：34.6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于l00ml水中。取lml样品热水提取液，加入4～5滴用时配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和甙，取lml样品水提液，加入lmll0％盐酸溶液，在沸水浴上加热l0min，过滤，再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。
（3）氨性硝酸银试剂
检查还原糖。
硝酸银1g，加水20ml溶解，小心滴加适量氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，过滤。取lml样品的水溶液，加入lml试剂，混匀后，40℃微热数分钟，管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应。本试剂也可作为色谱显色剂，喷洒后于110℃加热数分钟，显棕黑色斑点为阳性反应。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰。
（4）茴香醛－硫酸试剂
检查糖类化合物。
硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中，需临用前配制。喷洒于薄层板上，105℃加热至显示色斑，不同糖显不同颜色。
（5）苯胺－邻苯二甲酸试剂
检查糖类化合物。
苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。作色谱显色剂用。喷后105℃烤5min，显红棕色斑点。
（6）l,3－二'羟基萘酚－磷酸试剂
检查酮糖、醛糖。
0.2％1，3--'二羟基萘酚乙醇溶液50ml与85％磷酸50ml混合均匀后使用。喷后105℃烤5min～10min，酮糖呈红色，醛糖显淡蓝色。
（7）苯胺－二苯胺－磷酸试剂
检查糖类化合物。
苯胺4ml、二苯胺4g及85％磷酸20ml溶于丙酮200ml中。喷洒于薄层板上，85℃加热10min，不同糖显不同颜色。
（8）2，3，5－三苯基氯化四氮唑(T．T．C)试剂
检查还原糖。
溶液Ⅰ：4％T．T．C甲醇溶液。溶液Ⅱ：4％氢氧化钠溶液。临用时将溶液Ⅰ和Ⅱ等体积混合。喷洒后，100℃加热5～10min，显红色斑点为阳性反应(醛类无干扰)。
（9）三氯化铁－冰醋酸(K．K)试剂
检查 －去氧糖，常用于强心甙。
溶液I：1％三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸至l00ml。溶液Ⅱ：硫酸。取样品乙醇提取液lml，置试管中，水浴上蒸去乙醇，残渣用0.5ml溶液I溶解，沿试管壁缓缓加入溶液Ⅱlml，静置分层，上层渐显蓝色，下层显红色或棕色为阳性反应(其颜色随苷元羟基和双键的位置和个数不同而不同)。
（10）占吨氢醇试剂
检查 －去氧糖(常用于强心甙)。
10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中，再加入lml硫酸混合。取lml样品，加入试剂lml，置水浴上加热30min，显红色为阳性反应。
（11）Gregg-Gisvold试剂
检查2．6－去氧糖。
溶液I：10％三氯化铁溶液。溶液Ⅱ：1％盐酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2．8ml盐酸)。0.5ml溶液I与100ml溶液Ⅱ混合。将样品的乙醇溶液点于滤纸片上，晾干后，喷洒上述混合试剂，110℃加热5min，显蓝色为阳性反应。
（12）3，5－二氨基苯甲酸－磷酸试剂
检查2－去氧糖。
3，5－二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80％磷酸25ml，加水稀释至60ml。喷洒后，100℃加热15min，2－去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光。
（13）对硝基苯胺－过碘酸试剂
检查去氧糖。
溶液I：饱和偏高碘酸溶液1份加水2份混匀。溶液Ⅱ：1％对硝基苯胺乙醇溶液4份与盐酸1份混合。先喷溶液I，放置10min，再喷溶液Ⅱ，去氧糖显黄色，紫外光下显强荧光，再喷5％氢氧化钠甲醇溶液，颜色转绿，乙二醇同样显色。

Ⅳ 配制试剂时，一般常用的方法有哪些

1．直接法
准确称取基准物质，溶解后定容即成为准确浓度的标准溶液。例如，需配制500mL浓度为0.01000 mol·L-1 K2Cr2O7溶液时，应在分析天平上准确称取基准物质K2Cr2O7 1.4709g，加少量水使之溶解，定量转入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度。
较稀的标准溶液可由较浓的标准溶液稀释而成。例如，光度分析中需用1.79×10-3mol·L-1标准铁溶液。计算得知须准确称取10mg纯金属铁，但在一般分析天平上无法准确称量，因其量太小、称量误差大。因此常常采用先配制储备标准溶液，然后再稀释至所要求的标准溶液浓度的方法。可在分析天平上准确称取高纯（99.99%）金属铁1.0000g，然后在小烧杯中加入约30mL浓盐酸使之溶解，定量转入一升容量瓶中，用1mol·L-1盐酸稀释至刻度。此标准溶液含铁1.79×10-2mol·L-1。移取此标准溶液10.00mL于100mL容量瓶中，用1mol·L-1盐酸稀释至刻度，摇匀，此标准溶液含铁1.79×10-3mol·L-1。由储备液 配制成操作溶液时，原则上只稀释一次，必要时可稀释二次。稀释次数太多累积误差太大，影响分析结果的准确度。

2．标定法
不能直接配制成准确浓度的标准溶液，可先配制成溶液，然后选择基准物质标定。做滴定剂用的酸碱溶液，一般先配制成约0.1mol·L-1浓度。由原装的固体酸碱配制溶液时，一般只要求准确到1～2位有效数字，故可用量筒量取液体或在台秤上称取固体试剂，加入的溶剂（如水）用量筒或量杯量取即可。但是在标定溶液的整个过程中，一切操作要求严格、准确。称量基准物质要求使用分析天平，称准至小数点后四位有效数字。所要标定溶液的体积，如要参加浓度计算的均要用容量瓶、移液管、滴定管准确操作，不能马虎。

Ⅳ 化学试剂配制计算公式，要求全一点，及他们之间的换算，

1、溶液稀释配制： cv = CV
2、固体称桐宏量；m= cvM
3、液体配制：局御册c = n/V = （w% px1000/拆棚M)/V

Ⅵ 固体试剂配制公式

以近似认为c(mol/L) =b(mol/kg) 计算

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常用缓冲液1、1M Tris-HCl；2、1.5 M Tris-HCl；3、10×TE Buffer；4、3 M 醋酸钠；5、PBS Buffer；6、10 M醋酸铵 7、Tris- HCl平衡苯酚 8、苯酚/氯仿/异戊醇9、10％（W/V）SDS 10、2N NaOH11、2.5 N HCl 12、5 M NaCl 13、20％（W/V）Glucose14、Solution I15、Solution II 16、Solution III17、0.5M EDTA贺知 18、1 M DTT 19、10mM ATP

Ⅶ 中药制剂常用的分离和纯化方法有哪些

三种主流方法:煎煮提纯法,精密提纯法,溶剂提纯法。

1. 皂苷的提取方法
（1）皂苷类通常用醇提取，提取液减压浓缩后，加适量的水，必要时先用乙醚，石油醚等亲脂性溶剂萃取，除去亲脂性杂质，然后用水饱和正丁醇萃取，减压蒸干，得粗制总皂苷，此法被认为是皂苷类成分的提取的通法.。
（2）甲醇或乙醇提取-丙酮或乙醚沉淀法 由于皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂，可将粗制总皂苷溶于少量甲醇，然后滴加乙醚或丙酮，皂苷即析出.。 （3）碱水提取法 酸性皂苷可先用碱水提取，再加酸酸化使皂苷沉淀析出。
2. 皂苷元的提取方法
(1)皂苷元多数难溶于或不溶于水，易溶于有机溶剂，所以可采用两相萃取法，用矿酸并加热的条件先将粗皂苷水解，水解出来的皂苷元用弱极性的有机溶剂萃取，可以减少对皂苷元的破坏。
(2)还可以直接用酸水加热水解中药原料中的皂苷。
(3)含羰基的皂苷元可用Girard T或P试剂进行提取分离。
3. 皂苷的分离
（1）沉淀法
①丙酮或乙醚沉淀法：方法简便，但难以分离完全。
②胆甾醇沉淀法：可用来精制甾体皂苷。
③铅盐沉淀法：此法可分离酸性皂苷与中性皂苷。醋酸铅可使酸性皂苷完全沉淀；碱式醋酸铅则能使中性皂苷也沉淀下来。
（2）色谱法 纯化皂苷多采用吸附色谱、分配色谱法、高效液相色谱法以及液滴逆流色谱法。

Ⅷ 碘试验的配制

中药化学成分的预试验
系统预试法——应用一些简单的定性试验,对中药中所含各类化学成分作全面检查.
单项预试法——根据需要,有重点的检查某类成分或某药效成分.
方法：试管反应+薄层层析检查
中草药主要来源于植物.植物的化学成分较复杂,有些成分是植物所共有的,如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等.有些成分仅是某些植物所特有的,如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等.
各类化学成分均具有一定的特性,一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一.如药材样品折断后,断面不油点或挤压后有油迹者,多含油脂或挥发油；有粉层的多含淀粉、糖类；嗅之有特殊气味者,大多含有挥发油、香豆精、内酯；有甜奈者多含糖类；味若者大多含生物碱、甙类、苦味质；味酸者含有有机酸；味涩者多含有鞣质等等.
中草药所含化学成分均为多类的混合物,分析时常常互相干扰,不易得到正确结果.因此需根据中草药所含唯判颤各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质,再用各类成分的鉴别反应加以鉴别.
一、 预试溶液的制备
1、 水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质……
2、 乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体……
3、 5%HCl-乙醇提取液——生物碱
4、 石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油……
（一）鉴别注意事项
1．冲隐根据各灰成分不同性质,选用适宜的溶剂提取,以保证等成分能被提取出来.
2．检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度.
3．检品提取液的酸碱度（pH）值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值.相差甚大时应事先调节.
4．提取液较深时,常易影响观察鉴别反应的效果,此时可适当稀释,或进一步提纯.
5．鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰,以免出现假阳性,或颜色不正等情况.最好在化学鉴别的同时,做空白试验和对照试验（用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照）.
6．在鉴别试验中,如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时（即有的呈阳性反应,有的呈阴性）则应进行全面分析.首先应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分的专一反应,否则应检查其他类成分能否产生该反应,从多方面加以判断.但也应注意,某些反应只能对某一类成分中的某个化学基团呈性反应,如检查黄酮类的盐酸――镁粉试验,它只对黄酮类中的羟基黄酮类（黄酮醇类）反应明显,其余类的黄酮类则不甚明显,但也不能轻易否定不是黄酮类,为了避免孤立和片面的下结论,一定要全面考虑综合分析.
中草药化学成分一般鉴别试验屯只是一个初步判断,最后确证尚需进一步提纯,以鉴定后才能予以肯定.
（二）鉴别方法
1、 氨基酸、多肽、蛋白质
（1）加热沉淀试验：加热煮沸 →混浊或沉淀 （蛋白质）
+5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀
（2）双缩脲反应：+40%NaOH,1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质）
（3）茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质）
（4）吲哚醌反应：+吲哚醌试液 →各种颜色（氨基酸）
（5）Millon反应：+Hg,H2NO2 →红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成）
（6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸,浓硫酸 →各色（蛋白质分子中有色氨酸组成）
（7）氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G
展开剂—— n-BuOH,n-BuOH：HAc：H2O
显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点
（1）加热或矿酸试验：取检品的水溶液1ml于试管中,加热至沸或加5％盐酸,如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质.
（2）缩二脲试验：取检品的水溶液1ml,加10％氧化钠指败溶液2滴,充分摇匀,逐渐加入硫酸铜试液,随加摇匀,注意观察,如呈现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸.
凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键（－CONH－）者均有此反应,能在碱性溶液中与Cu2+生成仙络合物,呈现一系列的颜色反应,二肽呈蓝色,三肽呈紫色,加肽以上呈红色,肽键越多颜色越红.
（3）茚三酮试验,取检品的水溶液1ml,加入茚三酮试液2－3滴,加热煮沸4－5分钟,待其冷却,呈现红色棕色或蓝紫色（蛋白质、胨类、肽类及氨基酸）.
氨基酸与茚三酮的水合作物作用,氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳,而茚三酮被还原成仲醇,与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物.
【注】①茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂,反应在1小时内稳定.试剂溶液pH值以5－7为宜,必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整. ②此反应非常灵敏,但有个别氨基酸不能呈紫色,而呈黄色,如脯氨酸.
（4）氨基酸薄层层析检出反应：
①吸附剂：硅胶G.
②展开剂：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5）
③显色剂：0.5％茚三酮丙酮溶液,喷雾后于1100烘箱放置5分钟,显蓝紫允或紫色.
2、 皂苷
（1）泡末试验：振摇 →大量持续性泡末
+0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷）
+0.1M NaOH 碱管高于酸管（甾体皂苷）
（2）溶血试验：+2%红血球悬浮液 →溶血
（3）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸—— 紫红色（三萜皂苷）
黄-红-紫-污绿（甾体皂苷）
（1）泡沫试验：取检品的水溶液2ml于带塞试管中,用力振摇3分钟,即产生持久性蜂窝状泡沫（维持10分钟以上）,且泡沫量不少于液体体积的1／3.
【注】常用的增溶剂吐温、司盘,振摇时均能产生持久性泡沫,要注意区别.
（2）溶血试验：取试管4支,分别加入滤液0.25、0.5、0.75 ml,然后依次分别加入生理盐水2.25、2.0、1.75、1.5 ml,使每一个试管中的溶液都成为2.5ml, 再将各试管加入2％的血细胞悬液2.5ml,振摇均匀后,同置于370水浴或25－270的室温中注意观察溶血情况,一般观察3小时即可,或先滴红细胞于显微镜下,然后滴加检液看血细胞是否消失.如有溶血现象示正反应.
【注】①鞣质对血红细胞有凝集作用,干扰溶血试验的观察,应事先除去（可用取胜酰胺粉吸附或用明胶沉淀）. ②检液应为中性溶液.
（3）醋酐浓硫酸试验（Liebrmann Burchard反应）取检品的水溶液置蒸发皿中,于水浴上蒸干,残渣加入少量冰醋酸使溶解,再加入醋酐浓硫酸（19：1）试液,呈现红紫色并变成污色绿色（甾类、三萜类成分或皂甙）
（4）区别甾体皂甙和三萜皂甙：取带塞试管两支,各盛检品的水溶解1 ml,1支加0.1N盐酸溶液2ml,另一支加0.1N氢氧化钠溶液2ml用力振摇1分钟（需左右手交替振摇各半分钟）,观察两管泡沫的多少,若两管泡沫体积相同或酸管多,示含三萜式皂甙；若加碱管泡沫多于加酸管示含甾示含甾体皂甙.
三萜皂甙为酸性皂甙在酸性水溶液中形成较稳定的泡沫；甾体皂甙为中性皂甙在碱笥溶液中能形成较稳定的泡沫.
浓硫酸、高氯酸、高氯酸-香草醛、浓硫酸-香草醛等的显色原理主要是使羧基脱水,增加双键结构,再经双键位移,双分子缩合等反应生成共轭双键系统,又在酸作用下形成阳碳离子盐而显色
3、 糖和苷
（1）斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠 —— 砖红色沉淀（还原糖）
（—）+1%HCl +NaOH 沉淀（苷元）
△30min 上清液（+）（多糖、苷）
（2）Molish反应：+α-萘酚-浓硫酸 →紫红色环
（3）银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水 →银褐色（还原糖）
（4）薄层层析检查：：吸附剂——硅胶G或纤维素
展开剂—— n-BuOH：Pd：H2O；15%HAc
显色剂—— 苯胺-邻苯二甲酸
（1）碱性酒石酸铜试液：取检品的水溶液1－2ml（如为醇溶液须将醇蒸发除去）,加入碱笥酒石酸铜试液1ml,于沸水浴上加热5分钟,产生棕红色或砖红色氧化亚铜沉淀,示有还原糖.
还原糖能使二价铜盐（蓝色）还原成氧化亚铜,醛糖的醛基氧化成羧基：
【注】①如检液呈酸性,应先碱化. ②此反应所产生的沉淀由于条件不同,其颜色也不同,质点上的呈黄色,质点大的呈红色.有保持性胶体存在时,也常产生黄色沉淀. ③职样品中含有其他醛、酮及还原较强的其他成分,或中划药制剂中附加的抗氧剂、；葡萄糖等均可显阳性反应.
（2）α萘酚试验（Molisch紫环反应）：取检品的水溶液1ml,加5％萘酚试液数滴振摇后,沿管壁滴入5－6滴浓硫酸,使成两液层,待2－3分钟后,两层液面出现紫红色环（糖、多糖或甙类）.
多糖类遇浓硫酸被水解成单糖,单糖被浓硫酸脱水闭环,形成糠醛类化合物,在浓硫酸存在下与α萘酚发生酚醛缩合反应,生成紫红色缩合物.
【注】①甙的分子结构中含有糖基,一般属于单糖类,如葡萄糖,鼠李糖、半乳糖,但也有含二分子糖（双糖）或多分子糖（多糖）.在上述反应条件下,甙被水解成单糖,因此甙萘酚试验,系分子中糖部分的反应. ②由于此反应较为灵敏,如有微量滤纸纤维或中草药粉末存在于溶液中,都能产生上述反应.故滤过时应加注意.
（3）多糖的确证试验：取检品的水溶液5ml于水蒸发至干,加入1ml蒸馏水,再加入乙醇5ml,如出现沉淀,滤过收集后用少量热乙醇洗涤,再将沉淀物溶于3ml蒸馏水中,做下例试验.
①碘试验：取检品的不溶液1ml,加碘试液1滴,观察颜色变化,如呈蓝黑色为地衣糖；紫黑色为糊精；蓝色加热消失,冷后蓝色再现为淀粉.
②多糖水取检品的水溶液1ml,加入稀盐酸5滴,置沸水浴中加热10－15分钟,然后用10％氢氧化钠液中和至中性,再加新配制的碱性酒石酸铜试淮4滴,另取检液1ml,不加酸水解直接加入上述试液4滴,两管同置水浴上煮沸5－6分钟.如果水解后生成棕红色常常物的量比未经水解的多,则示有多糖.
多糖水解后产生单糖,利用单糖的还原性,使铜离子还原成氧化亚铜.
4、 酚类和鞣质
（1）FeCl3试剂：+1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色
（2）三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒→蓝色斑点
（3）香草醛-盐酸试剂：喷洒 →红色（间苯二酚、间苯三酚）
（4）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色
（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或纤维素
展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc
显色剂——1% FeCl3试液
1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液 →蓝、绿或黑色
鞣质与酚类的区别：+明胶 —— 沉淀
上清液 +1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色
（1）三氯化铁试验：取检品的水溶液1ml,加三氯化铁试液1－2滴,呈现绿色、污绿色、蓝黑色或暗紫色（可水解鞣质显蓝一蓝黑色,缩合鞣显绿色一污绿色）.
鞣质均是多羟基酚的衍生物,即多元酚,能和三价铁离子发生颜色反应生成复杂的络盐.
【注】此反应如遇有矿酸或有机酸、醋酸盐等存在,能阻碍颜色的生成.硝基酚类对三氯化铁试剂无明显反应.
（2）明胶试验：取检品的水溶液1ml,加氯化钠明溶液2－3滴,即生成白色沉淀物.
鞣质有凝固蛋白的性能.
（3）溴试验：取检品的水溶液1ml,加溴试液1－2滴,生成白色或沉淀物,示可能含有酚或儿茶酚鞣质.
【注】过多的溴会阻碍鞣质的沉淀,因此溴水不宜多加.
（4）香草醛一酸试验：取检品的水溶液点于滤纸片上,干后,喷雾或滴加香草醛一盐酸试液,呈现红色斑点（多元酚类物质）.
（5）鞣质、酚类薄层层析检出反应：
①吸附剂：聚酰胺；硅胶；硅胶；石膏：水（5：1：7）调成状,涂成薄板,1050烘干45分钟.
②展开剂：乙醇：醋酸（100：2）；正丁醇：乙酸乙酯：水（5：4：1）；苯：甲醇（95：5）.
③显色剂：10％三氯化铁溶液；1％三氯化铁乙醇溶液与1％铁氰化钾水溶液（1：1）显蓝一紫色斑点.
5．黄酮及其甙类
（1）盐酸-镁粉反应：+HCl-Mg →红色
（2）三氯化铝反应：+AlCl3 →黄色
（3）浓氨水反应：+NH3 →亮黄或橙色
（4）薄层层析检查：吸附剂——聚酰胺或硅胶G
（1）盐酸一镁（或锌）粉试验：取检品的乙醇溶液1ml,加放少量镁粉（或锌粉）,然后加浓盐酸4－5滴,置沸水浴中加热2－3分钟,如出现红色示有游离黄酮类或黄酮甙（以同法不加镁或粉做一对照,如两管都显红色则有花色素存在.如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色双转变为蓝色,即证明含花色素）.
黄酮类的乙醇溶液,在盐酸存在的情况下,能被镁粉还原,生成花色甙元而呈现红色或紫色反应（个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色）.这是由于酮类化合物分子中含有一个碱性氧原子,致能溶于稀酸中被还原成带四价的氧原子即锌盐.本法是鉴别黄酮类的一个反应.但花色素本身在酸性下（不需加镁粉）呈红色,应加以区别.
【注】①此反庆仅在化学结构中,第三位上带羟基的酮醇类显色较明显,而其它黄酮烷酮类均不甚明显.因此试验呈阴性反庆是不能做出否定的结论,尚需结合其他实验再做结论. ②试验应在醇中进行,水分多会影响颜色的生成.此反庆较慢,有时需置水浴上加热,以促使反应的进行.
（2）荧光试验：
①三氯化铝试验：取检品的乙醇溶液点于滤纸片上（干后再点1次,使其浓度庥中）,干后,喷雾1％三氯化铝乙醇试液,在紫外光灯下观察,呈现黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类；呈现天蓝色或黄绿色；荧光,则为二氢黄酮类.这是区别二氢黄酮类化合物的一种鉴别反应.
②硼酸丙酮枸橼酸丙酮试验：取检品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入饱和硼酸丙酮溶液及10％枸橼酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮后,在紫外光灯下观察,管内呈现强烈的绿色荧光（黄酮或其甙类）.
（3）碱液试验：取检品的乙醇溶液点于滤纸片上（干后,再点一次,使其溶液集中）,干后,喷1％碳酸钠溶液或在氨蒸气中熏几分钟,呈现亮黄、绿或橙黄色.如将氨气熏过的滤纸露置空气中,颜色逐渐裉去而变为原有的颜色（黄酮或其甙类）.
5、 生物碱
（1）沉淀反应——碘化汞钾试剂 →白色或浅黄色沉淀
碘化铋钾试剂 →橘红色沉淀
碘—碘化钾试剂 →浅棕或暗棕色沉淀
硅钨酸试剂 →浅黄或黄棕色沉淀
磷钨酸试剂 →浅黄色沉淀
磷钼酸试剂 →白色或淡黄色沉淀
苦味酸试剂 →黄色结晶或非结晶形沉淀
鞣酸试剂 →棕黄色沉淀
氯化金试剂 →黄色结晶
氯化铂试剂 →白色结晶
雷氏铵盐 →红色无定形沉淀
（2）薄层层析检查：吸附剂——碱性氧化铝（Ⅲ级,干法铺板）
硅胶G（稀碱湿法铺板）
展开剂——氯仿：甲醇
显色——UV；碘化铋钾
6、 有机酸
（1）PH试纸检查
（2）溴酚兰试液：喷洒→蓝色背景黄色斑点
（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝
展开剂—— C6H6：EtOH
显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色
7、甾体
（1）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸 →黄-红-紫-污绿
（2）氯仿-浓硫酸反应：+氯仿-浓硫酸 氯仿层→红或青色
硫酸层→绿色荧光
（3）五氯化锑或三氯化锑反应：+SbCl3或SbCl5 →红色
（4）薄层层析检查：吸附剂——中性氧化铝或硅胶G
展开剂—— C6H6-MeOH；CHCl3-MeOH
显色剂—— 10%磷钼酸 →蓝-蓝紫色
5%三氯化锑试液 →红、棕红或绿色
9、香豆素、内酯
（1）开闭环反应：+1%NaOH→澄清 +2%HCl→混浊
（2）异羟污酸铁反应：+7%盐酸羟胺、10%KOH △ +稀HCl、1%FeCl3 →红色
（3）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色
（4）薄层层析检查：吸附剂——酸性硅胶G或硅胶G 或酸性氧化铝
展开剂—— 甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：4：1）
显色剂—— UV→蓝色荧光
异羟污酸铁试液 →红色
10、强心苷
（1）Kedde试剂：+3,5-二硝基苯甲酸试液 →紫红色
（2）Baljet试剂：+碱性苦味酸试液 →橙或橙红色
（3）Legal试剂：+亚硝酰铁氰化钠试液 →紫红色
（4）K-K反应：+FeCl3/冰HAc、浓H2SO4→ 上层绿~蓝色 （2-去氧糖）
界面红棕色
（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G 或中性氧化铝
展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O（4：1：5）
显色剂—— 碱性3,5-二硝基苯甲酸试液→紫红色
碱性苦味酸试液 →橙红色
11、蒽醌
（1）碱液反应：+10%NaOH →红色 +H2O2 →红色不褪 +H+ →红色褪去
（2）醋酸镁反应：+1%MgAc2 →红色
（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G
展开剂——Pet：EtOAc
显色剂—— UV→黄色荧光
5%NaOH →红色
12、挥发油、油脂
（1）油斑检查：油斑挥发 →挥发油； 油斑不消失→油脂或类脂
（2）磷钼酸反应：喷洒5%磷钼酸试液 →蓝色（油脂、三萜、甾醇）
最后重点提醒：以上各试剂的配制方法最好参照药典来配制,原因一是上面写得很详细,二是药典中有个规定,药典上配制的溶液要是要用到乙醇的,如果没有指定用无水乙醇,一般是要用95%的乙醇的.
另外附一个试剂的配法：
氯化钠明胶试剂：（两者都是固体,刚开始我还真不知道怎样配,后来在药典才发现配方）2g氯化钠和1g明胶,再加上100g水,要求是现配的!

Ⅸ 中药化学的检识方法

荧光
香豆素母体本身无荧光，而羟基香豆素在紫外灯下大多能显出蓝色荧光，在碱溶液中荧光大都增强，可以辨认。
香豆素类荧光的有无或强弱与分子中取代基的种类和位置有一定的关系，但荧光与结构之间的关系尚不太清楚
显色反应
香豆素分子中某些基团所给出的颜色反应可为鉴别香豆素类提供一定的参考。
1.异羟肟酸铁反应
这是由香豆素的内酯结构所发生的显色反应，在碱性条件下，内酯开环，与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后在酸性条件下再与三价铁盐络合而显红色。
2.酚羟基反应
具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与三氯化铁试剂络合而产生不同的颜色，可以判断羟基的有无。
重氮化试剂也可用于酚羟基的检查，若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化试剂生成红色至紫红色的偶氮染料。
3.Gibb's反应
Gibb's试剂为2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺，它在弱碱性（pH9.4）条件下可与酚羟基对位的活泼氢缩合，生成蓝色的化合物。
该反应可判断香豆素分子中C6位是否有取代基存在。由于香豆素分子在碱性条件下内酯环被水解后所生成的酚羟基，如果其对位（即C6位）无取代基存在，可与Gibb's试剂反应产生蓝色。若C6位有取代，则Gibb's反应为负反应。
4.Emerson反应
与Gibb's反应一样，Emerson反应也是用以判断酚羟基对位有无取代的，在香豆素中用以判断C6位有无取代基存在。
Emerson试剂由4-氨基安替比林和铁氰化钾所组成，与酚羟基对位的活泼氢反应生成红色。
色谱检识
1.纸色谱
由于香豆素分子中多含有酚羟基显弱酸性，故其在进行纸色谱时，在碱性溶剂系统中的Rf值相对较大，在中性溶剂系统中则易产生拖尾现象。
常用的溶剂系统为含水有机溶剂系统，色谱后的滤纸可先在紫外灯下观察香豆素特有的荧光，再喷以10%氢氧化钾醇溶液或20%SbCl3氯仿溶液显色。
2.薄层色谱
香豆素化合物多具有酚羟基结构，在薄层色谱中多选硅胶作吸附剂，并用一定pH的缓冲溶液处理，可以得到较好的分离效果。酸性氧化铝也可选作吸附剂用。展开后的斑点除在紫外灯下观察荧光外，还可喷三氯化锑等显色剂

Ⅹ 怎么配制纳氏试剂

1、称取60g氢氧化钾，溶于约250ml无氨水中，冷却至室温。

另外称取20g碘化钾溶于100ml无氨水中，边搅拌边逐步加入二氯化汞结晶粉末（约10克），至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，保持搅拌，到出现少量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加饱和二氯化汞溶液。

然后把该溶液缓慢注入上述已冷却的氢氧化钾溶液中，边注入边充分搅拌，并用无氨水稀释至400ml，然后静置过夜。最后将该溶液的上清液转移至聚乙烯塑料瓶中，常温避光保存。

2、称取16g氢氧化钠，溶于50ml无氨水中，充分冷却至室温

另称取10g碘化汞和7g碘化钾溶于水，然后将该溶液在充分搅拌的条件下缓慢注入上述的氢氧化钠溶液中，并用无氨水释释至100ml，贮于聚乙烯塑料瓶中，常温避光保存。