厌氧袋使用方法

‘壹’ 厌氧产气袋多久换一个

如果打开样品培养的密封环境，就需要更换新的厌氧产气包重新进行实验。
1、厌氧包的主要原理是利用氢硼化钠或氢硼化钾与水反应产生氢，氢与密封袋中的氧气在钯催化下结合成水，从而建立起无氧小环境。
2、厌氧袋中二氧化碳由柠檬酸生成，利用美蓝的变色反应作为厌氧度的指示剂。厌氧环境无氧指示剂呈无色，有氧则变为蓝色。

‘贰’ 如何培养厌氧菌

有几种密封方法：
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境。
至于厌氧培养基怎么配我就不太清楚了，不过就是按一般要的各种营养，灭菌即可，个人看法

‘叁’ 求助：厌氧菌的培养方法及常用培养基配方

厌氧菌的培养方法
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境。

‘肆’ 空气培养的操作过程是什么

空气细菌培养的采样方法检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法，目前大部分医疗单位采用，在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。

基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降。

培养方法：

1、厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。

2、厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。

放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。

以上内容参考：网络-厌氧菌培养

‘伍’ 生物专业英文文献翻译，要求人工翻译，语句通顺，谢谢，满意后加分~ 急用，越快越好~谢谢好心人~

2.4 化学和微生物分析
在试验日粮干物质和粗蛋白含量的分析中，排泄物和益生菌产品是根据AOAC（1990）方法（分别为930.05和976.05 ）分析。使用弹式量热计（model 1261, Parr Instrument Co., Moline, IL）测定总能量，根据芬顿博士（1979）的使用自动化分光光度计确定铬浓度。
第14和28天排泄物样本和第28天的肠道消化物的微生物分析，将样品在不同培养基中培养，测定总厌氧菌（胰酶解物大豆琼脂),双歧杆菌（MRS培养基），乳杆菌种（MRS培养基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸盐酸盐水化合物），梭菌属某些种（TSC培养基）和大肠杆菌群（紫色红胆汁琼脂）。通过培养技术对"益生菌"产品进行了微生物分析。嗜酸乳杆菌用MRS培养基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸盐酸盐水化合物培养，枯草芽孢杆菌通过琼脂培养基平板计数，酵母菌和米曲霉菌通过薯仔葡萄糖培养基计数。通过使用厌氧袋厌氧系统创造厌氧条件，(BBL, No. 260678; Difco, Detroit, MI)。大豆胰酶解物的琼脂(No.236950)，MRS琼脂培养基(No. 288130)，结晶紫中性红胆盐琼脂(No.216695)，平板计数琼脂(No. 247940)，和马铃薯葡萄糖培养基(No. 213400)的使用是从Difco实验室（(Detroit,MI)购买的，和TSC培养基是从Oxoid (Hampshire, UK)购买的。益生菌产品的pH值由pH计(Basic pH Meter PB-11, Sartorius,Germany).测定。
2.5 小肠形态学
每个肠道样本取三横截面，使用标准的石蜡包埋程序与天青A和曙红染色。共有10个完好无损，良好的导向隐窝绒毛单位被选定为每个肠道截面，每个样品一式三份的 (Jin et al.2008)。从绒毛尖端绒毛到隐窝交界处测量绒毛高度，这个被定义为相邻绒毛内陷深度和隐窝深度。所有形态测量（绒毛高度和隐窝深度）通过使用一个图像处理的分析系统（擎天柱软件版本6.5，网络媒体遗传学，北读，MA），增量为10-μm。