Ⅰ 多糖类的提取方法
一、提取与纯化动植物中存在的多糖或微生物胞内多糖,因其细胞或组织外大多有脂质包围,要使多糖释放出来,第一步就是去除表面脂质,常用醇或醚回流脱脂。第二步将脱脂后的残渣以水为主体的溶液提取取多糖 (即冷水,热水,热或冷的0.1-1.0mol/L NaOH,热或冷的1%醋酸或1%苯酚等),这样提取得到的多糖提取液含有许多杂质,主要是无机盐,低分子量的有机物质及高分子量的蛋白质、木质素等。第三步则要除去这些杂质,对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去;对于大分子杂质可用酶消化 (如蛋白酶.木质素酶) ,乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。多糖提取液中除去蛋白质是一个很重要的步骤,常用的方法有Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯乙酸法,后者较为剧烈,对于含呋喃糖残基的多糖由于连接键不稳定,所以不宜使用。但该法效率较高,操作简便,植物来源的多糖常采用该法。上述三种方法均不适合于糖肽,因为糖肽也会像蛋白质那样沉淀出来。除去蛋白质后,应再透析一次,选用不同规格的超滤膜和透析袋进行超滤和透析,可以将不同分子大小的多糖进行分离和纯化,该法在除去小分子物质十分实用,同时能满足大生产的需要。具有广阔的应用前景。至此,得到的提取液基本上是没有蛋白质与小分子杂质的多糖混合物。一般来讲,通过上述方法所得到的是多糖的混合物,如果要得到单一的多糖,还必须对该混合物进行纯化。柱层析在多糖的纯化较为常用,常分为两类:一是只有分子筛作用的凝胶柱层析, 它根据多糖分子的大小和形状不同而达到分离目的,常用的凝胶有葡聚糖凝胶及琼脂糖凝胶,以及性能更佳的Sephacryl等。洗脱剂为各种浓度的盐溶液及缓冲液,其离子强度不应低于0.02mol/L。二是离子交换层析,它不仅根据分子量的不同,同时也具有分子筛的作用,常用的交换剂有DEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖和 DEAE-琼脂糖等,此法适合于分离各种酸性,中性多糖和粘多糖。多糖的纯化还可用其他方法,如制备性高效液相层析、制备性区带电泳,亲和层析等,这些方法有时对制备一些小量纯品供分析用是很有用处的。
Ⅱ 三七是一种名贵中药,其有效成分是三七皂苷,可用萃取法提取.(1)为了提高提取率,提取前应对三七材料
(1)人参皂苷易溶于有机溶剂,溶剂挥发后得到人参皂苷,因此可用萃取法提取.为了提高提取率,提取前应对田七材料进行预处理,即对棚迅盯其进行粉碎和干燥.昌锋由于有机溶剂易燃,直接链和明火加热容易燃烧,因此采用萃取法提取某有效成分时加热一般不用酒精灯直接加热而用水浴加热.
(2)工业化大量而快速生产三七以提取相关成分,可利用植物组织培养技术,植物组织培养过程中利用生长素和细胞分裂素等植物激素来促进根芽的分化,并且对形成的愈伤组织应当测定其三七皂苷的含量.
故答案为:
(1)粉碎、干燥 萃取剂易燃易爆
(2)植物组织培养技术 生长素和细胞分裂素 三七皂苷
Ⅲ 植物多糖的最佳提取方法是什么
植物活性多糖的提取方法有多种,在水提醇沉的基础上,常采用酶解、微波、超声波,膜处理和CO<2>超临界萃取等方法进行辅助提取或精制.最常用的还是水提醇沉法.
举例: 蒽酮比色法,具体步骤
一、仪器、试剂和材料
1.仪器:电子天平,超声波清洗器,电热恒温水浴锅,抽滤设备,分光光度计,容量瓶,刻度吸管等
2.试剂:
(1)葡萄糖标准液:l00 µg/mL
(2)浓硫酸
(3)蒽酮试剂:0.2 g蒽酮溶于100 mL浓 H2SO4中。当日配制使用。
3.材料:甜高粱,甘草
二.操作步骤
1.葡萄糖标准曲线的制作
取7支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液:
管号
1
2
3
4
5
6
7
葡萄糖标准液(mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8
蒸馏水(mL)
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2
葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0mL,迅速浸于冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖,以防蒸发。自水浴沸腾起计时,准确煮沸l0 min,取出,用冰浴冷却至室温,在620 nm波长下以第一管为空白,迅速测其余各管吸光值。以标准葡萄糖含量(µg)为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
2.植物样品中可溶性糖的提取:将样品粉碎,105 ºC烘干至恒重,精确称取1~5 g,置于50mL三角瓶中,加沸水25mL,加盖,超声提取10 min,冷却后过滤(抽滤),残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤(抽滤),滤液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。
3.稀释:吸取提取液2mL,置于另一50mL容量瓶中,以蒸馏水定容,摇匀。
4.测定:吸取1 mL已稀释的提取液于试管中,加入4.0 mL蒽酮试剂,平行三份;空白管以等量蒸馏水替代提取液。以下操作同标准曲线制作。根据A620平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量(µg)。
三、结果处理:
C × V总 × D
样品含糖量(%)= ————————————— × 100%
W × V测 × 106
其中:C——在标准曲线上查出的糖含量(µg),
V总——提取液总体积(mL),
V测——测定时取用体积(mL),
D——稀释倍数,
W——样品重量(g),
106——样品重量单位由g换算成µg的倍数
Ⅳ 多糖提取中的酸法提取
蛋白质会影响此方法的测定结果,故需要除去。
三氯乙酸是一种有机酸,使多糖提取液中的蛋白质与有机酸作用而变性沉淀。 该法是 在多糖水提液中滴加 5 %~10 %与多糖水提取液等体积的三氯乙酸,混匀静置过夜,离心除 去胶状沉淀,重复以上的操作直至溶液不再继续混浊为止,得无蛋白质的多糖。 三氯乙酸浓度越大,除蛋白质效果越好,但对多糖的影响也越大,可能是三氯乙酸对多糖结构具有破坏作用,使多糖降解,而且这种破坏作用随着三氯乙酸浓度增大而增强。 植物多糖常采用三氯乙酸法除蛋白质,也可先用蛋白水解酶,使样品中的蛋白质部分降解后再用 Sevag 法效果更好;微生物多糖去除蛋白常采用 Sevag 法、三氟三氯乙烷法;也可用盐析法、有机溶剂萃取等方法除蛋白。
Ⅳ 三七的成分是什么,请问做其主要有效成分最适合的的方法。。如果用HPLC可以用什么方法
三七含量测定
取本品粉末(过三号筛)0.5克,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚适量,加热回流1小时,弃去乙醚液,药渣橡瞎挥去乙醚,置于索氏提取器中,加甲醇适量,加热提取至甲醇无色,取甲醇提取液,挥干,残渣加甲醇使溶解,定量转移至20毫升量瓶中,加甲醇到刻度,摇匀,作为供试品溶液。另取人参皂苷Rb1及人参皂苷Rg1对照品适量精密称定,加甲醇制成每1毫升各含0.5毫克的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,精密吸取供试品溶液2微升,梁前空对照品溶液2微升与4微升,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿—甲醇—水(13:7:2)10摄氏度以下放置12小时的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在110摄氏度加热至斑点显色清晰,取出,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,周围用胶布固定,照薄层色谱法进行扫描,测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值,计算,即得。
本品含人参皂苷Rb1(C54H92023)和人参皂苷Rg1(C42H72O14)的总量不得小于3.8%。
三七 Radix Notoginseng
(英)Sanchi
别名 人参三七、田七、盘龙七、金不换。
来源 为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen的根。
植物形态 多年生草本,高达60cm。根茎短,茎直立,光滑无毛。掌状复叶,具长柄,3~4片轮生于茎顶;小叶3~7,椭圆形或长圆状倒卵形,边缘有细锯齿。伞形花序顶生,花序梗从茎顶中央抽出,长20~30cm。花小,黄绿色;花萼5裂;花瓣、雄蕊皆为5。核果浆果状,近肾形,熟时红色。种子1~3,扁球形。花期6~8月,果期8~10月。
生于山坡丛林下。现多栽培于海拔800~1000m的山脚斜坡或土丘缓坡上。主产云南、广西、四川。
采制 种后第3年冬季及夏末初秋采挖。去须根,曝晒至半干,用于搓揉,再曝晒,重复数次,置麻袋中加蜡打光。
性状 根圆锥形、纺锤形或不规则块状,长1.5~5cm,直径1.2~2cm。表面灰黄色或棕黑色,具蜡样光泽,有不规则细纹及少数横长皮孔;上部有数瘤状隆起的支根断痕,顶端残留根茎基。质坚实,击碎后皮部与木部常分离;横切面灰白色或黄棕色,皮部有棕色小点(树脂道),味苦、微甜。
化学成分 含皂甙,主要为人参皂甙Rb1、Rg1 、Rg2和少量人参皂甙Ra、Rb2、Rb和Re。此外,尚含黄酮甙、淀粉、蛋白质、油脂等。
性味 性温,味甘、微苦。
功能主治 散瘀止血,消肿定痛。用于各种内、外出血,胸腹刺痛,跌扑肿痛。
三七种植过程和种植要求
三七是一种十分娇嫩的植物,需要在人工搭建的荫棚下生长,对光的需求仅为自然光强的10~20%,对水分的要求也很苛刻,不能过多,也不能过少。因此,在长达3年的生长过程中,更需要人们的精心管理和细心呵护。稍不留神就会全军覆没,颗粒无收。为此,文山州专门成立了文山州三七研究所来对其进行专门的研究,了解它们的脾气,研究保护它们顺利成长的方法。在三七栽培过程中,人们需要经过选地、整地、播种、定植、施肥、防治各种病虫害等一系列的管理,才能获得丰收的喜悦。三七种植过的土地要经过10年以上的轮作才能再进行种植。 [采收]经过3年漫长的悔则时间,三七终于可以收获了。三七最佳的收获时间每年的9~11月,也就是中秋节前后。这段时间采收的三七产量高,质量好。根据文山州三七研究所专家们的研究结果,9~11月三七中的总皂苷、三七素、黄酮和多糖等活性成分均上一年中含量最高的。 三七采收后必须立刻进行初加工。加工方法是在洁净的地方,摘除地上茎,洗净泥土,剪去根茎、支根和须根。然后进行晾晒或50~55℃衡温烘烤,然后进行手工揉搓,修剪、分级、检测、包装。
Ⅵ 粗多糖提纯的方法有哪些
西安市天园生物制剂厂
大豆粗多糖:是从大豆籽粒中提取出的可溶性寡糖的总称,大豆中的寡糖属于а-半乳糖苷类,包括棉籽糖、水苏糖和Vabascose.
(1)、促进双歧杆菌的增殖:人体虽然不能直接利用粗多糖,但是粗多糖可被肠内细菌利用,并且能促进双歧杆菌的增殖。双歧杆菌是一种厌氧革兰氏阳性细菌,是维护和保持肠道菌群平衡的一个极为重要的因素,也是判断肠内外环境是否正常的一个可靠依据。
(2)、抑制病原菌:大豆粗多糖能促进双歧杆菌的增殖,从而抑制有害细菌如产生梭状芽孢杆菌的生长。双歧杆菌能发酵粗多糖产生短链脂肪酸和一些抗菌素物质,从而可抑制外源致病菌和肠内固有腐败细菌的生长繁殖。
(3)、防止便秘、腹胀,促进消化,调节胃肠功能:肠道内的双歧杆菌发酵粗多糖产生大量的短链脂肪酸(主要是醋酸和乳酸),能刺激肠道蠕动,从而促进消化,防止便秘的产生。
(4)、增强免疫功能:如果人较长期的食用无细菌食物,肠道就会因为缺少刺激而使其产生抗体的能力下降,从而容易诱发疾病。食用粗多糖,促进双歧杆菌的增殖,将对肠道免疫细胞产生刺激,提高其产生抗体的能力从而起到防治疾病的效果。
Ⅶ 多糖提取方法有哪些
溶剂提取法
溶剂提取法是从植物中提取多糖的常用方法,溶剂提取法首先要考虑的因素是选择溶剂,一般应遵循相似相溶的原则,即极性强的有效成分选择极性强的溶剂,极性弱的成分选择极性弱的溶剂。多糖是极性大分子化合物,应选择水、醇等极性强的溶剂。在所有溶剂中,水是典型的强极性溶剂,对植物组织的穿透力
强,提取效率高,在生产上使用安全。它能用于各种植物多糖,被广泛应用。用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法,该法所得多糖提液可直接或离心除去肢高不溶物;或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质,用高浓度乙醇沉淀提纯多糖;但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同,它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离;还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离;其中,以乙醇沉淀最为普遍。刘青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,热水提取控制条件为:温度为20~100℃,水与紫
菜的液固质量比为50:1,提取时间30~180min,经多次
试验最终得率为2.05%。周峙苗得到热水浸提羊栖菜
多糖的最佳因素:浸提温度为煮沸(102℃),ph为3.0,
浸提时间为3h,液固质量比为40:1。李战对三种紫球
藻的提取工艺研究表明,三种紫球藻的最佳提取工艺
各不相同。铜绿紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度
5%,乙醇用量为3倍体积,醇沉时间为1.5h。氯仿与正
丁醇的比例4:1,样液与sevag试剂的比例1:2,作用时
间为15min。淡色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度
75%,乙醇用量为2倍体积,醇沉时间为1h,氯仿与正
丁醇的比例3:1,样液与sevag试剂的比例1:2,作用时
间为45min。血色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度
50%。乙醇用量为1倍体积,醇沉时间为0.5h,氯历陵尺仿与
正丁醇的比例4:1,样液与sevag试剂的比例2:1,作用
时间为45min。
酸碱提取法
有些多糖适合用稀酸或碱溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸碱提取法有其特殊性,因多糖类的不
同而异。只在一些特定的植物多糖提取中占有优势,而
且即使有优势,在操作上还应严格控制酸碱度。因为
某些多糖在酸性或者碱性较强时,可能引起多糖中糖
苷键的断裂。另外,稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅
速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。赵宇等对海篙
子多糖的提取方法研究发现,从硫酸根含量及粗多糖
产率看酸提方法好于水提方法。具体方法为:100g海
篙子干粉,加入1000ml 0.1mo1/l hcl溶液提取。室温
搅拌1h后过滤,重复操作三遍,合并滤液;滤液减压浓
缩至总体积的1/5,再加入95%乙醇至乙醇浓度达
30%,沉淀,离心除去沉淀中的褐藻酸,继续向上清液
中加入乙醇至乙醇浓度达7%。室温放置过夜使沉淀
完全,离心,沉淀干燥得海篙子粗多糖,多次试验算得
平均产率为3.35%。
孟宪元等在茜草多糖提取研究中发现酸提相对
多于水提,以稀酸提取茜草多糖,产品纯度较高。具体
方法如下茜草根粗粉1000g 5%hcl浸泡、离心、取上
清液加入etoh并调节至浓度为7%,静置,2500rpm
离心,收集棕色沉淀物,95%etoh洗涤3次,用45%
hcl溶解。加1%活性炭脱色,真空抽滤,滤液4℃过
夜,弃去容器底部少许沉淀物。溶液置透析袋内,逆水
法透析3d,冷冻干燥,得白色粉末状多糖约10g。
hayashi katsuhiko发明了一种从绿色藻类中提取酸汪耐
性多糖的方法,而这种多糖用常规的热水法是无法得到的。具体过程为:将干燥的绿藻粉末制成悬浮液,热
水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分
离,取粘稠的固状物,加入碱水,在ph≥10的条件下
再进行搅拌提取,碱水提取液在搅拌的同时加入酸水
调节ph值为3.0~4.0,静置沉降后离心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一
项生物技术,在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取
条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的
释放或提取。此外,使用酶还可分解提取液中淀粉、果
胶、蛋白质等的产物,常用的酶有蛋白酶,纤维素酶,果
胶酶等。孟江研究不同酶对大枣渣多搪提取效果的
影响,根据多糖得率、多糖含量及蛋白质含量进行综合
评分得到最适合的酶为复合酶2(先胰蛋白酶提取,后
木瓜蛋白酶提取),接下来依次是木瓜蛋白酶、复合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(ph=7.0)、胃蛋白酶(ph=2.0)。复合酶2作用条件温
和,多糖得率及含量较高,且蛋白含量较低,实为一种
理想的酶提取剂。通过进一步正交实验考察得出最佳
工艺:先用胰蛋白酶3%,40倍体积在ph=7.0,65℃温
浸1.5h后,再加木瓜蛋白酶2.5%,在ph=7.0,50℃水
温浸1h,过滤残渣加40倍体积水,迅速升温至80℃,
然后温浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法还有超滤法,超声波强
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技术在不断
改进和创新,但对于同一种方法和技术又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在选取提取分离方法的同
时,应当根据目标多糖的特点、物理化学性质,综合比
Ⅷ 多糖的提取方法
问题一:实验室多糖的提取方法请问有几种和具体步骤 提取率要看你具体的提取条件了,即使都是用水提法,不同的条件、不同的原料,得到的提取率也不一样,找篇文章给你参考吧。
枸杞多糖水提工艺的优选
植飞 郑卫平 陈平 何梅仙
(1.武汉工业学院制药教研室,武汉430023;2.中国药科大学,南京210000)
摘要:目的:确定枸杞多糖最佳提取条件。方法:分别以多糖得率及多糖含量为考察指标,以正交实验法确定枸杞多糖的最佳提取工艺。结果:枸杞多糖的最佳提取工艺为:取枸杞药材,第一次加水l0倍,以后每次加水8倍掘瞎量,共冷浸3次;每次冷浸1 h;每小时搅拌10 min。结论:本法为枸杞多糖水腔散磨提工艺的伍斗确定提供实验依据。
问题二:多糖提取中水提法的具体步骤 10分 将原料浸没在水中,加热至50-100℃,保温20分钟-2小时,具体参数要看原料的性质,多糖会大部分溶解在水中,将多糖水溶液减压浓缩,喷雾干燥可以得到多糖的干粉。
Ⅸ 三七多糖的提取原料来源于
总皂苷的药渣。三七多糖的提取原料来源于总皂苷的药渣,三七多糖是戚坦三七粉中的一种成份,有止血作用。以提取过三七总皂苷的高型桐药渣为原料,经过水提醇沉、sevage法除蛋白、活性炭除色素、阴离子交换纤维素柱层析纯化等租启步骤,得到三七多糖。
Ⅹ 多糖的提取有哪些方法
植物活性多糖的提取方法有多种,在水提醇沉的基础上,常采用酶解、微波虚肆、超声波,膜处理雀枣和CO超临界萃顷誉拆取等方法进行辅助提取或精制.最常用的还是水提醇沉法.