压片模具使用方法

‘壹’ 圆二色光谱的谱带宽度

选为1 nm。对于高分辨率测量，要用较窄的狭缝宽度，此时光电倍增管的电压较高，谱的信噪比差。虽然对于正常测量最佳谱带宽度是1~2 nm，但是在下列情况下要牺牲分辨率而需要较宽的狭缝宽度。当样品的吸光度很高但CD信号很弱时，一方面要尽量保证测定CD峰所需要的足够浓度，另一方面要设置较宽的狭缝。不过此时要特别小心，因为样品在吸光度过高(A>2)的情况下可能存在荧光或杂散光引起的某些假象。另外，在固体CD光谱测试时也需要较大的狭缝宽度(一般要求 > 2 nm)。(2)椭圆率和摩尔椭圆率都依赖于测量条件。因此，温度、波长和样品浓度总是应该特别注明的。(3) 当用压片法或石蜡油研磨法进行固体粉末样品测试时，要尽可能地研磨获得细小均匀的样品颗粒。采用石蜡油糊方法时，必须注意某些憎水有机化合物可能溶于石蜡油中，这时所得CD光谱在某种意义上应视为溶液CD光谱。采用压片法测试固体CD时，在保证手性样品的定性浓度达到CD光谱仪检测要求的同时，片越薄越透明越好(但切忌破损)。在某些情况下，压片法不适用于手性抗衡阴离子存在下的固体诱导CD光谱的测定。使用压片机须注意：① FW-4型压片机极限压力24吨，对应压力表读数37.5 MP，超过此极限容易损坏机器，请不要随意加压。② 一般用途的压片，加压至8吨(12.5 MP)即可，当KBr(或KCl)用量约50 mg时能获得较光滑均匀的片膜。③ 使用压片机时如感觉压油手柄有压力，而压力表读数为0，请立即旋松油阀，检查压力表是否损坏。④ 机器放置一段时间未使用，在使用前可旋紧放油阀，加压至15 MP，再旋松放油阀。如此反复几次，即可正常使用。⑤ 压片完成后，请用棉花蘸取少量酒精将压片模具和研钵洗干净，置于红外灯下烘干后再将压片模具放回干燥器中。压片剩余的固体粉末和使用过的棉花倒入垃圾桶中。(4) 在紫外区进行光谱扫描时，J-810型CD光谱仪的耗氮量为：3 L/min(190~400 nm)；3~5 L /min(185 nm)；10 L/min(180 nm)；30~50 L/min(175 nm)；60~70 L/min(170 nm)。因此当测定蛋白等样品的远紫外光谱时，必须增加氮气的流量，以避免臭氧对紫外光产生的吸收干扰光谱的测定。(5) 对获取理想的溶液或固体CD谱图的建议：① 手性样品符合CD光谱测试的条件(在给定波长范围内有较强的CD信号和合适的吸收值)。必须事先测定手性样品的UV-Vis吸收光谱(溶液或固体漫反射)，预测CD谱峰的可能位置和选择合适的制样浓度(对于溶液吸收光谱，A ≈ 1)。② 提供高对映纯度的手性样品。③ 根据样品的性质选择测定方式(溶液、固体、单晶或荧光CD)。④ 对溶液样品应选用合适的溶剂(见附表)、浓度和光程(与测定UV-Vis光谱类似)。对于在紫外区测试的样品建议选用较小的光程(≤0.5 cm)和截止波长足够低的溶剂，最好为高纯水或醇类溶剂(见附表)。⑤ 对固体样品的压片法测试，应视样品的不同选用合适百分比浓度及合适的稀释剂( KBr、KCl或 CsI 等)研磨压片后进行透射扫描。⑥ 选择适当的测定参数(波长范围、扫描速度、灵敏度和狭缝等)。⑦ 对于同一个样品，在可能的条件下，建议同时做其溶液和固体CD光谱加以比较。⑧ 如果可能，最好同时做一对对映体的CD光谱，以检查其CD信号的真伪和在定量的条件下互相印证其对映纯度。

‘贰’ 红外光谱仪的使用方法步骤

红外光谱仪的基本操作步骤：

1、打开红外光谱仪的电源开关。

2、点击电脑屏幕打开IRsolution工作站软件。

3、点击测定，使屏幕转到测定界面。之后初始化仪器。

4、制备溴化钾空白片和样品压片。

5、将压制好的溴化钾空白片（不含样品的溴化钾空片）放入光谱仪样品仓内的样品架上。

6、点击测定按钮下的背景按钮，输入光谱名称，确认采集参比背景光谱。

7、背景谱图采集完毕后，将待测样品片放入光谱仪内，关上仓盖。

8、软件可按要求对谱图进行各种分析处理，从文件菜单中选择打印，将谱图以不同形式打印出报告。

9、退出系统。

二、仪器使用注意事项

1、仪器一定要安装在稳定牢固的实验台上，远离振动源。

2、供试品测试完毕后应及时取出，长时间放置在样品室中会污染光学系统，引起性能下降。样品室应保持干燥，应及时更换干燥剂。

3、所用的试剂、试样保持干燥，用完后及时放入干燥器中。

4、在工作期间，不可中途断电。

5、压片模具及液体吸收池等红外附件，使用完后应及时擦拭干净，必要时清洗，保存在干燥器中，以免锈蚀。

6、光路中有激光，开机时严禁眼睛进入光路。

7、测定完毕，要及时做好仪器使用登记记录。