常用溶剂的脱气方法

① 什么是脱气

流动相使用前为什么要脱气
流动相使用前必须进行脱气处理 ，以除去其中溶解的气体（如O2），以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时，因压力降低而产生气泡。气泡会增加基线的噪音，造成灵敏度下降，甚至无法分析。溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化，柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能。若用FLD，可能会造成荧光猝灭。

常用的脱气方法比较：

氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。

加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。

抽真空脱气法：易抽走有机相。

超声脱气法：流动相放在超声波容器中，用超声波振荡10-15min，此法效果最差。

在线真空脱气法：Agilent1100LC真空脱机利用膜渗透技术， 在线脱气，智能控制，无需额外操作，成本低，脱气效果明显优于以上几种方法，并适用于多元溶剂体系。

② 高效液相色谱法使用流动相前为什么要脱气方法有哪些

HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。

噪声增大，基线不稳，突然跳动。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果带来误差。

常用的脱气方法有：加热煮沸、抽真空、超声、吹氦等。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

(2)常用溶剂的脱气方法扩展阅读：

液相色谱和质谱连接，可以增加额外的分析能力，能够准确鉴定和定量像细胞和组织裂解液，血液，血浆，尿液和口腔液等复杂样品基质中的微量化合物

流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式。

式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm—溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处，即分离的顺序取决于K，K大的组分保留值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。

③ 液相色谱仪的流动相为什么要脱气常用的脱气方法有哪几种

气泡会影响柱的分离效果，影响检测器的灵敏度、基线的稳定，甚至无法工作

1.如果不排气，容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作

2.溶解气体会引起溶剂pH的变化，给分析或分离带来误差

3.溶解在流动相的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。

4.溶解氧能与某些溶剂（如甲醇、四氢呋喃）形成有紫外吸收的配合物，会提高背景吸收，并导致检测灵敏度的轻微降低。

5.在梯度洗脱时会造成基线漂移或形成鬼峰（假峰）

6.在荧光检测中，溶解氧在一定条件下还会引起猝灭现象，特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等

常用的脱气方法有超声波震动脱气、抽真空脱气、加热回流脱气、吹氦气脱气以及在线真空脱气。

最简单的脱气方法是超声震动脱气，脱气效果最佳的是在线真空脱气。