外科灭菌的常用方法

❶ 常用6种灭菌方法有哪些，附适用范围

回答
常用6种灭菌方法有干热灭菌法、湿热灭菌法、间歇灭菌法、辐射灭菌法、过滤除菌法和化学试剂灭菌法。干热灭菌法是指在干燥环境(比如火焰或者干热空气)进行灭菌的技术。湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或者流通蒸汽进行灭菌的方法。间歇灭菌法是指利用反复多次的流通蒸汽加热，从而杀灭所有微生物的方法。
一、常用6种灭菌方法有哪些
1、干热灭菌法:是指在干燥环境(比如火焰或者干热空气)进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法，适用于干燥粉末、凡士林、油脂等。火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法;干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。
2、湿热灭菌法:是指用饱和水蒸气、沸水或者流通蒸汽进行灭菌的方法，湿热灭菌法是以高温高压水蒸气为介质，因为蒸汽的潜热大，而且穿透力强，容易使蛋白质变性或者凝固，从而导致微生物的死亡。该方法的灭菌效率比干热灭菌法高，而且还是药物制剂生产过程中比较常用的灭菌方法。
3、间歇灭菌法:是指利用反复多次的流通蒸汽加热，从而杀灭所有微生物。间歇灭菌一般在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。这种方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100°C以上的温度下处理比较长时间会被破坏，用间歇灭菌法可以起到杀菌作用，又可以让被处理的物质免遭破坏。
4、辐射灭菌法:是利用电离辐射杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法，它们都可以通过特定的方式控制微生物生长或者杀死微生物，比如微波可以通过热产生杀死微生物的作用，该方法可以在常温或者低温下进行，处理过程食品温升很小，这样有利于维持食品的质量;而且辐射过的食品不会留下任何残留物。
5、过滤除菌法:是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，从而达到无菌目的，过滤除菌的原理有惯性撞击截留作用、拦截截留作用、布朗扩散截留作用等。
6、化学试剂灭菌法:是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法，该方法可以分为气体灭菌法和液体灭菌法，气体灭菌法是指采用气态杀菌剂进行灭菌的方法，比如臭氧、甲醛等;液体灭菌法是指采用杀菌剂容易如进行消毒的方法。
二、6种灭菌方法的适用范围
1、干热灭菌法:适用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品的灭菌，不耐湿热的器械的灭菌，用于蒸汽或者气体不能穿透物品的灭菌，比如玻璃、油脂、粉剂和金属等制品的消毒灭菌。
2、湿热灭菌法:适用于耐高温、耐湿热物品，如培养基、动物尸体等，比如实验室内常见压力蒸汽灭菌器。
3、间歇灭菌法:适用于不耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌。
4、辐射灭菌法:适用于食品、化妆品、药品、日用品、医疗产品和电子塑胶等领域，主要作用是产品消毒灭菌处理，通过射线作用于产品在不拆外包装的前提下可以有效降低或者杀灭产品内部不同类形的微生物。
5、过滤除菌法:适用于血清、毒素、抗生素等不耐热生物制品及空气除菌。
6、化学试剂灭菌法:适用于环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器具、设备和设施等的消毒，也用于粉末注射剂。

❷ 常用的灭菌方法有哪些

微生物学实验常用的灭菌方法有哪些
一般分为溼热灭菌法和干热灭菌法两种。

一、溼热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是最常用的灭菌方法。溼热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。

（1）煮沸灭菌法：将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈。此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。

（2）巴氏消毒法：一种低温消毒法，因巴斯德首创而得名。有两种具体方法，一是低温维持法：62摄氏度维持30分钟；二是高温瞬时法：75摄氏度作用15-30秒。该法适用于食品的消毒。

（3）流通蒸气灭菌法：利用常压下的流通蒸汽进行灭菌。

（4）间歇蒸汽灭菌法

（5）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度，维持15-20分钟。

二、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。

（1）火焰灭菌法：是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等）物品与用具的灭菌，不适合药品的灭菌。

（2）干热空气灭菌法：是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许溼热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。
临床上常用的灭菌的方法有哪些？
一、物理方法

1、温度

利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。

1）干热灭菌法:

a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。

b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。

2）溼热灭菌法:

在同样的温度下，溼热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。

a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。

b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。

c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做恭完全无菌。若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是：将待灭菌的物品加热至100°C，15~30分钟，杀死其中的营养体。然后冷却，放入37°C恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。

d. 加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌，也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。

加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121°C。在这种情况下，微生物（包括芽孢）在15~20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间。

在加压蒸汽灭菌中，要引起注意的一个问题是，在恒压之前，一定要排尽灭菌锅中的冷空气，否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系，这样会大大降低灭菌效果。

3）影响灭菌的因素

a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同。多数微生物的营养体和病毒在50~65°C，10分钟就会被杀死；但各种孢子、特别是芽孢最能抗热，其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌，要在121°C，12分钟才被杀死。对同种微生物来讲，幼龄菌比老龄菌对热更敏感。

b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果，数量越多，热死时间越长。

c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果。一般地讲，蛋白质、糖或脂肪存在，则提高抗热性，pH在7附近，抗热性最强，偏向两极，则抗热能力下降，而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响；固体培养基要比液体培养基灭菌时间长。

4）灭菌对培养基成分的影响

a.pH值普遍下降。

b.产生混浊或沉淀，这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或......
什么叫灭菌？灭菌方法有哪几种
灭菌的定义：

灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。

微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。

将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞（或孢子）杀灭或去除，从而达到无菌的过程。

常用的灭菌方法：

热灭菌法

热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、溼热和间歇加热灭菌等法。

干热灭菌

火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧（incineration或bustion）是一种最彻底的干热灭菌法，应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等 。

溼热灭菌以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。

巴氏消毒法：因最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒，故名。这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法 。

巴氏灭菌法就是溼热灭菌，此法有两种方式[1] ，①经典的低温维持法（lowtemperatureholdingmethod，LTH）：在61.7～62.8℃下处理30分钟；②较现代的高温瞬时法（hightemperatureshorttime或flushpoint，HTST）：在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中，以蒸气加压灭菌效果最好，可用常压蒸气灭菌，也可在高压蒸气锅中（一般使用1千克/厘米2）灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。但对某些易被高压破坏的物质，如某些糖或有机含氮化合物，宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15～30分钟。

煮沸消毒法：采用在100℃下煮沸数分钟的方法，一般用于饮用水的消毒。

间歇灭菌

间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌 1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

辐射灭菌

辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射（射线加快中子等）。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

渗透压灭菌

渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离，不能进行正常的新陈代谢，结果导致微生物的死亡。

化学试剂灭菌

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。

化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物（磺胺类等）、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物，他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物（包括病原菌，病毒，癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂 。...
医疗器械常用的灭菌方式有哪些？
医疗器械灭菌工艺的验证方法就是与菌过程的相适应性，一般的灭菌方式包括以下：

1、溼热灭菌：

溼热灭菌是将产品放在压力锅内，利用饱和蒸汽在最小温度为1210C的压力下，热力和溼气被迅速传递给灭菌产品，灭菌时间至少15min。蒸汽潜热大，可迅速提高物体的温度，水分子穿透力强，容易使蛋白质凝固变性，所以溼热灭菌是热力灭菌中最常用、效果较可靠的一种灭菌方法。适用于溼热灭菌的医疗器械有：衣服、被单、聚四氟乙烯、外科手术器械、硅橡胶、聚丙烯、环氧树脂等。但对一些不耐高温的聚合物如聚氨酯等，承受不了这样的高温，只能采用其他的灭菌方法。；

2、干热灭菌：

热灭菌是将产品放于热空气箱中、利用干热空气的氧化作用，杀灭一切活的微生物或消除热原的方法。干热灭菌通常使用的温度较高，范围在160～2500℃，依据其使用的温度，暴露的时间可达2h。干热灭菌条件一般为160x120min以上、180。Cx60min以上或250。C×45min以上，也可采用其它温度和时间参数。实际应用中，干热灭菌的适用范围十分有限，一般应用于耐高温的玻璃器具和金属外科器械，另有些产品不仅要求达到必要的无菌水平，还要消除细菌内毒素(热原物质)，应用其他的灭菌方法很难消除细菌内毒素，而干热灭菌的温度时间参数设置在250℃x45min，可以除去玻璃器具的热原物质。

3、环氧乙烷灭菌：

包装系统的材料中最起码有一种具备一定的透气性，环氧乙烷灭菌是医疗器械领域比较常用的灭菌方法，环氧乙烷灭菌原理是通过其与蛋白质分子上的巯基(一SH)、氨基(一NH：)、羟基(一OH)和羧基(一COOH)以及核酸分子上的亚氨基(一NH一)发生烷基化反应，造成蛋白质失去反应基团，阻碍了蛋白质的正常生化反应和新陈代谢，导致微生物死亡，从而达到灭菌效果。环氧乙烷灭菌时，灭菌柜内的温度、溼度、灭菌气体浓度、灭菌时间都是影响灭菌效果的重要参数。一般采用的灭菌条件：温度(55±10)oC、相对溼度(60±10)％、灭菌压力8xl 05Pa灭菌时间120min。环氧乙烷是一种烷化剂，穿透力强，能够使用各种包装材料，在常温下能杀灭各种微生物(包括细菌、芽孢、病毒、真菌孢子等)H。适用于生物医用高分子材料，比如天然橡胶、聚乙烯、聚丙烯及聚氯乙烯等。

4、辐射灭菌：

要求构成包装系统的所有包装材料都能够耐抗辐照射线的处理而不至于老化脆裂；

辐射灭菌是将灭菌产品放于适宜放射源辐射的1射线或适宜的电子加速器发生的电子束中进行电离辐射产生自由基通过控制辐射条件而达到杀灭微生物的方法。灭菌用的1射线通常以钴Co一60或铯Cs一137作为放射源，发生衰变时发射出1．33MeV和1．17MeV两个能级的射线，使微生物DNA受到不可恢复的损失，达到人们所需要的目标131。辐射灭菌通常用于外科器具、人工假体、注射器和缝合线等。

5、低温等离子体灭菌：

低温等离子体灭菌是最近几年才发展起来的新的低温灭菌技术。等离子体是气体或蒸汽受电场或磁场影响，使大部分分子发生离子化而形成的。等离子体灭菌器是由电源、激发原、气原、传输系统和灭菌腔室组成，抽真空后通过水蒸汽，蒸汽在电场作用下转变为等离子体。等离子体灭菌优点是杀菌效果可靠、作用温度低、灭菌后的器械不需要放置空气中去除残留气体，无腐蚀性同。目前，许多国家已开始应用这种技术，主要用于不耐热的医疗器械。

总结语：

灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件，灭菌产品的无菌保证取决于灭菌材料的选择，生产过程中适宜的的灭菌工艺、规范的GMP管理质量管理体系，同时灭菌工艺的确定应综合考虑生......
生物中灭菌方法有哪些
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子.

实验室里常用的灭菌方法有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸气灭菌.

（灭菌与消毒是不同的,用紫外线处理属于消毒.）
微生物实验室常用的灭菌方法有哪些
常用的灭菌方法主要包括以下三种：干热灭菌；溼热灭菌；紫外灭菌

1.干热灭菌法

1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要用于接种工具灭菌,在火焰上灼烧即可达灭菌目的,火焰灭菌通常用于无菌操作中试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等实验物品的灭菌,防止管口污染。

1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后,在烤箱内加热至160℃,保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃.此外降温过速,骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密,应有空隙,利于热空气流动,过密,致使温度不均,部分物品灭菌不彻底.

2.溼热灭菌法

通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,温度高,灭菌效果最好.

注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时,在同一表压下所达到的温度值要低,而冷空气排出越少,温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时,为保证达到规定的温度,必须将冷空气完全排除.否则,虽然压力达到,而温度达不到规定的要求,灭菌就不彻底.

3.紫外线

杀菌谱广,但穿透力弱,影响因素多,杀菌效能受到一定限制.

紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与溼度等因素有关.紫外灯杀菌的温度以20~40℃,相对溼度40%~60%为宜.
常用的消毒灭菌方法有哪些
(1)天然消毒法：利用日光等天然条件杀灭致病微生物，达到消毒目的，称为天然消毒法。

① 日光曝晒法：日光由于其热、干燥和紫外线的作用，而具有一定的杀菌力。日光杀菌作用的大小受地区、季节、时间等因素影响，日光越强，照射时间越长，杀菌效果越好。日光中的紫外线由于通过大气层时，因散热和吸收而减弱，而且不能全部透过玻璃，因此，必须直接在阳光下曝晒，才能取得杀菌效力。日光曝晒法常用于书籍、床垫、被褥、毛毯及衣服等的消毒。曝晒时应经常将被晒物翻动，使物品各面都能与日光直接接触，一般在日光曝晒下4～6小时可达到消毒目的。

② 通风：通风虽然不能杀灭微生物，但可在短时间内使室内外空气交换，减少室内致病微生物。通风的方法有多种，如用门、窗或气窗换气，也可用换气扇通风。居室内应定时通风换气，通风时间一般每次不少于30分钟。

(2)物理灭菌法：利用热力等物理作用，使微生物的蛋白质及酶变性凝固，以达到消毒、灭菌目的，称为物理灭菌法。

①燃烧法：是一种简单易行、迅速彻底有效的灭菌方法，但对物品的破坏性大，多用于耐高热，或已带致病菌而又无保留价值的物品，如被某些细菌或病毒污染的纸张、敷料，搪瓷类物品如坐浴盆，也可以用火焰燃烧消毒灭菌，应先将盆洗净擦干，再倒人少许90％酒精，点燃后慢慢转动浴盆，使其内面完全被火焰烧到。应用此法时，要注意安全，须远离易燃或易爆物品，以免引起火灾。

②煮沸法：是一种经济方便的灭菌法，一般等水开后计时，煮沸10—15分钟可杀死无芽胞的细菌。可用于食具、毛巾、手绢等不怕溼而耐高温的物品的消毒灭菌。

③ 高压蒸汽灭菌法：利用高压锅内的高压和高热释放的潜能进行灭菌，此法杀菌力强，是最有效的物理灭菌法。待高压锅上汽后，加阀再蒸15分钟，适合消毒棉花、敷料等物品。

(3)化学消毒灭菌法：化学消毒灭菌法是利用化学药物渗透细菌体内，破坏其生理功能，抑制细菌代谢生长，从而起到消毒的作用。家庭常用化学消毒灭菌方法有以下三种。

① 擦拭法：用化学药液擦拭被污染的物体表面，常用于地面、家俱、陈列物品的消毒。如用0．5％-3％漂白粉澄清液、84消毒液等含氯消毒剂(现市场都出售，要看好有效期及使用方法)，擦拭墙壁、床、桌椅地面及厕所。

②浸泡法：将被消毒物品浸泡在消毒液中，常用于不能或不便蒸煮的生活用具。浸泡时间的长短因物品及溶液的性质而有不同。如用1％-3％漂白粉澄清液浸泡餐具、便器需1小时，用0.5％“84”消毒液浸泡需15分钟，而用0.02％高效消毒片浸泡只需5分钟，就可以达到目的。若浸泡呕吐物及排泄物，不但消毒液浓度要加倍，而且浸泡时间也要加倍。

③ 熏蒸法：是利用消毒药品所产生的气体进行消毒。常用于传染病人居住过的房间空气及室内表面消毒。

福尔马林(甲醛)+高锰酸钾：每立方米加入福尔马林25—40毫升，高锰酸钾15—30克，两种药放置在一起即产生气体，可达到消毒目的。消毒时，必须将门窗紧闭12-24／小时，消毒后再打开门窗进行通风，此法对各种细菌、病毒引起的传染病均有效。

食醋：每立方米用3-10毫升食醋，加水2～3倍加热熏蒸，用于室内空气消毒，对于预防流感等呼吸道传染病有效。

❸ 论述主要灭菌方法和原理

1、热力灭菌：利用高温使菌体蛋白质变性或凝固，代谢发生障碍， 导致细菌死亡。包括：

（1）焚烧法：用火焚烧，是很彻底的灭菌方法，适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。

（2）烧灼法：直接再火焰上烧灼，用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌。

（3）干烤法：在干烤箱通电后利用高热空气进行灭菌。一般加热160-170℃， 维持2小时即可杀灭包括芽胞在内的一切微生物。主要用于玻璃器皿、 磁器或需干燥的注射器等。

（4）煮沸法：煮沸100℃5分钟可杀死细菌的繁殖体，一般消毒以煮沸10分钟为宜。如需要杀死芽胞则要煮沸1-3小时。主要用于一般外科器械、注射器、胶管和食具等的消毒。

（5）间歇灭菌法：是利用反复多次的流通蒸汽， 杀死细菌所有繁殖体和芽胞的一种灭菌法。本法适用于耐热物品，也适用于不耐热(<100℃)的一些物质如某些培养基的灭菌。具体做法是将待灭菌的物品置于阿诺氏流通蒸汽灭菌器内，100℃加热15-30分钟杀死其中的细菌繁殖体，然后将物品置37℃温箱中过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸汽加热，如此连续三次，可将所有繁殖体和芽胞全部杀死。若有某些物品不耐100℃，则可将温度降至75-80℃， 每次加热的时间延长至30-60分钟， 次数增至3次以上，也可达到灭菌目的，如用血清凝固器对血清培养基或卵黄培养基的灭菌。

（6）巴氏消毒法：由巴斯德创建，常用于牛奶和酒类的消毒。一般加热61.1-62.8℃半小时， 或71.7℃经15-30秒钟， 便可达到杀死病原菌或一般杂菌， 而不严重破坏物品的质量的目的。

（7）高压蒸汽灭菌法：是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。利用高压蒸汽灭菌器锅进行灭菌，由于密闭容器加温所产生的高压饱和水蒸汽能获得较高的温度，通常在1.05kg/cm2的压力下， 温度达121.3℃， 维持15-30分钟， 可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物。此法适用于高温和不怕潮湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术器械、注射器、手术衣、敷料和橡皮手套等。

在同样温度下， 湿热灭菌的效果比干热灭菌好， 原因是：

A、湿热中菌体吸收水份， 蛋白质较易凝固。

B、湿热比干热的穿透力好， 这主要是由于水或饱和水蒸汽传导热能的效率明显高于空气。蒸汽容易穿透到物体的深部， 使灭菌的物体内部温度迅速上升。

C、蒸汽有潜热存在。每一克水在100℃时， 由气态变为液态可放出529卡的热量。当蒸汽与被灭菌的物体接触时凝结成水， 放出潜热， 能迅速提高灭菌物体的温度。

2、紫外线灭菌：紫外线杀菌原理是通过干扰细菌DNA的合成， 波长2650-2660A杀菌力最强。紫外线作用的特点是(1)穿透力弱， 只能用于房间空气、物体表面消毒;(2)杀菌效果与照射时间， 距离和强度有关;(3)对眼睛角膜和皮肤有损伤作用，工作人员切勿在紫外线灯照射下进行操作。

日光中含有大量紫外线。将病人的被褥、衣服、书报等放在强烈的日光下爆晒数小时， 可达到消毒的目的。

❹ 一个外科手术包括哪些消毒方式

1. 消毒方法 （1）检查消毒区皮肤清洁情况。 （2）手臂消毒后（不戴手套），用无菌海绵钳夹持纱球。（1个纱球蘸3％碘酊，两个纱球蘸70％酒精）。 （3）先用3％碘酊纱球涂擦手术区皮肤，待干后，再用70％酒精纱球涂擦两遍，脱净碘酊。每遍范围逐渐缩小，最后用酒精纱球将边缘碘酊擦净。 因碘酊的杀菌作用是由碘升华过程的游离碘对细菌起杀灭作用，其对皮肤的刺激性也很大，所以待碘酊干燥对细菌产生杀灭能力后，应再用70％酒精纱布以同样方式涂擦两次将碘酊脱除。这样不仅发挥了碘酊产生游离碘的强大杀菌力，而且又能克服碘酊对皮肤的损害。操作的关键是涂擦均匀，严密无漏，待碘酊干燥后再脱碘。 欧美和日本国手术区皮肤消毒，已经很少采用碘酊酒精消毒法。普遍用0.5％PVP—碘进行手术区皮肤消毒。因为该消毒剂有碘酊相同的杀菌能力，又无碘酊对皮肤的刺激性。用此剂消毒时只按上法涂擦两次，不用脱碘即可。 2.消毒方式（1）环形或螺旋形消毒：用于小手术野的消毒。 （2）平行形或迭瓦形消毒：用于大手术野的消毒。 3.消毒原则（1）离心形消毒：清洁刀口皮肤消毒应从手术野中心部开始向周围涂擦。 （2）向心形消毒：感染伤口或肛门、会阴部的消毒，应从手术区外周清洁部向感染伤口或肛门、会阴部涂擦。 4.不同手术部位所采用的消毒溶液由于手术病人年龄和手术部位不同，手术野皮肤消毒所用的消毒剂种类也不同。 （1）婴幼儿皮肤消毒：婴幼儿皮肤柔嫩，一般用70％酒精或0.75％碘酊消毒。会阴部、面部等处手术区，用0.3％或0.5％碘伏消毒。 （2）颅脑外科、骨外科、心胸外科手术区皮肤消毒：用3％～4％碘酊消毒，待干后，用70％酒精脱碘。 （3）普通外科手术皮肤消毒：用3％～4％碘酊消毒，待干后，用70％酒精脱碘。或用1％（有效碘）碘伏消毒2遍，无需脱碘。 （4）会阴部手术消毒：会阴部皮肤粘膜用1％碘伏消毒2遍。 （5）五官科手术消毒：面部皮肤用70％酒精消毒2遍；口腔粘膜、鼻部粘膜消毒用0.5％碘伏或2％红汞消毒。 （6）植皮术对供皮区的皮肤消毒：用70％酒精涂擦2～3遍。 （7）皮肤受损沾染者的消毒：烧伤清创和新鲜创伤的清创，用无菌生理盐水反复冲洗，至创面基本上清洁时拭干。烧伤创面按其深度处理。创伤的伤口内用3％过氧化氢和1：10碘伏浸泡消毒，外周皮肤按常规消毒。创伤较重者在缝合伤口前还需重新消毒铺巾。 5.手术野皮肤消毒范围（1）头部手术皮肤消毒范围：头及前额。 （2）口、唇部手术皮肤消毒范围：面唇、颈及上胸部。 （3）颈部手术皮肤消毒范围：上至下唇，下至乳头，两侧至斜方肌前缘。 （4）锁骨部手术皮肤消毒范围：上至颈部上缘，下至上臂上1／3处和乳头上缘，两侧过腋中线。 （5）胸部手术皮肤消毒范围：（侧卧位）前后过中线，上至锁骨及上臂1／3处，下过肋缘。 （6）乳腺根治手术皮肤消毒范围：前至对侧锁骨中线，后至腋后线，上过锁骨及上臂，下过肚脐平行线。如大腿取皮，则大腿过膝，周圈消毒。 （7）上腹部手术皮肤消毒范围：上至乳头、下至耻骨联合，两侧至腋中线。 （8）下腹部手术皮肤消毒范围：上至剑突、下至大腿上1／3，两侧至腋中线。 （9）腹股沟及阴囊部手术皮肤消毒范围：上至肚脐线，下至大腿上1／3，两侧至腋中线。 （10）颈椎手术皮肤消毒范围：上至颅顶，下至两腋窝连线。 （11）胸椎手术皮肤消毒范围：上至肩，下至髂嵴连线，两侧至腋中线。 （12）腰椎手术皮肤消毒范围：上至两腋窝连线，下过臀部，两侧至腋中线。 （13）肾脏手术皮肤消毒范围：前后过中线，上至腋窝，下至腹股沟。 （14）会阴部手术皮肤消毒范围：耻骨联合、肛门周围及臀，大腿上1／3内侧。 （15）四肢手术皮肤消毒范围：周圈消毒，上下各超过一个关节。

❺ 手术室常用的灭菌方法有那些

（1）加热灭菌法

利用高温来杀死微生物（超过最高生长温度）的方法。加热灭菌的原理：当高温作用于微生物时，首先引起细胞内生理生化反应速率加快，机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等，随着温度的增高而遭受不可逆的破坏，尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏，从而使细胞失去了生活机能上的协调，停止了生长发育。随着高温的继续作用，细胞内原生质便发生凝固，酶结构完全破坏，活动消失，生化反应停止，渗透交换等新陈代谢活动消失，细胞死亡。加热灭菌可分干热灭菌和湿热灭菌两大类。

1）干热灭菌 利用灼烧或干热空气灭菌而没有饱和水蒸气参加的灭菌法称为干热灭菌法。由于干热灭菌使用方便，方法简单，故在生产上广泛应用。如火焰灭菌法：直接利用火焰把微生物烧死，故又称焚烧灭菌法。采用此法灭菌既彻底又迅速，但只适用于金属制的接种工具、试管口及污染物品等的处理。热空气灭菌法：即在电热恒温干燥箱中利用干热空气来灭菌。

2）湿热灭菌 即利用蒸汽进行灭菌的方法。湿热灭菌又分为高压、常压、间歇灭菌和巴氏灭菌4种。

①高压蒸汽灭菌 由于高压蒸汽具有较强的穿透力和较常压高的温度，能大大缩短灭菌时间，提高工作效率，加之蛋白质在湿热条件下容易变性，在热蒸汽条件下，细菌的芽孢在120℃，经20～30分钟可全部被杀死。如灭菌材料体积较大，不易被穿透时，可将压力增加到0.152兆帕，延长至1～2小时。在高压蒸汽灭菌中，灭菌温度随蒸汽压力的增加而升高（图2-6）。

图2-7 简易常压灭菌法

③常压间歇蒸汽灭菌法 这是利用常压蒸汽反复几次灭菌的方法。具体做法是将待灭菌物品放在锅内，100℃处理1小时左右，杀死微生物的营养细胞，让其冷却至30℃左右，此时芽胞会萌发，再以同样方法加热处理，反复3次，可达到灭菌目的。该方法可用于不耐高温的药品、营养物、特殊培养基的灭菌。

④低温巴氏灭菌法 即在60～70℃下，经一定时间，杀死有害微生物的方法。适应于不耐高温的物品消毒。有些培养基，在高温下遭到破坏，用此法既可杀死致病微生物的营养体，又能使培养基的成分不致受到严重破坏。食用菌生产中培养料堆积发酵工艺，就是利用这个原理杀死其中的病虫、杂菌。

（2）过滤除菌法

又分液体过滤和空气过滤两种，就是采用机械的方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器，通过机械过滤，只让液体培养基或空气从筛孔流出，各种微生物菌体则留在筛子上，从而达到除菌的目的。这种方法适用于对热不稳定的体积小的液体培养基（如动物血清、蛋白质、酶、维生素等）及气体的灭菌。超净工作台的工作原理就是将带菌空气通过过滤灭菌形成无菌空气，从风洞中吹出，来造成工作台范围的无菌状态。过滤灭菌的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。常用的过滤器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的，也有用火棉胶、硝化纤维素滤膜制成的。

（3）辐射灭菌法

利用辐射产生的能量进行杀菌的方法称辐射灭菌。辐射可分电离辐射和非电离辐射两种，α-射线、β-射线、γ-射线、X-射线、中子和质子、微波等属电离辐射，紫外线、臭氧、日光为非电离辐射。

1）紫外线灭菌 紫外线杀菌的原理是利用紫外线的辐射作用。用灯管直接照射细菌使其发生光化学反应，将细菌细胞质诱导形成胸腺嘧啶双聚体，从而抑制DNA的复制而发生变性、致死。另一方面，空气在紫外线照射下产生的臭氧（O₃），也具有一定的杀菌作用。紫外线的有效作用距离为1.2～2.0米。紫外灯一般悬吊在接种室或培养室的上方，个数依房间大小而定，容1～2个人操作的接种室，安装一个30瓦的紫外灯就可以了。在每次接种前，应将所需的器具一起放入接种室（箱）内，然后打开紫外灯照射。如果接种室体积较大，开灯照射2小时才能达到灭菌效果；如果较小，只需开灯半小时左右既可达到灭菌效果。由于紫外线穿透力弱，即使是普通玻璃也不能滤过，因此，只适于空气或物体表面的灭菌。紫外线对人体皮肤，尤其是眼睛有杀伤作用，应避免直视，工作时应将紫外灯关闭。紫外线消毒时工作场所如果处在稍暗无光的情况下，能提高杀菌效果。细菌接受致死量紫外线照射后，随即给予可见光照射，部分细菌有复活的可能。干细胞比湿细胞对紫外线的抗性强，孢子比其营养细胞对紫外线更具抗性。

2）微波灭菌 由于微生物的细胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波电场中被极化，并随着电场方向的改变而转动，在转动过程中分子之间高速度摩擦产生热能，这种热能不同于外部加热，可在短时间里使细胞爆破而物体本身的温度却只有极微增加，从而达到灭菌效果。用YM7601型微波炉只需60秒钟就能杀死食品中192万个大肠杆菌。

3）臭氧发生器消毒 臭氧（O₃）具有强烈的氧化作用，能破坏微生物的细胞膜与核酸。O₃也是一种暂态物质，常温下能自然分解，还原成氧。其灭菌原理实际上和紫外线消毒极相似。

❻ 常见的五种消毒方法

1、机械消毒法：用去除或隔离的方法将染毒物品的表面去除或隔离，防止毒剂损伤人员。如被毒剂污染的粮食、食品等，可先将表层部分去除，然后通风日晒和彻底冲洗。2、焚烧：是一种简单、迅速、彻底的消毒方法，因对物品的破坏性大，故只限于处理患传染病病鸭尸体、污染的垫料、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。

1、机械消毒法：用去除或隔离的方法将染毒物品的表面去除或隔离，防止毒剂损伤人员。如被毒剂污染的粮食、食品等，可先将表层部分去除，然后通风日晒和彻底冲洗。

2、焚烧：是一种简单、迅速、彻底的消毒方法，因对物品的破坏性大，故只限于处理患传染病病鸭尸体、污染的垫料、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。

3、煮沸消毒法：即利用煮沸100℃经5min可杀死一切细菌的繁殖体。一般消毒以煮沸10min为宜。用于一般外科器械、胶管和注射器、饮水和食具的消毒。

4、干热空气灭菌法：干热空气灭菌法属于干热灭菌法，是其中的一种。干热空气灭菌是指使待灭菌物品在干燥空气中被加热，用达到足以杀死细菌的温度的方法来灭菌。

5、高压蒸汽灭菌法：可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。方法是将需灭菌的物品放在高压锅里，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。

❼ 常用灭菌方法有哪些各有何特点

1、热灭菌法

热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。

2、干热灭菌

火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法（dryheatsterilization）。

把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧（incineration或combustion）是一种最彻底的干热灭菌法，应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。

3、化学试剂灭菌

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。

化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物（磺胺类等）、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物，他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物（包括病原菌，病毒，癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂。

4、间歇灭菌

间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

5、辐射灭菌

辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射（射线加快中子等）。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

❽ 手术包的灭菌通常使用哪种方法

1.高压蒸气灭菌法
是目前医院内应用最多的灭菌法,效果很可靠。高压蒸气灭菌器分为下排气式和预真空式两种。下排气式灭菌器的式样很多,有手提式、卧式及立式等但其基本结构和作用原理相同。均由一个有两层壁的耐高压的锅炉构成。蒸气进人灭菌室内，积聚而使压力增高,室内温度也随之升高。当高压蒸气达到一定的温度和时间,即能杀灭包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切微生物。
2.化学气体灭菌法
这类方法适用于不耐高温、湿热的医疗材料的灭菌.如电子仪器、光学仪器、内镜及其专用器械、心导管、导尿管及其他橡胶制品等物品。目前主要采用环氧乙烷气体灭菌法、过氧化氢等离子体低温灭菌法和甲醛蒸气灭菌法等。