常用沉淀蛋白的方法

❶ 蛋白质沉淀的方法有那些，各有什么特点

沉淀蛋白质的方法主要有：盐析、有机溶剂、生物碱试剂、重金属盐、加热凝固。
分析如下：
（1）盐析破坏蛋白质的水化膜和电荷，采用不同浓度盐可将不同的蛋白质分段析出，盐析的蛋白质不变性，盐析作用是可逆的。（2）有机溶剂可破坏蛋白质的水化膜，若调节pH=pI，则更易沉淀。低温操作，快速分离溶剂不会使蛋白质变性，而常温操作，蛋白质易变性。（3）沉淀生物碱试剂：钨酸、三氯乙酸等的酸根与带正电荷的蛋白质结合沉淀，会使蛋白质变性。（4）重金属离子可与带负电荷的蛋白质结合沉淀，会使蛋白质变性。（5）在等电点加热蛋白质可形成凝块沉淀，会使蛋白质变性。

❷ 请问使蛋白质沉淀的方法有几种

使蛋白质沉淀的方法有3种。

1、盐析法

在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出，这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白，饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来，盐析沉淀的蛋白质，经透析除盐，仍保证蛋白质的活性。

2、重金属盐沉淀蛋白质

蛋白质可以与重金属离子如汞、铅、铜、银等结合成盐沉淀。重金属沉淀的蛋白质常是变性的，但若在低温条件下，并控制重金属离子浓度，也可用于分离制备不变性的蛋白质。如临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质，抢救误服重金属盐中毒的病人，给病人口服大量蛋白质，然后用催吐剂将结合的重金属盐呕吐出来解毒。

3、生物碱试剂以及某些酸类沉淀蛋白质

蛋白质又可与生物碱试剂（如苦味酸、钨酸、鞣酸）以及某些酸（如三氯醋酸、过氯酸、硝酸）结合成不溶性的盐沉淀。如临床血液化学分析时常利用此原理除去血液中的蛋白质，此类沉淀反应也可用于检验尿中蛋白质。

(2)常用沉淀蛋白的方法扩展阅读：

蛋白质的沉淀可分为两类：

1、可逆的沉淀反应：蛋白质分子的结构尚未发生显着变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能溶解于原来的溶剂中，并保持其天然性质而不变性。如大多数蛋白质的盐析作用或低温下用乙醇（或丙酮）短时间作用于蛋白质。

2、不可逆的沉淀反应：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于原来溶剂中。如加热引起的蛋白质沉淀与凝固，蛋白质与重金属离子或某些有机酸的反应。

❸ 蛋白质沉淀有哪几种方法哪些是可逆的沉淀反应

蛋白质沉淀 蛋白质在溶液中的稳定性是有条件的、相对的.如果条件发生改变,破坏了蛋白质溶液的稳定性,蛋白质分子则聚集成大的颗粒沉淀出来.
蛋白质溶液的稳定性与质点大小、电荷和水化作用有关,只要破坏这些条件,蛋白质自然会从溶液中沉淀出.
沉淀蛋白质有以下方法：
1、盐析法
2、有机溶剂沉淀法
3、重金属盐沉淀法
4、生物碱试剂和某些酸（三氯醋酸,磺基水杨酸,硝酸等）沉淀法
5、加热变性沉淀法
蛋白质变性：蛋白质的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象.蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失.
蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀（precipitation）,变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀.
蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素,即颗粒表面的水化层和电荷.若无外加条件,不致互相凝集.然而除掉这两个稳定因素（如调节溶液pH至等电点和加入脱水剂）蛋白质便容易凝集析出.
可以看出,如将蛋白质溶液pH调节到等电点,蛋白质分子呈等电状态,虽然分子间同性电荷相互排斥作用消失了.但是还有水化膜起保护作用,一般不致于发生凝聚作用,如果这时再加入某种脱水剂,除去蛋白质分子的水化膜,则蛋白质分子就会互相凝聚而析出沉淀；反之,若先使蛋白质脱水,然后再调节pH到等电点,也同样可使蛋白质沉淀析出.

❹ 蛋白质沉淀法原理

原理：蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。

蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。由于水化层和双电层的存在，蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。如果向蛋白质溶液中加入某种电解质，以破坏其颗粒表面的双电层或调节溶液的pH，使其达到等电点，蛋白质颗粒因失去电荷变得不稳定而将沉淀析出。

蛋白沉淀法是毒物分析过程中对生物样品进行前处理的一种常用方式。对于富 含蛋白质的检材，在进行分离、提取时要将 大量干扰测定的蛋白质沉淀除去，使待测毒 物仍留存于溶液中。

操作时一般要先将检材组织磨碎，然后再加入蛋白沉淀剂进行蛋白质沉淀，组织中的蛋白质与沉淀剂形成疏松的絮状沉淀物，而毒物则留在溶液中。

(4)常用沉淀蛋白的方法扩展阅读：

有机溶剂易使蛋白质或酶变性，常采用降低温度的方法进行有效控制， 而且有机溶剂使用量大，溶剂的使用及回收；储存都比较困难或 麻烦。 盐析法：盐析法简单方便，可用于蛋白质抗原的粗提、丙种 球蛋白的提取、蛋白质的浓缩等。

盐析法提纯的抗原浓度不高，只用于抗原的初步纯化。 金属离子沉淀法纯度高,太耗电，沉淀效果很好，容易使生物分 子变性，复合物难分解。

选泽性变性沉淀法：溶解度下降、粘度 增加、紫外线吸收增加、侧链反应增强、对酶的作用敏感，易被 水解 （这就是为何蛋白类食品在被加热至变性后人体对其中氨基 酸的吸收。能力增强） 等电点沉淀法无机酸会引起较大的蛋白质不可逆变性的危险等电点装置复杂,也比较纯。

蛋白质变性指在某些物理和化学因素如热、有机溶剂、重金属离子、生物碱试剂等作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。

❺ 加热沉淀蛋白质

加热沉淀蛋白质将接近于等电点附近的蛋白质溶液加热，可使蛋白质发生凝固而沉淀。加热首先是加热使蛋白质变性，有规则的肽链结构被打开呈松散状不规则的结构，分子的不对称性增加，疏水基团暴露，进而凝聚成凝胶状的蛋白块。
蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸沉淀等。
蛋白质的沉淀，沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有

❻ 有哪些方法可使蛋白质沉淀，沉淀的原理是什么，有何实用意义

盐析法可以使蛋白质沉淀。x0dx0a盐析法的原理x0dx0a 蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目，亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。蛋白质溶液中加入中性盐后，由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化层减弱乃至消失。同时，中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，之蛋白质分子之间聚集而沉淀。由于各种蛋白质在不同盐浓度中的溶解度不同，不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋白质不同，从而使之从其他蛋白中分离出来。简单的说就是将硫酸铵、硫化钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。x0dx0a---摘自网络

❼ 沉淀蛋白质的方法有哪些

（1）盐析法，此方法并未破坏蛋白质天然状态，沉淀出的蛋白质可不变性，所以盐析法是分离制备蛋白质或蛋白类生物制剂的常用方法。
（2）有机溶剂沉淀法，通过破坏蛋白质的水化膜而使蛋白质沉淀，此方法在常温下可使蛋白质变性，低温下可使变性速度减慢。
（3）重金属盐沉淀法，可与蛋白质结合形成不溶于水的蛋白质盐沉淀，引起蛋白质变性。临床用于救重金属盐中毒。

❽ 沉淀蛋白质的方法有哪些，各有和特点

等电点沉淀法和盐析

一、等电点沉淀法

等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。

在等电点时，蛋白质分子以两性离子形式存在，其分子净电荷为零(即正负电荷相等)，此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥，分子相互之间的作用力减弱，其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀，所以蛋白质在等电点时，其溶解度最小，最易形成沉淀物。

等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小，从而有利于悬浮液的过滤。

二、盐析

盐析是指在蛋白质水溶液中加入中性盐，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质，溶解度又大，在蛋白质溶液中，一方面与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。

向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐，可以使蛋白质性质发生改变而凝聚，进而从溶液中析出，这种作用叫作变性，性质改变，是化学反应，无法复原。

把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定比例放在皂化锅内搅拌加热，反应后形成的高级脂肪酸钠、甘油、水形成混合物（胶体）。往锅内加入食盐颗粒，搅拌、静置，使高级脂肪酸钠与甘油、水分离，浮在液面。

(8)常用沉淀蛋白的方法扩展阅读：

蛋白质的变性

1、物理因素包括：加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、X射线、超声波等

2、化学因素包括：强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。

3、在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作作用下，蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来。这种凝结是不可逆的，不能再使它们恢复成原来的蛋白质．蛋白质的这种变化叫做变性。蛋白质变性之后，紫外吸收，化学活性以及粘度都会上升，变得容易水解，但溶解度会下降。

4、蛋白质变性后，就失去了原有的可溶性，也就失去了它们生理上的作用，因此蛋白质的变性凝固是个不可逆过程。

❾ 蛋白沉淀的方法和原理

蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。
蛋白质的沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸（如三氯醋酸）沉淀等。