固相萃取小柱使用方法

‘壹’ 固相萃取的操作步骤

针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。固相萃取操作一般有四步：

1.填料保留目标化合物

活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。

上样----将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。

淋洗----最大程度除去干扰物。

洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。

2.填料保留杂质

固相萃取操作一般有三步：

活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。

上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，故此步骤要开始收集

洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液。

此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。

‘贰’ 请问固相萃取小柱萃取之后小柱上的液体用什么方法吸干啊谢谢

呵呵，我用SPE小柱的时候都是用一次或者说用一个梯度的样就废弃了。
萃取柱使用的一般步骤：
（1）样品处理（2）萃取柱活化（3）上样：缓慢加入处理好的样品；
（4）柱清洗：（5）洗脱：少量多次洗脱（6）将洗脱液用氮吹仪吹干，重新定容，上机分析
我不明白的是，你为什么要把萃取后的液体吸干？？
经过第（5）步之后，第（5）步是少量多次洗脱，基本上来说小柱上的液体不会对结果有多大影响了。
如果是你不放心，想精益求精的话，我建议你用洗脱液再次洗脱。然后进行第（6）步。

‘叁’ 固相萃取上样后需要静置一段时间吗

洗脱率与吸附剂、洗脱溶剂、保留体积、 流速等因素都有关，一般可达90%~98%。

相关资料：

1、固相萃取柱（英文, 简称SPE column，或Solid Phase extraction Cartridges，简称SPE cartridges）是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。

2、原理：

固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）技术基于液相色谱原理，可近似看作一个简单的色谱过程。原理是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取。前者萃取与色谱分析同步完成，而后者萃取与色谱分析分步完成，两者在原理上是一致的。

3、固相萃取柱的使用

最简单的固相萃取可以通过手工方式完成，即在固相萃取柱上端连接一个器，通过对器的挤压将萃取柱内的液体排挤出萃取柱。另外，也可以使用正压或负压固相萃取装置对批量样品进行固相萃取操作。随着科技的发展和样品数量的增多，越来越多的分析实验室开始使用自动固相萃取仪，特别是多通道固相萃取仪对批量样品进行处理。

4、萃取步骤

1. 柱预处理（柱活化）

2. 用适当的溶剂淋洗SPE 柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶剂不同，其目的有2 个：一是除去填料中可能存在的杂质；二是使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。

3. 2. 上样

4. 将液态或溶解后的固态样品倒入预处理后的SPE 柱，然后利用抽真空、加压或离心的方法使样品通过SPE柱，在该步骤中，分析物被保留在吸附剂上。

5. 3. 淋洗和洗脱

6. 样品进入SPE柱、目标化合物被吸附后，视分离模式和样品性质而定，可采用适当的洗脱剂将目标化合物直接淋洗下来；也可先将干扰化合物淋洗掉，再用适当的洗脱剂将目标化合物洗脱，通常采用后一种方法更有利于样品的净化。淋洗和洗脱同上所述，可采用抽真空、加压或离心的方法使淋洗液或洗脱液流过吸附剂。

7. 5、影响因素

8. 1) 吸附剂

9. 目前常用的吸附剂有正、反相吸附剂、离子交换吸附剂和抗体键合吸附剂等，试验时尽量选择与目标化合物极性相似的吸附剂，其用量大小与目标物性质（极性、挥发性）及其在水样中的浓度直接相关。

10. 2) 洗脱溶剂

11. 在SPE中，洗脱溶剂的选择与目标物性质及使用的吸附剂有关，楼蔓藤等给出了常见有机溶剂的极性和洗脱强度，试验过程中可根剧被测物的物理、化学性质选用。洗脱剂体积应以淋洗完全为前提，体积最小的为最佳，可通过多次洗脱法（小体积），根据回收率的变化曲线找到最佳的洗脱液体积，显然，洗脱体积越小富集倍数越高。

12. 3) 保留体积

13. 在加样过程中，保留体积是SPE 技术的关键因素之一，它代表了进行痕量富集时能有效处理的水样体积。根据色谱分析仪的最小检出量和水样中有机物的浓度，可以估算出欲富集的最小水样体积。另外，样液的pH 值也影响样品的吸附效率。

14. 4) 流速

15. 流速的控制对SPE至关重要，流速过大将引起SPE柱的穿漏，流速太小则处理速度太慢。柱预处理过程中流速适中，保证溶液充分湿润吸附剂即可，上样和洗脱过程则要求流速尽量慢些，以使分析物尽量保留在柱内或达到完全洗脱，否则会导致分析物流失，影响回收率的大小。尤其离子交换过程，进行比较缓慢，应采用较低的流速（0.5~2.0 mL/min）。
    

‘肆’ 固相萃取仪装置操作规程有哪些

您好，北京德世科技有限公司（www.cnpetjy.com）为您答疑解惑：
固相萃取仪装置︰具有免溶剂、快速、萃取简单、可现场携带采样之仪器。可应用在非常多的领域;如药物分析、食品分析、环境污染分析(VOC、PAH、PCB、有机氯、有机磷杀虫剂)等等。

一、安装程序

(A) 先将Holder下方黑色保护套管转松拆开，再将不绣钢金属盖转松拆下。

注意:不绣钢金属盖有时会已松离Holder而卡在黑色保护套管，此时请将黑色保护套管再套回Holder转紧后再松开，不绣钢金属盖会回卡在Holder外牙上，再将它拆下，离开Holder。

(B) 将Holder推杆推至下端，此时有黑色圆棒秃出来(内有牙纹) 。

(C) 取出要用之Fiber，以Fiber上头外牙纹和Holder微秃出黑色圆棒内牙纹平顺锁上后，推杆小心拉回最上端，再将

刚拆下之不绣钢金属盖及黑色保护套管依序小心套上锁紧，即完成装置。

(D) 小心试着将Holder推杆推至中端卡点处卡住，此时Coated Fiber已从保护针头内秃出来，可上下调整黑色保护套

管及查看Holder上刻度，略估保护针头加上Coated Fiber所伸出的长度，以配合实验所需。

注意: Fiber装好后，此时勿将推杆推至最下端，会压坏Fiber之弹簧。

(E) SPME要插入样品瓶(袋)之隔塞取样或插入GC注射器之隔塞热脱附时，先将保护针头插入隔塞后，再将推杆推

至中端卡住，秃出Coated Fiber。

(F) SPME从样品瓶(袋)隔塞取样或从GC注射器之隔塞取出时，则先收回Coated Fiber至保护针头，再取出保护针头。

注意:因保护针头是平头针，所以新的隔塞片先以干净细针插一下以便保护针头较容易插入。GC Injection Liner(Sleeve)请改用SPME用Liner这样Coated Fiber较不会碰断。

(G) 若要从Holder拆下Fiber，先将Holder推杆拉回最上端，让Coated Fiber收回至保护针头内，把Holder下方黑色保护套

管转松和不绣钢金属盖拆下，再将Holder推杆推至下端，让黑色圆棒秃出来，转松Fiber上头锁牙即可。

固相微萃取装置主要部分是一个手柄加一个固相微萃取头即可进行工作，是最简单的配置。最好还需要恒温，磁力搅拌的装置等。也可以使用全自动SPME进样器，方便好用，就是价格太贵。

二、组成

SPME由手柄(Holder)和萃取头(Fiber)两部分构成，

壮似一支色谱注射器，萃取头是一根涂不同色谱固定相或吸附剂的熔融石英纤维，接不锈钢丝，外套细的不锈钢针管(保护石英纤维不被折断及进样)，纤维头可在针管内伸缩，手柄用于按装萃取头，可永久使用。

三、SPME操作步骤

样品萃取

1. 将SPME针管穿透样品瓶隔垫，插入瓶中。

2. 推手柄杆使纤维头伸出针管，纤维头可以浸入水溶液中(浸入方式)或置于样品上部空间(顶空方式)，萃取时间大约2-30分钟。

3. 缩回纤维头，然后将针管退出样品瓶

GC分析

1.将SPME针管插入GC仪进样口。

2.推手柄杆，伸出纤维头，热脱附样品进色谱柱。

3.缩回纤维头，移去针管。

原理：

固相微萃取(Solid Phase Micro-Extraction,
SPME)是用一根表层涂有特异性涂层，如聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane
)的石英纤维来吸附植物或昆虫顶空中的挥发性化合物。可以根据要提取的挥发物的性质选择不同的涂层。在提取过程中，石英纤维被手柄推出保护针套，处于择发物之中，挥发物被吸附到纤维涂层上，然后将石英纤维直接注入气相色谱的进样口，吸附在其表层的挥发物在瞬时高温条件下快速解吸附，进入色谱柱分离。SPME可以在自然或半自然状态下对活体生物进行连续取样，是目前分析鉴定少量挥发性化合物最精确的方法。此方法最大优点是只需少量的样品材料，并且不需要净化的中间步骤，因而无溶剂干扰。同时该法能基本反映昆虫在田间寻食过程中利用的信息化合物种类和浓度。缺点是收集的信息化合物量少，只能用于化学分析，不足以用来进行生物测定。