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常用的沉淀方法天然药物

发布时间:2022-12-26 03:53:34

Ⅰ 常见的沉淀方法都有哪些

(1)盐析法,此方法并未破坏蛋白质天然状态,沉淀出的蛋白质可不变性,所以盐析法是分离制备蛋白质或蛋白类生物制剂的常用方法.
(2)有机溶剂沉淀法,通过破坏蛋白质的水化膜而使蛋白质沉淀,此方法在常温下可使蛋白质变性,低温下可使变性速度减慢.
(3)重金属盐沉淀法,可与蛋白质结合形成不溶于水的蛋白质盐沉淀,引起蛋白质变性.临床用于救重金属盐中毒.

Ⅱ 化学沉淀法的常用方法

根据使用的沉淀剂不同,常见的化学沉淀法有氢氧化物沉淀法、硫化物沉淀法、碳酸盐沉淀法、钡盐沉淀法、卤化物沉淀法等。

Ⅲ 常用的沉淀法有哪几种

沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀,也可以是由于盐析。
蛋白质变性是指光照,热,有机溶济以及一些变性剂(如重金属盐)的作用时蛋白质的空间结构被破坏,使得蛋白质丧失活性,该过程不可逆。
盐析是指向蛋白质的溶液中加入轻金属盐,使得蛋白质沉淀析出,这是由于加入盐降低了蛋白质得溶解度而析出,该过程可逆,加水蛋白质又会溶解。
(一)材料的预处理及细胞破碎

分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:

1. 机械破碎法

这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有,高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。

2. 渗透破碎法

这种方法是在低渗条件使细胞溶胀而破碎。

3. 反复冻融法

生物组织经冻结后,细胞内液结冰膨胀而使细胞胀破。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。

4. 超声波法

使用超声波震荡器使细胞膜上所受张力不均而使细胞破碎。

5. 酶法

如用溶菌酶破坏微生物细胞等。

(二) 蛋白质的抽提

通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的蛋白质的性质而定。如膜蛋白的抽提,抽提缓冲液中一般要加入表面活性剂(十二烷基磺酸钠、tritonX-100等),使膜结构破坏,利于蛋白质与膜分离。在抽提过程中,应注意温度,避免剧烈搅拌等,以防止蛋白质的变性。

(三)蛋白质粗制品的获得

选用适当的方法将所要的蛋白质与其它杂蛋白分离开来。比较方便的有效方法是根据蛋白质溶解度的差异进行的分离。常用的有下列几种方法:

1. 等电点沉淀法

不同蛋白质的等电点不同,可用等电点沉淀法使它们相互分离。

2. 盐析法

不同蛋白质盐析所需要的盐饱和度不同,所以可通过调节盐浓度将目的蛋白沉淀析出。被盐析沉淀下来的蛋白质仍保持其天然性质,并能再度溶解而不变性。

3. 有机溶剂沉淀法

中性有机溶剂如乙醇、丙酮,它们的介电常数比水低。能使大多数球状蛋白质在水溶液中的溶解度降低,进而从溶液中沉淀出来,因此可用来沉淀蛋白质。此外,有机溶剂会破坏蛋白质表面的水化层,促使蛋白质分子变得不稳定而析出。由于有机溶剂会使蛋白质变性,使用该法时,要注意在低温下操作,选择合适的有机溶剂浓度。

(四)样品的进一步分离纯化

用等电点沉淀法、盐析法所得到的蛋白质一般含有其他蛋白质杂质,须进一步分离提纯才能得到有一定纯度的样品。常用的纯化方法有:凝胶过滤层析、离子交换纤维素层析、亲和层析等等。有时还需要这几种方法联合使用才能得到较高纯度的蛋白质样品。

Ⅳ 生物碱沉淀反应的条件

1. 生物碱的一般鉴定反应有哪几种

生物碱或生物碱的盐类水溶液,能与一些试剂生成不溶性沉淀。这种试剂称为生专物碱沉淀剂。此种沉淀属反应可用以鉴定或分离生物碱。常用的生物碱沉淀剂有:碘化汞钾(HgI2•2KI)试剂(与生物碱作用多生成黄色沉淀);碘化铋钾(BiI3•KI)试剂(与生物碱作用多生成黄褐色沉淀);碘试液、鞣酸试剂、苦味酸试剂、苦味酸试剂分别与生物碱作用,多生成棕色、白色、黄色沉淀。

2. 生物碱试剂沉淀蛋白质中加酸有什么作用

生物碱试剂本质就是酸类,它们一般均导致蛋白质变性.因为反应机理是 跟蛋白质侧链上阳性离子(如氨基等)发生酸碱成盐反应,而侧链氨基常参与蛋白质的高级结构或酶的活性中心,因此变性.(蛋白质盐是很大的分子,沉淀是很自然的)。
大多数生物碱在酸水或稀醇中能与某些试剂反应生成难溶于水的复盐或分子络合物,这些试剂称为生物碱沉淀试剂.
1.常用的生物碱沉淀试剂
碘化物复盐、重金属盐、大分子酸类等.常见的生物碱沉淀试剂有碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、碘化汞钾试剂等.
2.生物碱沉淀反应的条件
(1)反应环境
生物碱沉淀的反应一般在稀酸水溶液中进行.
(2)净化处理
共存的蛋白质、多肽、鞣质等成分,这些物质也能与生物碱沉淀试剂发生沉淀的反应.为了避免其干扰,可将酸水液经碱化后用氯仿萃取,除去水溶性干扰成分,然后用酸水从氯仿中萃取出生物碱,以此酸水液进行沉淀反应.
3.生物碱沉淀反应阳性结果的判断
(1)阳性结果判断
一般需选用三种以上的沉淀试剂进行反应,如果均有生物碱的沉淀反应,可判断为阳性结果.
(2)需要注意的问题
①少数生物碱不能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反应.如麻黄碱、咖啡碱与多数生物碱沉淀试剂不能发生沉淀反应.
②中药中有些非生物碱类物质也能与生物碱沉淀试剂产生沉淀的应,如蛋白质、多肽、氨基酸、鞣质等.
4.生物碱沉淀反应的应用
(1)检识反应
(2)指导生物碱的提取分离
(3)生物碱的分离纯化
(4)薄层或纸层色谱的显色剂

3. 能使生物碱发生沉淀反应的溶液性质

能使生物碱复发生沉淀反应的溶制液主要显酸性,如鞣酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸等,能使各类生物碱发生沉淀反应的的化学试剂叫做生物碱沉淀试剂,或直接称为生物碱试剂。
实际上生物碱大部分不溶于水或难溶于水,但生物碱的盐类却大多溶于水,只有少部分的生物碱盐不溶于水,生物碱沉淀试剂与各类生物碱发生反应所生成的盐就是少数不溶于水的盐。
如麻黄碱和伪麻黄碱多溶于水,他们的盐也多溶于水,不能和大多数生物碱沉淀试剂发生反应。
生物碱沉淀试剂可以是有机酸也可以是无机酸,他们的最主要的特征就是显酸性并能与大多生物碱发生反学反应生成沉淀。

4. 生物碱沉淀反应在天然药物化学中的应用有哪些

生物碱的沉淀抄反应:

1)常用沉袭淀试剂:碘化物复盐、重金属盐、大分子酸,其中碘化铋钾试剂最为常用。雷氏铵盐试剂可用于水溶性生物碱的分离。

2)反应条件:稀酸水溶液。

3)假阳性:蛋白质、多肽、鞣质等可引起假阳性,需净化。医学|教育网收集整理净化方法为酸水提取液碱化后氯仿萃取,氯仿萃取液再用酸水萃取,取酸水萃取液进行沉淀反应。

4)假阴性:麻黄碱、咖啡碱与多数生物碱沉淀试剂不能发生沉淀反应。

5)应用:生物碱预识;生物碱提取、分离、纯化;生物碱检识(薄层或纸层色谱显色剂)。

5. 生物碱的沉淀反应

大多数生物碱在酸水或稀醇中能与某些试剂反应生成难溶于水的复盐或分子络合物,这些试剂称为生物碱沉淀试剂。
1.常用的生物碱沉淀试剂
碘化物复盐、重金属盐、大分子酸类等。常见的生物碱沉淀试剂有碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、碘化汞钾试剂等。
2.生物碱沉淀反应的条件
(1)反应环境
生物碱沉淀的反应一般在稀酸水溶液中进行。
(2)净化处理
共存的蛋白质、多肽、鞣质等成分,这些物质也能与生物碱沉淀试剂发生沉淀的反应。为了避免其干扰,可将酸水液经碱化后用氯仿萃取,除去水溶性干扰成分,然后用酸水从氯仿中萃取出生物碱,以此酸水液进行沉淀反应。
3.生物碱沉淀反应阳性结果的判断
(1)阳性结果判断
一般需选用三种以上的沉淀试剂进行反应,如果均有生物碱的沉淀反应,可判断为阳性结果。
(2)需要注意的问题
①少数生物碱不能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反应。如麻黄碱、咖啡碱与多数生物碱沉淀试剂不能发生沉淀反应。
②中药中有些非生物碱类物质也能与生物碱沉淀试剂产生沉淀的应,如蛋白质、多肽、氨基酸、鞣质等。
4.生物碱沉淀反应的应用
(1)检识反应
(2)指导生物碱的提取分离
(3)生物碱的分离纯化
(4)薄层或纸层色谱的显色剂

6. 普鲁卡因什么机构生物碱的沉淀反应

物碱沉淀试剂:碘化汞钾试剂,碘化铋钾试剂,碘化钾碘试剂,硅钨酸试剂,磷钼酸试剂等
物碱用显色剂:碘化铋钾及改良碘化铋钾试剂

7. 生物碱的沉淀反应

//huas.cn:88/jys2007/UploadFiles/20071012143923124.ppt#257,1,

沉淀反应
全在这个网址里.
此外:
一种血清学反应。可溶性抗原与相应抗体结合,在有适量电介质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等。同相应抗体比较,抗原的分子小,单位体积内含有的抗原量多,做定量试验时,为了不使抗原过剩,应稀释抗原,并以抗原的稀释度作为沉淀反应的效价。习惯上将参与沉淀反应的抗原称为沉淀原,抗体称沉淀素。沉淀反应的实验方法大体可分为环状法、絮状法、琼脂扩散法三种基本类型。
沉淀反应
preclpltation
reaction
可溶性抗原与抗体结合,形成不溶性的、可以看见的沉淀物的过程。利用沉淀反应,曾提出各种有关抗原、抗体的定性或定量方法。最简单的方法是将抗血清放入细玻璃管内,将抗原液轻轻地加于其上,短时间(1—2分钟内)内便可在界面生成白色沉淀(环状试验)。又将抗原液同抗血清以最适当比例混合,用离心法收集沉淀物而测定其数量,由此可以测知抗体量或抗原量。沉淀反应在琼脂之类的凝胶内进行,可普遍应用于检查抗原或抗体的浓度及组成的目的。
蛋白质的沉淀反应
蛋白质由于水化膜的破坏造成的蛋白质凝集而沉淀。
常见的沉淀方法有:
1.
加高浓度盐类(盐析):加盐使蛋白质沉淀析出。
2.
加有机溶剂
3.
加重金属盐
4.
加生物碱试剂
希望对你有所帮助.加油!!

8. 生物碱下降的反应条件

生物碱下降的反应条件
大多数生物碱在酸水或稀醇中能与某些试剂反应生成难溶于水的复盐或分子络合物,这些试剂称为生物碱沉淀试剂.
1.常用的生物碱沉淀试剂
碘化物复盐、重金属盐、大分子酸类等.常见的生物碱沉淀试剂有碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、碘化汞钾试剂等.
2.生物碱沉淀反应的条件
(1)反应环境
生物碱沉淀的反应一般在稀酸水溶液中进行.
(2)净化处理
共存的蛋白质、多肽、鞣质等成分,这些物质也能与生物碱沉淀试剂发生沉淀的反应.为了避免其干扰,可将酸水液经碱化后用氯仿萃取,除去水溶性干扰成分,然后用酸水从氯仿中萃取出生物碱,以此酸水液进行沉淀反应.
3.生物碱沉淀反应阳性结果的判断
(1)阳性结果判断
一般需选用三种以上的沉淀试剂进行反应,如果均有生物碱的沉淀反应,可判断为阳性结果.
(2)需要注意的问题
①少数生物碱不能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反应.如麻黄碱、咖啡碱与多数生物碱沉淀试剂不能发生沉淀反应.
②中药中有些非生物碱类物质也能与生物碱沉淀试剂产生沉淀的应,如蛋白质、多肽、氨基酸、鞣质等.
4.生物碱沉淀反应的应用
(1)检识反应
(2)指导生物碱的提取分离
(3)生物碱的分离纯化
(4)薄层或纸层色谱的显色剂

9. 有碱性和与生物碱试剂发生沉淀反应是否意思一样

生物碱试剂沉淀蛋白质的原理:
植物体内具有显着生理作用的含氮碱性化合物回成为生物答碱。 能沉淀生物碱或与其产生颜色反应的物质称为生物碱试剂。 当溶液PH小于等电点时,蛋白质颗粒带正电荷, 容易与生物碱试剂的负离子发生反应而沉淀。

Ⅳ 常用的沉淀法

常用的有下列几种方法:

  1. 等电点沉淀法不同蛋白质的等电点不同,可用等电点沉淀法使它们相互分离。

2. 盐析法不同蛋白质盐析所需要的盐饱和度不同,所以可通过调节盐浓度将目的蛋白沉淀析出。被盐析沉淀下来的蛋白质仍保持其天然性质,并能再度溶解而不变性。

3. 有机溶剂沉淀法中性有机溶剂如乙醇、丙酮,它们的介电常数比水低。能使大多数球状蛋白质在水溶液中的溶解度降低,进而从溶液中沉淀出来,因此可用来沉淀蛋白质。此外,有机溶剂会破坏蛋白质表面的水化层,促使蛋白质分子变得不稳定而析出。由于有机溶剂会使蛋白质变性,使用该法时,要注意在低温下操作,选择合适的有机溶剂浓度。

Ⅵ 常见的化学沉淀方法

常见的化学沉淀方法

化学沉淀是只投加化学剂,使水中需要去除的溶解物质转化为难溶物质而析出的水处理方法,那么常见的化学沉淀方法有哪些呢?

1化学沉淀的基本原理

化学沉淀法指的是向工业废水中投加某种化学物质,使其和废水中溶解物质发生反应并生成难溶盐沉淀,从而去除废水中该溶解性

物质的方法。

可以用于处理含金属离子和某些阴离子的工业废水。

一般采用氢氧化物、硫化物和碳酸盐等作为沉淀剂。

2氢氧化物沉淀法

大多数金属的氢氧化物在水中的溶度积很小,因此可以利用向水中投加某种化学药剂使水中金属阳离子生成氢氧化物沉淀而被去除。氢氧化物沉淀法最经济的化学药剂是石灰,一般适用于不准备回收重金属的低浓度废水处理。

例如:某矿山废水含铜83.4mg/L,总铁1260 mg/L,二价铁10 mg/L,pH值为2.23,沉淀剂采用石灰乳,其处理过程为:废水与石灰乳在混合池内混合后进入一级沉淀池,控制,使铁先沉淀,然后加入石灰乳,控制pH值7.5~8.5范围,使铜沉淀。废水经二级化学沉淀后,出水可达到排放标准,沉淀过程中产生的铁渣和铜渣可回收利用。

3硫化物沉淀法

许多金属能形成硫化物沉淀,大多数金属硫化物的溶解度一般比其氢氧化物的要小很多,采用硫化物作沉淀剂可使废水中的'金属得到更完全地去除。但是,由于硫化物沉淀法处理费用较高,且硫化物固液分离困难,常需投加凝聚剂,因此,此法的应用不太广泛,有时作为氢氧化物沉淀法的补充法。常用沉淀剂为硫化氢、硫化钠和硫化钾等。

4碳酸盐沉淀法

锌和铅等金属离子的碳酸盐的溶度积较小,可投加碳酸钠到高浓度的含锌或含铅废水中,形成锌或铅的碳酸盐沉淀,从而回收重金属。

5其他沉淀处理法

钡盐沉淀法主要用于含六价铬的废水处理,而铁氧体沉淀法则用于金属废水的处理与回收利用,其原理是向废水中投加适量的硫酸亚铁,加碱中和后,通入热空气使废水中各种金属离子形成具有磁性的复合金属的氧化物,即铁氧体,其特点是易沉淀分离。

6化学沉淀法处理废水

⑴碱性锌酸盐镀锌废水处理

碱性锌酸盐镀锌工艺应用比较广泛。锌的氢氧化物兼有弱碱性和弱酸性,氢氧化锌不溶于水,但由于呈两性,在强酸或强碱中都能溶解。

其处理工艺为:在反应池中用硫酸将废水的pH值调8.5~9.0,废水的锌很快转化为氢氧化锌白色沉淀,而分离出的氢氧化锌再遇到氢氧化钠溶液又溶解,可返回到镀槽再利用。

⑵硫化物沉淀法处理重金属废水

例如某化工厂需去除所排废液中的铅和镉污染,将含铅和镉废水调至微酸性,以符合质量要求的硫化锰固体为沉淀剂,通过反应生硫化铅和硫化镉沉淀,用过滤法去除沉淀物后,将滤液蒸发和结晶,可获得工厂制备氯化锰和硫酸锰的原料。

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Ⅶ 常用的沉淀方法有哪些

沉淀法,是指由于表面扩散脱氧法速度慢,故实际生产中使用并不广泛,而常使用沉淀脱氧法。这种方法用磷、锂作为脱氧剂,脱氧反应在整个熔池内进行,所以反应速度快。缺点是脱氧剂可能会残留在合金液体中,影响合金的性能。
沉淀法,是包括制造固体催化剂的方法之一、水彩画的特殊技法和溶剂萃取的方法。沉淀法,在水处理中,是利用水中悬浮颗粒的可沉降性能,在重力作用下产生下沉作用,以达到固液分离的一种过程。

催化剂方法
把沉淀剂加入到盐溶液中反应后,将沉淀热处理得到纳米材料。其特点简单易行,但纯度低,颗粒半径大,适合制备氧化物。
特殊技法
.水彩画的特殊技法,水彩画颜色中有些颜色干后会产生沉淀,这就需要在上色时,水份 要充足,让颜色中的小颗粒流动后沉淀在纸面上。这种方法颜色淡容易出效果。如: 深蓝、赭石等颜色。
溶剂萃取法
介绍
最常用的是铅盐法,可以用于除去杂质,也可用于沉淀有效成分。
沉淀法通常是在溶液状态下将不同化学成分的物质混合,在混合液中加人适当的沉淀剂制备前驱体沉淀物,再将沉淀物进行干燥或锻烧,从而制得相应的粉体颗粒.
铅盐法是利用中性醋酸铅或醋酸铅在水或稀醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐,而用于中药成分。中性醋酸铅可以沉淀有机酸、蛋白质、氨基酸、粘液质、鞣质、酸性皂甙、树脂、部分黄酮甙和花色甙等。碱式醋酸铅沉淀范围更广,除了述被中性醋酸铅沉淀的物质外,还可以沉淀某些中性皂甙、异黄酮甙、糖类和一些碱性较弱的生物碱等。通常将铅盐沉淀滤出,然后将沉淀悬于水或稀醇中,通硫化氢气体或硫酸钠等试剂进行脱铅,即可回收提取物。
铅盐沉淀法
铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一。由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中,能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀,故可利用这种性质使有效成分与杂质分离。中性醋酸铅可与酸性物质或某些酚性物质结合成不溶性铅盐。因此,常用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白质、粘液质、鞣质、树脂、酸性皂甙、部分黄酮等。可与碱式醋酸铅产生不溶性铅盐或络合物的范围更广。通常将中草药的水或醇提取液先加入醋酸铅浓溶液,静置后滤出沉淀,并将沉淀洗液并入滤液,于滤液中加碱式醋酸铅饱和溶液至不发生沉淀为止,这样就可得到醋酸铅沉淀物、碱式醋酸铅沉淀物及母液三部分。然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中,通以硫化氢气体,使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀。含铅盐母液亦须先如法脱铅处理,再浓缩精制。硫化氢脱铅比较彻底,但溶液中可能存有多余的硫化氢,必须先通人空气或二氧化碳让气泡考试,大收集整理带出多余的硫化氢气体,以免在处理溶液时参与化学反应。新生态的硫化铅多为胶体沉淀,能吸咐药液中的有效成分,要注意用溶剂处理收回。脱铅方法,也可用硫酸、磷酸、硫酸钠、磷酸钠等除铅,但硫酸铅、磷酸铅在水中仍有一定的溶解度,除铅不彻底。用阳离子交换树脂脱铅快而彻底,但要注意药液中某些有效成分也可能被交换上去,同时脱铅树脂再生也较困难。还应注意脱铅后溶液酸度增加,有时需中和后再处理溶液,有时可用新制备的氢氧化铅、氢氧化铝、氢氧化铜或碳酸铅、明矾等代替醋酸铅、碱式醋酸铅。例如在黄芩水煎液中加入明矾溶液,
黄芩甙就与铝盐络合生成难溶于水的络化物而与杂质分离,这种络化物经用水洗净就可直接供药用。
试剂沉淀法
例如在生物碱盐的溶液中,加入某些生物碱沉淀试剂(见生物碱性质下),则生物碱生成不溶性复盐而析出。水溶性生物碱难以用萃取法提取分出,常加入雷氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉淀析出。又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、甘草皂甙均易溶于碱性溶液,当加入酸后可使之沉淀析出。某些蛋白质溶液,可以变更溶液的值利用其在等电点时溶解度最小的性质而使之沉淀析出。此外,还可以用明胶、蛋白溶液沉淀鞣质;胆甾醇也常用以沉淀洋地黄皂甙等。可根据中草药有效成分和杂质的性质,适当选用。

Ⅷ 天然药物化学题 请写出用酸溶碱沉淀法提取、分离生物碱的工艺流程并说明其原理

生物碱大多与有机酸结合成盐的形式存在于生物体中,但也有个别生物碱是与无机酸结合成盐,如黄连中的小檗碱是与盐酸结合成盐。少数生物碱因碱性很弱而为游离状态或与糖结合成甙的形式而存在。所以生物碱的主要存在形式应该是盐类,生物碱pH梯度萃取法的原理是根据不同物质在不同pH下析出沉淀的原理来提纯所需物质 。 pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。分离碱性强弱不同的游离生物碱,可用pH由高至低的酸性缓冲溶液顺次萃取,使碱性由强到弱的生物碱分别萃取出来。

Ⅸ 常用蛋白质沉淀方法有哪些有哪些应用实例

1、盐析法:此方法并未破坏蛋白质天然状态,沉淀出的蛋白质可不变性,所以盐析法是分离制备蛋白质或蛋白类生物制剂的常用方法2、有机溶剂沉淀法:通过破坏蛋白质的水化膜而使蛋白质沉淀,此方法在常温下可使蛋白质变性,低温下可使变性速度减慢3、重金属盐沉淀法:可与蛋白质结合形成不溶于水的蛋白质沉淀,引起蛋白质变性。

Ⅹ 常用的沉淀法有哪几种

等电点沉淀法和盐析
一、等电点沉淀法
等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。
在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。
等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从而有利于悬浮液的过滤。
二、盐析
盐析是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐,可以使蛋白质性质发生改变而凝聚,进而从溶液中析出,这种作用叫作变性,性质改变,是化学反应,无法复原。
把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定比例放在皂化锅内搅拌加热,反应后形成的高级脂肪酸钠、甘油、水形成混合物(胶体)。往锅内加入食盐颗粒,搅拌、静置,使高级脂肪酸钠与甘油、水分离,浮在液面。
(10)常用的沉淀方法天然药物扩展阅读:
蛋白质的变性
1、物理因素包括:加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、X射线、超声波等
2、化学因素包括:强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。
3、在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作作用下,蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来。这种凝结是不可逆的,不能再使它们恢复成原来的蛋白质.蛋白质的这种变化叫做变性。蛋白质变性之后,紫外吸收,化学活性以及粘度都会上升,变得容易水解,但溶解度会下降。
4、蛋白质变性后,就失去了原有的可溶性,也就失去了它们生理上的作用,因此蛋白质的变性凝固是个不可逆过程。

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