固定化酵母的常用方法

❶ 固定化酵母细胞发酵为什么要无氧

（1）微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故整个过程中要严格进行无菌操作．
（2）酵母菌无氧呼吸产生酒精，制作葡萄酒时，酵母菌来自于附着在葡萄皮上的野生型酵母菌．
（3）酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉这四种微生物中，只有酵母菌是兼性厌氧性生物（既能进行有氧呼吸也能进行无氧呼吸），故要分离到较纯的酵母菌，可直接提供无氧环境进行分离．
（4）制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是海藻酸钠，使用方法如图③．
（5）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的由于不能进入凝胶通道而移动速度快，最先分离出来，使用电泳法分酶，影响酶电泳速度的因素有带电多少、带电性质、电压的大小、分子的大小和形状等．
故答案为：（1）无菌
（2）附着在葡萄皮上的野生型酵母菌
（3）无氧
（4）海藻酸钠
③
（5）相对分子质量的大小
大
带电多少、带电性质、电压的大小、分子的大小和形状等

❷ 固定化酵母在燃料乙醇发酵中的应用有哪些

固定化细胞发酵技术有许多突出的优点:由于它大大增加了细胞浓度,增强了菌体对外部条件如温度和酸碱度的抵抗能力;缩短了发酵周期,提高反应器单位体积的生物转化速率;而且由于细胞被固定,减少了细胞流失,细胞可长时间反复使用,并有利于产物分离等。这为发酵的连续化和规模化提供了方便。
目前固定化细胞技术己经在食品工业、环境保护、能源开发等方面得到广泛的应用 。
酒精酵母细胞固定化大部分采用海藻酸钠、聚乙烯醇( PVA) 等包埋法,但存在成本较高、固定化过程较繁琐且对细胞有损伤,载体软化现象等缺点。
探索新的固定化载体和固定化方式,营造更适合细胞生长和代谢的环境是固定化技术发展的方向。各种天然材料,如水果块、麸皮、去木质素的纤维素残渣,都曾作为固定化载体被成功应用于酿酒和乳清发酵等食品相关工业。
利用甘蔗茎块中天然的细胞纤维间隙和纤维素自身对酵母的吸附作用,有利于酵母吸附并在其
内部生长的特点，制备固定化酵母，利用其发酵甘蔗汁生产酒精。

❸ 固定化酵母菌的操作过程

大概的回忆，没有数据
海藻酸钠固定酵母细胞
一、准备
1.对于要用到的酵母前一天活化。（！）
2.用到的针筒、烧杯、玻棒等，事先灭菌。
二、操作
1.配海藻酸钠，称量，溶解，小火持续（！），或大火间断（！）。
2.配氯化钙溶液。
3.冷却至略温（！）（摸摸杯壁可知），加入活化的酵母液，搅拌。
4.用去掉针头的针筒吸。稀的海藻酸钠要加针头注射，浓的不用。
5.在离液面十来公分注射。
6.静置一段时间。（！）
三、结果
1.把海藻酸钠小球取出，蒸馏水反复冲洗。（！）
2.把小球放在葡萄糖溶液中，观察结果。
以下是网上的资料
《酵母细胞的固定化》教学设计
XX第一中学
XXX
20XX年X月XX日
XX:XX
一、实验原理
固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或者细胞固定在一定空间的技术，包括包埋法，化学结合法（将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上）和物理吸附法固定化，细胞多采用包埋法固定化。因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中露出。
常用的包埋载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维和聚丙烯酰胺等。本实验选用海藻酸钠作为载体包埋酵母菌细胞。
二、实验目的
1.了解细胞固定化的原理；
2.掌握酵母细胞固定化实验操作。
三、仪器与用具
水浴锅，20ml注射器，烧杯，三角瓶，玻璃棒，酵母悬液，海藻酸钠，无水氯化钙，葡萄糖
三、试剂配制
CaCl2溶液：称取0.83g无水氯化钙加150ml水溶解待用；
海藻酸钠溶液：称取0.7g海藻酸钠加入10ml水加热溶液成糊状；
10%葡萄糖溶液：称取15g葡萄糖溶液溶于150ml水中。
四、实验方法与步骤
1.海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已经活化的酵母细胞，用玻璃棒充分搅拌混合均匀。
2.固定化酵母细胞：用20ml注射器吸取海藻酸钠与酵母细胞混合液，在恒定的高度（建议距液面12~15cm处，过低凝胶珠形状不规则，过高液体容易飞溅），缓慢将混合液滴加到CaCl2中，观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min
左右使其充分固定。
3.固定化酵母细胞发酵：用5ml移液器吸取蒸馏水冲洗固定好的凝胶珠2~3次，然后加入装有150ml10%葡萄糖溶液的三角瓶中，置于25℃发酵24h，观察结果。
实验开始时，凝胶球是沉在烧杯底部，24h后，凝胶球浮在溶液悬浮在上层，而且可以观察到凝胶球并不断产生气泡，说明固定化的酵母细胞正在利用溶液中的葡萄糖产生酒精和二氧化碳，结果凝胶球内包含的二氧化碳气泡使凝胶球悬浮于溶液上层。

❹ 制备固定化酵母细胞的5大步骤

1、活化酵母细胞；2、通入氨气、3、配制海藻酸钠溶液、4、混合酵母培养液和海藻酸钠溶液；5、滴加氯化钙

❺ 酵母细胞的固定采用方法

酵母细胞的固定采用方法一般是包埋法。是将酶或细胞包埋在能固化的载体中。如将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中，或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中，前者包埋成格子型，后者包埋成微胶囊型。包埋法常用于微生物、动物和植物细胞的固定化。凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定化方法。

包埋法的原理是将微生物细胞截流在水不溶性的凝胶聚合物孔隙的网络空间中。通过聚合作用或者离子网络形成，或通过沉淀作用，或改变溶剂、温度、pH值使细胞截流。凝胶聚合物的网络可以阻止细胞的泄漏，同时能让基质渗入和产物扩散出来。包埋法操作简单，对细胞活性影响较小，制作的固定化细胞球的强度高，目前工业应用上以凝胶包埋法固定细胞最为广泛。

❻ 固定化酵母细胞中氯化钙的配制可以用无菌水吗

可以，无菌水和蒸馏水都可以用。
无菌水则通常是指通过物理方法对含有菌团的水进行处理而得到不含细菌的水。如蒸汽法、UHT热法、紫外线杀菌、臭氧方法和物理过滤法，将水中微生物杀死并过滤而得到的水，水中的无机盐等一般来说不会减少。无菌水是用冷水热开后冷却经过高温杀菌制作的，适合密封无菌保存。蒸馏水是热水烧开后的蒸气形成的水滴形式（也基本无菌，比无菌水容易制作且好取制，量少）。制备方法：其一是采用UHT热法制备，这种方法常用于无菌灌装的包材冲洗；其二是采用化学法制备，如添加二氧化氯、次氯酸等，这种方法常用于热灌装的包材冲洗；其三是采用臭氧方法制备，这种方法用于在瓶装水的冲洗。

❼ 海藻酸钠固定酵母细胞是什么方法

包埋法
防止海藻酸钠焦糊
冷却