手术室灭菌常用方法

1. 手术室消毒分哪几种

为了保障环境的清新和洁净，手术室的消毒方法有以下几种，人和净化为您介绍。空气消毒方法有物理消毒法和化学消毒法。1）物理消毒法包括紫外线、层流式通风过滤除菌等；2）化学消毒法包括乳酸、甲醛等熏蒸法。紫外线、乳酸、甲醛等临床上常用的传统消毒方法。

2. 手术室常用的灭菌方法有那些

（1）加热灭菌法

利用高温来杀死微生物（超过最高生长温度）的方法。加热灭菌的原理：当高温作用于微生物时，首先引起细胞内生理生化反应速率加快，机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等，随着温度的增高而遭受不可逆的破坏，尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏，从而使细胞失去了生活机能上的协调，停止了生长发育。随着高温的继续作用，细胞内原生质便发生凝固，酶结构完全破坏，活动消失，生化反应停止，渗透交换等新陈代谢活动消失，细胞死亡。加热灭菌可分干热灭菌和湿热灭菌两大类。

1）干热灭菌 利用灼烧或干热空气灭菌而没有饱和水蒸气参加的灭菌法称为干热灭菌法。由于干热灭菌使用方便，方法简单，故在生产上广泛应用。如火焰灭菌法：直接利用火焰把微生物烧死，故又称焚烧灭菌法。采用此法灭菌既彻底又迅速，但只适用于金属制的接种工具、试管口及污染物品等的处理。热空气灭菌法：即在电热恒温干燥箱中利用干热空气来灭菌。

2）湿热灭菌 即利用蒸汽进行灭菌的方法。湿热灭菌又分为高压、常压、间歇灭菌和巴氏灭菌4种。

①高压蒸汽灭菌 由于高压蒸汽具有较强的穿透力和较常压高的温度，能大大缩短灭菌时间，提高工作效率，加之蛋白质在湿热条件下容易变性，在热蒸汽条件下，细菌的芽孢在120℃，经20～30分钟可全部被杀死。如灭菌材料体积较大，不易被穿透时，可将压力增加到0.152兆帕，延长至1～2小时。在高压蒸汽灭菌中，灭菌温度随蒸汽压力的增加而升高（图2-6）。

图2-7 简易常压灭菌法

③常压间歇蒸汽灭菌法 这是利用常压蒸汽反复几次灭菌的方法。具体做法是将待灭菌物品放在锅内，100℃处理1小时左右，杀死微生物的营养细胞，让其冷却至30℃左右，此时芽胞会萌发，再以同样方法加热处理，反复3次，可达到灭菌目的。该方法可用于不耐高温的药品、营养物、特殊培养基的灭菌。

④低温巴氏灭菌法 即在60～70℃下，经一定时间，杀死有害微生物的方法。适应于不耐高温的物品消毒。有些培养基，在高温下遭到破坏，用此法既可杀死致病微生物的营养体，又能使培养基的成分不致受到严重破坏。食用菌生产中培养料堆积发酵工艺，就是利用这个原理杀死其中的病虫、杂菌。

（2）过滤除菌法

又分液体过滤和空气过滤两种，就是采用机械的方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器，通过机械过滤，只让液体培养基或空气从筛孔流出，各种微生物菌体则留在筛子上，从而达到除菌的目的。这种方法适用于对热不稳定的体积小的液体培养基（如动物血清、蛋白质、酶、维生素等）及气体的灭菌。超净工作台的工作原理就是将带菌空气通过过滤灭菌形成无菌空气，从风洞中吹出，来造成工作台范围的无菌状态。过滤灭菌的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。常用的过滤器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的，也有用火棉胶、硝化纤维素滤膜制成的。

（3）辐射灭菌法

利用辐射产生的能量进行杀菌的方法称辐射灭菌。辐射可分电离辐射和非电离辐射两种，α-射线、β-射线、γ-射线、X-射线、中子和质子、微波等属电离辐射，紫外线、臭氧、日光为非电离辐射。

1）紫外线灭菌 紫外线杀菌的原理是利用紫外线的辐射作用。用灯管直接照射细菌使其发生光化学反应，将细菌细胞质诱导形成胸腺嘧啶双聚体，从而抑制DNA的复制而发生变性、致死。另一方面，空气在紫外线照射下产生的臭氧（O₃），也具有一定的杀菌作用。紫外线的有效作用距离为1.2～2.0米。紫外灯一般悬吊在接种室或培养室的上方，个数依房间大小而定，容1～2个人操作的接种室，安装一个30瓦的紫外灯就可以了。在每次接种前，应将所需的器具一起放入接种室（箱）内，然后打开紫外灯照射。如果接种室体积较大，开灯照射2小时才能达到灭菌效果；如果较小，只需开灯半小时左右既可达到灭菌效果。由于紫外线穿透力弱，即使是普通玻璃也不能滤过，因此，只适于空气或物体表面的灭菌。紫外线对人体皮肤，尤其是眼睛有杀伤作用，应避免直视，工作时应将紫外灯关闭。紫外线消毒时工作场所如果处在稍暗无光的情况下，能提高杀菌效果。细菌接受致死量紫外线照射后，随即给予可见光照射，部分细菌有复活的可能。干细胞比湿细胞对紫外线的抗性强，孢子比其营养细胞对紫外线更具抗性。

2）微波灭菌 由于微生物的细胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波电场中被极化，并随着电场方向的改变而转动，在转动过程中分子之间高速度摩擦产生热能，这种热能不同于外部加热，可在短时间里使细胞爆破而物体本身的温度却只有极微增加，从而达到灭菌效果。用YM7601型微波炉只需60秒钟就能杀死食品中192万个大肠杆菌。

3）臭氧发生器消毒 臭氧（O₃）具有强烈的氧化作用，能破坏微生物的细胞膜与核酸。O₃也是一种暂态物质，常温下能自然分解，还原成氧。其灭菌原理实际上和紫外线消毒极相似。

3. 手术室常用的消毒方法有哪些

1.紫外线照射灭菌
紫外线主要适用于空气的消毒，此外用于空调导管等物体表面的消毒。
常用低压型汞灯，发射波长253.7nm的紫外线。消毒房间照射剂量（所需灯数及功率），应根据室内容积和距灯管的远近计算，平均照射剂量为1w/m3，照射时间为30一60分钟，每日2-3次，如30 m3的房间，可用一支30W的紫外线灯，距离光源60一100cm内灭菌效果较好。
应定期对消毒装置进行检测，常用方法有：①ZnSiO3，荧光法：距紫外线20cm处放置荧光粉（ZnSiO3），若呈亮苹果绿色为良好，不变色为无效;②紫外线辐射仪测定：如不低于标准灯的60%可继续使用;③平皿培养对比法：照射5分钟，培养24小时（37℃），若杀菌率在90%以上可以使用。照射环境，要求室温以10℃一25℃为宜，湿度在40%一50%杀菌力最强。空气的洁净度及灯管表面的尘埃均可影响消毒效果。此外，紫外线照射可引起眼结膜炎、皮炎，照射时工作人员或病人应离开室内或采取防护措施。
2.乳酸熏蒸消毒
消毒前地面喷洒少量清水，紧闭门窗。按每100m2空间用80%乳酸12ml，加等量水，倒入容器内，下置酒精灯加温，待药液蒸发完后将火熄灭，封闭30一60分钟，再打开通风。适用于普通手术后的消毒。
3.甲醛、高锰酸钾消毒
按室内容积计算用量，40%甲醛（福尔马林）12mL/m3、高锰酸钾1g。房间相对湿度应在60%以上，室温在18℃以上。先将高锰酸钾置于容器内，再倒入甲醛溶液，即沸腾产生甲醛蒸气，封闭6-12小时，再开窗通风。适用于破伤风、气性坏疽等特殊感染手术后的消毒。
4.过氧乙酸熏蒸法
20%，过氧乙酸3.75ml/m3，置于耐热容器中，加热蒸发，室温应超过18℃，密闭l一2小时。用于手术室空气消毒。
手术室墙壁、门窗、地面、手术台的消毒常用化学消毒剂，如用2%一3%来苏儿（煤酚皂）溶液喷洒、擦洗，5%过氧乙酸2.5mL/m3喷雾，0.05%一0.1%新洁尔灭或洗必泰溶液喷雾、擦拭等。

4. 临床上常用的消毒法和灭菌法有哪些

常见的化学消毒灭菌法如下：
（1）浸泡法
选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂，将物品浸没于消毒剂内，在标准的浓度和时间内，达到消毒灭菌目的。
（2）擦拭法
选用易溶于水、穿透性强的消毒剂，擦拭物品表面，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
（3）薰蒸法
加热或加入氧化剂，使消毒剂呈气体，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品（血压计、听诊器以及传染病人用过的票证等），均可用此法消毒。
①纯乳酸
常用于手术室和病室空气消毒。每100m2空间用乳酸12ml加等量水，放入治疗碗内，密闭门窗，加热熏蒸，待蒸发完毕，移去热源，继续封闭2小时，随后开窗通风换气。
②食醋
5－10ml/m3加热水1－2m3，闭门加热熏蒸到食醋蒸发完为止。因食醋含5%醋酸可改变细菌酸碱环境而有抑菌作用，对流感、流脑病室的空气可进行消毒。
此外，尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌。
（4）喷雾法借助普通喷雾器或气溶胶喷雾器，使消毒剂产生微粒气雾弥散在空间，进行空气和物品表面的消毒。如用1%漂白粉澄清液或0.2%过氧乙酸溶液作空气喷雾。对细菌芽胞污染的表面，每立方米喷雾2%过氧乙酸溶液8ml经30分钟（在18℃以上的室温下），可达99.9%杀灭率。
（5）环氧乙烷气体密闭消毒法将环氧乙烷气体置于密闭容器内，在标准的浓度、湿度和时间内达到消毒灭菌目的。
环氧乙烷是广谱气体杀菌剂，能杀灭细菌繁殖体及芽胞，以及真菌和病毒等。穿透力强，对大多数物品无损害，消毒后可迅速挥发，特别适用于不耐高热和温热的物品，如精密器械、电子仪器、光学仪器、心肺机、起博器、书籍文件等，均无损害和腐蚀等副作用。本品沸点为10.8℃，只能灌装于耐压金属罐或特制安瓿中。
操作方法：灭菌可用柜室法或丁基橡胶袋法。
①柜室法可在环氧乙烷灭菌柜内进行。将物品放入柜室内，关闭柜门，预温加热至40－60℃，抽真空至21kpa左右，通入环氧乙烷，用量1kg/m3，在最适相对温度（60－80%）情况下作用6－12小时。灭菌完毕后排气打开柜门，取出物品。
②丁基橡胶袋法在特制的袋内进行。将物品放入袋内，挤出空气，扎紧袋口。环氧乙烷给药可事先放安瓿于袋内，扎紧袋口后打碎，使其气体扩散；亦可将钢瓶放在40－50℃温水中气化后与袋底部胶管相通，使气体迅速进入，用药量为2.5g/l.将橡胶袋底部通气口关闭，放入20－30℃室温中放置8－24小时。
注意事项：
①环氧乙烷应存放在阴凉、通风、无火源、无电开关处。用时轻取轻放，勿猛烈碰撞。②消毒时，应注意环境的相对湿度和温度。钢瓶需加温时，热水不可超过70℃。③消毒容器不能漏气（检测有无漏气，可用浸有硫代硫酸钠指示剂的滤纸片贴于可疑部位。如有漏气，滤纸片由白色变粉红色）。袋内物品放置不宜过紧。④环氧乙烷有一定吸附作用，消毒后的物品，应放置在通风环境，待气体散发后再使用。⑤本品液体对皮肤、眼及粘膜刺激性强，如有接触，立即用水冲洗。⑥在环氧乙烷消毒的操作过程中，如有头昏头痛等中毒症状时，应立即离开现场，至通风良好处休息。

5. 手术室消毒分哪几种

根据消毒目的，消毒一般分为预防性消毒和疫源地消毒。预防性消毒是指在未发现传染源情况下，对可能被病原体污染的物品、场所等进行消毒。蛋鸭场日常对场地、设备、饮水等进行的定期消毒就是预防性消毒。疫源地消毒是指对存在或曾经存在污染源的场所和被污染的物品等进行消毒以杀灭由污染源排出的病原微生物。疫源地消毒又分为随时消毒和终末消毒。随时消毒又叫紧急消毒、临时消毒，是指在发生疫病时及时杀灭并消除由污染源排出的病原微生物而随时进行的消毒。消毒的对象包括病禽分泌物、排泄物、污染物等，通常在解除封锁前进行多次定期消毒，对场所每天随时消毒，具有多次和重复的特点。终末消毒是指传染源离开后进行一次全面彻底的最后消毒，及时杀灭或清除污染源留下来的病原微生物，是切断传播途径的重要措施之一。终末消毒原则上只消毒一次，与随时消毒相比，应考虑加大消毒剂的浓度、剂量，以达到彻底杀灭病原体的目的。

6. 手术室空气消毒几种方法的比较

一、空气消毒的方法

1、空气消毒剂消毒：

手术室空气消毒建议用微酸性次氯酸消毒剂，该类型消毒剂可以在有人的情况下进行消毒，而且不会对医疗器械进行腐蚀。建议选择“CELA水”，30年日本大品牌底蕴，可以带人消毒无需特意通风换气。

医学研究表明，健康人的口腔环境pH值为6.20~6.80之间，充分体现了人体长期使用的消毒产品pH值不能低于6.20，pH值低于6.20对粘膜和皮肤会有损坏；pH值高于6.80则杀菌效果严重下降，甚至无效。CELA非电解微酸性次氯酸水pH值模仿人体口腔环境，无刺激，无副作用，确保了长期使用的安全性。

手术室空气消毒套装

（次氯酸是人体免疫系统核心杀菌物质--由人体血液白血球中噬中性球生成的有效杀菌物质之一，当细菌侵入人体内或表皮受损时，白血球会开始作用抵抗外来细菌与病毒，此时白血球就会分泌次氯酸，专门破坏细菌与病毒的细胞壁，让细菌与病毒无法生存，由于与人体机能相同，就是所谓的生物相容性，不具伤害性。并具有杀菌广谱、杀灭力强、安全性高，环保性好、温和便捷等优点。

人和动物是真核细胞生物，酶系多藏于细胞的胞器内，次氯酸无法直接接触到,并且次氯酸在杀菌过程是透过氧化来瓦解细菌和其他微生物,其生成物是水、氯化钠(盐)、有机糖和微量的二氧化碳等无毒物质，因此，具有无残留、无毒害的特色。）

2、集中空调系统消毒。

利用风机、制冷、制热、除湿、净化等，调节室内的温度、湿度、空气清洁度、新鲜度与气流速度，是空调系统与室内空气中的微生物浓度将至安全限值以内。暂时不提倡这种方法，因为疫情原因，空调会导致交叉感染。

3、紫外线灯消毒。

室内被阳光完全照射到的几率很小，但是紫外线达到一定的波长是由杀菌杀毒的作用的。现在有一种移动紫外线灯，在室内可以进行，但是不是很方便，因为太强的紫外线对人体并不好，还会产生辐射，紫外线还会对加速一些设备的老化。

4、臭氧层发生器消毒。

臭氧的消毒原理是依靠它的强氧化性，通过这样的氧化作用破坏病毒与细菌的细胞结构。臭氧对室内空气微生物有较好的消毒作用，能去除气味，方法简单。但是臭氧对金属有腐蚀作用，对人有一定毒性，消毒时做好防护，最好是离开房间，消毒后直至房间内闻不到臭氧的气味才可以进入房间。

7. 常用的灭菌方法有哪些

常用的灭菌方法有哪些?
微生物学实验常用的灭菌方法有哪些一般分为溼热灭菌法和干热灭菌法两种。
一、溼热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是最常用的灭菌方法。溼热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。
（1）煮沸灭菌法：将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈。此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。
（2）巴氏消毒法：一种低温消毒法，因巴斯德首创而得名。有两种具体方法，一是低温维持法：62摄氏度维持30分钟；二是高温瞬时法：75摄氏度作用15-30秒。该法适用于食品的消毒。
（3）流通蒸气灭菌法：利用常压下的流通蒸汽进行灭菌。
（4）间歇蒸汽灭菌法
（5）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度，维持15-20分钟。
二、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。
（1）火焰灭菌法：是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等）物品与用具的灭菌，不适合药品的灭菌。
（2）干热空气灭菌法：是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许溼热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。
临床上常用的灭菌的方法有哪些？一、物理方法
1、温度
利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1）干热灭菌法:
a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2）溼热灭菌法:
在同样的温度下，溼热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做恭完全无菌。若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是：将待灭菌的物品加热至100°C，15~30分钟，杀死其中的营养体。然后冷却，放入37°C恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。
d.加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌，也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。
加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121°C。在这种情况下，微生物（包括芽孢）在15~20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间。
在加压蒸汽灭菌中，要引起注意的一个问题是，在恒压之前，一定要排尽灭菌锅中的冷空气，否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系，这样会大大降低灭菌效果。
3）影响灭菌的因素
a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同。多数微生物的营养体和病毒在50~65°C，10分钟就会被杀死；但各种孢子、特别是芽孢最能抗热，其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌，要在121°C，12分钟才被杀死。对同种微生物来讲，幼龄菌比老龄菌对热更敏感。
b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果，数量越多，热死时间越长。
c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果。一般地讲，蛋白质、糖或脂肪存在，则提高抗热性，pH在7附近，抗热性最强，偏向两极，则抗热能力下降，而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响；固体培养基要比液体培养基灭菌时间长。
4）灭菌对培养基成分的影响
a.pH值普遍下降。
b.产生混浊或沉淀，这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或......
什么叫灭菌？灭菌方法有哪几种灭菌的定义：
灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。
微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。
将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞（或孢子）杀灭或去除，从而达到无菌的过程。
常用的灭菌方法：
热灭菌法
热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、溼热和间歇加热灭菌等法。
干热灭菌
火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧（incineration或bustion）是一种最彻底的干热灭菌法，应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。
溼热灭菌以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。
巴氏消毒法：因最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒，故名。这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法。
巴氏灭菌法就是溼热灭菌，此法有两种方式[1]，①经典的低温维持法（lowtemperatureholdingmethod，LTH）：在61.7～62.8℃下处理30分钟；②较现代的高温瞬时法（hightemperatureshorttime或flushpoint，HTST）：在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中，以蒸气加压灭菌效果最好，可用常压蒸气灭菌，也可在高压蒸气锅中（一般使用1千克/厘米2）灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。但对某些易被高压破坏的物质，如某些糖或有机含氮化合物，宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15～30分钟。
煮沸消毒法：采用在100℃下煮沸数分钟的方法，一般用于饮用水的消毒。
间歇灭菌
间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。
辐射灭菌
辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射（射线加快中子等）。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。
渗透压灭菌
渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离，不能进行正常的新陈代谢，结果导致微生物的死亡。
化学试剂灭菌
大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。
化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物（磺胺类等）、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物，他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物（包括病原菌，病毒，癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂。...
医疗器械常用的灭菌方式有哪些？医疗器械灭菌工艺的验证方法就是与菌过程的相适应性，一般的灭菌方式包括以下：
1、溼热灭菌：
溼热灭菌是将产品放在压力锅内，利用饱和蒸汽在最小温度为1210C的压力下，热力和溼气被迅速传递给灭菌产品，灭菌时间至少15min。蒸汽潜热大，可迅速提高物体的温度，水分子穿透力强，容易使蛋白质凝固变性，所以溼热灭菌是热力灭菌中最常用、效果较可靠的一种灭菌方法。适用于溼热灭菌的医疗器械有：衣服、被单、聚四氟乙烯、外科手术器械、硅橡胶、聚丙烯、环氧树脂等。但对一些不耐高温的聚合物如聚氨酯等，承受不了这样的高温，只能采用其他的灭菌方法。；
2、干热灭菌：
热灭菌是将产品放于热空气箱中、利用干热空气的氧化作用，杀灭一切活的微生物或消除热原的方法。干热灭菌通常使用的温度较高，范围在160～2500℃，依据其使用的温度，暴露的时间可达2h。干热灭菌条件一般为160x120min以上、180。Cx60min以上或250。C×45min以上，也可采用其它温度和时间参数。实际应用中，干热灭菌的适用范围十分有限，一般应用于耐高温的玻璃器具和金属外科器械，另有些产品不仅要求达到必要的无菌水平，还要消除细菌内毒素(热原物质)，应用其他的灭菌方法很难消除细菌内毒素，而干热灭菌的温度时间参数设置在250℃x45min，可以除去玻璃器具的热原物质。
3、环氧乙烷灭菌：
包装系统的材料中最起码有一种具备一定的透气性，环氧乙烷灭菌是医疗器械领域比较常用的灭菌方法，环氧乙烷灭菌原理是通过其与蛋白质分子上的巯基(一SH)、氨基(一NH：)、羟基(一OH)和羧基(一COOH)以及核酸分子上的亚氨基(一NH一)发生烷基化反应，造成蛋白质失去反应基团，阻碍了蛋白质的正常生化反应和新陈代谢，导致微生物死亡，从而达到灭菌效果。环氧乙烷灭菌时，灭菌柜内的温度、溼度、灭菌气体浓度、灭菌时间都是影响灭菌效果的重要参数。一般采用的灭菌条件：温度(55±10)oC、相对溼度(60±10)％、灭菌压力8xl05Pa灭菌时间120min。环氧乙烷是一种烷化剂，穿透力强，能够使用各种包装材料，在常温下能杀灭各种微生物(包括细菌、芽孢、病毒、真菌孢子等)H。适用于生物医用高分子材料，比如天然橡胶、聚乙烯、聚丙烯及聚氯乙烯等。
4、辐射灭菌：
要求构成包装系统的所有包装材料都能够耐抗辐照射线的处理而不至于老化脆裂；
辐射灭菌是将灭菌产品放于适宜放射源辐射的1射线或适宜的电子加速器发生的电子束中进行电离辐射产生自由基通过控制辐射条件而达到杀灭微生物的方法。灭菌用的1射线通常以钴Co一60或铯Cs一137作为放射源，发生衰变时发射出1．33MeV和1．17MeV两个能级的射线，使微生物DNA受到不可恢复的损失，达到人们所需要的目标131。辐射灭菌通常用于外科器具、人工假体、注射器和缝合线等。
5、低温等离子体灭菌：
低温等离子体灭菌是最近几年才发展起来的新的低温灭菌技术。等离子体是气体或蒸汽受电场或磁场影响，使大部分分子发生离子化而形成的。等离子体灭菌器是由电源、激发原、气原、传输系统和灭菌腔室组成，抽真空后通过水蒸汽，蒸汽在电场作用下转变为等离子体。等离子体灭菌优点是杀菌效果可靠、作用温度低、灭菌后的器械不需要放置空气中去除残留气体，无腐蚀性同。目前，许多国家已开始应用这种技术，主要用于不耐热的医疗器械。
总结语：
灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件，灭菌产品的无菌保证取决于灭菌材料的选择，生产过程中适宜的的灭菌工艺、规范的GMP管理质量管理体系，同时灭菌工艺的确定应综合考虑生......
生物中灭菌方法有哪些灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子.
实验室里常用的灭菌方法有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸气灭菌.
（灭菌与消毒是不同的,用紫外线处理属于消毒.）
微生物实验室常用的灭菌方法有哪些常用的灭菌方法主要包括以下三种：干热灭菌；溼热灭菌；紫外灭菌
1.干热灭菌法
1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要用于接种工具灭菌,在火焰上灼烧即可达灭菌目的,火焰灭菌通常用于无菌操作中试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等实验物品的灭菌,防止管口污染。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后,在烤箱内加热至160℃,保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃.此外降温过速,骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密,应有空隙,利于热空气流动,过密,致使温度不均,部分物品灭菌不彻底.
2.溼热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,温度高,灭菌效果最好.
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时,在同一表压下所达到的温度值要低,而冷空气排出越少,温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时,为保证达到规定的温度,必须将冷空气完全排除.否则,虽然压力达到,而温度达不到规定的要求,灭菌就不彻底.
3.紫外线
杀菌谱广,但穿透力弱,影响因素多,杀菌效能受到一定限制.
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与溼度等因素有关.紫外灯杀菌的温度以20~40℃,相对溼度40%~60%为宜.
常用的消毒灭菌方法有哪些(1)天然消毒法：利用日光等天然条件杀灭致病微生物，达到消毒目的，称为天然消毒法。
①日光曝晒法：日光由于其热、干燥和紫外线的作用，而具有一定的杀菌力。日光杀菌作用的大小受地区、季节、时间等因素影响，日光越强，照射时间越长，杀菌效果越好。日光中的紫外线由于通过大气层时，因散热和吸收而减弱，而且不能全部透过玻璃，因此，必须直接在阳光下曝晒，才能取得杀菌效力。日光曝晒法常用于书籍、床垫、被褥、毛毯及衣服等的消毒。曝晒时应经常将被晒物翻动，使物品各面都能与日光直接接触，一般在日光曝晒下4～6小时可达到消毒目的。
②通风：通风虽然不能杀灭微生物，但可在短时间内使室内外空气交换，减少室内致病微生物。通风的方法有多种，如用门、窗或气窗换气，也可用换气扇通风。居室内应定时通风换气，通风时间一般每次不少于30分钟。
(2)物理灭菌法：利用热力等物理作用，使微生物的蛋白质及酶变性凝固，以达到消毒、灭菌目的，称为物理灭菌法。
①燃烧法：是一种简单易行、迅速彻底有效的灭菌方法，但对物品的破坏性大，多用于耐高热，或已带致病菌而又无保留价值的物品，如被某些细菌或病毒污染的纸张、敷料，搪瓷类物品如坐浴盆，也可以用火焰燃烧消毒灭菌，应先将盆洗净擦干，再倒人少许90％酒精，点燃后慢慢转动浴盆，使其内面完全被火焰烧到。应用此法时，要注意安全，须远离易燃或易爆物品，以免引起火灾。
②煮沸法：是一种经济方便的灭菌法，一般等水开后计时，煮沸10—15分钟可杀死无芽胞的细菌。可用于食具、毛巾、手绢等不怕溼而耐高温的物品的消毒灭菌。
③高压蒸汽灭菌法：利用高压锅内的高压和高热释放的潜能进行灭菌，此法杀菌力强，是最有效的物理灭菌法。待高压锅上汽后，加阀再蒸15分钟，适合消毒棉花、敷料等物品。
(3)化学消毒灭菌法：化学消毒灭菌法是利用化学药物渗透细菌体内，破坏其生理功能，抑制细菌代谢生长，从而起到消毒的作用。家庭常用化学消毒灭菌方法有以下三种。
①擦拭法：用化学药液擦拭被污染的物体表面，常用于地面、家俱、陈列物品的消毒。如用0．5％-3％漂白粉澄清液、84消毒液等含氯消毒剂(现市场都出售，要看好有效期及使用方法)，擦拭墙壁、床、桌椅地面及厕所。
②浸泡法：将被消毒物品浸泡在消毒液中，常用于不能或不便蒸煮的生活用具。浸泡时间的长短因物品及溶液的性质而有不同。如用1％-3％漂白粉澄清液浸泡餐具、便器需1小时，用0.5％“84”消毒液浸泡需15分钟，而用0.02％高效消毒片浸泡只需5分钟，就可以达到目的。若浸泡呕吐物及排泄物，不但消毒液浓度要加倍，而且浸泡时间也要加倍。
③熏蒸法：是利用消毒药品所产生的气体进行消毒。常用于传染病人居住过的房间空气及室内表面消毒。
福尔马林(甲醛)+高锰酸钾：每立方米加入福尔马林25—40毫升，高锰酸钾15—30克，两种药放置在一起即产生气体，可达到消毒目的。消毒时，必须将门窗紧闭12-24／小时，消毒后再打开门窗进行通风，此法对各种细菌、病毒引起的传染病均有效。
食醋：每立方米用3-10毫升食醋，加水2～3倍加热熏蒸，用于室内空气消毒，对于预防流感等呼吸道传染病有效。

8. 手术室无菌物品灭菌方法有哪几种适用范围以手术室内物品举例说明每一种灭菌方法

一、物理消毒灭菌法
物理消毒灭菌法是医学实践中常用的方法,通常包括热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等.
(一)热力灭菌法
热力能破坏微生物的蛋白质和核酸,使蛋白质变性凝固,核酸解链崩裂,从而导致其死亡.
1.干热灭菌法 常用焚烧、烧灼和干烤等方法.
(1)焚烧与烧灼 焚烧仅用于废弃的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及动物尸体等.烧灼用于微生物实验室的接种环、金属器械、试管口、瓶口等的灭菌.
(2)干烤 使用干烤箱灭菌,一般需加热至160℃～170℃经2h,可达到灭菌的目的.适用于玻璃器皿、瓷器、金属物品等的灭菌.
2.湿热消毒灭菌法
(1)巴氏消毒法 法国学者巴斯德创用而得名.主要以较低温度杀灭病原菌或特定微生物,而使物品中不耐热成分不被破坏.此法有两种：一种方法是加热61.1℃～62.8℃、30min；另一种方法是加热71.7℃、15～30s.现在人们多用后种方法对牛奶进行消毒.
(2)煮沸法 煮沸100℃、5～10min,可杀死细菌繁殖体.芽胞则需要煮沸1～2h.常用于注射器、食具与饮水的消毒.
(3)流通蒸气法 用阿诺(Arnold)蒸锅或普通蒸笼,加热100℃、15～30min,可杀灭细菌的繁殖体.若将消毒后的物品放入37℃孵箱培养,使芽胞发育成繁殖体,次日再蒸一次,如此连续三次以上,可达到灭菌效果,这种方法称为间歇灭菌法.常用于不耐高温的物品,如糖类、血清和鸡蛋培养基等的灭菌.
(4)高压蒸气灭菌法 是一种迅速而有效的灭菌方法.使用高压蒸气灭菌器,利用加热产生蒸气,随着蒸气压力不断增加,温度随之升高,通常压力在103.4kPa(相当旧制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )时,器内温度可达121.3℃,维持15～30min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物.此法常用于一般培养基、生理盐水、手术器械及敷料等耐湿和耐高温物品的灭菌.
(二)紫外线与电离辐射
1.日光与紫外线 日光消毒是最简单、经济的方法,将病人的被褥、衣服、书报等在日光下曝晒数小时,可杀死表面的大部分微生物.日光中杀菌的成份主要是紫外线.紫外线200～300nm时,具有杀菌作用,其中以265～266nm波长的紫外线杀菌力最强.紫外线的杀菌原理,主要是细菌DNA吸收紫外线后,一条链上相邻的两个嘧啶通过共价键结合形成二聚体,从而干扰了DNA的正常碱基配对,导致细菌死亡或变异.
紫红外线能透过石英,但不能穿过一般玻璃或薄纸,因此,紫外线只适用于物体表面及空气的消毒.例如手术室、婴儿室、传染病房、无菌制剂室、微生物接种室的空气消毒.
2.电离辐射 X射线、γ射线和阴极射线等电离辐射,有较高的能量与穿透力,因而可产生较强的致死效应.其机制在于产生游离基,破坏DNA.此法常用于大量一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于中药成药和食品的消毒,而不破坏其化学成分和营养成分.
(三)超声波
超声波是不被人耳感受的高于 20千周/s的声波.其杀菌机制主要是它通过水时发生空化作用,而破坏了细菌细胞质的胶体状体,使其胞膜、胞质分离,胞壁及胞膜破碎致细菌繁殖体死亡.此法主要用于粉碎细胞,以提取细胞组分或制备抗原等.
(四)微波
是一种波长为 1mm到1m左右的电磁波,称微波.它能穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质,但不能穿透金属表面.目前用于消毒的微波有2,450MHz与915MHz两种,常用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品用具及其它用品的消毒.
(五)滤过除菌
滤过除菌是用滤菌器阻留过滤液体和气体的细菌,以达到无菌的目的.滤菌器含有微细小孔,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过.常用滤菌器有蔡氏滤器、玻璃滤器、薄膜滤器及高效颗粒空气滤器四种.主要用于不耐热的血清、抗毒素、生物药品以及空气等的除菌.
二、化学消毒法
许多化学药物都有抑制或杀灭微生物作用,按作用不同分为化学消毒剂和化学治疗剂两类,用于消毒、防腐和治疗疾病.
(一)常用消毒剂的种类和应用
具有杀死微生物的化学药物称消毒剂.消毒剂对人体有毒性作用,只能外用,不能内服.主要用于皮肤粘膜的伤口、器械、排泄物和周围环境的消毒.消毒剂在低浓度时也可作防腐用,但防腐剂的关键是应要对人体无毒性作用.消毒剂种类浓度与用途见表 13-1.
表 13-1 常用消毒剂的种类浓度与用途
类别
名称
浓度
用途
重金属盐类
红汞
2%
皮肤粘膜的小创伤消毒
升汞
0.05%～0.1%
非金属器皿浸泡消毒
硝酸银
1%
新生儿滴眼防淋球菌感染
氧化剂
高锰酸钾
0.1%
皮肤粘膜消毒
过氧化氢
3%
皮肤粘膜创口消毒
过氧乙酸
0.2%～0.5%
塑料、玻璃器材消毒
碘酒
2.0%～2.5%
皮肤消毒
氯
0.2ppm～0.5ppm
饮水及游泳池消毒
漂白粉
10%～20%
地面、厕所与排泄物消毒
醇类
乙醇
70%～75%
皮肤、体温表消毒
酚类
石碳酸
3%～5%
地面、器具表面的消毒
来苏
2%
皮肤消毒
醛类
甲醛
10%
物品表面、空气消毒
戊二醛
2%
精密仪器、内窥镜消毒
表面活性剂
新洁尔灭
0.05%～0.1%
皮肤粘膜、器械消毒
杜灭芬
0.05%～0.1%
皮肤创伤冲洗、金属器械、塑料、橡皮类消毒
染料
龙胆紫
2%～4%
浅表创伤消毒
酸碱类
醋酸
500mml/100m 3
加等量水蒸发
空气消毒
食醋
2%溶液,
3～5ml/m 3
熏蒸消毒空气
生石灰
加水 1：4
或 1：8
配成糊状
排泄物及地面消毒

9. 手术室空气消毒最常用的方法

空气消毒灭菌是手术室控制感染的重要环节，人员流动、房门开关次数及手术时污物增加，都可能造成空气细菌总数急剧增加，因此手术室空气消毒是手术室工作中重要的一个环节。

1、紫外线灯照射

紫外线灯是国内外常用的一种无毒、经济、方便、有效的空气消毒方法。安装方式以无罩悬空吊式最佳,照射30分钟至1小时基本能使室内空气达Ⅲ类环境标准；2小时达Ⅱ类环境标准。强调最佳安装方式，合理安排消毒间隔时间，照射时保持室内清洁干燥，灯管无尘，温度20-25℃，湿度50%-60%，紫外线杀菌效果受室内温度、湿度、照射时间、距离、灯管质量、照射强度、灰尘及消毒对象等影响。照射距离要求灯管悬挂在距地面2.5米以下,桌面上方1米处.紫外线存在一定的缺陷性,对人体皮肤及眼睛均有伤害，可致皮肤烧伤、角膜发炎、皮肤癌等，紫外线产生的臭氧催人老化，其气味使人难以接受，吸入过多会使人中毒，臭氧进入血液与血红蛋白竞争氧气，故只能在无人的状态下进行空气消毒。尽管如此，只要合理操作紫外线照射仍是手术室空气消毒的有效方法。

2、 使用电子灭菌灯

是利用电解空气产生臭氧来达到杀菌的目的，它不仅起到与紫外线灯相同的空气消毒效果，且不受有效消毒范围的限制，没有消毒死角存在。但每周仍需用化学消毒剂熏蒸。

3 、使用化学药物熏蒸

手术室运用紫外线灯或电子灭菌灯照射，结合每周末使用规定浓度及用量的福尔马林氧化熏蒸或采用乳酸加热熏蒸，均为可靠的空气消毒手段。但这些化学制剂对工作人员的皮肤、神经系统、胃肠道及呼吸道存在一定不良影响，可导致机体免疫力下降。由于配料不准、用量过低、作用时间短暂、药液使用过久、忽略容器的防护与消毒等，非但起不了消毒的作用，反可造成二次环境污染。

4、 新一代动态臭氧消毒机

对空气和物体表面的微生物、细菌、病毒灭活率>99.9%。由于其采用弥漫性循环消毒，无论有无遮挡物均无消毒死角。消毒机在产生大量臭氧气体的同时，产生大量的空气负离子，从而达到除异味，净化空气的效果。尤其适用于手术进行中及连台手术。

10. 手术中常用的消毒灭菌方法有哪些

常用灭菌法包括高温灭菌、气体灭菌和电离辐射灭菌三种方法。
1、高温灭菌法：利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡。这是应用最广泛而有效的灭菌方法，主要用于手术器械和物品的灭菌。
①高压蒸汽灭菌法：用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌，对细菌芽胞也有杀灭效果，这是手术用品灭菌最常用最可靠是方法。主要用于能耐高温的物品，如金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。压力升至104.0~137.3kPa，温度达121~126℃，维持20~30分钟，可杀灭包括具有顽强抵抗力的细菌芽孢在内的一切微生物。
②煮沸灭菌法，用于金属器械、玻璃、橡胶类物品。
③火烧法，用于紧急情况下使用的器械。
2、气体灭菌法：包括环氧乙烷灭菌法、臭氧和负离子等气体消毒灭菌法。
3、电离辐射灭菌法：属工业灭菌法，适用于所用的医疗器械、大规模应用的一次性物品。
消毒法包括药液浸泡、甲醛熏蒸和紫外线照射三种方法。
1、药液浸泡消毒：适用于锐利器械、内镜、特殊材料制成的导管等消毒，目前常用的化学消毒剂有下列几种：2%戊二醛、75%乙醇溶液、1：1000氯己定溶液、0.5%过氧乙酸溶液。
2、甲醛熏蒸消毒法：甲醛有强烈的刺激作用，此种消毒方法已逐渐淘汰。
3、紫外线消毒法：紫外线表面作用强，可杀灭悬浮在空气、水中和附于物体表面的细菌、支原体和病毒等。多用于室内空气和物品表面消毒。