导航:首页 > 使用方法 > 目的基因的获取最常用的方法是

目的基因的获取最常用的方法是

发布时间:2022-11-28 19:25:56

㈠ 目的基因的获取方法

目的基因的获取方法:

1、从基因文库中获取目的基因。

2、cDNA文库。

3、反转录法。

4、人工合成法。

目的基因,也称靶标基因,是指在实验中研究或操纵的特定基因。在基因克隆过程中目的基因就是要分离、纯化、克隆并转化到生物体的那个可以带来预期表型性状如抗虫或耐除草剂的基因。

目的基因获得方法是取得含有所需生物学功能或编码所需产物结构基因的DNA片段的方法。1969年贝克威思等从大肠杆菌中分离出了乳糖操纵子DNA,以后有不少科学家用生物学方法、物理化学方法分离出许多纯化的基因。但总的来看为数不多。

㈡ 获取目的基因的常用方法是哪种

1.从基因文库中获取目的基因:将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌
的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。
当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因
在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基
因。
2.化学合成法。已知目的基因的核苷酸序列,可用DNA合成仪直接合成。
3.用PCR技术扩增技术提取。已知目的基因引物的序列,将整个DNA放入合成仪,因为只有当
引物与模板结合后DNA热聚合酶才能行使聚合功能,所以只有引物中间的目的基因被大量扩增,
即被提取出来。

㈢ 获得目的基因有几种主要方法

获得目的基因常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选

直接获取
1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了(基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下:① 选用特定限制性内切酶, DNA进行部分酶解,得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA。③ 经适当处理,将基因组DNA限制性片段与λ噬菌体载体进行体外重组。④ 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。⑤ 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌,形成大量噬菌斑,从而形成含有整个DNA的重组DNA群体,即文库。)经典解释
2.cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因,但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多,相关工作量同样大得多。更为重要的是,在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子,但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列的存在,所以大肠杆菌不能从真核生物基因的初级转录本中去除间隔序列,即不能表达真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列(已在拼接过程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA为模板,逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此,在基因工程中,cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。
3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是:用限制酶(即限制性内切酶)将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法吧带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫,抗病毒的基因都可以用上述方法获得。

用“鸟枪法”获取目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。

人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。
2.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑

㈣ 目的基因的获取方法

1、当目的基因的序列已知时:用化学方法合成目的基因,或用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。
将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存。各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息来获取目的基因。如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。
2、当目的基因序列未知时:建立一个包括目的基因在内的基因文库,从基因文库中提取目的基因。
3、用PCR技术扩增技术提取。已知目的基因引物的序列,将整个DNA放入合成仪。只有引物中间的目的基因被大量扩增,即被提取出来。

㈤ 获取目的基因的方法到底有几种,PCR技术也是获取目的基因的途径吗

获取目的基因的方法主要有两种:一是从供体细胞的DNA中直接分离基因,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法",另一种是人工合成基因,这种方法有两条途径,一是以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA,即目的基因,另一条途径是蛋白质的氨基酸序列,推测出信使RNA序列,再推测出结构基因的核苷酸序列,然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
PCR技术是扩增目的基因的方法,不应该算作获取目的基因的途径。

㈥ 获取目的基因最方便的方法

获取目的基因的方法有:从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、用化学方法直接人工合成.
在目的基因的序列为未知的情况下,可以采用从基因文库中获取目的基因;在目的基因比较小,核苷酸序列已知的情况下常采用人工合成法.所以在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是以4种脱氧核苷酸为原料利用DNA合成仪化学方法直接合成.
故选:A.

㈦ 目的基因的制备方法有哪些

获取目的基因的方法主要有两种:

1、从供体细胞的DNA中直接分离基因,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法"。

2、人工合成基因:以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA,即目的基因,另一条途径是蛋白质的氨基酸序列,推测出信使RNA序列,再推测出结构基因的核苷酸序列,然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。

在基因克隆过程中目的基因就是要分离、纯化、克隆并转化到生物体的那个可以带来预期表型性状如抗虫或耐除草剂的基因。



(7)目的基因的获取最常用的方法是扩展阅读:

目的基因可以是生物体本身的, 也可以是来自不同生物体的。比如Bt基因来自苏云金芽孢杆菌。

目的基因被成功地转化并整合到受体细胞本身不能保证基因在新的遗传环境中能得到准确的表达。必须进行测试以确定是否存在表达,在实际应用中,只有那些以足够高的水平表达目的基因的转基因生物才是有意义的。

如果转基因后代分离比例不符合孟德尔遗传规律,转入的外源基因有可能干扰了内源基因的表达。另一个原因是在受体基因组中的不同位点整合了两个或更多个转基因拷贝。这些都要进行育种试验确认。

㈧ 目的基因的获取

选修三的1.2基因工程基本操作中的目的基因获取主要介绍了两种方法。

一、从基因文库中获取目的基因。

形象的说,就是相当于“从图书馆中找到你要的那本图书”。基因文库是前人已经构建好的受体菌群体,整个群体已经包括所有该物种的基因,你只需要通过目的基因的位置或转录产物mRNA、蛋白质等的特异性的表现,与基因文库中的基因产物一致性找出文库中的目的基因。

二、通过PCR扩增获取目的基因。

关键是设计目的基因上游的引物,通过DNA复制,从引物开始延伸出引物后的DNA序列,从而得到你要的目的基因。

3,我最近学的还有
化学法
是知道了核苷酸序列
用人工合成的方法得到

㈨ 简述目的基因获取的方法

目的基因的获取方法主要有以下2类
(1)已知基因的获得 PCR分离法和化学合成法等
(2)未知基因的获得 直接分离法和基因文库分离法等
直接分离法
1、限制性内切酶法
用限制性内切酶把基因组DNA切成不同大小的片断
应用对象 适合于从简单的基因组中分离目的基因 如质粒或病毒的大小只有几千碱基 大的也超不过几十万碱基 编码基因比较少 获得也比较简单
(1)对已定序列的DNA分子 只需要用已知识别序列的限制内切酶进行一次或几次切割 分离纯化所需要的DNA片断 与适当载体连接
(2)对已知定位的目的基因 只要根据目的基因两侧的已知的酶切识别位点 一次就可以获得
(3)即使含目的基因的DNA分子未定序或定位 也只须通过酶切分析 随后再通过部分酶切 构建一个简单的基因文库 从钩出目的基因

㈩ 在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径

(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即人工合成和从生物材料中分离,人工合成可通过反转录法或人工化学合成法,从生物材料中分离即通过基因文库法.
(2)由于cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的全部基因,故两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少.
(3)基因表达载体的组成包括目的基因+启动子+终止子+标记基因,其中启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位;若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,由于细菌繁殖速度快,故最常用的原核生物是大肠杆菌等细菌.
(4)基因枪法是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉和钨粉颗粒,成本较高.
故答案为:
(1)人工合成 生物材料
(2)cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的全部基因
(3)RNA 大肠杆菌(或答细菌)
(4)金粉 钨粉

阅读全文

与目的基因的获取最常用的方法是相关的资料

热点内容
眼镜片卡槽拉丝与镜架安装方法 浏览:459
有什么方法可以矫正近视眼 浏览:540
亿万台电脑列数字说明方法 浏览:34
初中生高考题解决方法 浏览:439
特殊测量技术方法特点 浏览:539
用化学方法鉴别真金和假金子黄铜 浏览:7
羊五号病怎么治疗土方法 浏览:484
增强手指肌力的训练方法 浏览:182
擦车的正确方法 浏览:213
民间治疗失眠的方法 浏览:502
断奶后正确的回奶方法 浏览:362
联想电脑打开麦克风在哪里设置方法 浏览:971
如何测量水温传感器方法 浏览:444
桥梁钢腹板的安装方法 浏览:746
中式棉袄制作方法图片 浏览:71
五菱p1171故障码解决方法 浏览:866
男士修护膏使用方法 浏览:554
电脑图标修改方法 浏览:609
湿气怎么用科学的方法解释 浏览:545
910除以26的简便计算方法 浏览:813