① 厌氧培养的培养工艺
厌氧培养——微生物厌氧培养
1.可利用厌氧产气袋法进行厌氧培养。
规格2.5L的产气袋只能将2.5L容积内的氧气完全吸收,转化成二氧化碳,同理,3,5L的产气袋能吸收3.5L容积的氧气。微需要产气袋和二氧化碳产气袋亦是如此,为达到相应的氧气浓度和二氧化碳浓度,不仅容积要固定,放置的培养物数量也基本要装满,在出厂前都根据计算设定好了的,所以,培养也需要在设定的条件下进行。
日本三菱的厌氧培养罐有两种规格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容纳12只9cm标准培养皿),配套使用1只2.5L规格的厌氧产气袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容纳42只9cm标准培养皿),配套使用3只2.5L规格的厌氧产气袋或者2只3.5L的厌氧产气袋。两种都是长方体,原厂的产气袋培养后不会产生负压,直接可以打开,所以不需要泄压孔。
2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。
3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
② 厌氧产气袋的介绍
厌氧产气袋AnaeroPack——是由日本三菱瓦斯化学株式会社发明并拥有专利的一类产品,其基本原理是将密闭空间中的氧气完全或者部分吸收掉,然后产生二氧化碳。
③ 厌氧产气袋的产品特点
厌氧产气袋和其他厌氧培养方法相比,优势体现在以下方面:
1,操作简便,不用加水、不用催化剂,只需把药剂(产气袋)外包装剪开放入容器内,密封后即可形成适宜的厌氧、微需氧、二氧化碳培养环境。
2,适用范围广,培养容器内不会产生压差,不会产生高温。同容积的培养容器可通用,废弃物处理方便,不 会污染环境。
3,高效经济,无须使用昂贵且占空间的大型设备,无须使用危险气体,性能价格比更经济实惠。
4,针对性强,厌氧、微需氧、二氧化碳培养三种类型,根据培养量选择350ml、2.5L和3.5L三个系列,自由搭配,产气量稳定准确有保障。
因为其独特的应用优势,英国OXOID公司以及法国生物梅里埃公司亦将其配套到产品线中,名称虽有不同,但其包装均注明制造者:MITSUBISHI GAS CHEMICAL COMPANY,INC. 北京九和永泰代理的是从日本直接进口的产品,优势主要体现在经济实惠供货及时,生产日期较短品质更有保证。 1,技术上:行业的技术性很强,还没有得到广泛应用。
2,资金上:资金要求较高
④ 厌氧培养中氧指示剂
这是利用的是水解酸化的原理,有机物水解酸化使PH值变小,石蕊与亚甲兰都是酸碱指示剂。
⑤ 如何消除纺织面料里已经含有的壬基酚聚氧乙烯醚,谢谢NPEO是:壬基苯酚聚氧乙烯醚
摘要 当排除厌氧污泥,控制污泥泥龄,是控制系统最终出水中NP及短链NPEO浓度的可行方法.
⑥ 厌氧产气袋的应用范围
涉及的行业有:啤酒、饮料、食品、包装材料,石化及环保产业
1.实验室和现场分析仪器及配件、微生物检测消耗品供应
2.仪器现场安装调试及培训服务
3.仪器的维护、校准及维修等售后技术服务,技术咨询
4.提供客户其它特定需求的服务公司技术实力
⑦ 厌氧菌都有哪些呢
根据对O₂的耐受程度,可将厌氧菌分为三大类:
(1)对氧极端敏感的厌氧菌:代表菌种为月形单胞菌,这类细菌对厌氧条件要求很高,在空气中暴露10min即死亡,临床上很难分离出。
(2)中度厌氧菌:代表菌种为脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌等临床分离常见的厌氧菌。它们在空气中暴露60~90min或在脓汁抽出72h后仍然能分离出来。
(3)耐氧厌氧菌:代表菌种为溶组织梭菌。这类细菌不能利用氧,在无氧条件下生长好,而在有氧条件下生长不佳。
厌氧培养:
可利用厌氧产气袋法进行厌氧培养。规格2.5L的产气袋只能将2.5L容积内的氧气完全吸收,转化成二氧化碳,同理,3,5L的产气袋能吸收3.5L容积的氧气。
微需要产气袋和二氧化碳产气袋亦是如此,为达到相应的氧气浓度和二氧化碳浓度,不仅容积要固定,放置的培养物数量也基本要装满,在出厂前都根据计算设定好了的,所以,培养也需要在设定的条件下进行。
日本三菱的厌氧培养罐有两种规格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容纳12只9cm标准培养皿),配套使用1只2.5L规格的厌氧产气袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容纳42只9cm标准培养皿),配套使用3只2.5L规格的厌氧产气袋或者2只3.5L的厌氧产气袋。
两种都是长方体,原厂的产气袋培养后不会产生负压,直接可以打开,所以不需要泄压孔。初期摸索实验条件,还可以选择350ml厌氧产气袋(配套用350ml密封袋可容纳2只9cm标准培养皿)。
以上内容参考:网络-厌氧菌;网络-厌氧
⑧ 如何培养厌氧菌
有几种密封方法:
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。
1.厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。
2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。
3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒:原理同厌氧袋,有成品销售。
5.生物耗氧法:在一密闭的容器内放以生物(多是植物),消耗氧气,同时产生二氧化碳,供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的白蜡封边,造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基:本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。
至于厌氧培养基怎么配我就不太清楚了,不过就是按一般要的各种营养,灭菌即可,个人看法
⑨ 厌氧指示剂和厌氧产气袋要一起使用吗
厌氧指示剂是表明厌氧环境是否维持或者维持的好不好的直观指示,所以要一起使用效果才好,才能及时更换。
⑩ 厌氧产气袋多久换一个
如果打开样品培养的密封环境,就需要更换新的厌氧产气包重新进行实验。
1、厌氧包的主要原理是利用氢硼化钠或氢硼化钾与水反应产生氢,氢与密封袋中的氧气在钯催化下结合成水,从而建立起无氧小环境。
2、厌氧袋中二氧化碳由柠檬酸生成,利用美蓝的变色反应作为厌氧度的指示剂。厌氧环境无氧指示剂呈无色,有氧则变为蓝色。