实验动物室常用的消毒方法

1. 对于病理性器物品或动物尸体采用哪种灭菌方式

微生物学实验常用的灭菌方法有哪些
一般分为溼热灭菌法和干热灭菌法两种。

一、溼热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是最常用的灭菌方法。溼热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。

（1）煮沸灭菌法：将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈。此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。

（2）巴氏消毒法：一种低温消毒法，因巴斯德首创而得名。有两种具体方法，一是低温维持法：62摄氏度维持30分钟；二是高温瞬时法：75摄氏度作用15-30秒。该法适用于食品的消毒。

（3）流通蒸气灭菌法：利用常压下的流通蒸汽进行灭菌。

（4）间歇蒸汽灭菌法

（5）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度，维持15-20分钟。

二、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。

（1）火焰灭菌法：是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等）物品与用具的灭菌，不适合药品的灭菌。

（2）干热空气灭菌法：是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许溼热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。

临床上常用的灭菌的方法有哪些？
一、物理方法

1、温度

利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。

1）干热灭菌法:

a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。

b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。

2）溼热灭菌法:

在同样的温度下，溼热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。

a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。

b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。

c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做恭完全无菌。若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是：将待灭菌的物品加热至100°C，15~30分钟，杀死其中的营养体。然后冷却，放入37°C恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。

d. 加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌，也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。

加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121°C。在这种情况下，微生物（包括芽孢）在15~20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间。

在加压蒸汽灭菌中，要引起注意的一个问题是，在恒压之前，一定要排尽灭菌锅中的冷空气，否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系，这样会大大降低灭菌效果。

3）影响灭菌的因素

a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同。多数微生物的营养体和病毒在50~65°C，10分钟就会被杀死；但各种孢子、特别是芽孢最能抗热，其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌，要在121°C，12分钟才被杀死。对同种微生物来讲，幼龄菌比老龄菌对热更敏感。

b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果，数量越多，热死时间越长。

c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果。一般地讲，蛋白质、糖或脂肪存在，则提高抗热性，pH在7附近，抗热性最强，偏向两极，则抗热能力下降，而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响；固体培养基要比液体培养基灭菌时间长。

4）灭菌对培养基成分的影响

a.pH值普遍下降。

b.产生混浊或沉淀，这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或......

什么叫灭菌？灭菌方法有哪几种
灭菌的定义：

灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。

微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。

将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞（或孢子）杀灭或去除，从而达到无菌的过程。

常用的灭菌方法：

热灭菌法

热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、溼热和间歇加热灭菌等法。

干热灭菌

火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧（incineration或bustion）是一种最彻底的干热灭菌法，应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等 。

溼热灭菌以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。

巴氏消毒法：因最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒，故名。这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法 。

巴氏灭菌法就是溼热灭菌，此法有两种方式[1] ，①经典的低温维持法（lowtemperatureholdingmethod，LTH）：在61.7～62.8℃下处理30分钟；②较现代的高温瞬时法（hightemperatureshorttime或flushpoint，HTST）：在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中，以蒸气加压灭菌效果最好，可用常压蒸气灭菌，也可在高压蒸气锅中（一般使用1千克/厘米2）灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。但对某些易被高压破坏的物质，如某些糖或有机含氮化合物，宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15～30分钟。

煮沸消毒法：采用在100℃下煮沸数分钟的方法，一般用于饮用水的消毒。

间歇灭菌

间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌 1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

辐射灭菌

辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射（射线加快中子等）。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

渗透压灭菌

渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离，不能进行正常的新陈代谢，结果导致微生物的死亡。

化学试剂灭菌

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。

化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物（磺胺类等）、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物，他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物（包括病原菌，病毒，癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂 。...

医疗器械常用的灭菌方式有哪些？
医疗器械灭菌工艺的验证方法就是与菌过程的相适应性，一般的灭菌方式包括以下：

1、溼热灭菌：

溼热灭菌是将产品放在压力锅内，利用饱和蒸汽在最小温度为1210C的压力下，热力和溼气被迅速传递给灭菌产品，灭菌时间至少15min。蒸汽潜热大，可迅速提高物体的温度，水分子穿透力强，容易使蛋白质凝固变性，所以溼热灭菌是热力灭菌中最常用、效果较可靠的一种灭菌方法。适用于溼热灭菌的医疗器械有：衣服、被单、聚四氟乙烯、外科手术器械、硅橡胶、聚丙烯、环氧树脂等。但对一些不耐高温的聚合物如聚氨酯等，承受不了这样的高温，只能采用其他的灭菌方法。；

2、干热灭菌：

热灭菌是将产品放于热空气箱中、利用干热空气的氧化作用，杀灭一切活的微生物或消除热原的方法。干热灭菌通常使用的温度较高，范围在160～2500℃，依据其使用的温度，暴露的时间可达2h。干热灭菌条件一般为160x120min以上、180。Cx60min以上或250。C×45min以上，也可采用其它温度和时间参数。实际应用中，干热灭菌的适用范围十分有限，一般应用于耐高温的玻璃器具和金属外科器械，另有些产品不仅要求达到必要的无菌水平，还要消除细菌内毒素(热原物质)，应用其他的灭菌方法很难消除细菌内毒素，而干热灭菌的温度时间参数设置在250℃x45min，可以除去玻璃器具的热原物质。

3、环氧乙烷灭菌：

包装系统的材料中最起码有一种具备一定的透气性，环氧乙烷灭菌是医疗器械领域比较常用的灭菌方法，环氧乙烷灭菌原理是通过其与蛋白质分子上的巯基(一SH)、氨基(一NH：)、羟基(一OH)和羧基(一COOH)以及核酸分子上的亚氨基(一NH一)发生烷基化反应，造成蛋白质失去反应基团，阻碍了蛋白质的正常生化反应和新陈代谢，导致微生物死亡，从而达到灭菌效果。环氧乙烷灭菌时，灭菌柜内的温度、溼度、灭菌气体浓度、灭菌时间都是影响灭菌效果的重要参数。一般采用的灭菌条件：温度(55±10)oC、相对溼度(60±10)％、灭菌压力8xl 05Pa灭菌时间120min。环氧乙烷是一种烷化剂，穿透力强，能够使用各种包装材料，在常温下能杀灭各种微生物(包括细菌、芽孢、病毒、真菌孢子等)H。适用于生物医用高分子材料，比如天然橡胶、聚乙烯、聚丙烯及聚氯乙烯等。

4、辐射灭菌：

要求构成包装系统的所有包装材料都能够耐抗辐照射线的处理而不至于老化脆裂；

辐射灭菌是将灭菌产品放于适宜放射源辐射的1射线或适宜的电子加速器发生的电子束中进行电离辐射产生自由基通过控制辐射条件而达到杀灭微生物的方法。灭菌用的1射线通常以钴Co一60或铯Cs一137作为放射源，发生衰变时发射出1．33MeV和1．17MeV两个能级的射线，使微生物DNA受到不可恢复的损失，达到人们所需要的目标131。辐射灭菌通常用于外科器具、

2. 实验动物房怎么消毒

一般室内消毒都是消毒剂兑水喷洒，或者紫外线灯照射。

3. 实验室常用的消毒和灭菌方法

消毒：煮沸消毒法 巴氏消毒法 灭菌：灼烧灭菌 干热灭菌 高温蒸汽灭菌

4. 微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些

主要包括以下三种：干热灭菌；湿热灭菌；紫外灭菌
1.干热灭菌法
1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要用于接种工具灭菌,在火焰上灼烧即可达灭菌目的,火焰灭菌通常用于无菌操作中试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等实验物品的灭菌,防止管口污染。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后,在烤箱内加热至160℃,保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃.此外降温过速,骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密,应有空隙,利于热空气流动,过密,致使温度不均,部分物品灭菌不彻底.
2.湿热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,温度高,灭菌效果最好.
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时,在同一表压下所达到的温度值要低,而冷空气排出越少,温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时,为保证达到规定的温度,必须将冷空气完全排除.否则,虽然压力达到,而温度达不到规定的要求,灭菌就不彻底.
3.紫外线
杀菌谱广,但穿透力弱,影响因素多,杀菌效能受到一定限制.
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关.紫外灯杀菌的温度以20~40℃,相对湿度40%~60%为宜.

5. 用什么消毒剂给动物实验室的器材进行消毒

有过氧化氢复合过氧乙酸的杀孢子剂、过氧化氢银离子的杀孢子剂、高纯度过氧化氢的杀孢子剂。 芽孢也叫芽胞，有部分领域称之为“孢子”，但学术上芽胞和孢子是两种不同物质。芽胞是细菌的休眠体。某些细菌（芽孢杆菌，梭状芽孢杆菌，少数球菌等）在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量低，抗逆性强的休眠体构造，称为芽孢。芽胞是整个生物界中抗逆性最强的生命体，在抗热，抗化学药物和抗辐射等方面，十分突出。例如，肉毒梭菌的芽胞在沸水中要经过5至9.5小时才被杀死；巨大芽胞杆菌芽胞的抗辐射能力比E.coli细胞要强36倍。芽胞的休眠能力更为突出，在常规条件下，一般可以保持几年至几十年而不死。据文献记载，有的芽胞甚至可以休眠数百至数千年，最极端的例子是在美国的一块有2500万~4000万年历史的琥珀，至今从其中蜜蜂肠道内还可以分离到有生命的芽胞。 芽胞特点： 1. 自由存在的芽孢没有明显的代谢作用，只保持潜在的萌发力，称为隐藏的生命。一旦环境条件合适，芽孢便可以萌发成营养细胞。 2. 芽孢是细菌的休眠体，在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞。 3. 产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。产芽孢的细菌多为杆菌，也有一些球菌。 4. 芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。 5. 芽孢与营养细胞相比化学组成存在较大差异，容易在光学显微镜下观察。（相差显微镜直接观察；芽孢染色）芽胞是人人都讨厌和害怕的一种生物，因此灭菌也一直以来都是大家都在热议的话题。杀灭芽胞对制药厂洁净车间、GMP车间、实验室、化妆品生产车间、保健品生产车间等场所来说十分重要，是否能消灭芽孢也是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标。那么说到灭菌，我国目前GMP条例对实验室（特别是无菌品)都存在着极其严格的要求。在GMP的验证过程中，很多的人力推过氧化氢灭菌这一方法。其实，国内目前比较常用的几种灭菌方法包括干热灭菌法、湿热灭菌法和臭氧灭菌法等等。不过过氧化氢是上述几种灭菌最好的消毒剂。杀孢子剂可以作为杀孢子剂或高效杀菌剂使用，一般用纯水稀释后作为高效杀菌剂使用。杀孢子剂适用于预清洁过的表面，可安全的用于不锈钢、钢、塑料、玻璃、地板、墙壁 等各种表面。

6. 实验动物消毒用什么

建议使用二氧化氯消毒剂。

作为一种食品级消毒剂，二氧化氯广泛用于食品厂、乳品厂、果汁厂、饮料厂、饮用水企业等的消毒。随着其价格的降低，现在也逐渐应用于养殖行业，包括禽畜养殖和水产养殖。在实验动物养殖中，尤其适合应用二氧化氯消毒剂，因实验动物相对于其他动物的养殖，对于养殖环境、条件、消毒产品的毒性、刺激性更敏感，要求也更高。

二氧化氯不但适用于实验动物养殖场舍、圈笼、实验室等环境（包括空气、墙壁、地面等的消毒、除臭、防霉），也适用于实验动物身体表面的消毒，以及实验设备、器具、动物饮用水、运输工具等的消毒。

7. 动物实验室器材消毒最好用什么

最好用盐和水电解生成的DCW次氯酸，这种次氯酸浓度可达800ppm，氧化性非常好，可以快速、广谱的杀灭各种细菌、病毒、真菌等微生物，同时无毒、不刺激动物，不腐蚀器械。

8. 实验动物消毒用什么

SPF动物房包括以下特点：工作人员只能通过隔离装置上的橡胶手套来进行饲养或实验。物品是通过包装消毒后，由灭菌渡舱或传递窗传入；动物是经由无菌剖腹产的方法进入；
进入隔离装置的空气，应经高效过滤，保证隔离装置内空气洁净度达100级，无菌并维持正压状态。根据实验需要也可维持负压状态，但需要配置空气排放装置，保证空气排放符合标准。SPF级动物房空间消毒方式：欧菲姆OXY-30000干雾过氧化氢消毒机，由全球先进干雾技术打造，肉眼看不见的微米分子，接近气态的干雾过氧化氢，具备优越的扩散性，可以说“无孔不入”，专门应对“无处不在”的微生物，轻松安全快速杀灭动物病原体微生物及病毒，预防病原细菌向外泄漏或对人员造成危害，不但能使动物房达到相应的卫生环境条件（无菌条件），而且灭菌之后没有药物残留。其中特点包括：
安全：配备全国领先的消毒液—诺福，对动物无害，对人员友好，无腐蚀，无需移出动物
高效：能杀灭包括H1N1、埃博拉病毒、黑枯芽孢及嗜热芽孢在内的200多种有害微生物，可应对动物实验潜在的风险
迅速：灭菌过程短暂，消毒+静置时间不超过45分钟，提升工作效率，节约工作成本
合法：具备省级疾控检测报告，及众多资质文件，合法且专业

9. 生物实验室消毒有没有好的解决方案

你好

生物安全实验室空气消毒的常用方法有紫外线照射、化学消毒剂喷雾等 。由于紫外线照射需要对被消毒物体表面或气体进行直接照射才有作用，对被遮挡的墙壁表面、地面、工作台面等不能有效消毒灭菌，故在高等级生物安全实验室的终末消毒中基本采用气体熏蒸消毒方式。近年来部分高等级生物安全实验室开始采用气化过氧化氢（H2O2）进行消毒。

1．消毒剂

1 甲醛

甲醛气体的消毒效果受环境温度和湿度影响较大，消毒时需严格控制温湿度在规定范围内。在温度高于20℃时，甲醛气体能够杀死所有微生物及其孢子，但对朊蛋白没有灭活性。甲醛消毒时间相对较长，并需要相对湿度达到70％左右。

甲醛熏蒸消毒因为具有广谱杀菌、使用方便和价格低廉等优点，已成为国内普遍的消毒、灭菌方法。但由于甲醛具有刺鼻的气味，其气体会刺激眼睛和黏膜，已被确认具有致癌风险，消毒后需要中和，再进行排风换气。因甲醛消毒后会有残留，要注意擦拭去除物体表面的微量残留。

甲醛消毒包括熏蒸消毒、降解、通风3个阶段，熏蒸消毒一般需要8 h以上，然后进行氨水中和，降低甲醛浓度，最后进行通风置换室内空气。

2 二氧化氯

二氧化氯不同于一般的含氯消毒剂，其主要通过氧化而不是氯化发挥其消毒作用，从而避免消毒过程中产生有机氯化物，具有广谱、高效、速效、对金属有腐蚀性对织物有漂白作用、消毒效果受有机物影响大的特点。

3 拜科特瑞提供的干雾过氧化氢灭菌法：

传统的过氧化氢灭菌法具有广谱、高效、无毒、对金属及织物有腐蚀性、受有机物影响大、纯品稳定性好、稀释液不稳定等特点。拜科特瑞经过多年的研究和实际实验应用，研究了复合型干雾过氧化氢灭菌解决方案，解决了稀释液不稳定性和腐蚀性的问题，拜科特瑞的干雾过氧化氢灭菌主要高效、广谱、快速、干燥、无毒、无残留，应用范围广。

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