简述常用的保藏方法

⑴ 菌种保藏的目的，菌种保藏的方法有哪些

1、目的：尽可能的保持菌种的原有性状以及活力的稳定，保证菌种不死亡、不发生变异、不被外物污染，保持菌株的优良性状不发生退化以及优良菌株的存活。2、原理：通过降低微生物体内的代谢，抑制生长繁殖，从而延长菌种的生命，减少变异，常用的方法为低温保藏、缺氧保藏、干燥保藏。

一、菌种保藏的目的

1、目的

在使用和传代的过程中，菌种容易出现污染，发生变异，死亡等情况，从而导致菌种衰退，优良菌种丢失。而菌种保藏的目的就是为了尽可能的保持菌种的原有性状以及活力的稳定，保证菌种不死亡、不发生变异、不会被外物污染，保持菌株的优良性状不发生退化以及优良菌株的存活。

2、原理

菌种保藏的原理是通过降低微生物体内的代谢，抑制生长繁殖，从而延长菌种的生命，减少变异。常用的方法主要为低温保藏，缺氧保藏，干燥保藏。除此之外，避光，添加保护剂，缺乏营养等也可以提高保藏的效果。

二、菌种保藏的方法有哪些

1、斜面低温保藏法

将菌种接种到适合的固体斜面培养基上，等到菌种充分生长过后，使用油纸将棉塞部分包扎好，然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。

2、液体石蜡保藏法

（1）使用三角烧瓶将液体石蜡装好，塞上棉塞，并用牛皮纸进行包扎，0.1MPa，121.3℃灭菌30分钟左右，然后转移至40℃的温箱中，将水汽蒸发掉。

（2）将菌种在斜面培养基中培养，得到健壮的菌体，然后使用灭菌吸管将石蜡注入斜面上，用量为高出斜面顶端1cm为宜。

（3）将试管直立，放置在低温或者室温的环境下进行保存。

3、滤纸保藏法

（1）准备好滤纸条（0.5×1.2cm），装入安瓿管中（0.6×8cm），每个管中放入1-2张，然后塞上棉塞，在0.1MPa，121.3℃的环境下灭菌30分钟。

（2）将菌种在斜面培养基中培养，得到健壮的菌体，然后取出1-2ml的灭菌脱脂牛乳，滴加在灭菌培养皿内，接着取数环菌苔在牛乳内混合均匀，制成浓悬液。

（3）使用镊子将滤纸条夹出，浸入菌悬液内，吸饱后，放回安瓿管中，塞上棉塞。

（4）将安瓿管放入装有五氧化二磷的干燥器，并用真空泵抽气至干，然后将棉花塞入管内，用火焰熔封，放置在低温下保存。

（5）当需要使用菌种的时候，将安瓿管口在火焰上烧热，在烧热的部位滴上一滴冷水，使玻璃破裂，再用镊子将瓶口端的玻璃敲掉，等到打开安瓿管后，将滤纸取出，放入液体培养基内，置温箱中培养。

4、沙土保藏法

（1）取出河沙，加入10%稀盐酸，加热煮沸30分钟（除去有机质）。

（2）将酸水倒掉，并用自来水将河沙洗至中性，然后进行烘干，过筛（40目筛子），将粗颗粒去掉。

（3）取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，浸泡洗涤数次，直至为中性。

（4）烘干，碾碎，过筛（100目筛子），去除粗颗粒。

（5）将沙和土按照2：1的比例混合，装入试管中，塞好棉塞，灭菌30分钟左右。

（6）将菌种在斜面培养基中培养，得到健壮的菌体，然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水，洗下细胞或孢子制成菌悬液。

（7）用无菌吸管吸取菌悬液，均匀滴入沙土管中，每管0.2-0.5ml，然后真空抽去管中的水分。如果是放线菌和霉菌可以直接挑取孢子拌入沙土管之中。

（8）将沙土管用火焰熔封，然后放置在低温（4-6℃）干燥处保藏，或者是将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好，置干燥器内保存。保存过程中，需要每隔半年检查一次菌种的存活性和纯度。

5、甘油管保存法

（1）将80%的甘油进行高压蒸汽灭菌。

（2）将菌种放置在斜面培养基上培养，然后使用无菌水制成高浓度的菌悬液。

（3）使用1ml的甘油与菌液混合均匀，让甘油的浓度为10-30%左右，然后将其放置在零下70℃的环境下进行冻存。

（4）也可以使用甘油-生理盐水（体积比8：2），和菌体肉汤混合均匀，然后放置在零下20℃的环境下进行保存。

6、冷冻干燥保藏法

（1）在低温下将细胞快速冻结，然后在真空条件下进行干燥，同时为了保证细胞在冷冻和水分升华的过程中不受损害，应当使用保护剂来制备细胞细胞悬液（菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质），通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。

（2）干燥后的菌种在真空下封装，和空气隔绝，从而实现长期保藏。

（3）该方法兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素，除开丝状真菌的菌丝体外，其它各类微生物大多都适用。

⑵ 食品保藏的基本原理和方法

1、制生
停止食品中一切生命活动和生化反应，杀灭微生物、生物，破坏酶的活性（无生机原理）。
2、抑生
抑制微生物和食品的生命活动及生化反应，延缓食品的腐败变质（假死原理）。
3、促生
促进生物体的生命活动，借助有益菌的发酵作用防止食品腐败变质（不完全生机原理）医学`教育网搜集整理。常用的方法有低温保藏、高温保藏、脱水保藏、提高食品的渗透压、提高食品的氢离子浓度、辐照保藏、隔绝空气、加入防腐剂和抗氧化剂。

⑶ 保藏菌种的方法有哪些

1、传代培养保藏法：包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等，培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法：液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间。

3、载体保藏法：载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法。

4、寄主保藏法：寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物。

5、冷冻干燥保藏法：先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥），其中真空冷冻干燥法最常见。

(3)简述常用的保藏方法扩展阅读

菌种保藏的原理：

菌种保藏有多种方法，其原理大多大同小异，主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢，达到延长生命，减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。

低温主要对菌种产生两方面的影响，首先，较低的温度可以减缓机体细胞的酶活，降低新陈代谢，达到保藏菌种的目的。其次，低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制，如果降温过程失误，同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。

⑷ 食品保存的七大方法 食品保藏的主要方法介绍

1、干制：干制主要是控制食品在的水分，降低水分活度，从而达到保藏目的。

2、冷冻：降低温度，抑制食品本身的生化活动和微生物的生长，从而达到保藏目的。

3、热处理：通过加热，使食品品质变性达到人们需要的要求，并且杀灭微生物，从而达到保藏目的。

4、气调储藏：主要用于水果蔬菜等植物类食品的保藏，通过调节密封室内的气体成分，从而抑制植物类食品的后熟过程，延长保存期。

5、腌渍：用盐，糖或者是酒腌渍食品，改变食品的渗透压，并有其他化学物质抑制微生物生长，从而达到保藏目的。

6、真空包装和密封：抽掉空气，使食品处于真空状态，抑制微生物的生长，从而达到保藏目的。

7、提高氢离子浓度：大多数细菌不能在pH4.5以下正常生长繁殖，所以可以利用提高氢离子浓度的方法进行防腐。醋渍就是向食物中加入食醋，例如常见的醋渍和酸发酵等，这类方法常用于蔬果中，如酸黄瓜、酸菜等。

⑸ 微生物菌种保藏的方法有哪些

菌种的优劣是食用菌生产成败的关键。菌种是国家重要的生物资源，也是微生物工厂首要的生产资料。由于微生物繁殖快、易变异，因此微生物菌种特别需要妥善保藏。世界各国对微生物菌种都很重视。中国科学院微生物研究所专门设立了菌种的保藏机构，为各生产单位收藏和供应各种优良菌种。当然就具体的生产单位而言，大量的生产用菌种还得靠自己来生产和保藏。
菌种保藏的目的：是使优良菌种经过较长时间后，仍能保持菌种的优良性状、生活能力及纯度，降低菌种的衰亡速度，确保菌种的纯一，防止杂菌污染及绝种。
保藏菌种的方法：人们在长期的生产实践中，积累了不少保藏菌种的经验，常用的保藏方法有：斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、滤纸片保藏法、谷粒保藏法等。常用保藏菌种的方法有以下几种：
（1）斜面低温保藏法这是最简单最普通的保藏方法。首先将菌种在适宜的斜面培养基（一般PDA）上培养成熟后，选择菌丝生长粗壮，边缘保存。一般保存温度4～6℃，除草菇和银耳菌种外（10～15℃），此方法对其他食用菌都适宜，一般菌种可保藏2～4个月，所以需定时移接。此法保藏虽然方便，但是保藏时间短，需经常转管，也很容易发生衰退变异现象。因此，不能用作长期保藏，最好与其他方法结合起来保藏。
另外，为了减少保藏期间培养基水分蒸发，琼脂最好加到2.5%。为防止菌种在保藏过程中产酸分的积累，应加入0.2%的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等缓冲盐类，同时，培养成熟后，最好将棉塞管口外剪平，并用矿蜡封或换以无菌木塞，这样做也可以减少培养基水分的散失，延长保存时间。
在农村如果没有冰箱，可采用土法保藏。即把保藏用的斜面菌种换上无菌橡皮塞，并用矿烛蜡封后密闭的广口瓶中，悬入井底保藏。（2）贮藏室保藏法原种和栽培种一般只在贮藏室短期保藏，贮藏室温度0～10℃为好。室内应清洁、干燥、无光，应经常检查温度和湿度，以降低其生活力，减少变异退化，防止杂菌污染，避免过早出菇。温度越高，保存的时间越短。

⑹ 菌种保藏的常用方法及特点

（1）斜面低温保藏。是一种最常用、最简便的菌种保藏方法。首先将需要保藏的菌种接到斜面培养基上，在适宜的温度条下培养，当菌丝健壮地长满斜面时，即将此试管菌种取出，放置于4 ℃的冰箱中保藏。特点：
①简单易行，适用于各类菇类菌种保藏，是目前生产及科研普遍采用的一种方法；②保藏时间短，需6个月转接一次，转管次数多菌丝变异的可能性大；③如改用橡皮塞并用石蜡扣，可保藏1年～3年。
（2）液体石蜡保藏。液体石蜡保藏也称为矿油保藏，即用矿油覆盖试管斜面试管保藏的方法。矿油是指无色、透明、黏稠、性质稳定、不易被微生物分解的石蜡油和液体石蜡，将其覆盖在斜面菌种之上，可以隔绝空气，防治培养基水分蒸发，抑制微生物的代谢活动，推迟细胞老化，从而达到长期保藏菌种的目的。特点：
①方法简便易行，保藏条件不严格，保藏时间长，可作为长期保藏菌种的方法；②菌种必须垂直放，放置不方便。
（3）滤纸保藏。滤纸保藏是一种以无菌滤纸作为食用菌孢子吸附载体长期保藏菌种的方法，又称滤纸孢子保藏法。特点：技术要求高，设备费用大，菌种不易衰老退化，菌种保藏时间长很少变异。
（4）自然基质保藏。自然基质保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含营养的自然生长的基质作培养基来保藏菌种的方法。自然基质很多，食用菌常用的自然基质有发酵的粪草、木屑及枝条基质等，取材方便，制作方法简便，保藏时间也较长。使用时，只需取一块、一粒或一条培养物放在新鲜的培养基上，并在适温下培养即可。特点：方法简便易行，保藏时间长。

⑺ 常见的食品保藏方法有哪几种

1、冷藏法：食物在20-25°C的时候是霉菌最适宜生长的温度，35°C左右是细菌最适宜生长的温度，所以降低温度就能抑制细菌生长，食物的保存时间就会拉长。一般蔬果不宜冷冻，只能冷藏，且最好两天以内吃完，肉食等如果超过两天不吃则应该冷冻保存。

2、风干法：食物中的水分是微生物的生长所必须的，如果能将食物脱水，就能达到抑制微生物生长的目的，通常吃的风干鱼、风干肉、干菜等保质期都比新鲜的久。

3、腌制法：食盐有杀菌的作用，其高渗透作用能使细菌脱水，所以用食盐腌制的食物可以长时间的保存。比如咸肉、咸鱼、咸菜等。

(7)简述常用的保藏方法扩展阅读：

注意事项：

1、要注意储藏温度。不同食物对储藏温度的要求是不同的，应根据不同的食物特点决定储藏的温度和方法。

2、如鱼类和生肉存放时要事先包装成一次能吃完的数量，放入冷冻室(温度一般应在-25~18℃),而烧熟的肉类食品则应冷藏保存，鲜蛋应储存在1~5℃的环境中。

3、蔬菜和水果的适宜温度是5~10℃，此温度能抑制微生物的生长繁殖，且能防止蔬菜、水果间隙结冰，避免在冰融化时因水分溢出而造成蔬菜水果的腐败。

⑻ 菌种保藏的方法 菌种保藏的方法有哪些

1、沙土保藏法。取河沙加入10%稀盐酸，加热煮沸30分钟，以去除其中的有机质。倒去酸水，用自来水冲洗至中性。烘干，用40目筛子过筛，以去掉粗颗粒，备用。另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，加自来水浸泡洗涤数次，直至中性。烘干，碾碎，通过100目筛子过筛，以去除粗颗粒。

2、滤纸保藏法。将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05 kg/cm，121℃灭菌30分钟。将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。

3、寄主保藏法。寄主保藏法用于尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。冷冻保藏法可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法，其中最常见的是甘油管冷冻保藏法。

4、甘油管保存法。甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。其方法是将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液。取1ml灭菌甘油放入与菌液充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。-20℃保存时间较短。或采用体积比为8：2的甘油-生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。该方法适用于一般细菌的保存，同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种，适用范围广，操作简便，效果好，无变异现象发生。甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液，其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用，且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分，从而更好地保护了待保存的菌株。

5、冷冻干燥保藏法。先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥），其中真空冷冻干燥法最常见。真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素，除不宜于丝状真菌的菌丝体外，对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用，不宜用冻干法保存的微生物不到2%。真空冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结，然后在真空条件下干燥，使微生物的生长和酶活动停止。为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害，要采用保护剂来制备细胞悬液，使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质，通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。即是使样品中的水分在冰冻状态下，抽真空减压，使冻结的冰直接升华为水蒸气，使样品达到干燥。干燥后的微生物在真空下封装，与空气隔绝，达到长期保藏的目的。