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组织学中最常用的标本制作方法

发布时间:2022-10-20 15:46:18

1. 请教教我,做标本。非常感谢

标本制作分很多种:血涂片、植物压片、金相切片等
举一个组织标本制作的方法
石蜡切片标本制作法:
这是最常用的组织学标本的制作方法。这种方法包括以下几个步 骤:取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色和封固。

1.取材、固定:动物组织在死后及离体后会很快解体,这可能是由于细菌或是由于组织 本身所含酶的分解所致。所以,被检动物在乙醚麻醉下或以不同方法处死后,应立即进行取 材和固定,以停止其分解作用,尽可能保存细胞、组织生前结构和成分,还能抵抗后继各步 骤处理时所产生的影响。 1)取材:即从动物体内取下被检的器官或组织。以肝为例,取材的步骤为:将动物麻醉 或处死后,腹部向上固着在蜡盘上,打开腹部,暴露肝,用锋锐的小剪或手术刀细致而又迅 速地取下一块厚度和大小适宜(0.5cm’)的肝,立即投入固定液内‘:。:
2)固定:固定是把组织用化学试剂浸泡,使其蛋白质等成分迅速凝固,尽量保持生前形 态结构而不发生死后的变化。固定时所使用的化学溶液,称为固定液。
常用固定液的配方:
①Susa液(HeidenhainfsSusafluid) I液: 氯化汞(升汞)饱和水溶液 B液: 氯化钠 三氯醋酸 冰醋酸 40%甲醛 蒸馏水 50.0ml o.58g 2.08g 4.oIml 20.0m1 80.0ml临用时取等量的I液和2液混合后,将组织块投入,固定12h。
Helly液(Helly`s fluid) 重铬酸钾 2.5g 氯化汞 5.0g 硫酸钠 1.0g 蒸馏水 100.0m1 40%甲醛 5.0m1(临用时加入) 。
⑧甲醛(10%nelltralformalin) 40%甲醒 10.0m1 蒸馏水 90.0m1。
④Bouin液(Bouinfsfluid) 苦味酸饱和水溶液 75.0m1 40%甲醛 25.0m1 冰醋5.0m1。
⑤Carnoy液(Carnoy`s fluid) 无水酒精 6ml 氯仿 3m1 冰醋酸 1m1 。

2.脱水、透明、浸蜡、包埋:这几个步骤是为了将组织包埋在较硬的物质即石蜡中,以 便于制备薄的切片。
1)脱水:普通固定液多是水溶液,必须先脱去水分,为浸蜡创造条件。脱水剂通常用酒 精。脱水的步骤是逐步升高酒精溶液的浓度,以去净组织块内的水分,并完全由无水酒精取 代。Susa液固定的组织块,须先入含碘的95%酒精,脱水并洗去组织内的汞沉淀,然后换 90%、95%酒精和无水酒精。10%甲醛液固定后的组织块,脱水时应依次经70%、80%、 90%、95%酒精和无水酒精。
2)透明:因石蜡不溶于酒精而溶于二甲苯,因而组织块经脱水后须再用二甲苯替代出酒 精。组织块浸入二甲苯后逐渐变得透明,故此步骤称为透明。透明时间依组织块大小及性质 而定。
3)浸蜡:将透明好的组织块置入已在温箱(56—58℃)内熔化的石蜡内,放置适当时间, 使石蜡浸入组织并替换出二甲苯。
4)包埋:在包埋器的内壁涂一层甘油,倾入熔化的石蜡,将浸透蜡的组织块放到里面, 摆好方位,挨蜡液表面凝固后,将包埋器投入冷水浴中,使石蜡冷却凝固,即得坚硬的组织 蜡块,经过修整即可用于切片。

3.切片:一般用轮转式切片机制作组织学切片。切片机一般结构为:切片刀固定台、载 物台(机头或标本固定台)、切片厚度调节装置、机轮等部件。切片时:①将组织蜡块固着在 木托或金属托上,再将蜡块托固定于载物台;⑧将磨好的切片刀固定于切片刀固定台,调好 蜡块与刀的距离;②调整切片厚度调节装置,一般调至切6ym厚度的小格上;④转动机轮,每 转动一周,载物台就向切片刀侧移动6ym,同时还垂直下降上升往返一次,于是切得6ym厚 度的切片一张;如机轮连续转动,就可得一条连续的切片蜡带。
取下切片,置于涂布一层蛋白甘油的载玻片上,滴上适量水,于酒精灯上徐徐加温,至 切片在水面展平,倾去水,摆好切片位置,放入烤片箱。待切片干燥并牢固地附着于载玻片 后,即可取出,进行染色。

4.染色、封固:染色的目的是使组织内的不同结构染上不同藏色以便于在显微镜下观察。 染色的方法很多,可根据研究目的选用。组织学和病理学教学标本最常用的基本染色方法是 苏木精·伊红染色(H.E染色)。该方法可将细胞核染成蓝紫色,细鲍质染成粉红色,使细 胞结构对比分明。因此,现将该方法介绍如下。至于在实习过程中遇到的其它特殊染色法,将 分别介绍于首次出现之处。
苏木精·伊红染色(hematoxylin and eosinstain,简称H.E染色):
1)染色的配方:
①Erich苏木精染液(Ehrlich’shematoxylin) ; 苏木精 2.98 95%酒精 100.0ml 蒸馏水 100.0m1 钾矾 3.0g 冰醋酸 10.0m1 甘油 100.Oml ‘的染液在至气中氧化2个月左右即可使用。
②1%伊红染液(1%Eosin) 伊红 1.08 蒸馏水 100.0
2)染色步骤:
①脱蜡:将裱好的干燥切片放入二甲苯浸2次,每次放置5。10min,以便将石蜡脱净。.
②下行酒精到水:脱蜡后,切片入无水酒精浸2次,每次2min,以便洗去二甲苯;然后 经95%、90%、80%和70%酒精,每次2min;随后入蒸馏水浸洗。若组织是用含汞的固定液 (如Susa液、Helly液)固定,还须经含碘的70%酒精脱汞后再入70%酒精及蒸馏水。
②苏木精染色:将蒸馏水浸洗后的切片放入Ehrich苏木精染液中,浸染5一10min。
④蓝化和分色:切片由染液取出以后,用自来水冲洗,挨切片变成蓝色后,再用稀盐酸 70%酒精溶液进行分色,脱去多余的染料(因为苏木精染色后,往往胞核着色较深,胞质及 结缔组织纤维等亦稍着色,影响下步染色及观察)。然后再用自来水冲洗,使之蓝化,约需15 ~30min。
⑤伊红染色:切片用蒸馏水浸洗后,放入1%伊红染液,浸染5—10min。
⑧上行酒精脱水:将切片用蒸馏水洗去附在载玻片上的染液后,经70%、80%、90%95% 酒精和2次无水酒精脱水,每次一般为2min。:
⑦透明:切片入二甲苯2次,每次2min。
⑦封固:从二甲苯中取出切片,在切片的组织上滴加适量树胶(balsam),上面再加一盖 玻片,使树胶布满于盖玻片与载玻片之间的间隙,封固即告完成。将封好的切片标本放入烤 箱.待盖玻片粘着牢固后,即得可供长期观察和保存的H.E染色标本。

2. 如何制作标本

昆虫玩赏者对于自己精心饲养过的昆虫,一般都有较深的感情,当它死掉之后也舍不得扔掉。要想今后能永远观看到这些昆虫,唯一的办法就是把它制成标本,长期收藏。
制作标本的方法主要有两类:即针插和液浸。
对于昆虫来说,一般多采用针插法制作标本。
用针插法制作标本都需经过下列8个步骤:
1.杀死 要想制作形体完整、色彩和形态都栩栩如生的标本,常常需要用刚刚捕捉到的新鲜活虫,让其在短时间内迅速死亡,可用毒性大,击倒力强的杀虫剂如三氯甲烷、四氯化炭等药剂来自制毒瓶或毒管。
毒瓶和毒管可采用广口的玻璃瓶来制作,瓶口的大小可根据虫体的大小而定,瓶塞宜用软木塞,不能用易被腐蚀的橡皮塞。先在瓶底放些木屑,然后将药液倒入,以达到刚好饱和,药液不外流为度,再用厚长纸或软木片将药层盖住。纸片或木片上要有几个透气孔,使毒气能够透出。
2.去除内脏 在制作标本前,必须先将昆虫的内脏取出,便于针插后能迅速干燥。但象蜻蜓中的豆娘那样身体极细的昆虫,则可不必去除内脏。
解剖时,可用镊子直接从虫的颈部和前胸背连接膜处插入,取出各个脏器。或在腹部侧面沿背板和腹板的连接膜处剪开一个口子,然后用镊子取出脏器。
接着用脱脂捏成一长条状的棉花栓,用镊子将其慢慢的塞人已掏空的昆虫腹腔内,保持虫体原来的体形。
3.临时保存 昆虫被毒气杀死后,应尽早将其从毒瓶中取出,除去内脏后,放在预先制备好的棉花纸包内,以避免携带时使虫子遭到挤压而变形受损。
棉花纸包的纸,宜选用吸水性好的,将其剪成方块,大小根据虫体的大小而定,以恰好能包住虫体为度。脱脂棉可扯取一块约0.5厘米厚、比纸稍小一点的小块,压平后放在纸片中间。
最好再备一小张白纸附置在脱脂棉上,作为临时棉签,以记载采集的时间和地点等。
准备就绪后,就可以在将虫子取去内脏之后,将其临时包裹在里面,防止其受到损坏变形。
保存期不宜过长,应在1~2天内,注意及时将包打开,让其通气干燥,不使变质。
4.还软 干燥变硬后的虫壳一般都会发脆,若不采取措施使其软化,很可能一碰就会碎成小片,所以在插针之前必须使其还软。
还软的方式是:用玻璃换软缸或别的器皿,底部加进蒸馏水,加入几滴石炭酸,在架空的架子上面放置虫子,加盖密闭2~3天后就可换软。
没有换软缸设备的,也可直接将虫浸于温水中,用热气也能使其还软。
5.针插 固定昆虫标本用的昆虫针,系用不锈钢制成,由细至粗,共有00号、0号、1号、2号、3号、4号、5号等7个级别。
从0至5号,6个级别的针都带有针帽。只有00号不带针帽,其长度仅为其他各号针长的一半,是作为双重针插标本用的。
对于死后还未干燥变硬的或是还软后的昆虫,就是用上述的针将其固定起来的。使用哪号针,应根据虫体的大小来定。
插针开始时,先将要制作的虫体放在刺虫台或桌缝上,再根据虫的大小,选用合适的号针,昆虫针插前翅基部背中线稍右部位,半翅目昆虫插前胸中央或小盾板中线偏右方,其他昆虫插中胸中央。
6.整姿 完成针插后的昆虫,还须根据该种昆虫最正确的姿势,对针插后的昆虫作局部调整,如翅膀的位置、虫足的弯曲度、触角的伸长方向等逐项加以调整,使其完全与活昆虫具有相同的姿态。
有些昆虫爱好者喜欢按他所喜欢的姿态来固定昆虫,可以根据自己的要求,适当调整昆虫身躯、翅、腿或触角的姿势和位置。
7.干燥 当插针和整姿之后,下一步就可将昆虫放置到安全通风出去干燥一段时间,这个阶段一般需时1~2周,就可以完全干透。
8.防腐和保存 最后一道程序就是在制成的昆虫标本上加放适量的防蛀防霉药剂,然后插上标签。若标本的数量较多,则需分门别类将标本置入标本盒内,将其置于避光的干燥处保存。
若需要制成昆虫生态景箱,还可将昆虫标本与经过干燥处理的植物、花草配置在同一个玻璃罩内,也可配置在其他艺术镜框中。

3. 组织学教学标本常用的制片技术是

课堂学习过程中基本组织形式,就是指教师采用一定的方式,运用一定的协调机制等来组织而形成的课堂学习活动的过程模式。例如有:

(一)环套式的组织形式

指通过教师编制一整套的、系统的、层层递进式的问题(问题情境),以此来引导学生不断地去探索、发现,直至问题的解决。

例如,在课堂学习两位数乘法(例题:17×32)是,教师就可以通过下列一组问题来引导学生思考:①17×32表示什么?能否用算式表示?②第一步先算什么?为什么先算17×30?③再算什么?两个结果怎样相加?④怎样用竖式相加?为什么这样对?找到什么规律?

(二)回旋式的组织形式

指通过教师编制的一个引导学生对问题情境的探索、思考与发现的系统,来组织学生的学习。并且这个系统不是直线式的,而是一个循环式的回路系统。在这个系统中,“情景①”和“情景②”之间构成一个不断比较、探索、思考和修正的回路,而“情景②”与“情景③”又构成了一个不断比较、探索、思考和修正的回路。如此往复不断地通过尝试、比较、修正,来逼近问题目标。

4. 植物标本和动物标本的制作方法

如何制作植物标本

材料用具:采集来的植物,旧报纸或草纸,刷子或纱布,标本夹或两块比台纸大一些的木板和书,吸水
纸或棉絮,台纸,标签,胶水,胶带或缝衣针和线,毛笔,刀片,剪刀,玻璃纸。

制作方法

:从采集来的同一种植物中选择各个器官最完备的做标本。用刷子或纱布擦掉标本上的污物,
保持标本清洁美观。把整理好的标本夹在干燥的旧报纸或草纸中,用标本夹压起来,或者放在
两块木板中间,上面用书或砖头压紧。在压的时候,应该注意标本是否平整,叶和花的位置是
否自然,避免互相遮盖。如果标本过长过大或者枝叶过密,应该加以适当修剪或弯折。如有硬
刺,要先压平。有些植物的叶片背腹面是有显着区别的,要把一部分叶片翻过来。

压标本的地方要通风、有阳光,否则标本就不容易干燥,而且会卷曲、变黑,失去原有的绿色。花的上
面必须放吸水纸或棉絮。每天要用干纸替换湿纸,湿纸晒干或烘干以后还可以用。在换纸的时
候要注意摆正植物的姿态。也可以把植物夹在吸水纸里,用熨斗熨平。

植物压干以后,就用线或胶带选几个点固定在台纸上。小的植物或枝叶柔软的标本,可以用毛笔蘸胶水
涂在标本的一面,粘贴在台纸上,略微用力按一按,搁置半天到一天,等它阴干后再用胶带把胶
水没有粘牢的部分在台纸上固定起来。如果用针叶树的枝条做标本,最好先把它浸泡在开水里,
或者放在稀薄的胶水中蘸一下,然后压平,这样可以防止针叶散落。

腊叶标本制作完毕以后,要在台纸的右下角贴上标签,学名、俗名、产地、采集日期、采集者。

昆虫标本的制作方法

根据昆虫本身的特性
(
例如身体、大小、软硬程度
)
、生活时期
(
例如幼虫或成虫
)
及研究需求等,会有
不同的制作方法。主要可分为下列几种:

一、针插法

此种方法适用于体型较大、体表较坚硬的昆虫,这也是最常见的一种标本制作方法。采集
后,在标本还没干燥以前,用昆虫针插在标本上并进行整姿或展翅等工

作,等干燥后即可完成。

二、微针及黏贴法

有些小型昆虫,用普通的昆虫针太大,无法插入虫体,此时就需要用更小的微针来插
虫,然后将微针插在小块的软木片上,再将普通昆虫针插在软木片上。若还有更小的昆虫,则可以用
黏胶,将虫右侧中胸部份黏贴在小型三角纸的尖端,再用一般昆虫针将三角纸插起来。

三、浸渍法

有些昆虫体表较为柔软,例如白蚁或完全变态类昆虫的幼虫时期,无法制成针插的干燥标
本。此时,可将虫体浸泡在液体中。通常先用专用固定液或热开水将虫体组织固定,再浸泡于
95%
的酒精中保存。注意,保存的玻璃瓶要密封,否则酒精很容易挥发。有时标本会脱水或虫体的体液流
出,而使酒精浓度变低,那时就必须更换几次酒精。

四、玻片标本

玻片标本适用于体型极小的昆虫,必须用显微镜或放大镜观察他的形态特征。

例如

虱子、
跳蚤、蚜虫等。一般步骤为,将采集标本浸泡在
10%
氢氧化钾溶液中,将虫体的骨骼软化一天后再取
出,用蒸馏水清洗,必要时以洋红等染剂染色,以利观

察。随后以
50, 60, 70, 80, 90, 100%
等浓度的
酒精,进行一系列脱水,再以阿拉伯胶封片,干燥
2-3
周后,即大功告成。

制作针插标本需要那些工具

一、昆虫针

昆虫针由不锈钢制成,长度约
3.5-4
公分不等,其尖端锐利可以插入虫体。有些昆虫针的另
一端有类似大头针的圆头,有些则无。昆虫针依大小分为
5-0
号,可适用于不同大小的虫。另外还有
微针,其长度约为昆虫针的
1/3
,并且更为细小。

二、展翅板

展翅板主要由三片软木板组成。下层一片约为
30
×
30
平方公分的正方型。

上层二片,约为
10
×
30
平方公分的长方型。上层二片平放对齐,互相平行排列,中间留约
0.5-1
公分
凹槽,供虫体腹部伸入,并使翅平放于上层板片上。

三、整姿台

整姿台主要是一片软木板,供针插标本后,将虫体各部位固定在整姿台上,使标本保持自然
姿态,不让其卷曲。

四、平均台

由三块不同高度的木板组成,在各块木板中,挖不同深度的中空洞口。针插昆虫后,

为维持昆虫在虫针上的高度及标签高度彼此一致,可将标本连虫针插入洞口,调整标本及虫

签高度,如此标本作好后,放在标本盒内,彼此高度较整齐划一,也较为美观。

五、虫签

为详实记录标本资料,每一个标本必须要有一张标签。标签是由大小约
1
×
1.5
公分之

硬纸制成,称为虫签。虫签上必须忠实地记录采集时间、采集地点及采集者等三项资料,缺一不可。

六、其他

制作标本时还需要大头针、压条纸、镊子等,以协助固定标本用。

如何制作针插标本

一、选择昆虫针

依昆虫标本大小不同,选定适合的昆虫针。例如金龟子等可用
5
号虫针,中型蝴蝶用
3
号针,而小型蚊子则用
0
号针即可。

二、插针

位置一般以插在昆虫中胸右侧为准。而椿象则插在小楯片右侧,。针插入的深度

到底要多深?一般以标本上方约还留有整只虫针的
1/3
长度为准。但有时必须视虫体厚度来调整。

三、展翅

有些昆虫要展翅,例如蝴蝶、蜻蜓等。展翅时,先将插好针的标本,小心插入展翅板中,使虫
体陷入凹槽内,而翅膀和展翅板呈水平位置。随后以镊子将翅展开,使前翅的后缘和身体呈垂直。将
翅调整至理想位置后,一手以压条纸压住翅膀,一手拿大头针插在压条纸四周,但不能插到翅膀,使
压条纸与展翅板紧密接合,借以固定翅膀。展翅后,另外调整一下触角、脚及腹部位置后,即大功告
成。

四、整姿

有些昆虫不需要展翅,例如蚂蚁、金龟子等。但在标本采集后,虫体会卷曲,死相很难看,为
使将来容易观察,以及维持标本美观,必须要整姿。整姿时,前足及触角向前,中后足向后,将身体
各副属器官伸展开来。用镊子将欲固定的部位放到适当位置后,以大头针协助将肢体固定在整姿板
上,再烘干即可。

五、烘干

当标本完成上述动作后,已经大致就绪,剩下的工作就是标本烘干。一般在
50
℃的定温箱中烘
干一星期左右即可。如果没有定温箱,也可以用日晒法或用烘衣机代替。千万不可以用微波炉、烤
箱。

六、保存

标本烘干后,即可放入标本盒中保存。理想的标本盒,其四周应该留有空隙,以便放置樟脑
丸。平常也可以用铁制的饼乾盒替代,在盒内铺一层保利龙板,将标本插在盒中保存。标本盒需放置
于通风、干燥处保存。一个保存良好的标本馆,一般标本可以维持上百年而不致损坏。每一个标本代
表着一个生命,应妥为爱惜,并善加利用。譬如说仔细观察他的形态,并尝试进行分类或其他科学研
究。

叶脉标本的制作方法


1
)材料

水槽、软毛刷、树叶等。


2
)制作方法

将树叶放在盛有清水的水槽中,放在温暖的地方。几天以后,水渐渐变色,会发出臭味。换水后继
续浸泡,泡到叶肉与叶脉脱落为止。如果没有脱尽,可以用软毛刷轻轻刷洗。然后用清水洗净放在玻璃
板上晾干。夹入标本夹,注上名称、采集地点、时间及制作人,就成为标本了。

种子标本制作方法

种子类型很多,有的是单一的种子,有的是果皮和种子愈合一起所成的果实。

不同的种子要单独处理保存。所用的种子必须是完整的和干燥的,如果种子含有较多的水分就进行
保存,那么将有发霉变质的可能。所以,获得种子后,应先晒干,也可以自然干燥或者烘干,然后装入
瓶中,用磨口瓶塞盖严,最后在瓶壁上贴标签,写明种子名称。

5. 谁有组织切片的制作过程

一、制备显微标本的切片法
一石蜡包埋切片制作法
这是最常用的切片法。以石蜡作为组织的填充支持介质,将整块组织加以包埋,最后凝固成均匀一致的固态结构。用切片机制取极薄的切片。为了让石蜡能浸入组织内部,需将组织经过脱水等处理。过程大致如下:
⑴固定:生物标本脱离机体或培养环境,细胞会发生自溶,腐败分解。因此,需用固定剂处理,使蛋白质凝固停止濒死或死后变化。凡供永久保存的标本都需经固定处理。
常用的固定剂是甲醛、乙醇等,能使蛋白质凝固。还有由几种试剂配成的固定液,例如Carnoy固定液,由无水酒精、氯仿、冰醋酸配成,固定力更快更强,不含水分,可避免水溶性物质如糖原等在固定过程中损失。
⑵脱水:是将组织细胞所含水分除去。通常用乙醇(Alcohol,酒精),浓度递升到 100%。此过程还使组织块进一步硬化。
⑶透明:是用既能溶于纯酒精又能融解石蜡的有机溶剂,将组织中的酒精取代,以便石蜡浸入。通常用二甲苯(xylene)为透明剂。
⑷浸蜡:在温箱内进行。已透明的组织块放入加热融解的石蜡中,让石蜡浸透组织,作为支持介质。
⑸包埋:将已浸蜡的组织块放入热融的包埋石蜡中,迅速冷凝,组织决便被蜡包埋。
⑹切片:用切片机。常用的切片机有轮转式、平推式的。用轮转式的易于切出连续切片。切片厚度随制片目的而调整。教学标本厚度多是5~6μm。
⑺贴片烤干:石蜡切片在温水上展平后,移在玻片上,烤干,即可供染色处理。染色后用树胶、盖坡片封固,可永久保存。
二冷冻切片法
冷冻切片法是借组织在低温下,冻结变硬而达到符合切片要求。冷冻切片法需有冷冻切片机,或在普通切片上配制冷设施。恒冷切片机是高级冷冻切片设备。它有一个恒冷箱,标本致冷台和切片机都装在箱内。恒冷箱的作用类似冰箱,可在一定范围内调整温度,其结构有利于保持箱内恒定低温,减少箱门打开时环境温度的干扰。切片机的轮转把手装在箱外,便于操纵切片。
冷冻切片法的优点是:在处理得当时,它可以最大限度地保持组织的新鲜状态。并且,由于不需经脱水、透明、浸蜡等过程中有机溶剂的处理,及湿箱浸蜡热的影响,甚至可不经固定。所以能很好地保存组织细胞的各种成分和酶的活性,因此在酶的组织化学研究中常用此切片法。
二、显示标本结构成分的染色法
一苏木素伊红染色法(HE染色法)
为最常用的染色法。该法应用于各种组织的染色,是组织学技术的基本方法,对任何液体固定的组织和各种包埋的切片均可使用,只是对不同包埋的切片法处理略有不同。下面简介石蜡包埋切片的HE染色法。
1、脱蜡:石蜡切片的组织内部充满石蜡,不能使水溶性染液着色,因此在染色前必须首先用二甲苯将石蜡脱掉,共两次。
2、下行入水:将已脱蜡的标本浸入无水酒精及各级酒精,使组织逐步接近水。3、蒸馏水略洗。
4、苏木素溶液染色约5—15分钟
5、自来水洗去多余染料。
6、入稀释的盐酸酒精溶液中分色,边分色边镜检,至核呈红紫色,细胞质无
色为合适。
7、分色后用自来水或加数滴氨水碱化,直至细胞核变成蓝色。这一步骤也可称为“蓝化”。
8、入蒸馏水洗去碱性水分。
9、入70%酒精→80%酒精各5分钟。
10、入伊红染液染色30秒至数分钟。
11、以95%酒精对伊红分色,至胞浆,结缔组织等呈桃红色。
12、上行脱水:染色后的切片,因组织内含水而不透明,不能清晰地观察其微细结构。因此,须将组织内的水分经各级酒精→无水酒精逐步置换,最后进入不含水份的透明剂内。
13、透明:入二甲苯透明剂,二次(各数分钟)。
14、取出切片:将组织周围多余的二甲苯擦去,滴树胶后加盖玻片封固。
结果:细胞核蓝紫色,胞浆、胶原纤维、肌纤维为桃红色,嗜酸性颗粒为鲜红色,弹性纤维呈明亮桃红色。
二组织化学和细胞化学染色法
组织化学和细胞化学,是将物理和化学的技术运用到组织标本,用显微镜和化学分析方法来研究组织和细胞内的化学成分,并观察该化学成分在组织、细胞内的定位、含量及其变化规律。这些化学成分借着化学反应所产生的不溶性着色物质来显示。对于某些化学成分,例如:Fe++糖原、核酸等,可以用直接或间接的化学反应产生着色沉淀而显示其部位和相对含量。对于酶类,显示它的活性,须有该种酶的底物(被该种酶作用的物质),由酶对底物的分解,直接或间接地生成着色物质而被显示。凡是在光学显微镜下观察细胞原位显示的化学物质,称组织化学,若用电镜观察细胞原位化学成分的着色部位,则称电镜细胞化学,下面从原理方面简要介绍几种常用的组织化学染色技术:
1、显示琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的硝基-BT法:
(Succinate dehydrogenase)
⑴酶的定位及生物学意义:
琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶,其存在于所有有氧呼吸的细胞,和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白(FP,Flavoprotein)为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。其催化过程如下:
弱-单甲(紫红色)
HOOC-CH2-CH2-COOHFPH2四唑(甲)↓
(有色)强-双甲(深紫蓝色)
(琥珀酸)(黄素蛋白)
HOOC-CH=CH=COOHFPH2四唑(无色)
(延胡索酸)
⑵原理:上述的反应最后一步的原理是,硝基-BT(Nitro-blue tetrozolyum,四唑氮蓝)系异环族化合物四唑盐,当它接受氢时,本身被还原为有色沉淀产物(甲
)(Formazan)。
⑶孵育液配制:
A液(贮备液)
0.2M磷酸缓冲液(PH7.6)10ml等量混合
0.2M琥珀酸钠(S01.succinate) 10ml备用
B液:
硝基四唑(Nitro-Br)2mg
2ml
0.2M磷酸缓冲液(PH7.6) 2ml
取:A液2ml
B液2ml孵育液
聚乙烯吡烷酮(PVP) 300mg
⑷方法:
①新鲜恒冷箱冷冻切片,厚6~8μm,平贴在盖玻片上。
②滴染法:将有冷冻切片的盖玻片(标本面朝上)平放于预热好的培养皿中(底部垫一湿滤纸),滴加孵育液至全部覆盖组织,于37℃温箱中孵育45~60分钟(肝,心肌组织15分钟即可)。
③于生理盐水中冲洗二次(轻晃,以防脱片)。
④10%福尔马林生理盐水固定10分钟。
⑤15%酒精浸洗5分钟(换二次)。
⑥甘油明胶封片。
⑸结果:酶活性强处呈蓝色颗粒(双甲沉淀),酶活性较低时形成紫红色单甲。在光镜下,该酶活性于肝小叶内分布呈明显分带现象,周边带强于中央带。在心肌细胞纵切面,酶活性颗粒沿心肌细胞长轴整齐排列,相邻心肌细胞的空白处为闰盘。

2、显示葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的铅法:
(Glucosel-phosphate phosphohydrolase)
①酶的定位及其生物学意义:
该酶主要位于内质网,是内质网的标志酶。G-6-Pase参与糖代谢,能水解葡萄糖-6-磷酸而释放出葡萄糖和磷酸。
⑵原理:G-6-Pase将底物(葡萄糖-6-磷酸钾盐)水解产生磷酸离子,后者被孵育液中的硝酸铅所捕获,最终反应物为颗粒状的硫化铅沉淀,其反应式如下:
酶Pb(NO3)2
葡萄糖-6-磷酸钾+H2O葡萄糖+磷酸

(NH4)2S
Pb2(PO4)2PbS↓
(无色)(棕色)
(试剂配制及方法详见组织学技术专着)
⑶结果:酶活性部位呈棕色硫化铅颗粒沉淀。在光镜下G-6-Pase活性颗粒较均匀地分布于胞质中。
3、显示碱性磷酸酶(APL)的钙钴法(Alkaline phosphohydrolase)
⑴酶的定位及其生物学意义:
ALP在碱性环境下能催化各种醇和酚的磷酸酯水解,参与磷酸根的跨膜转运过程,并有磷酸转移的作用,故在细胞膜上运输较活跃,如毛细血管内皮细胞,肾近曲小管刷状缘,肠上皮纹状缘等处,该酶的活性较高。
⑵原理:ALP将磷酸盐底物(如β-甘油磷酸钠等)分解产生磷酸根离子,后者为孵育液中的氯化钙捕获生成磷酸钙沉淀,但该沉淀为非金属盐,需加入硝酸钴,使其生成磷酸钴沉淀,因无色,再需通过硫化铵处理,形成棕黑色硫化钴沉淀而被显示。在PH9.2—9.4环境中表现最大活性。反应式如下:
ALPCa++
β-甘油磷酸钠磷酸离子Ca2(PO4)2

Co(NO3)2(NH4)2S
CO2(PO4)2CoS↓
(无色)(棕黑色)
⑶结果:酶活性部位为棕黑色CoS沉淀。
4、显示核酸的甲绿一派喏宁(Methyl green-pyronln)染色:
⑴原理:甲绿和派喏宁都是碱性染料,对两种核酸(DNA和RNA)能分别染色,其机制可能在于两种核酸分子都是多聚体,但聚合程度有所不同。甲绿具有两个带电荷的氨基,而派喏宁只有一个。因此在混合的染液中,二者竞争的结果是甲绿易与聚合程度较高的DNA结合呈现蓝绿色,而派喏宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色。
(试剂制备及方法详见组织学技术专着)
⑶结果:核内DNA呈蓝绿色,核仁及胞质内RNA呈桃红色。
5、显示糖原的过碘酸雪夫氏(PAS)反应:
⑴原理:糖原是一种动物多糖,无色,富含于肝细胞和肌细胞胞质中。PAS反应(Periodic acid schiff Reaction)能在糖原所在部位生成紫红色物质,从而将之显示。RAS反应分为两步:首先是强氧化剂过碘酸(Periodic acid,分子式为HIO4),将糖原中的葡萄糖分子的C-C键打开,将CHOH-CHOH氧化,生成二醛基,然后Schiff试剂中的无色亚硫酸品红分子与糖的醛基结合,生成新的紫红色复合物。
HIO4schiff试剂
多糖醛基紫红色反应产物
(氧化)
(试剂配制及方法详见组织学技术专着)
⑵结果:糖原呈紫红色颗粒状。

6. 有谁知道如何制作标本

翅目成虫通常是用插针展翅法制成标本。主要工具是展翅板。
展翅板是选用质量轻软的木板制作,尺寸可按图式比例制作。也可把展翅板做成固定式,需多做几种沟槽宽窄不一的,以便根据虫体大小分别选用。
展翅的操作步骤:
调整工具 使用移动式展翅板展翅时,需先根据虫体(头、胸、腹)的粗细移动板面,使虫体正好纳入槽内,以左右两侧不触及板体为准,然后拧紧旋钮。
放虫入槽 把已插针的虫体放进沟槽插在底板上(底板上粘一条软木板,易于插针)。用小镊子调理虫体,使体背与沟槽口面相齐。
挑翅固定 虫体在沟内固定后,先展左侧前后翅,再展右侧前后翅;同侧前后翅先展前翅,再展后翅。先用纸条在前翅基部附近把虫翅压在板面上,纸条上端用大头针固定在翅前方稍远一点的位置上,左手拉住纸条向下轻压,右手用解剖针(或大头针)向前轻挑前翅前缘与虫体体轴垂直,再稍向前挑一点,以待虫翅干燥后回缩时,正好与体轴相垂直。
然后把左侧触角沿前缘平行地压在纸条下面;紧接着挑展后翅,在不掩盖后翅前缘附近的主要斑纹特征的情况下,把后翅前缘挑在前翅内缘的下面,并拉紧纸条,平压后翅的翅面上,用大头针固定纸条下端。同上法再展右侧前后翅。为了稳固翅位,保持翅面平整,在左右两对翅的外缘附近,再各加压一纸条。
我从别人那里贴过来的
我初中时做过的,很简单,很好看,最好自己再做个精致的纸盒把标本贴在其中,如果蝴蝶的须子没了就用头发代替

昆虫标本制作
壹、为甚么要制作标本
每一次去采集,总会带回很多珍贵的昆虫标本,这些都是心血的结晶,如果不赶快作成标本,很快就会腐烂生臭,非常可惜。做好的标本可以永久保存,可以作为私人的收藏品,就像集邮一样,是一种很好的嗜好。标本也可作为学术研究之用,例如进行形态解剖学观察,分类特征鉴定,甚至作为发表新种的依据。此外,制作良好的标本,可提供做为教育展示之用,存放博物馆,让人们可以借由栩栩如生的标本展示,认识周围环境,进而体验自然之美,启动自然生态保育的心愿。
贰、标本制作方法有哪几种
昆虫标本的制作方法,根据昆虫本身的特性(例如身体、大小、软硬程度)、生活时期(例如幼虫或成虫)及研究需求等,会有不同的制作方法。主要可分为下列几种:
一、针插法
此种方法适用于体型较大、体表较坚硬的昆虫,这也是最常见的一种标本制作方
法。采集后,在标本还没干燥以前,用昆虫针插在标本上并进行整姿或展翅等工
作,等干燥后即可完成。在第四节中,我们会再详细介绍。
二、微针及黏贴法
有些小型昆虫,用普通的昆虫针太大,无法插入虫体,此时就需要用更小的微针来插虫,然后将微针插在小块的软木片上,再将普通昆虫针插在软木片上。若还有更小的昆虫,则可以用黏胶,将虫右侧中胸部份黏贴在小型三角纸的尖端,再用一般昆虫针将三角纸插起来。
三、浸渍法
有些昆虫体表较为柔软,例如白蚁或完全变态类昆虫的幼虫时期,无法制成针插的干燥标本。此时,可将虫体浸泡在液体中。通常先用专用固定液或热开水将虫体组织固定,再浸泡于95% 的酒精中保存。注意,保存的玻璃瓶要密封,否则酒精很容易挥发。有时标本会脱水或虫体的体液流出,而使酒精浓度变低,那时就必须更换几次酒精。
四、玻片标本
玻片标本适用于体型极小的昆虫,必须用显微镜或放大镜观察他的形态特征。
例如 虱子、跳蚤、蚜虫等。一般步骤为,将采集标本浸泡在10%氢氧化钾溶液中,将虫体的骨骼软化一天后再取出,用蒸馏水清洗,必要时以洋红等染剂染色,以利观
察。随后以50, 60, 70, 80, 90, 100%等浓度的酒精,进行一系列脱水,再以
阿拉 伯胶封片,干燥2-3周后,即大功告成。
参、制作针插标本需要那些工具
一、昆虫针
昆虫针由不锈钢制成,长度约3.5-4公分不等,其尖端锐利可以插入虫体。有些昆虫针的另一端有类似大头针的圆头,有些则无。昆虫针依大小分为5-0号,可适用于不同大小的虫。另外还有微针,其长度约为昆虫针的1/3,并且更为细小。

二、展翅板
展翅板主要由三片软木或保利龙板组成。下层一片约为30×30平方公分的正方型。
上层二片,约为10×30平方公分的长方型。上层二片平放对齐,互相平行排列,中间留约0.5-1公分凹槽,供虫体腹部伸入,并使翅平放于上层板片上。

三、整姿台
整姿台主要是一片软木或保利龙板,供针插标本后,将虫体各部位固定在整姿台上,使标本保持自然姿态,不让其卷曲。

四、平均台
由三块不同高度的木板组成,在各块木板中,挖不同深度的中空洞口。针插昆虫后,为维持昆虫在虫针上的高度及标签高度彼此一致,可将标本连虫针插入洞口,调整标本及虫签高度,如此标本作好后,放在标本盒内,彼此高度较整齐划一,也较为美观。
五、虫签
为详实记录标本资料,每一个标本必须要有一张标签。标签是由大小约1×1.5公分之硬纸制成,称为虫签。虫签上必须忠实地记录采集时间、采集地点及采集者等三项资料,缺一不可。
六、其他
制作标本时还需要大头针、压条纸、镊子等,以协助固定标本用。
肆、如何制作针插标本
一、选择昆虫针
依昆虫标本大小不同,选定适合的昆虫针。例如金龟子等可用5号虫针,中型蝴蝶用3号针,而小型蚊子则用0号针即可。
二、插针
插针位置一般以插在昆虫中胸右侧为准。而椿象则插在小楯片右侧,如图4-1。针插入的深度到底要多深?一般以标本上方约还留有整只虫针的1/3长度为准。但有时必须视虫体厚度来调整。

三、展翅
有些昆虫要展翅,例如蝴蝶、蜻蜓等。展翅时,先将插好针的标本,小心插入展翅板中,使虫体陷入凹槽内,而翅膀和展翅板呈水平位置。随后以镊子将翅展开,使前翅的后缘和身体呈垂直。将翅调整至理想位置后,一手以压条纸压住翅膀,一手拿大头针插在压条纸四周,但不能插到翅膀,使压条纸与展翅板紧密接合,借以固定翅膀。展翅后,另外调整一下触角、脚及腹部位置后,即大功告成。

四、整姿
有些昆虫不需要展翅,例如蚂蚁、金龟子等。但在标本采集后,虫体会卷曲,死相很难看,为使将来容易观察,以及维持标本美观,必须要整姿。整姿时,前足及触角向前,中后足向后,将身体各副属器官伸展开来。用镊子将欲固定的部位放到适当位置后,以大头针协助将肢体固定在整姿板上,再烘干即可。

五、烘干
当标本完成上述动作后,已经大致就绪,剩下的工作就是标本烘干。一般在50℃的定温箱中烘干一星期左右即可。如果没有定温箱,也可以用日晒法或用烘衣机代替。千万不可以用微波炉、烤箱或瓦斯炉。

六、保存
标本烘干后,即可放入标本盒中保存。理想的标本盒,其四周应该留有空隙,以便放置樟脑丸。平常也可以用铁制的饼乾盒替代,在盒内铺一层保利龙板,将标本插在盒中保存。标本盒需放置于通风、干燥处保存。一个保存良好的标本馆,一般标本可以维持上百年而不致损坏。每一个标本代表着一个生命,应妥为爱惜,并善加利用。譬如说仔细观察他的形态,并尝试进行分类或其他科学研究。

昆虫标本制作
昆虫采后的处理与保存:主要分为取虫、毒杀、包装、储存四个步骤
a.取虫 当虫子入网或掉入陷阱后,大型的虫子可用手直接取出,小型的虫子可以用吸虫管或吸虫瓶取出。吸虫管可以自制,常见的吸虫管是一种两端都有开口的玻璃管或塑胶管;而在开口上,则各具一插有细玻璃管的橡皮塞或软木塞,其中的一端并套上橡皮管,以便以口吸取小虫,但用于口吸的一端玻管内侧管口敷以纱布,以免虫子吸入口中。
蝴蝶、蛾、蜻蜓及其他大型翅易破损的昆虫,取出时要用拇指和中指或食指先捏住虫子胸部,使翅摺在背后。对于一些具有危险性或攻击性的昆虫可用大型镊子或戴上较厚橡皮手套取出。
b.毒杀 捕获昆虫,如欲将其制成标本,则必先予以毒毙,以免因虫子的挣扎而断脚断翅;而毒杀虫子的最常应用的方法,也就是利用毒瓶、毒管或一些挥发性毒剂将虫子毒杀。
· 毒瓶 毒杀所用的瓶子,可利用咖啡或酱菜的空玻璃罐;只要大小适当,密封性良好均适用。毒瓶内所用的药物可分为潮解式和挥发性两种。潮解式的药物如氰酸钾(KCN)或氰酸钠(NaCN)等具毒药剂,制法为先在罐底平铺一层约0.2-0.5公分的细木屑,用小木条将其压实;然后在其上铺上一层约0.2公分的药剂并予以压实;最后上方再铺上一层约0.5公分的细木屑,也予以压紧。此时,再于其上方铺上一层薄薄的石膏粉,并喷少许水于石膏粉上,使其固化,固化后最好再石膏面上放一张滤纸,以防止因虫挣扎而破坏石膏面。挥发性毒剂的毒瓶制法较简单,只要将沾上药剂的棉花放于罐底即可,或用橡皮筋吸饱药剂置于瓶底,上面再铺上一层石膏即可。药品可选用乙醚乙酯 (Ethyl acetate)、乙酸乙醚(Acetate ether)、乙醚、氯仿(CCl4)、苯等。
· 毒管 此种管子远较毒瓶小,直径约3-10公分。
· 毒袋 用一个中型的塑胶袋,内置一些挥发性的毒剂即可。抓倒的虫子只要投入瓶中即可,非常简便。如果捕虫网捕到蜂类或其他具攻击性的昆虫或者网内有很多小型昆虫时可直接将捕虫网置于毒瓶中,待其毒毙后,即可取出。
· 注射法 将酒精或热水用针筒注入虫体,可迅速杀死大型昆虫,尤其采集蛾类非常适用。
c.包装 毒毙后的昆虫要小心的包装,以免标本破损。包装材料常用有三角纸、糖果纸、小型的塑胶封口袋、塑胶瓶等。

· 三角纸 三角纸的功用,在于捕获蝶、蛾、蜻蜓等类昆虫为防止虫体的鳞粉脱落或翅损坏,所必备的纸袋,纸质以光面的腊纸或玻璃纸为佳;将纸裁成长方形,然后对摺成三角型,再摺成三角状,一张全开的纸约可制作32张大型三角纸,中型约64张,小型128张。同时准备大、中、小不同的三角纸,则使用起来就非常方便。
· 糖果纸包法 对于一些虫体厚实的昆虫如甲虫、椿象类可用包糖果用的玻璃纸将虫子像包糖果般包起来,则可避免损坏。但采集结束后,应立刻取出干燥,以免标本发霉损坏。
· 塑胶封口袋 小型塑胶封口袋装标本非常方便,但标本要尽快处理。
· 塑胶瓶 采到一些微小的昆虫,最好毒杀完后立刻放入塑胶瓶内,以70%酒精暂时保存,瓶外一定要贴上标签以免弄混了。
d. 储存 在野外采集时要特别已包装的标本,以免因挤压、碰撞使标本毁坏,以致前功尽弃。三角纸可装在三角箱内,和其他用糖果纸或塑胶袋包装的标本装在饼乾盒也可以。总之,必须用一各坚固的箱子存放,才不致于挤坏标本。如果不立刻作成标本,也要将虫子干燥以免发霉。

并不是仅仅取出内脏,肌肉全部要去除,骨骼的去留也很有讲究……很复杂,我有经验,如果你也住在锦州市的话我倒可以帮你。不过如果你要自己完成,就用网络搜一下吧。我先告诉你所需药品,你先准备:
骨骼防腐剂:石炭酸
皮肤防腐剂:砒霜500克、肥皂1500克、樟脑30克。
收敛剂:食盐、明矾。

植物标本制作

在野外采集、制作植物标本,是一件很有意义和乐趣的事。春天来了,正好趁此机会去郊外走走看看,享受一下大自然的乐趣。

要采集制作植物标本,需准备植物标本夹和吸水的草纸,标本夹可以自己动手制作,用木条做两片网式架,架上要留有可绑绳索的头,两条木架之间放吸水的草纸,用绳绑好随身携带。

全株植物(包括根、茎、叶、花)采下后,先将花瓣整理好压放在草纸上,然后将茎、叶整理好,每片叶要展平。不能因为叶多把叶子摘掉,一部分叶要反放,这样压好的标本叶正反面均有。如果茎、根太长超过标本夹的长度,可将茎或根折压在纸上,然后在上面铺几层吸水草纸,用木夹压紧绑好。

植物标本不能在太阳下晒,这样容易变色,压在标本夹内的标本每天要翻倒数次,每次换用干燥的吸水草纸,用过的纸在太阳下晒干以备下次翻倒时使用,标本夹压标本主要是靠吸水草纸,将植物的水分吸干。压好的标本,花、茎、叶的颜色不变。压好的植物标本可用来做教学用品和装饰品,别有情趣。

也可将植物标本压制在有机玻璃内,制成人造琥珀,这样保存的植物标本色彩更为鲜艳。

在野外活动如果你没有带标本夹,用餐巾纸或卫生纸代替吸水草纸,夹在纸板或塑料箱板中用绳绑紧也可,或将植物的叶或花夹在笔记本中。叶 子

植物标本的制作和保存

植物标本是植物教学和科研的一个重要手段,植物标本的制作是生物教学的主要内容之一,也是学生必须掌握的技能之一。

植物标本的制作主要过程是采集、整理、装作、标签和编号等过程,现将几种植物标本制作介绍如下:

一、标本的采集

1.尽可能选择根、叶、茎、花、果。因为花和果实是鉴定植物的主要依据,同时还要尽量保持标本的完整性。采集矮小的草本植物,要连根掘出,如标本较高,可分为上、中、下三段采集,使其分别带有根、叶、花(果),而后合为一标本。

2.要有代表性。要采集在正常环境下生长的健壮植物,不采变态的、有病的植株,要采能代表植物特点的典型枝,不采徒长枝、萌芽枝、密集枝等。

3.保护好所采集的植株。把采集到的标本放到采集箱里,如植株较柔软,应垫上草纸,并压在标本夹里。

4.要给所采集的标本挂上标签,并注明所采集的地点、日期及采集人的姓名,并且记下植物的生长环境和形态特征如陆地、水池、向阳、气味、颜色、花的形态、乳汁等。

二、腊叶植物标本的制作

腊叶植物标本的制作可分为台纸式和固定式两种。

1.台纸式

工具:标本夹、枝剪、小刀、记录本、笔。

材料:台纸、标签、草纸(或报纸)

把标本夹的一面放在桌上,上铺几层吸水性好的草纸,把采集来的标本放在纸上,加以整理,主要把枝、叶、花的正面向上展平,较长的标本可折成两三折放置,然后放上标签,再盖上几层草纸,这样,可使每件标本间隔着几层草纸置放,最后将标本夹的另一面也压上,并用绳缚紧,拿到阳光下晾晒,每隔一定时间(24小时)用干草纸换去标本夹里的湿纸,连续换5天左右,标本就会完全干燥了,最后,把已经干燥的标本分别固定在台纸上,并换上新标本,标本上要填写植物的名称、采集地点和日期、采集人的姓名。这样,一件台纸式植物标本就制作完成。

2.盒式

工具:尺、枝剪、刀、粘合剂

材料:硬的透明塑料板、吸水纸、透明胶。

将采集来的植物标本,用枝剪、刀修剪,剪取枝叶茂盛带花的部位,小的植株可保留全株,所取植物标本一般以高度25公分为准。用毛刷在清水中轻刷标本各部分,而后放置吸水纸上并置于阴凉通风处凉干。

根据选好的标本的大小量好尺寸,用刀将透明塑料板割出盒的盖和边盖,量取一硬纸板(三合板)做底板,然后用粘合剂粘合成一透明的盒状标本盒。

把已经干燥过的植株放入标本盒里,用透明胶粘合在底板上,贴上标签和编号以及采集人和采集地点、日期。

三、花的标本制作

工具:枝剪、500ml烧杯、较大的玻璃瓶、培养皿

材料:8#铁丝、木制底座、硅胶、硬纸板、回形针

取一段8#铁丝并盘旋,而后把盘在中央的一头拉起,使铁丝成盘旋状,再把拉起的一头铁丝插入花柄中,用硬纸板围成一圆筒,用回形针别住,圆筒的长度和直径以能罩住花为好,把花连同盘曲的铁丝放在培养皿中,用圆筒罩住,向内灌入硅胶直到淹没花为止,筒上盖一玻璃片,放在阳光下晒一周左右。而后放在大容器中,抽去纸板圆筒,硅胶散落,露出脱水后的干花。把干花连同铁丝插入木制底座,放入玻璃瓶中,加盖,用蜡封口。干花标本制作完成。贴上标签、采集地点和日期、采集人姓名。

四、蕨类植物标本的制作

蕨类植物有世代交替的生理特点,应采集孢子体(无性世代)和配子体(有性世代)的植物体。

采集孢子体以夏、秋为宜。可全株采集,孢子体及孢子体上具孢子囊群的羽片,可压制成腊叶标本。原叶体及带有幼小孢子体的原叶体,宜制成浸泡标本,可先将标本置于5%硫酸铜溶液中处理一昼夜,取出后用清水洗净,放在管口瓶注入5%福尔马林溶液,再用蜡封口保存。把制成的孢子体腊叶标本和配子体浸制标本按顺序装订于同一标本盒中,贴上签即可。

五、植物标本的保存

1.避光保存。阳光照射,标本易变色,失去原色。

2.低温保存。最好使标本室的温度不超过摄氏28度,不低于摄氏零度。温度过高,可使标本变形、流汁,腐烂变质;温度过低,可使标本色泽产生变化,皱缩。

3.保存时间不宜过长。

4.防止杂菌生长,要避免经常搬动。要做好标本柜,把标本分门别类上架保存。

请参考 植物标本和昆虫标本.

7. 制石蜡切片时,哪几步可以停顿并保存标本

石蜡切片标本制作法:

这是最常用的组织学标本的制作方法,包括以下几个步骤:取材、固定、脱
水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色和封固

8. 急救!请各位帮我找找“动、植物标本的制作方法

植物浸制标本的制作方法A 浸制的植物标本是把植物沉浸在浸制药液中而制成的。制作程序较为简单,把标本用清水洗净,缚在玻璃片上,然后沉入盛有浸制药液的标本瓶中,再用封合剂将瓶口封严,最后,在标本瓶的上端贴上标签。 浸制液常用的有以下几种: 7%酒精,其优点是可以使标本保存较长时间,缺点是容易使标本脱色。 5%福尔马林,其优点是可以临时保持实物的颜色,价钱也比较便宜,缺点是药液本身容易变成褐色。 另外,0.2%亚硫酸液或5%升汞(氯化高汞)溶液都可作浸制液。还有人在生物学通报上写过文章,介绍用大蒜100克磨碎,加入5克酚液、200克蒸馏水,在30℃气温下密闭12小时,然后过滤,再加2克甘油,用作浸制液效果较好。 一般的浸制标本,要想保存在酒精中,最好是从弱酒精(30%)开始,渐次转入强酒精(70%)中,以免标本皱缩变形。 福尔马林的浸透力较差。外皮较厚的标本,往往在未浸透前,内部已经腐烂。因此,用福尔马林液浸制标本时,标本内部也要注射这种浸制液,或把标本剥开,以免内部腐坏。 标本经过酒精或福尔马林浸泡以后,呈僵硬状态,不能用于解剖。要想作成供解剖实验用的材料,可以在浸制液内加少量的甘油。 上述浸制标本,在不很长的时间内就褪了色,标本因而失去了天然色泽。为了保存植物标本的天然颜色,需要配制特殊的浸制液,它们的配方因保存的颜色而不同。 绿色标本浸制液 将醋酸铜结晶加到50%冰醋酸溶液中,加到饱和状态为止。然后将这个饱和溶液用4倍水稀释,加热至80~85℃。把要做成标本的植物投到烧热的溶液中,继续加热。等到看见植物由绿变褐、由褐变绿时,即可把植物取出,用清水洗净,保存在5%福尔马林中。对于不适于烧煮或药液不易透入的植物,改用硫酸铜饱和水溶液700毫升、40%福尔马林50毫升、水250毫升的混合液,直接浸泡植物标本,浸泡的时间,要看植物幼嫩的程序以及种类而不同,一般地说,幼苗浸3~5天,而成长的植株需要浸8~14天。 最妥善的办法是从浸后的第二天开始,每天注意检查一次,看到植物由绿变黄,然后又由黄变绿时,即可取出,用清水将药液洗净,将洗净的标本投入5%福尔马林溶液中保存。 红色标本浸制液 用硼酸粉450克、75~90%酒精2000毫升、40%福尔马林300毫升、水2000~4000毫升混合起来,澄清,取澄清液保存红色标本,(如果是粉红色标本,可以不加福尔马林)。另一种方法是:用硼酸粉30克、40%福尔马林40毫升、水4000毫升的混合液浸渍标本1~3天,等到标本由红变褐时,取出投入加上少许硼酸粉的0.15 ~ 0.2%亚硫酸溶液中保存。标本在这种保存液中会重现红色。 黑色、红紫色、紫色标本浸制液 用40%福尔马林450毫升、95%酒精540毫升、水18100毫升制成混合液,澄清,取澄清液保存标本。另外一种方法是:用40%福尔马林500毫升、饱和氯化钠水溶液1000毫升、水8700毫升混合,澄清,取澄清液保存标本。 黄色、黄绿色标本浸制液 用亚硫酸饱和溶液568毫升、95%酒精568毫升、水4500毫升混合,澄清,取澄清液保存标本。上述方法是对一般黄色、黄绿色标本而言,由于这种颜色多是果实标本的颜色,根据果实种类不同,还可以对其浸制液有所区别。淡绿色的桃和杏:用0.1~0.5%亚硫酸水溶液1000毫升,加入5%硫酸铜溶液50毫升的混合液保存;梨、苹果、青葡萄:用1%亚硫酸100毫升、95%酒精100毫升、水800毫升、5%硫酸铜水溶液50毫升的混合液保存;黄番茄、柿子:浸入0.2%亚硫酸水溶液,加甘油少许。 封瓶口 标本瓶口的封合剂种类很多,仅介绍两种常用的材料。 石蜡 标本瓶的瓶盖盖好以后,把切碎的石蜡放在瓶口缝隙中,用烧热的镊子或小刀,把石蜡烫化、涂匀,等冷却以后,瓶口就封好了。溶化石蜡,切忌用火直接在瓶口上加热,特别是对用酒精作保存液的标本瓶,更要严格注意,以免发生意外。 鳔胶 将鳔胶切成小块,用水浸8~12小时,捞出后再切成更小的小块,除去未浸透的硬结,放入乳钵中捣成泥状,加少量水,使成均匀的乳剂,再放入重温锅内加热到粘稠为止。为了避免鳔胶在雨季发霉,可加入少量石碳酸。封瓶口时,瓶盖最好稍稍加温,然后用牙刷蘸鳔胶分别在瓶口和瓶盖上涂一薄层,立即将瓶盖盖好,5~6小时以后鳔胶就变干,将瓶口封死。 新鲜植物,建议用FAA固定液固定,本人曾经固定过数种标本,感觉不错,保存时间还可以,以备以后切片用等等。 再说题外话: 固定的目的和意义:固定就是用药品把细胞杀死,使细胞的原生质凝固,死后不发生变化,尽可能保持原来的结构以供我们观察。良好的固定剂,应是穿透力强,使细胞立刻致死,原生质全部凝固;不发生任何变形,增强折光率,并且不妨碍染色。 F.A.A固定液(又称万能固定液),在植物研究上,应用最多,为植物组织最常用的固定液。固定时间,不受限制,短为24小时,长可延至数月或数年。野外工作,非常便利。并且固定的材料,不妨碍染色,但对染色体的固定不佳。材料固定后,用50%酒精洗涤数次。 [FAA固定液配法] 组成:50%或70%酒精 90毫升 比例:冰醋酸 5毫升 福尔马林 5毫升 柔软材料用50%酒精,坚硬材料用70%酒精配制。

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9. 如何制作生物标本切片

最为广泛应用的方法:石蜡切片 不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。

石蜡切片制作基本技术 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。

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