❶ 10ml液体1ml移液10次
使用手动单道移液器。
手动单道移液器1-10mL是一种通用型移液器,移液器,也称移液枪,微量加样枪,微量移液器,微量移液枪,是一种小容量液体(ul)级的样品分配工具,有易拆卸和维护等特点。
手动单道移液器1-10mL的使用方法:1、选择合适的移液器:移取标准溶液时多使用空气置换移液器,移取具有高挥发性、高黏稠度以及密度大于2.0g每cm的液体或者在临床聚合酶链反应(PCR)测定中的加样时使用正向置换移液器。如移取15ul的液体,选择Zui大量程为20ul的移液器,选择50ul及其以上量程的移液器都不够准确。2、设定移液体积:调节移液器的移液体积控制旋钮进行移液量的设定。调节移液量时,应视体积大小而旋转刻度至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,以保证移取的jing确度。3、装配吸头:使用单通道移液器时,将可调式移液器的嘴锥对准吸头管口,轻轻用力垂直下压使之装紧。使用多通道移液器时,将移液器的第1排对准第1个管嘴,倾斜插入,前后稍微摇动拧紧。4、移液:保证移液器、吸头和待移取液体处于同一温度;然后用待移取吸液体润洗吸头1-2次,尤其是黏稠的液体或密度与水不同的液体。移取液体时,将吸头垂直浸入液面以下2-3mm深度,缓慢均匀地松开操作杆,待吸头吸入溶液后静置2-3秒,并斜贴在容器壁上淌走吸头外壁多余的液体。5、移液器的放置:使用移液器完毕后,用大拇指按住吸头推杆向下压,安全退出吸头后将其容量调到标识的Zui大值,然后将移液器悬挂在的移液器架上;长期不用时应置于盒内。
❷ 做ELISA实验需要注意一些什么
Elisa实验中应该注意的问题,包括样品稀释、试剂盒平衡、样品和试剂的混匀、加样、温育等问题,希望对你有用处.
Elisa试剂盒有着准确性高、灵敏度高、特异性强的诸多优点,深受广大用户朋友的喜爱.然而,在实验过程中,也需要注意很多问题.对此,武汉福来生物工程提醒你,需要遵守一些规则,才能更好地进行实验,取得较好的实验成果.
Elisa方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定.在Elisa测定中影响因素较多,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果.引起ELISA测定错误结果的原因主要有:标本因素;试剂因素;操作因素.
1.样品稀释
一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性.酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性.
2.试剂盒平衡
Elisa中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上.平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分.冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.
3.样品和试剂的混匀
在稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性.
4.加样
加样是一项很重要的步骤.加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡.加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性.加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附.
5.温育
温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素.ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间.
6.洗板
固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证ELISA测定的特异性.洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及时更换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去,否则可能影响试验结果.
7.显色
显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可.一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加.
8.比色
比色要注意波长的选择.以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而前者比色波长为450nm,后者为492nm,滤光片需根据要求随时更换.因此,容易出现滤光片错用的问题.
❸ 连续加样器使用方法
前进移液法(适用于常规液体移取)
1、将加样枪刻度或读数调至所需定量吸取的液体量值,并装上合适的吸头。
2、将按钮压至*停点位置(有明显的阻滞感)并保持,以挤出吸头内空气,形成吸头内负压。
3、将吸头浸入待移取的液体液面下2~3毫米深处,然后慢慢松开按钮,液体在大气压强的作用下进入吸头内。待吸入要求量的液体后,将加样枪撤离液面,擦去吸头外侧的液体,注意不能接触吸头尖部。
❹ 加油枪怎么使用加油枪怎么卡住不用扶
对于自助加油而言,如果油箱比较大,需要长时间扶着加油枪,时间长了会很累,加油枪怎么卡住不用扶?将加油枪插入油箱口后,4根手指扣下扳机,然后中指往外抬。此时会有个小卡扣被中指顶到扳机的对面卡上,然后松开剩下的三根手指即可,这样就可以将扳机卡住不用扶了,油加满以后会自动跳枪的。❺ Mehlich3(M3)法浸出液中磷的测定方法是什么
答:Mehlich3(M3)法浸出液中磷的测定方法如下:
(1)试剂配制
①钼锑抗试剂:称取酒石酸钾[K(SbO)C4H4O6·1/2H2O,分析纯]0.5克溶于100毫升去离子水中,配制成0.5%的溶液。另称取钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O,分析纯]10.0克溶于450毫升水中,慢慢地加入153毫升浓硫酸(分析纯),边加边搅动。再将100毫升0.5%的酒石酸锑钾溶液加入钼酸铵溶液中,最后加水至1000毫升,充分摇匀,贮存于棕色瓶中,此为钼锑贮备液。
在临用前(当天),称取抗坏血酸(即维生素C,分析纯)7.5克,溶于500毫升钼锑贮备液中,混匀此为钼锑抗试剂,有效期24小时,如保存在冰箱中则有效期更长。上试剂中硫酸的浓度为5.5摩尔/升(1/2H2SO4),钼酸铵为1%,酒石酸锑钾为0.05%,抗坏血酸为1.5%。此溶液可供100样次(方法一)或250样次(方法二)使用。
②磷工作液[ρ(P)=5毫克/升]:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,分析纯,105℃烘干2小时)0.2195克,置于400毫升去离子水中,加入浓硫酸5毫升(防长霉菌,可使溶液长期保存),转入1000毫升容量瓶中,用水定容。此溶液为50毫克/升磷标液。准确吸取此贮备液25毫升,稀释至250毫升,即为5毫克/升磷标液(此溶液不宜久存)。
(2)测定步骤
以下两种方法任选其一。
方法一:用移液管或加样枪准确吸取2.00~10.00毫升土壤浸出液(依肥力水平而异)于50毫升容量瓶中,加水至约30毫升,加入5.00毫升钼锑抗试剂显色,定容摇匀[注5]。显色30分钟后,在880纳米处比色。如冬季气温较低时,注意保持显色时温度在15℃以上,最好在恒温室内显色,以加快显色速度。测定的同时做空白校正[注6]。
方法二:用加样枪准确吸取1.00毫升土壤浸出液于50毫升塑料瓶中,用溶液分配器准确加水17.0毫升,再用加样枪准确加入2.00毫升钼锑抗试剂显色,摇匀,显色30分钟后,在880纳米处比色。冬季气温低时,保温措施同方法一。测定的同时做空白试验校正。该法速度快,浸出试液用量少,试剂用量也少,计算简单。
工作曲线:准确吸取5毫克/升 P标准溶液0、0.5、1.00、2.00、4.00、6.00毫升,分别放入50毫升容量瓶中,加水至约30毫升,加入5.00毫升钼锑抗试剂显色,定容摇匀,即得0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.6毫克/升P标准系列溶液。显色30分钟后,在880纳米处比色。
(3)结果计算
方法一:土壤M3—P,ω(P)=ρ(P)×v×D/m
式中:ω(P)——土壤有效磷(M3—P)的质量分数(毫克/千克);
ρ(P)——待测液中P浓度(毫克/升);
v——显色液体积(毫升);
D——分取倍数,浸出液体积/吸取滤液体积;
m——风干土样质量(克)。
方法二:简化计算公式为:
ω(P)=ρ(P)×200
❻ 生化使用加样枪时需要将枪头伸入液面底部吗
加样时尽量悬空加入,样品量太少可以贴壁,如果枪头伸入液面底部需要每次更换枪头。
❼ 加样枪污染怎么消毒
加样枪污染消毒方法:将鼻锥用1%消毒液浸泡至少1小时,用无菌蒸馏水小心漂洗,将消毒液完全清除干净,干燥。
旋松鼻锥,并清洗,如有需要则进行消毒或蒸汽灭菌,鼻锥部的小孔应被清洁并保持通畅。在将鼻锥旋回位置上以前,将原位置清洁,并轻轻涂上一层硅树脂(为加样枪提供的)。
加样枪可以完成连续接种20个试条。超过20个试条(更大不超过50个试条)时,在每完成一套鉴定-药敏试条接种后,须将加样枪放回立式充电座上。
维护保养时的注意事项
如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。最好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。
高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。
校准是可以在20-25度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。
使用时要检查是否有漏液现象。方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下几方面:
1、枪头是否匹配。
2、弹簧活塞是否正常。
3、如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体,然后再移液。
以上内容参考:网络-活塞正移动加样器
❽ 简述微量加样器的使用方法
微量加样器的使用方法主要为:
一、将移液抢在空气中缓慢按到一档,并用大拇指保持适当力度按压使之停止在一档置换液量的设置。然后将移液枪保持垂直姿势,慢慢垂直将枪头尖端浸入液体,一般将枪头浸入液体3-4毫米即可。二、缓慢松开拇指,让按钮缓慢恢复,这时液体会慢慢进入枪头中置换液量的设置。松开大拇指不要过快,否则容易吸入气泡。按钮完全恢复之后,将移液枪移开液体,并将枪头插入要加入的容器中(如离心管,试管、烧杯等)。三、将按钮按到一档,稍停片刻(1秒钟左右),继续将按钮一按到底(二档)置换液量的设置。这时液体就全部排出了。排液时按的速度可以适当快点,当然你要确保液体不飞溅出容器就完成了。
❾ 简要叙述加样器的使用方法及注意事项
加样器就是“移液枪”,这种取液器在生化实验中大量地使用,它们主要用于多次重复的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。
使用方法:量取的时候,根据量的容积大小调节后面的螺母,将适当大小的枪头,用右手操作半按下后面的按纽,将枪尖放在液体中,缓慢释放手柄按纽(粘度大的防止进入气泡),吸取液体;然后将按纽压到底部释放出液体。
注意事项:
移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性。不用酶标枪时不要一直拿在手里,不可以倒过来(特别是里面还有液体的时候)