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丙型肝炎基因检测常用方法

发布时间:2022-10-04 08:28:22

⑴ 做什么检查能查出丙肝

一、实验室检查
(一)血常规 急性肝炎初期白细胞总数正常或略高,一般不超过10×109/L,黄疸期白细胞总数正常或稍低,淋巴细胞相对增多,偶可见异型淋巴细胞。重型肝炎时白细胞可升高,红细胞下降,血红蛋白下降。肝炎肝硬化伴脾功能亢进可有血小板、红细胞、白细胞减少的“三少”现象。
(二)尿常规 尿胆红素和尿胆原的检测是早期发现肝炎的简易有效方法,同时有助于黄疸的鉴别诊断。肝细胞性黄疸时两者均阳性,溶血性黄疸时以原为主,梗阻性黄疸以尿胆红素为主。深度黄疸或发热患者,尿中除胆红素阳性外,还可出现蛋白质、红、白细胞或管型。
(三)肝功能检查
1、血清酶测定 (1)丙氨酸氨酶(ALT,曾称为谷丙氨酶GPT):是目前林装上反映肝细胞功能的最常用指标。ALT在肝细胞损伤时释放入血流。血清ALT升高,对肝病诊断的特异性比天冬氨酸氨酶(AST)高,因为其他脏器中ALT含量比AST低得多。急性肝炎时ALT明显升高,AST/ALT常小于1,黄疸出现后ALT开始下降。慢性肝炎和肝硬化时ALT轻度或中度升高或反复异常,AST/ALT常大于1。比值越高,则预后愈差,病程中AST/ALT比值降低,提示未损及肝细胞线粒体,预后较佳。重型肝炎患者可出现ALT快速下降,胆红素不断酶升高、胆分离现象,提示肝细胞大量坏死。(2)天冬氨酸转氨酶(AST,曾称为谷草转氨酶GOT):此酶在心肌含量最高,依次为肝、骨骼肌、肾、胰。在肝脏,AST80%存在于肝细细胞线粒体中,仅20%在胞浆。在肝病时血清AST升高,与肝病严重程度呈正相关。当病变持久且较严重时,线粒体中AST释放入血流,其值可明显升高。急性肝炎时如果AST持续在高水平,有转为慢性肝炎的可能。心肌其其他脏器细胞受损时,AST亦升高,应予以鉴别,以免此类疾病被肝炎症状所掩盖。(3)乳酸脱氢酶(LDH):肝病时可显着升高,但肌病时亦可升高,须配合临床加以鉴别。(4)Y谷氨酰胎酶(Y—GT):肝炎和肝癌患者可显着升高,在胆管阻塞的情况下更明显,YGT活性变化与肝病病理改变有良好的一致性。(5)胆碱酯酶:由肝细胞合成,其活性降低提示肝细胞已有较明显损伤,其值愈低,提示病情愈重。(6)碱性磷酸酶(ALP或AKP):正常人血清中ALT主要来源于肝和骨组织,ALP测定主要用于肝病和骨病的临床诊断。当肝内或肝外胆汁排泄受阻时,组织表达的ALP不能排出体而回流入血,导致血清ALP活性升高。 2、血清蛋白 主要由比蛋白(A),α1、α2、β及Y球蛋白组成。前4种主要由肝细胞合成,Y球蛋白主要由浆细胞合成。在急性肝炎时,由于白蛋白半衰期较长,约21天,以及肝脏的代偿功能,血清蛋白质和量可在正常范围内。慢性肝炎中度以上、肝硬化、重型肝炎时出现白蛋白下降,Y球蛋白升高,白/球(A/G)比例下降甚至倒置。血清蛋白电泳分析则从另一角度来检测白、球蛋白各成份的相对比值,起到相同的诊断作用。
3、胆红素 急性或慢性黄疸型肝炎时血清胆红素升高,活动性肝硬化亦可升高且消退缓慢,重型肝炎常超过171vmol/L。一般情况下,肝损程度与胆红素含量呈正相关。直接胆红素在总胆红素中的比例尚可反映淤胆程度。
4、凝血酶原活动度(PTA) PTA高低与肝损程度成反比。<40%是诊断重型肝炎的重要依据,亦是判断重型肝炎预后的敏感指标。
5、血氨 肝衰竭时氨的能力减退或丧失导致血氨升高,常见于重型肝炎。肝性脑病患者。
(四)其他生化指标检测
1、电解质 重型肝炎常见低K+、低Na+、低CI-,亦可有低Ca2+、低Mg2+ 、低P2-等。肝肾综合征时可出现高K+。
2、血糖 超过40%的重型肝炎患者有血糖降低。临床上应注意低血糖昏迷与肝性脑病的鉴别。
3、血浆胆固醇 60%—80%的血浆胆固醇来自肝脏。肝细胞严重损伤时,胆固醇在肝内合成减少,故血浆胆固醇明显下降,胆固醇愈低,预后愈险恶。梗阻性黄疸时胆固醇升高。
4、补体 当肝细胞严重损害时,补体合成减少。临床简则CH50和C3补体对预后有评估作用。
5、甲胎蛋白(AFP) HBV和HCV感染与HCC的发生有明显相关性,AFP含量的检测是率选和早期诊断HCC的常规方法。肝炎活动、肝细胞癌变和肝细胞修复时,AFP均有不同程度的升高,应进行动态观察。急性重型肝炎AFP升高时,提示有肝细胞再生,为预后良好的标志。 6、胆汁酸 血清中胆汁含量很低,当肝炎活动时胆汁酸升高。由于肝脏对胆红素和胆汁酸的运转活动不同,检测胆汁酸有助于鉴别胆汁淤积和高胆红素血症。
(五)肝纤维化指标一些检测项目已在临床上应用,如3型较胶原体,4型胶原、层连蛋白、透明质酸、脯氨酰羟化酶等,对肝纤维化的诊断有一定参考价值,但缺乏特异性。
(六)病原学检查 (1)抗HCV IgM和抗HCV IgG:HCV抗体不是保护性抗体,HCV感染的标志。HCV Igm阳性提示现症HCV感染,抗HCV IgG阳性提示现正感染或既往感染。抗HCV IgM的检测受较多因素的影响,如球蛋白、RF等,稳定性不如抗HCV IgG。目前国内多用酶免疫试验(EIA)检测抗HCV IgG,试剂质量与国外第三代诊断试剂持平。抗HCV IgG低滴度提示病毒处于静止,高滴度提示病毒复制活跃 (2)HCV RNA:HCV在血液中含量很少,分子杂交甚至一次性PCR均难以检出HCV RNA,常采用套式PCR以提高检出率。由于影响因素较多及技术要求较高易产生假阳性和假阴性,分析结果时应结合临床做出正确判断。HC RNA阳性是病毒感染和复制的直接标志。HCV RNA亦可定量,方法包括b五DNA探针技术、竞争PCR法、荧光定量法等,定量测定有助于了解病毒复制程度、抗病毒治疗的选择及疗效评估等。对HCV RNA尚可进行基因分型,方法包括序列测定、PCR、酶切、探针杂交等,基因分型在流行病学和抗病毒治疗等方法有一定意义,但不作为常规。
组织中HCV标志物的检测基本同HBV,可检测HCV抗原及HCV RNA,一般单位难开展此项目。
(七)影像学检查 B型超声有助于鉴别阻塞性黄疸、脂肪肝及肝内占位性病变。对肝硬化有较高的诊断价值,能够反映肝脏表面变化,门静脉、脾静脉直径,脾脏大小,胆囊异常变化,腹水等。彩色超声尚未可观察到血流变化。在重型肝炎中可动态观察肝脏大小变化等。CT、MRI的应用价值基本同B超,但价格较昂贵,且有不同程度的损伤性,如应用增强剂,可加重病情。(八)肝组织病理检查 是明确诊断、衡量炎症活动度、纤维化程度及评估疗效的金标准。还可在肝组织中原位检测病毒抗原或核酸,以助确定病毒复制状态。
二、诊断
(一)流行病学资料 有输血及血制品、静脉吸毒、血液透析、多个性伴侣、怀孕或哺乳期母亲HCV感染等病史的肝炎患者应怀疑丙型肝炎。
(二)临床诊断
1、急性肝炎 起病较急,常有畏寒、发热、乏力、头痛、纳差、恶心、呕吐等急性感染或黄疸前期症状。肝大质偏软,ALT显着升高。黄疸型肝炎血清胆红素>17.1umol/L,尿胆红素阳性。黄疸型肝炎的黄疸前期、黄疸期、恢复期三期经过明显,病程6个月以内。
2、慢性肝炎 病程超过半年或发病日期不明确而有慢性肝炎症状、体征、实验室检查改变者。常有乏力、厌油、肝区不适等症状,可有肝病面容、肝掌、痴、胸前毛系血管扩张、肝大质偏硬、脾大等体征。根据病情轻重,实验室指标改变(表3—1—2)综合评定轻、中、重三度。
3、重型肝炎 主要有:极度疲乏;严重消化道症状如频繁呕吐、呃逆;黄疸迅速加深出现胆酶分离现象;肝脏进行性缩小;出血倾向,PTA<40%,皮肤、粘膜出血;出现肝性脑病,肝肾综合征,腹水等严重并发症。急性黄疸肝炎病情迅速恶化,2周内出现Ⅱ度以上肝性脑病或其他重型肝炎表现者,为急性重型肝炎;15天至20周出现上述表现者为性肝炎病史。乏力,腹胀,尿少,肝掌,痴,脾大,腹水,脚肿,胃底食管下段静脉曲张,白蛋白下降,A/G倒置等肝功能受损和门脉高压表现。
(三)病原学诊断 丙型肝炎具备急、慢性肝炎临床表现,抗HCV 阳性或HCV RNA 阳性,可诊断为丙型肝炎。无任何症状和体征,肝功能和肝组织学正常者为无症状HCV携带者。

⑵ 基因检测是用什么方法最准确的是哪一种

基因检测有很多种方法,最常见的有PCR扩增法和探针杂交法。这两种方法都比较准确,灵敏度也很高。目前最常用的方法是PCR扩增法,灵敏度极高,准确度也有保证。

⑶ 丙型肝炎病毒rna定量标准是多少

丙肝是一种由丙肝病毒感染而引起的病毒性肝炎,丙肝病毒是丙肝患者发病和传染的根源,当患者体内丙肝病毒超出一定范围时,就会加重对肝脏的损伤,加剧患者病情,促使患者病情向着肝硬化和肝癌的方向发展,所以丙肝患者需要定期检查丙肝病毒RNA定量检查,明确体内丙肝病毒的数量,是否查出正常值范围,对明确患者病情和治疗提供科学依据,那?丙肝患者体内丙肝病毒的高低,主要是要看丙肝病毒RNA定量检查的结果。丙肝病毒RNA定量检查是丙肝早期诊断最直接最有效的方法,丙肝病毒RNA定量检查的正常范围根据实验时检测仪器、方法以及试剂的不同因而也有所不同。目前检测丙肝病毒的定量的方法有很多,常用的是核酸提取方法,试剂检测,荧光pcr检测,其中荧光pcr双通道检测系统检测结果最为精密,已经是目前很多正规肝病医院都在采用的一种技术,相对来说不会出现漏诊和误诊现象;而荧光pcr双通道检测系统检测的丙肝病毒定量值单位为拷贝/ml,一般其正常是小于等于102,一般情况下认为超过102拷贝/ml,就说明感染了丙肝病毒,而以IU/毫升为单位的定量检测值为10的三次方,如果超过10的三次方就说明感染了丙肝病毒(丙肝病毒RNA检查有什么意义)。丙肝病毒是一种隐匿性强,并且危害性也强的病毒,当确诊感染了丙肝之后,大多数丙肝患者都处于急性感染时期或者慢性时期,临床数据发现如果半年之内,患者病情没有得到有效治愈,很大程度上都会发展为肝硬化、肝癌状态,后果相当严重。所以,检查发现得了丙肝之后,一定要及时有效的到专业肝病医院进行治疗。

⑷ 丙肝的起因及HCVRNA检测方法是什么

至于丙肝其发生的机理,目前尚不明确。但实验研究表明:丙肝的肝脏病变部位有多数单核细胞浸润,发生炎症和坏死,这和HBV引起的肝脏病变相似。同时,感染HCV后,也和HBV感染一样容易发生慢性肝炎、肝硬化和肝癌。 这就说明,HCV感染引起的肝脏病变也和HBV感染相似,主要由病毒诱发人体免疫反应导致对肝细胞的兔疫损伤。而通过输血和应用血制品引起的传播也已确定无疑。此外,针刺、滥用注射药物、纹身、粪口途径、母婴垂直传播,以及唾液、飞沫、接吻和性接触等水平传播,也是引起丙型肝炎的可能原因。 因此,凡接受输血及血制品者;注射(尤其是静脉注射)、吸毒者;血液透析及肾移植病入;丙型肝炎家庭内接触者,尤其配偶;有不正当性行为或同性恋者;丙肝孕妇所生婴儿等,均是丙型肝炎的易感入群。此外,医务人员、实验室工作人员、处理血或血制品者,其丙肝的发病率也较高。 丙肝的HCVRNA检测 方法:定性:HCVRNA检测。采用逆转录PCR技术,已成为确诊丙型肝炎和初步评估干扰素治疗效果的重要手段。 定量:HCVRNA检测。常用的有两种方法,即目标基因扩增法,包括PCR定时检查和信号扩增法,如bDNA检测。商品化的试剂盒Roche检测法是标准化的PCR定量检测,能检测的HCV最小数量为每毫升小于1000个拷贝。同一个标本进行重复检测时,标准差为±0.311,可信度为95%。该方法既可作为确诊和准确判断丙型肝炎治疗效果的重要指标,也可以进行 HCV基因型的检查。其准确性和精确程度远远优于 HCVRNA定性检测。 想直接电话咨询的客户,不收取任何费用,24小时服务。 由权威专家为你解答体检相关问题,根据你的情况给予专业的个性化指导意见。

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