实验室常用的培养酵母的方法

A. 酵母菌培养基配方

培养酵母菌所用的培养基和霉菌所用的培养基是一样的，它们都属于真菌。

常用的有PDA培养基、孟加拉红培养基、高盐察氏培养基、酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂等等。培养7天后如果菌落长毛的就是霉菌，没有毛的就是酵母菌，形态可能会不一样，因为酵母菌不止一种，不同的酵母菌长出来的形态会不一样。

酵母菌的适宜培养基是米曲培养基，合成培养基有ypd，组成为：葡萄糖2%，蛋白胨1%，酵母膏0.5%。

最简单的培养基：

一) 麦芽汁培养基的配制

1.培养基成分

新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

2.配制方法

(1) 用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。

(2) 取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。

(3) 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20 ml，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。

(4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH至6.4。如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到 10-15波林后使用。

(5) 如配固体麦芽汁培养基时，加入2%琼脂 ，加热融化，补充失水。

(6) 分装、加塞、包扎。

(7) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。

(1)实验室常用的培养酵母的方法扩展阅读：

用于酵母菌的培养：

配方：1% Yeast Extract（酵母膏） ，2% Peptone（蛋白胨） ，2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉

配制方法：

1 溶解10gYeast Extract（酵母膏）, 20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中，如制平板加入20g琼脂粉

2 高压 115 度 15min

3 加入100ml 20gDextrose (glucose)（葡萄糖），(葡萄糖溶液灭菌后加入)

注：葡萄糖，yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应，导致培养基成分变化，所以要分别灭菌后再混合。葡萄糖可以过滤除菌，也可以115℃ 15min灭菌。

B. 如何自己在家培养大量的酵母菌

培养酵母菌：配制质量分数为3％左右的蔗糖溶液放入培养皿中，收集一些酵母菌（如：酒曲、甜酒水、腐烂发出酒味的水果汁、老面等）放入蔗糖水中，培养皿置于温暖的地方，2～3天后，酵母菌就会大量繁殖。

C. 啤酒酵母扩培的方法

一、实验目的：

学习酵母菌种的扩大培养方法，为实验室啤酒发酵准备菌种。

二、实验原理：

在进行啤酒发酵之前，必须准备好足够量的发酵菌种。在啤酒发酵中，接种量一般应为麦芽汁量的10%（使发酵液中的酵母量达1×107个酵母/mL），因此，要进行大规模的发酵，首先必须进行酵母菌种的扩大培养。扩大培养的目的一方面是获得足量的酵母，另一方面是使酵母由最适生长温度（28℃）逐步适应为发酵温度（10℃）。

三、实验器材：

恒温培养箱，生化培养箱，显微镜等。

四、实验步骤：

本次实验拟用60升麦芽汁，因此应制备6000 mL含1×108个酵母/mL的菌种，以每班10个组计算，每个组应制备约600 mL菌种。建议流程如下：

菌种扩大: 麦汁斜面菌种→麦汁平板—28℃，2天→镜检，挑单菌落3个，接种 50mL麦汁试管（或三角瓶）—20℃，2天（ 每天摇动3次）→550mL麦汁三角瓶—15℃，2天（每天摇动3次）→计数备用。

1. 培养基的制备

取协定法制备的麦芽汁滤液（约400 mL），加水定容至约600 mL，取50 mL装入250 mL三角瓶中，另550 mL至1000 mL三角瓶中，包上瓶口布后，0.05 Mpa灭菌30分钟。

2. 菌种扩大培养

按上面流程进行菌种的扩大培养（斜面活化菌种由教师提供）。注意无菌操作。

五、注意事项：灭菌后的培养基会有不少沉淀，这不影响酵母菌的繁殖。若要减少沉淀，可在灭菌前将培养基充分煮沸并过滤。

六、思考题：菌种扩大过程中为什么要慢慢扩大，培养温度为什么要逐级下降？

D. 啤酒酵母的培养方法

（1） 实验室扩大培养阶段
斜面原菌种——→斜面活化——→10ml液体试管 ——→100ml培养瓶 ——→1L培养瓶 ——→5L培养瓶 ——→25L卡氏罐
（2） 生产现场扩大培养阶段
25L卡氏罐—→250L汉生罐 —→1500L培养罐 —→100hL培养罐 —→20m3繁殖罐—→0代酵母
扩培过程中要求严格无菌操作，避免污染杂菌，接种量要适当。

E. 怎么培养酵母菌

培养条件：

1、酵母菌需要营养物质。

2、酵母菌能在PH值为3.0～7.5的范围内生长。

3、酵母菌必须有水才能存活，但酵母需要的水分比细菌少。

4、 酵母细胞生长最适温度在20～30℃。

5、酵母菌在有氧和无氧的环境中都能生长。

(5)实验室常用的培养酵母的方法扩展阅读：

用途

最常提到的酵母为酿酒酵母（也称面包酵母）（Saccharomyces cerevisiae），自从几千年前人类就用其发酵面包和酒类，在发酵面包和馒头的过程中面团中会放出二氧化碳。

因酵母属于简单的单细胞真核生物，易于培养，且生长迅速，被广泛用于现代生物学研究中。如酿酒酵母作为重要的模式生物，也是遗传学和分子生物学的重要研究材料。

酵母菌中含有环状DNA－－质粒，可以用来作基因工程的载体。

F. 酿酒酵母的培养方法是什么

同步培养是指通过一定的化学或物理方法使培养的微生物或动植物细胞处于比较一致的生理状态，生长发育在同一阶段的培养方法。它不同于分批培养，在分批培养中，细胞处于不同的生长阶段，生理状态与代谢活动都不一样。显然，分批培养中的群体表现行为不能代表单个细胞的生理生化特性。而利用同步化技术，可以使同步生长群体与个体行为基本一致，这样就能用研究群体行为的方法来研究细胞水平的问题。需要指出，细胞的同步化既可以在自然条件下发生，又可以经人为处理得到。前者称为自然同步化，后者称为人工同步化，本文主要讨论人工同步化的情况。酿酒酵母（Saccaromycescerevisiae）是广泛用于工业生产与科学研究的常用菌种之一，本文拟对酿酒酵母同步培养方法及其在科研中的应用作一综述。1酿酒酵母的生活周期与特性酿酒酵母是一种结构简单的真核微生物。一般情况下，酿酒酵母以出芽的方式无性繁殖，只有在特定条件下，才会出现多倍体有性生殖现象。酿酒酵母是研究细胞生长和分裂的理想对象。其细胞周期与高等真核生物类似，可以分为四个时期：G1、S、G2、M期，细胞周期各阶段有明显的形态变化，

G. 酵母菌的培养条件

培养条件：

1、酵母菌需要营养物质。

2、酵母菌能在PH值为3.0～7.5的范围内生长。

3、酵母菌必须有水才能存活，但酵母需要的水分比细菌少。

4、 酵母细胞生长最适温度在20～30℃。

5、酵母菌在有氧和无氧的环境中都能生长。

(7)实验室常用的培养酵母的方法扩展阅读

酵母菌培养基

酵母菌培养基常用的有PDA培养基、孟加拉红培养基、高盐察氏培养基、酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂等等。

培养酵母菌所用的培养基和霉菌所用的培养基是一样的，它们都属于真菌。培养7天后如果菌落长毛的就是霉菌，没有毛的就是酵母菌，形态可能会不一样，因为酵母菌不止一种，不同的酵母菌长出来的形态会不一样。