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鉴定抗体的效价常用哪一种方法

发布时间:2022-09-12 15:01:02

❶ 医学免疫学名词解释:效价

效价是指生物制品活性(数量)高低的标志,通常采用生物学方法测定。
具体到免疫学中,最长说的效价是抗体的效价。抗体的效价是指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间,以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果,称为抗体效价。
抗体效价一般是用ELISA方法。灵敏度很高的。原理是:在反应板上包上抗原,然后加入检测样品液(血清,组织液等,需要处理一下),如果检测样品中有抗体,就可以与抗原结合,再加入酶标记的抗抗体,就可以和样品中抗体结合,加入显色剂,显色后,检测,通过吸光度的多少,确定抗体的含量。在其他地方,还有血凝抑制试验,琼脂扩散试验,抗体蛋白纯化定量,抗体活性检测等。

❷ 测定抗体的效价时,琼脂扩散试验与ELISA哪一个更好

这两种方法理论上都挺好的,不过在实际操作中,由于琼脂糖扩散试验的结果评定是由试验人观察所得,没有ELISA的结果客观。

❸ 抗体效价的检测方法

多采免疫双向扩散法
【基本原理】
*指抗原和抗体在同一凝胶内都扩散,彼此相遇后形成特异性的沉淀线。
-将抗原与抗体分别加入同一凝胶板中两个相隔一定间距的小孔内,使两者进行相互扩散,当抗原抗体浓度之比相适宜时,彼此相遇形成一白色弧状沉淀线。
*优缺点:简便,但敏感性较低,易出现假阴性结果。
免疫双向扩散法的操作步骤
*将玻璃板用水洗净后用75%乙醇冲洗,晾干后放在水平台上备用。
*将1%agar 融化后,置56℃水浴。
*在玻璃板上铺胶,约1.5mm 厚,凝固后打孔(直径 3rnm),孔间距10mm。
l 抗血清(抗体预先作系列倍比稀释即ml 抗原样品,周围孔内每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。
*凝胶板置湿盒内,室温扩散24h。
*观察结果。
凝聚胺法测定孕妇血清IgG抗-A(抗-B)效价的方法待检血清与0.2 mol/L 2?硫基乙醇(2?Me)在试管内等量混合,放入37℃水浴1 h以破坏血清中的IgM抗体,吸取处理后的血清用生理盐水倍比稀释,稀释度分别为2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024,然后每管加入相应的3%~5%红细胞悬液,置37℃水浴30 min,观察是否凝集,不凝集者用生理盐水洗涤3次,然后加入低离子盐水介质(LIM液),混匀,滴入2滴凝聚胺,混匀后3 000 r/min离心30 s,扣摇肉眼可见明显的凝集(无凝集者须重做),再加入2滴重悬液,轻摇,观察凝集是否消失,凝集1 min内不消失者表示受检者血清中含有IgG型抗?A(抗?B)。
抗体效价检测的其它方法
*环状沉淀试验,需较多的抗血清,现已很少用;
*对流免疫电泳,比琼脂免疫双扩散法敏感,较简便、实用;
*酶联免疫吸附试验 (ELISA)。
通常抗体效价低于1:128是没有问题的,有些孕妇高达1:256以上,而且抗体效价最好1个月查上一次,有时候会有所变化。

❹ 抗体定量的方法

抗体应该测定的是效价吧?测定抗体效价一般采用的方法是免疫双扩散法。

❺ 抗体效价测定的方法内容

1.取小试管10支,分别标明1-10号,各管加生理盐水0.2ml,用刻度吸管吸取被检者血清0.2ml加入到第1管充分混匀,再用同一吸管从第1试管中吸出0.2ml加入到第2管,充分混匀后再吸取0.2ml加入第3管,以此倍量稀释。取第10管的0.2ml稀释液弃去。使成 1:2、1:4……。
2.然后各管再加等量含相应抗原的5%红细胞盐水悬液,振摇试管架使之混匀,置 37℃水浴中放置1h,以3000r/min离心15s,观察凝集结果并记录;对凝集强度为“1+”以下及不凝集者,用生理盐水洗涤3遍,末次吸干上清液;各加生理盐水2滴,取出每管加抗人球蛋白试剂2滴,以3000r/min离心15s,观察凝集结果并记录。出现凝集的最高稀释度的倒数为效价。例如右图表抗A血清效价测定结果为256。

❻ 有什么好的方法可以快速判定疫苗的效价是否达标

其实从这个问题也能看得出大家的迫切心情。不药博士和大家一样,都想知道自己家的孩子到底有没有碰到不合格疫苗?也尽量的写文字纠正一些经过事件发酵,给大家造成的误解的问题。

别的药品不敢说,其实我国国产疫苗管控体系及质量已经达到国际标准了,并被世卫组织认可。部分国产疫苗甚至比国际标准更严格。为什么大家不信任疫苗了,不是国产疫苗不好,而就是被这么一小部分人怍的,就像有部分人医闹不相信医生一样。我所知道的有些部门这么多年辛辛苦苦的默默付出,推动了疫苗质量的提升,但最终还是被这一颗老鼠屎打败了。

【不药博士】简介

此博士哥哥药学出身,却也立志做一名优秀的营养师,人帅不帅不知道,但内容一定很帅!

❼ 制备免疫血清时,为检测抗体效价,家兔最常用的采血方法是

正确答案:B
解析:制备免疫血清时,免疫家兔后,常采用耳缘静脉采血来检测家兔产生抗体的效价

❽ 求助ELISA测定抗体效价方法

我用的是间接ELISA,以下自我的毕业论文:
将抗原用包被液稀释至约10 ?g/mL;分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释,稀释梯度从1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450),计算阳性血清与阴性血清的吸光度之比(P/N),当P/N<1.5时为阴性,当P/N≥1.5而<2.1为可疑,当P/N≥2.1为阳性,将P/N≥2.1时所对应的抗体最高稀释倍数作为抗体的效价。

如何测定蛋白抗体的效价

在免疫期间,不仅各个不同的动物,而且同一动物在不同的时间内抗血清效价、特异性、亲合力等都可能发生变化,因而必须经常地采血测试。只有在对抗血清的效价、特异性、亲合力等方面作彻底的评价后,才可使用所取得的抗血清。
1.效价 抗血清的效价,就是指血清中所含抗体的浓度或含量。效价测定的方法常用的是放射免疫法,此法对所有的抗体均适用。某些由大分子(如蛋白类)抗原所产生的抗体,可用双扩散等方法测定。前者测定的效价极为精确。而后者则粗糙得多。
(1)放射免疫法: 以不同稀释度的抗血清与优质标记抗原混合,孵育24h后,测定其结合率。通常以结合率为50%的血清稀度和为效价。如某抗血清的结合率为50%时的稀释度为1:15000,则该血清的效价就是1:15000。抗血清的效价,除由抗血清本身的性质决定外,还受标记抗原的质量、孵育时间,所用稀释液的成分及其pH等因素的影响,在工作中必须引起注意。(测定方法见第8章 )
(2)双向扩散法:利用大分子抗原和抗体在琼脂平板上扩散,两者在相交处产生沉淀线,以观察和判断抗血清中是否有抗体及其浓度。

❿ 抗体的荧光抗体鉴定

荧光抗体在使用前应加以鉴定。鉴定指医学标记包括效价及荧光素与蛋白质的结合比率。抗体效价可以用琼脂双扩散法进行滴定,效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率(F/P)的测定和计算的基本方法是:将制备的荧光抗体稀释至A2801≈1.0,分别测读A280 (蛋白质特异吸收峰)和标记荧光素的特异吸收峰,按公式计算。
F/P值越高,说明抗体分子上结合的荧光素越多,反之则越少。一般用于固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜,用于活细胞染色的以F/P=2.4为宜。
抗体工作浓度的确定方法类似ELISA间接法中酶标抗体的滴定。将荧光抗体自1:4~1:256倍比稀释,对切片标本作荧光抗体染色。以能清晰显示特异荧光、且非特异染色弱的最高稀释度为荧光抗体工作浓度。
荧光抗体的保存应注意防止抗体失活和防止荧光猝灭。最好小量分装,-20℃冻存,这样就可放置3~4年。在4℃中一般也可存放1~2年。

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