消化炉使用方法

1. 消化炉的用法

消化炉采用井式电加热方式，使样品在井式电加热炉内加热取得较佳热效应，提高消煮速度。下面我就给大家介绍消化炉的用法。

消化炉的用法

1、消化炉在蒸馏时翻滚剧烈，是水蒸气大量进入消化管液体翻滚，并非剧烈反应造成;而且仪器有超压保护装置，可以保持管路内部常压，避免危险。

2、消化炉的蒸馏水桶内要装蒸馏水或纯水，机器长期不用要将蒸馏器里水放掉。

3、消化炉开机没声音，如果机器电源开关内红灯亮，说明是定氮仪内保险管烧断了，保险管位置在机器内部靠近电源开关接口5公分处黑色壳子内。

4、消化炉蒸锅不加热，不能产生蒸气， 原因：如果机器能正常加碱，不能加热出蒸气，判定加热丝可能烧坏了，可拿万用表量一下加热丝正负极，不通可确定加热丝损坏，换新加热丝。如果及其不能正常加碱，开机后又没有任何声音，判断是保险丝烧断了，保险管位置在机器内部靠近电源开关接口5公分处黑色壳子内。

5、消化炉工作中不能加碱、加碱没有声音，原因：见车碱桶是否漏气，被气充鼓机器才能正常工作;仪器使用时间长，碱管内部会结晶，加液时流速降低，没有声音。

6、消化炉使用中发生消化管浸满水，是由于机器控制水位器导电性降低造成的，解决办法：打开水位器取出探针用砂纸打磨，去掉氧化层;在蒸馏水桶里加入3-5克实验室用氯化钠，摇匀溶解。

消化炉的分类

320智能消化炉

主要特点

HYP-320智能消化炉是由 上海纤检仪器有限公司研发 。

炉内温度连续可调，控温精度高，控温稳定。铝锭一体加热，温差小，样品消化均匀。控制面板与炉体散热隔离，减少炉体高温辐射对控制系统的影响。过热保护：温度超过500℃时自动切断加热电源并报警。限温保护：可设置温度上限，若实际温度超过上限温度，仪器将自动报警并切断加热电源，防止控温系统失灵后温度不断上升而报废样品。 自动6阶段升温：可设置连续6个阶段的温度和保温时间，仪器将自动按顺序完成。更适于牛奶等易产生泡沫的样品。毒气罩排气，可不用将仪器置于通风橱中使用。完善的周边附件配置，方便使用者称样，摆放等工作 。

技术参数

测定范围： 0.1mg～200mg氮; 测定数量：20个/批.; 速 度：45min/批; 消化管容量：250ml; 控温范围：室温～480℃; 控温精度：±1℃; 平均升温速度：30℃/min; ★控温方式：6阶段无触点控温; ★废气密封材料：聚四氟乙烯;加热方式：铝合金一体加热; ★安全功能：过温保护，限温保护; ★显示：2.5寸液晶屏，同时显示实际温度与保温时间，并倒计时，到时后自动停止加热并报警;电 源：220(V)±10% 50~60HZ; 额定功率： 2000W; 外形尺寸：405×435×475(mm);重 量： 27Kg;

二十孔消化炉

主要特点

HYP-1020消化炉

★消解装置采用数显无触点断开控温，设定温度与实际温度双重显示，加热体采用铝合金材料，具备工作室升温快，炉孔间温差小的优点;

技术参数

1. 测定范围： 0.1mg～200mg氮; 2. 测定数量：20个/批; 3. 速 度：45min/批; 4. 消化管容量：标配250ml;

5. 控温范围：室温～500℃ 6. 控温精度：±1℃; 7. 升温速度：30℃/min; 8. 控温方式：采用数显无触点断开控温; 9. ★废气密封材料：聚四氟乙烯; 10. 加热方式：铝合金一体加热; 11. 电 源：220(V)±10% 50~60HZ;额定功率： 2800W; 外形尺寸：392×360×485(mm)重量25KG

4孔恒温消化炉

消化炉介绍

HYP 4孔恒温消化炉

按经典凯氏定氮法为原理，广泛应用于粮食、食品、饲料、土壤、肥料、水、沉淀物、化学品乳制品、酿造、制糖、药物、煤炭、橡胶等物质的消解，具有测试精确、安全可靠、操作简便等特点。

技术参数

测定范围： 0.1mg～200mg氮;测定数量：4个/批; 速 度：45min/批 ;消化管容量：标配300ml;

废气密封材料：聚四氟乙烯升温速度：30℃/min;电 源：220V±10% 50~60HZ;

额定功率：1000W; 外形尺寸：430×310×485(mm);重 量： 17Kg;

8孔消化炉

主要特点

HYP-1008八孔消化炉

1、★采用数显无触点断开控温，设定温度与实际温度双重显示，加热体采用八个陶瓷炉芯，双排开关，单排使用;

2、★废气密封采用聚四氟乙烯材料加工制成，耐酸、耐碱、耐高温，保证操作安全;

3、消解时在不需通风橱的条件下消化管内溢出的SO2等有害气体，全部通过毒气罩，经过抽气泵溶于水中排入下水道，避免了废气对环境的污染，确保了操作人员的人身安全。

技术参数

测定范围： 0.1mg～200mg氮; 测定数量：8个/批; 速 度：45min/批 ;消化管容量：标配300ml;

控温范围：室温～500℃ 控温精度：±1℃; 升温速度：30℃/min;控温方式：采用数显无触点断开控温;

★废气密封材料：聚四氟乙烯;加热方式：陶瓷炉芯加热;电 源：220(V)±10% 50~60HZ;

2. 鸡肉、瘦肉的主要成分是（ ），检验方法为（ ）。

主要成分是蛋白质。检验方法是剀氏定氮法。

蛋白质的测定方法

pro的测定方法分为两大类：一类是利用pro的共性，即含氮量，肽链和折射率测定pro含量，另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定pro含量。但是食品种类很多，食品中pro含量又不同，特别是其他成分，如碳水化合物，脂肪和维生素的干扰成分很多，因此pro的测定通常利用经典的剀氏定氮法是由样品消化成铵盐蒸馏，用标准酸液吸收，用标准酸或碱液滴定，由样品中含氮量计算出pro的含量。由于食品中pro含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微量法，但它们的基本原理都是一样的。

一 凯氏定氮法

这种方法是1883年Kjeldahl发明，当时凯氏只使用H2SO4来分解试样，来定量谷物中的pro，他只知用H2SO4分解试样，而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程，所以只使用H2SO4分解试样，需要较长时间，后来由Gunning加入改进，他改进的办法是在消化时加入K2SO4使沸点上升，这样加快分解速度，因为温度由原来硫酸沸点的380上升到400℃，提高了不到67℃所以速度也就加快了，凯氏定氮法至今仍在使用。

我们在检验食品中pro时，往往只限于测定总氮量，然后乘以pro核算等数，得到蛋白质含量，实际上包括核酸、生物碱、含氮类脂、叶啉和含氮色素等非蛋白质氮化合物，故称为粗pro。

1 凯氏常量定氮法：

不论常量、半微量以及微量定氮法它们的原理都是一样的，首先第一个步骤是消化：

（1）消化：样品与硫酸一起加热消化，硫酸使有机物脱水。并破坏有机物，使有机物中的C、H氧化为CO2和H2O蒸汽逸出，而pro则分解氮，则与硫酸结合成硫酸铵，留在酸性溶液中。

（2）在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解，它与硫酸反应生成硫酸氢钾，可提高反应温度，一般纯硫酸加热沸点330℃，而添加硫酸钾后，温度可达400℃，加速了整个反应过程。此外，也可以加入硫酸钠，氢化钾盐类来提高沸点。其理由随着消化过程硫酸的不断地被分解，水分的逸出而使硫酸钾的浓度增大，沸点增加。加速了有机的分解。但硫酸钾加入量不能太大，否则温度太高，生成的硫酸氢铵也会分解，放出氨而造成损失。

为了加速反应过程，还加入硫酸铜，氧化汞或硒粉作为催化剂以及加入少量过氧化氢，次氯酸钾作为氧化剂。但为了防止污染通常使用硫酸铜。

所以有机物全部消化后，出现硫酸铜的兰绿色，它具有催化功能，还可以作为碱性反应指示剂。

（1）蒸馏：样液中的硫酸铵在碱性条件下释放出氨，在这操作中，一是加入氢氧化钠溶液要过量，二是要防止样液中氨气逸出。

（2）吸收与滴定：

蒸馏过程中放出的氨可用一定量的标准硫酸或标准盐酸溶液进行氨的吸收，然后再用标准氢氧化钠溶液反滴定过剩的硫酸或盐酸溶液，从而计算出总氮量。

半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收后，再用标准盐酸直接滴定，硼酸呈微弱酸性，用酸滴定不影响指示剂变色反应，它有吸收氨的作用。

1．操作步骤：

准确称取样品中0.50-2.00g→于500ml凯氏瓶中→加10g无水K2SO4→加0.5gCuSO4→加20ml H2SO4→在通风橱中先以小火加热，待泡沫消失后，加大火力，消化至透明无黑粒后，将瓶子摇动一下使瓶壁炭粒溶于硫酸中→继续消化30分钟→至到样液呈绿色状态，停止消化，冷却→加200ml水→连接蒸馏装置→用硼酸作吸收液→在K氏瓶中加波动珠数粒和80ml50% NaOH→立即接好定氮球→加热→至到K氏瓶内残液减少到三分之一时，取出用水冲洗→用0.1N HCl滴定。

N（V2-V1）0.014

W

计算：

总氮量%= （N(V2-V1)×0.014）/W × 100

0.014----氮的毫克当量数

pro%=总氮%×K

乳制品K=6.38（N=15.7%）

小麦粉K=5.79（N=17.6%）

动物胶K=5.6（N=18.0%）

冰蛋K=6.7（N=14.8%）

大豆制品K=6.0（16.7%） K=6.25则（N=16%）

K-换称等数

各种试剂的作用:

浓H2SO4：

A ：脱水使有机物炭化，然后有机物炭化生成碳，碳将H2SO4还原为SO2，本身则变为CO2

B： 氧化

C： pro与浓H2SO4生成NH3↑，CO2，SO2，H2O↑

D： NH3与H2SO4生成硫酸铵

（1）CuSO4的作用（催化剂）

CuSO4为红色沉淀，当C完全消化后，反应停止，红色消失，变为兰色，即为消化达到完全，兰色为CuSO4的颜色

（2）K2SO4的作用（提高沸点）

沸点由330℃提高到400℃加速了反应过程。

（3）硒粉和过氧化氢，氧化汞都为催化剂，但为了防止污染通常采用硫酸铜

（4）50%NaOH的作用

下面我就针对几点来说明为何影响氨化完全和速度快的因素:

（1）K氏烧瓶和取样量

如果称1g以上的样品，就需要K氏烧瓶最小500ml，800~1000ml的更好，这样的K氏烧瓶对于缩短氨化时间，加热的均匀性和完全氨化效果最好。

（2）分解剂

A H2SO4和K2SO4的添加量

有机无分解需要H2SO4量，H2SO4应根据有机物种类不同而加的量就不同，如果试样含脂类高，则加H2SO4多，为了提高分解温度，要大量添加K2SO4，但不能太多，也不能太少，太少则氨化不充分。K2SO4和H2SO4的添加比例是：

1g样品 K2SO4： H2SO4=7g：12ml

这种比例在国内外都使用，是公认的

还有一种比例： K2SO4：H2SO4=10：20ml

B 催化剂

用作催化剂的有Hg、HgO、Se，硒化合物，CuSO4、TiO2，对Hg，HgO有毒但结果好，Se与CuSO4得到结果是一种，TiO2，的结果偏低，采用不同的催化剂则消化时间不同， HgO消化麦子为38，Se与CuSO4消化麦子55，TiO2消化麦子70，所以在给出测定结果时要注明催化剂的类型。

（3）热源的强度

消化时热源的强度同迅速消化和完全氨化关系很大，即便盐类K2SO4加得多，如果热源弱，也是没有意义的，热源过强导致H2SO4损失，使氨回收率低，另外K氏瓶的容量大小，颈部的粗细和长短等，也与热源的强度有关。

（4）氨的蒸馏和吸收及滴定

蒸馏有两种:

1 直接蒸馏（装置简便，准确性好）

2 水蒸汽蒸馏

蒸馏加NaOH是50%，加的量为H2SO4量的4倍，硫酸量为12ml，则NaOH为12×4=48ml，而且一般高于这个理论值，即加到50~55ml，如果NaOH量加的不够就变成H2S， H2S是强酸，使颜色变红。

吸收液有：

1标准H2SO4 用标准碱返滴定，甲醛红指示剂

2 硼酸 用HCl进行滴定，混合指示剂

目前都用硼酸吸收液，用硼酸代替H2SO4，这样可省略了反滴定，H2SO4是强酸，要求较严，而硼酸是弱酸，在滴定时，不影响指示剂变色范围，另外硼酸为吸收液浓度在3%以上可将氨完全吸收，为保险期间一般用4%。

〈6〉实验注意事项

a.样品应时均匀的，若是固体样品应事先研细，液体样要混合均匀。

b.样品放入K氏烧瓶时，不要黏附瓶颈上，万一黏附可用少量水缓慢冲下，以免被检样消化不完全，使结果偏低。

c.消化时，如不容易呈透明溶液，可将K氏烧瓶放冷后，加入30%过氧化氢催化剂2~3ml，促使氧化。

d.在整个消化过程中，不要用强火，保持和缓的沸腾，使火力集中在K氏烧瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下，使氮有损失。

e.如硫酸缺少，过多的硫酸钾会引起氨的损失，这时会形成硫酸氢钾，而不与氨作用，因此当硫酸过多底物被消耗掉或样品中脂肪含量过高时，要添加硫酸量。

f.混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色，如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲醛红乙醇溶液。

g.氨是否完全蒸馏出来，PH试纸检查馏出液是否为碱性。

h.向蒸馏瓶中加入浓碱时，往往出现褐色沉淀无。这时由于分解促进剂与加入的硫酸铜反应，生成氢氧化铜，经加热后又分解生成氧化铜的沉淀，有时Cu离子与氨作用生成深兰色的络合物。

i.消化剂绿色后继续消化30分钟即可。

2 K氏微量定氮仪法

3 K氏半微量定氮仪法 (2 、 3原理一样)

操作方法大同小异，半微量法消化后，定容100ml，然后吸25ml蒸馏吸收液吸收。

N（V2-V1）0.014

W＊10／100

计算总氮%=(N(V2-V1)×0.014)/(W×10/100)×100

对于微量定氮仪法，仪器有了改进，样液称样少，蒸馏消化液也少，其它基本一样。

4 K氏自动定氮法

原理与上面一样，仪器，采用K氏自动定氮仪：其装置内具有自动加碱蒸馏装置，自动吸收和滴定装置以及自动数字显示装置，消化装置：由优质玻璃制成的K氏消化瓶以及红外线装置的消化炉。

二 水扬酸比色法：

1 原理： 样品中的pro经H2SO4消化转化为铵盐溶液后，在一定的酸度和温度下与水扬酸钠和次氯酸钠作用生成有颜色的化合物，可以在波长660nm处比色测定，求出样品含氮量，计算蛋白质含量。

2 方法 （1）标准曲线的绘制

取6个25ml容量瓶编号 0 1 2 3 4 5 6

分别加空白酸液 2ml

分别加磷酸盐缓冲液 5ml

稀释至总体体积至15ml

分别加水扬酸钠 5ml

37C水浴 15分钟

加入次氯酸钠 2.5ml

37C水浴 15分钟

取出试液于660nm下进行比色，绘标准曲线。

（2）样品处理：

准确称样0.20~1.00g→于K氏瓶中→加15mlH2SO4和5g催化剂→电炉上加热到沸腾后→加大

火力消化→直到出现暗绿色时→摇动瓶子→K氏瓶全部消化后→冷却→加水至250ml容量

瓶。

（3）样品测定：

准确吸取上述消化溶液10ml→于100ml容量瓶中→定容→准确吸2ml→于25ml容量瓶中→加

5ml磷酸缓冲液→以下操作与标准曲线绘制的步骤相同

并以试剂空白微对照，测得样液的光密度，从标准曲线查出其含氮量。

（4）计算

C×F

含氮%= ---------------------------× 100

W×1000×1000

C---从标准曲线中查出测定样液的含氮量（Ug）

F---样品溶液的稀释倍数

W---样品重量（g）

pro%=总氮%×K（K可为6.25，也可查）

3注意事项：

A 当天消化液最好当天测定，结果重现性好，如果样液改至第二天比色就有变化。

B 当在PH和试剂适当范围内加入氯源后，颜色的显色和温度有关，应严格控制反应温度。

C 这种方法测定结果基本与K氏法一致。

4 试剂

（1）氯标液：称经110℃干燥2h的硫酸铵0.4719g→于烧瓶中定容10ml→此液1ml相当于

1.0mg氮标液→使用时配制成1ml相当于2.50Ug氮标液。

（2）空白酸液：称0.50g蔗糖→加15mlH2SO4和5g催化剂→与样品一样消化→定容250ml→

使用时吸收此液10ml→加水至100ml为工作液备用。

（3）磷酸盐缓冲液：称7.1g磷酸氢二钠→加38g磷酸三钠→加20g三九石酸钾钠→加400ml水

溶解→过滤→另称35gNaOH溶于100ml水中→冷至室温→缓缓地搅拌加入磷酸盐溶液中→加

入水稀释至1000ml备用。

（4）水扬酸钠溶液：称25g水杨酸钠和0.15g亚硝基铁氰化钠溶于200ml水中过滤，加水稀释

至500ml

（5）次氯酸钠溶液：吸4ml安替富民液，用水稀释至100ml

5 仪器

（1）分光光度计

（2）恒温水浴

三 紫外分光光度法

1 原理：

pro及其降解产物的芳香环基 ，在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收，在280nm下，光吸收与pro浓度（3~8mg/ml）成直线关系，因此，通过测定pro溶液的吸光度，并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品，从标准曲线查出蛋白质的含量。

2 试剂：

（1） 0.1mol/l柠檬酸水溶液。

（2）8mol/l脲[（NH2）2CO]的2NNaOH溶液。 脲的2N氢氧化钠液

（3） 95%乙醇

（4） 无水乙醚

3 仪器

（1） 751型的紫外分光光度计

（2） 离心机

4 操作方法

（1）标准曲线的绘制：准确称取样品.2.00g，置于50ml烧瓶中，加入0.1mol/l柠檬酸水溶液30ml，搅拌30分钟使其充分溶解，用四层纱布过滤于玻璃离心管中，以每秒钟3000~5000转的速度离心10分钟，分别吸出上清夜0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml于6个10ml容量瓶钟，每个容量瓶，8mol/l脲的氢氧化钠溶液充分摇2分钟（如果离心再次离心），取透明液于比色皿中，在280nm下测定其吸光度。（做参比值）

以事先用K氏定氮法测定的样品中蛋白质的含量微横坐标上面的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

（2）样品测定

准确称取试样1.00g→于50ml烧杯中→加0.1mol/l柠檬酸溶液30ml→搅拌10分钟→四层纱布过滤到离心管中→用8mol/L脲的NaOH溶液定容，摇匀后于280nm下测吸光度，从标准曲线上查出pro的含量。

计算： 蛋白质= C/W× 100

C----从标准曲线上查得的pro含量（mg）

W----测定样品溶液相当于样品量（mg）

说明：

a.此法运用于糕点，牛乳和可溶性pro样品，测定糕点时，应把表皮颜色去掉。

b.温度对pro水解有影响，操作温度应控制在20~30℃。

四 双缩脲法-皮尼克法

1 原理：

双缩脲在碱性条件中，能与CuSO4结合成红紫色的络合物。pro分子中含有肽链与双缩脲结构相似，也呈此反应。本法直接用于测定像小麦粉等固体试样的pro含量。但作为铜的稳定剂，酒石酸钾钠比甘油好些。小麦粉中的pro能直接地一边抽出一边进行定量。

2 试剂

⑴甘油作为稳定剂：取10ml10N KOH溶液，3.0ml甘油加到937ml水中，激烈搅拌，同时加入4%CuSO450ml。

⑵酒石酸钠作稳定剂，吸10ml10N KOH溶液和20ml25%酒石酸钾钠溶液加到930ml水中，激烈搅拌，同时加入4%CuSO4液40ml。

配制以上两种溶液、试剂，必须澄清，无氢氧化铜生成，否则重配。

3 方法：样品测定

标准曲线绘制

准确称0.6g样品→使用试剂（1）

准确称0.5g样品→使用试剂（2）

假如用试剂（2）

（1）准确称样→0.5g→于80ml离心管→加1mlClC4→混合→加50ml酒石酸钾钠稳定剂→盖上盖子离心10min（4000转/分）→放置1小时→吸混合液15ml→于20ml离心管中→离心到完全透明→取上清夜5ml于→10ml容量瓶→加水定容→于550nm处测定吸光度，从标准曲线上查出pro含量。

（2）标准曲线绘制

按样品测定方法，根据样品中pro含量，取离心澄清样液0.0 2.0 4.0 8.0 10.0ml于10ml容量瓶中→分别加水定容，按照样品测定其吸光度。

事先用K氏定氮法测定样品中pro含量为横坐标，以上述吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

4 计算：蛋白质%=C/W×100

C----从标准曲线上查得得pro含量（mg）

W----测定样液时相当于样品重量（mg）

3. 摄入硒过量对人体健康有什么害处

硒是人体必需的微量元素，但若摄入过多会对人体健康造成危害，近年过

我国营养学家杨光圻教授根据大量人体资料，提出了硒的每人每日安全摄入量为

400μg，我国卫生部为了控制人体硒的摄入量，也制定了食品中硒的卫生标准

GB13105-91，并研制配套的国家标准方法GB12399-90-食品中硒的荧光测定法。由

于该法操作繁琐、 Ky用试剂2,2-二氨基萘(2,3-diaminonaph-thatene,简称DAN)毒性大、

且需进口。 1>次修订提出了较快速、简便、准确度、精密度好的氢化物原子荧江

江谱法测定各类食品中的硒，以弥补GB12399-90的不足。鉴于原子荧江江度计在

国内尚未普及，故作为第二法补充本标准。

1 范围

本标准规定了用荧光法和氢化物原子荧光光谱法测定食品中硒的方法。

本标准适用于各类食品中硒的测定。

第一法 荧光法

2 原理

样品经混合酸消化后，硒化合物被氧化为四价无机硒(Se4+)，与2.3-二氨基萘

(2,3-diaminonaphthatene,简称DNA)反应生成4,5-苯并苤硒脑(4,5-benzo piaselenol),

其荧光强度与硒的浓度在一定条件下成正比。用下己烷萃取后于激发光波长376nm，

发射江波长520nm处测定荧光强度，与绘制的标准曲线比较定量。本方法检出限为3ng。

3 试剂

3.1 环己烷。

3.2 硝酸。

3.3 过氯酸。

3.4 盐酸。

3.5 氢溴酸。

3.6 1+9盐酸溶液:取10mL盐酸，加90mL水。

3.7 1+1氨水。

3.8 5+95去硒硫酸:取5mL去硒硫酸，加于95mL水中。

去硒硫酸:取200mL硫酸，加于200mL水中，再加30mL氢溴酸，混匀， 置沙

浴上加热蒸去硒与水至出现浓白烟，此时体积应为200mL。

3.9 0.2mol/LEDTA:称37gEDTA二钠盐，加水并加热溶解，冷却后稀释至500mL。

3.10 10%盐酸羟胺:称取10g盐酸羟胺溶于水中，稀释至100mL。

3.11 混合酸:硝酸+过氯酸(2+1)。

3.12 0.1%2,3-二氨基萘(纯度95%～98%)需在暗室配制。称取200mgDAN于一带盖三

角瓶中，加入200mL0.1mol/L盐酸，振摇约15min，使其全部溶解。约加40mL环己烷，

继续振摇5min，将此液转入分液漏斗中，待溶液分层后，弃去环己烷层，收集DAN

层溶液。 如此用环己烷纯度不同而定，一般约需纯化3～4次)。将提纯后的DAN溶

液储于棕色瓶中，约加1cm厚的环己烷覆盖溶液表面。置冰箱中保存。必要时再

纯化一次。

3.13 硒标准溶液

3.13.1 硒标准储备液(100μg/mL):精确称取100.0mg元素硒(光谱纯)，溶于少量硝酸

中，加2mL过氯酸，置沸水浴中加热3～4h，冷却后加入8.4mL盐酸，再置沸水浴中

煮2min。准确稀释至1000mL，其盐酸浓度为0.1mol/L。此储备液浓度为100μg/mL。

3.13.2 硒标准使用液(0.05μg/mL):将3.13.1液用0.1mol/L盐酸稀释，使含硒为0. 05

μg/mL。于冰箱中保存。

3.14 0.02%甲酚红指示剂:称取50mg甲酚红溶于水中，加1+1氨水1滴，待甲酚红完

全溶解后加水稀释至250mL。

3.15 EDTA混合液:取(3.9)和(3.10)液各50mL，混匀，再加5mL(2.14)溶液， 用水稀释

至1L。

4 仪器和设备

4.1 实验室常用设备。

4.2 荧光分光光度计。

5 分析步骤

5.1 样品处理及消化

5.1.1 粮食:样品用水洗三次，60℃烘干，用不锈钢磨磨成粉，储于塑料瓶内，放一小

包樟脑精，盖紧盖保存，备用。

5.1.2 蔬菜及其他植物性食物:取可食部用水冲洗三次后用纱布吸去水滴，用不锈钢刀

切碎，取混合均匀的样品于60℃烘干，称重，粉碎、备用。

5.1.3 称取0.5-2.0g样品(含硒量0.01～0.5μg)于磨口三角瓶内， <S10mL5+95去硒硫

酸，样品湿润后，再加20mL混合酸液放置过夜。次日于沙浴上逐渐加热，当激烈反

应发生后(溶液变无色)，继续加热至产生白烟，溶液逐渐变成淡黄色即达终点。某

些蔬菜样品消化后常出现浑浊，难以确定终点，所以要细心观察，还有含硒较高的

蔬菜含有较多的Se6+，需要在消化达到终点时冷却后加10mL 1+9盐酸，继续加热，

使Se6+还原成Se4+。

按上述方法确定终点。

5.2 测定

于样品消化液中加20mLEDTA混合液，用氨水(1+1)或盐酸调至淡红橙色(pH1. 5

～2.0)。以下步骤在暗室进行:加3mLDAN试剂，混匀，置沸水浴中煮5min， H!出立即冷却，加3mL环己烷，振摇4min，将全部溶液移入分液漏斗，待分层后弃去水层，环己烷层转入带盖试管中，小心勿使环己烷中混入水滴，于激发光波长376nm，发射光波长

376nm，发射光波长520nm处测定苤硒脑的荧光强度。

5.3 硒标准曲线绘制:准确吸取硒标准使用液0、0.2、1.0、2.0及4.0mL，加水至5mL，

按样品测定步骤同时进行。硒含量在0.5μg以下时荧光强度与硒含量呈线性关系，

在常规测定样品时，每次需做试剂空白与样品硒含量相近的标准管(双份)即可。

6 结果

6.1 计算

C-B 1

X= --------- × S × ------

A-B m

式中:X—样吕中硒含量，μg/g；

A—标准管荧江读数；

B—空白管荧光读数；

C—样品管荧光读数；

S—标准管硒含量，μg；

m—试样质量,g。

6.2 结果的允许差

同一实验室平行测定或重复测定结果相对偏差绝对值≤10%。

第二法 氢化物原子荧光光谱法

7 原理

样品经酸加热消化后，在6mol/L盐酸(HCl)介质中， 将样品中的六价硒还原成

四价硒，用硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)作还原剂， 将四价硒在盐酸介质中还

原成硒化氢(SeH2)，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在硒特制空心阴极灯

照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧

光，其荧光强度与硒含量成正比。与标准系列比较定量。

8 试剂

本方法中，除特殊规定外，所用试剂为分析纯，试验用水为蒸馏水或同等

纯度水。

8.1 硝酸(优级纯)

8.2 高氯酸(优级纯)

8.3 盐酸(优级纯)

8.4 混合酸:硝酸+高氯酸(4+1)混合酸。

8.5 氢氧化钠(优级纯)

8.6 硼氢化钠溶液(8g/L):称取8.0g硼氢化钠(NaBH4)，溶于氢氧化钠溶液(5g/L)中，

然后定容至1000mL。

8.7 铁氰化钾(100g/L):称取10.0g铁氰化钾(K3Fe(CN)6)，溶于100mL蒸馏水中，混匀。

8.8 硒标准储备液:精确称取100.0mg硒(光谱纯)，溶于少量硝酸中，加2mL高氯酸，置

沸水浴中加热3～4小时，冷却后再加8.4mL盐酸，再置沸水浴中煮2分钟，准确稀释

至1000mL，其盐酸浓度为0.1mol/L，此储备液浓度为每毫升相当于100μg硒。

8.9 硒标准应用液:取100μg/mL硒标准储备液1.0mL，定容至100mL，此应用液浓度

为1μg/mL。

9 仪器

9.1 AFS-210双道原子荧光光度计或同类仪器

9.2 电热板

9.3 自动控温消化炉

10 分析步骤

10.1 样品处理及消化

10.1.1 粮食:样品用水洗三次，60℃烘干，用不锈钢磨粉碎，储于塑料瓶内，备用。

10.1.2 蔬菜及其他植物性食物:取可食部用水洗净后用纱布吸去水滴，打成匀浆后

备用。

10.1.3 称取0.5-2.0g样品于高筒烧杯内，加10.0mL混合酸及几粒玻璃珠，盖上表面皿

冷消化过夜。次日于电热板上加热，并及时补加混酸。当溶液变为清亮无色并伴有

白烟时，再继续加热至剩余体积2mL左右，切不可蒸干。冷却，再加5mL6mol/L盐酸，

继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，以完全将六价硒还原成四价硒。

冷却，转移定容至50mL容量瓶中。同时做空白实验。

10.1.4 吸取10mL样品消化液于15mL离心管中，加浓盐酸2mL，铁氰化钾溶液1mL，

混匀待测。

10.2 标准曲线的配制:分别取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0. *mL标准应用液于15mL离心管中，用去离子水定容至10mL，再分别加浓盐酸2mL，铁氰化钾1mL，混匀，制

成标准工作曲线。

10.3 测定

10.3.1 仪器参考条件:

负高压:340V；灯电流:100mA；原子化温度:800℃；炉高:8mm；载气流

速:500mL/min；屏蔽气流速:1000mL/min；测量方式:标准曲线法；读数方式:峰面积；

延迟时间:1s；读数时间:15s；加液时间:8s；进样体积:2mL。

10.3.2 测定:根据实验情况任选以下一种方法。

10.3.2.1 浓度测定方式测量:设定好仪器最佳条件，逐步将炉温升至所需温度后，

稳定10～20分钟后开始测量。连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转

入标准系列测量，绘制标准曲线。转入样品测量，分别测定样品空白和样品消化液，

每测量不同的样品前都应清洗进样器。样品测定结果按以下公式计算。

10.3.2.2 仪器自动计算结果方式测量:设定好仪器最佳条件，在样品参数画面， 输入

以下参数:样品质量(g或mL)，稀释体积(mL)，并选择结果的浓度单位。逐步将炉温升

至所需温度后，稳定10～20分钟后开始测量。连续用标准系列的零管进样，待读数

稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。在转入样品测定之前，再进入空白

值测量状态，用样品空白消化液进样，让仪器取其均值作为扣底的空白值。随后即

可依次测定样品。测定完毕后，选择“打印报告”即可将测定结果自动打印。

10.4 结果

10.4.1 计算

(C-C0)×V×1000

X=-------------------------------------------

M×1000×1000

式中:X:样品中硒的含量，mg/kg(或mg/L)；

C:样品消化液测定浓度，ng/mL；

C0:样品空白消化液测定浓度，ng/mL；

M:样品质量(体积)，g(mL)；

V:样品消化液总体积，mL。

10.4.2 本标准检出限仪器检出限为0.5ng/mL。

标准曲线线性范围0～400ng/mL。

方法回收率:标准粉:85.7%～102.3%奶粉:88.8%～101.2%。

标准参比物质控结果:

标准物 测定次数(n) 测定值 标准值

茶叶 (GBW08505) 7 0.044 0.041±0.010

猪肝 (GBW08551) 7 0.931 0.940±0.050

相对标准偏差:RSD=2.6%(n=12)

附录A(提示的附录)

食品中硒的测定

氢化物原子荧光光谱法

1 方法评价

氢化物原子荧光光谱法测定食品中硒，简便、快速、准确度、灵敏度、

精密度好，线性范围宽，所用试剂毒性小，实用性强。

2 方法研制及验证结果

┌——————┬——————┬——————┬————————┐

│ 单位 │北京市卫生 │卫生部食品卫│北京进口食品卫生│

│ │ 防疫站 │生监督检验所│ 监督检验所 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 仪器型号 │ AFS-220 │ xdy-2a │ AFS-210 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 检出限 │ 0.5(ng/ml) │ 0.3(ng/ml) │ 0.2(ng/mL) │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 回收率 │ 85.7-112.3 │ 85.7-112.3 │ 95.4-120.0 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 质控样名称 │茶叶 猪肝 │奶粉 牛血清 │ 甘兰 猪肝 │

│ │GBN GBN │GBN GBN │ GBN GBN │

│ │08505 08551 │0859 09131 │08504 08551 │

│ 分析结果 │0.044 0.931 │0.209 38.2 │0.082 0.934 │

│ 标准值 │0.041 0.940 │ 0.22 38.9 │0.083 0.934 │

│ (μg/g) │0.010�0.05│0.02 �2.3 │�0.008�0.05 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 相对标准 │ 2.6 │ 2.1 │ 5.1 │

│ 偏差(rsd%) │ │ │ │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 标准曲线相 │ r=0.9999 │ │ r=0.9992 │

│ 关系数(r) │ │ r=0.9999 │ │

└——————┴——————┴——————┴————————┘

3 操作注意事项及经验介绍

(1)本方法样品在加热消化过程中，切不可蒸干，以免硒损失。

(2)对于难消化的样品，若需加硫酸消化，必须进行硫酸的去硒处理， Rr硫酸中含硒量

较高。

4 本标准研制人员:

北京市卫生防疫站:田佩瑶、毛红

卫生部食品卫生监督检验所:杨惠芬 黄流生 陈青川

北京进口食品卫生监督检验所:阎军 杨光

------------------------------------------------

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

中华人民共和国卫生部1996--06--19批准 1996--09--01实施

进口豌豆 警惕硒超标

2006-4-18 厦门出入境检验检疫局 郑万里

国家质检总局发出风险警示要求批批严检发现问题一律退运

记者4月14日下午从厦门检验检疫局了解到，为有效防止被有毒有害物质污染的食品入境，国家质检总局发出风险预警，要求各地检验检疫机构对进口豌豆加强检验检疫，批批检测硒含量，凡经检验检疫不符合我国要求的进口豌豆，一律作退运处理。

为防止不符合我国卫生安全要求的豌豆进境，同时为避免进口企业产生不必要的经济损失，厦门检验检疫局授权新闻发言人向各进口企业发出警示，希望予以高度重视。特别是在签订贸易合同时，要注意严格签订检验检疫条款，并敦促国外供货商在出口前对豌豆进行硒、农药残留等有毒有害物质检测，不得出口不符合中国卫生要求的产品。

据悉，今年2月，我国质检部门分别从美国进口黄豌豆、加拿大进口豌豆中检出硒含量超过我国国家标准。厦门检验检疫局植检处介绍，由于漳州等地食品和饲料行业需求旺盛，从去年下半年开始，厦门进口豌豆数量不断攀升，2005年共进口豌豆20批6091吨，今年第一季度进口量已达14批次4646吨，目前暂未检出硒超标。

[名词解释] 硒 硒是生命必需的微量元素，科学家发现硒与许多疾病的防治有关。在我国，硒被用以预防克山病（一种以心肌坏死为主要症状的地方病）和大骨节病。人们还认为硒可以防癌、抗衰老等。

但人体中硒摄入量并不是越多越好，已发现在高硒地区，牲畜会因摄入过量硒而中毒，导致发育迟缓、脱毛、甚至死亡。当前人们对缺硒相当重视，而对摄入过量硒的危害尚认识不足。科学家研究，以标准人的体重70公斤计算，人体内硒含量约15毫克，人体在摄取与排泄中要保持体内的硒大致平衡，缺硒当然会患病，但摄入量过多对肌体也会造成伤害。我国国标GB 2762-2005食品中污染物限量中规定豆类及制品中允许含有的硒的最高限量为0.3mg/kg。

4. 废铝怎样回收利用

可以拿到炼制铝锅铝壶的地方做成厨房用具，也可以直接卖废铝，

5. 蛋白质及氨基酸的测定有哪些方法求大神帮助

楼主你好： 测定蛋白质最基本的方法是定氮法，即先测定样品中的总氮量，再由总氮量计算出样品中蛋白质的含量。蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法，它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一，在国内外应用普遍。此外，双缩脉法、染料结合法、酚试剂法等也常用于蛋白质含量测定，由于方法简便快速，故多用于生产单位质量控制分析。 蛋白质及氨基酸的测定 蛋白质是生命的物质基础，是构成生物体细胞组织的重要成分，一切有生命的活体都含有不同类型的蛋白质。人体内的酸碱平衡、水平衡的维持；遗传信息的传递；物质的代谢及转运都与蛋白质有关。人及动物只能从食品得到蛋白质及其分解产物，来构成自身的蛋白质，故蛋白质是人体重要的营养物质，也是食品中重要的营养指标。 蛋白质是复杂的含氮有机化合物，分子量很大，它们由20种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合起来，并具有一定的空间结构。不同的蛋白质其氨基酸构成比例及方式不同，故各种不同的蛋白质其含氮量也不同。蛋白质可以被酶、酸或碱水解，最终产物为氨基酸。氨基酸是构成蛋白质的最基本物质，在构成蛋白质的氨基酸中，亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸等8种氨基酸在人体中不能合成，必须依靠食品供给，故被称为必需氨基酸，它们对人体有着极其重要的生理功能，常会因其在体内缺乏而导致患病，或通过补充而增强了新陈代谢作用。所以食品及其原料中蛋白质和氨基酸的分离、鉴定和定量具有极其重要的意义。 蛋白质的测定 测定蛋白质最基本的方法是定氮法，即先测定样品中的总氮量，再由总氮量计算出样品中蛋白质的含量。蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法，它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一，在国内外应用普遍。此外，双缩脉法、染料结合法、酚试剂法等也常用于蛋白质含量测定，由于方法简便快速，故多用于生产单位质量控制分析。 微量凯氏定氮法 本法适用于各类食品中蛋白质的测定。 1．原理 食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸胺。然后碱化蒸馏使氨游离，用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。反应过程分为三个阶段，用反应式表示如下。 ①消化 2NH2(CH2)2COOH 4-13H2S04一(NH。)2S04+6C02+12S0=+16H20 (NH4)2S04+2Na()H一2NH3十+2H20+。Na2S04 2NH3+4H3803—，(NH4)2 B207+5H20 ③滴定 (NH4)2 B2 07+2HCl+5H20—NH4C1+4H3803 2．仪器 ①消化炉。 ②凯氏定氮蒸馏装置。 3．试剂 所用试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 ①CuS04。 ②K2SO。 ③浓H2SO。 ④2％H。BO。溶液。 ⑤混合指示剂：1份O．1％甲基红乙醇溶液与5份O．1％溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份O．1％甲基红乙醇溶液与1份0．1％次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 ⑥饱和氢氧化钠：500 g氢氧化钠加入500 mL水中，搅拌溶解，冷却后放置数日，澄清后使用。 ⑦0．01 toolI．一’或0．05 toolL叫HCl标准溶液(需用无水碳酸钠标定后使用)。 4．操作步骤 ①样品消化：精密称取O．2～2．0 g固体样品或2～5 g半固体样品或吸取液体样品5～20mI。，放人500 mI。干燥凯氏烧瓶中，加人O．2 g硫酸铜、3 g硫酸钾及20 mL浓HzSOa，于凯氏瓶口放一小漏斗，并将其以45。角斜支于有小孔的石棉网上。（更多详细咨询请参考国家标准物质网 www.rmhot.com ）用电炉以小火加热，待内容物全部碳化，泡沫停止产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至液体变蓝绿色透明后再继续加热微沸30 min。冷却，小心加入20 mL水，再放冷至室温，移人100 mL容量瓶中，并用少量水洗烧瓶洗液并人容量瓶，在加水至刻度，混匀备用。除不加样品外，取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸，按同一方法做试剂空白消化。 ②水蒸气发生瓶内装水至约2／3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 ③向接收瓶内加入10 mL 2％硼酸溶液及混合指示液l滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取lO mI。样品消化稀释液由小玻璃杯流人反应室，并以10 mL水洗涤小烧杯使之流人反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将3～10 mL饱和氢氧化钠溶液倒人小玻璃杯中，提起玻璃塞使其缓缓流入反应室，立即将玻璃塞盖紧，并加水于小玻璃杯中以防漏气。加紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸汽通人反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏2～5 min，移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面，然后用少量中性水冲洗冷疑管下端外部，再蒸馏1 min取下接收瓶，以0．01 molI．叫或O．05 molL1HCl标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。同时吸取10 mI_，试剂空白消化液按③操作。 5．计算 6。说明 ①干样用称量纸称重连纸一同消化，空白管同样放称量纸消化。 ②含糖量高和油脂高的样品消化时容易溢出，加热要缓慢。 ③氨是否蒸馏完全，可用pH试纸测试馏出液是否为碱性来判断。 ④实验前必须仔细检查蒸馏装置的各个连接处，保证不漏气。所用橡皮管、塞子须浸在氢氧化钠(10％)中，煮沸10 min，然后水洗、水煮，再用水洗。 ⑤小心加样，切勿使样品沾污凯氏烧瓶口部和颈部。

6. 凯氏定氮仪消化炉是什么

凯氏定氮仪消化炉是在测定蛋白质含量时可以用得到的仪器。

凯氏定氮仪消化炉也叫分路数显消化炉，采用井式电加热方式，使样品在井式电加热炉内加热取得较佳热效应，提高消煮速度，消化管内逸出的SO2等有害气体，通过排污管经抽吸泵从水中排入下水道，有效地抑制有害气体的外逸。消化炉采用智能温度仪表数控电加热炉内温度，并直接显示温度值。配不锈钢排污罩使用方便采用四氟乙稀密封圈，无须更换。你说的这款托普云农凯氏定氮仪消化炉广泛用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析。

7. 凯氏定氮法加的指示剂量不同会有影响吗

摘要 摘要

8. 一个实验设计“Rh的定量分析方法及其性质”找了好久都没找到，求助！（最好有文献和详细的测定方法）谢谢

对二乙氨基苯基亚甲基若丹宁柱前衍生-高效液相色谱法测定汽车尾气催化剂中的铂、钯、铑的研究

李维莉1* ，马银海1，彭永芳1，胡秋芬1，2，尹家元2
(1昆明师范专科学校化学系，昆明650031；2 云南大学化学系，昆明 650091)

摘要 研究了用对二乙氨基苯基亚甲基若丹宁(DEABR) 为柱前衍生试剂，以安捷伦ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm, 1.8 mm) 快速分离柱为固定相，85％的甲醇（内含0.5%的醋酸）为流动相，高效液相色谱分离，二极管矩阵检测器检测测定铂、钯、铑的的方法，三种贵金属元素的络合物在2.0 min内可达到基线分离。根据信噪比（S/N=3）得各金属离子的检出限分别为：铂1.2 mg/L，钯1.0 mg/L，铑1.0 mg/L，方法用于汽车尾气催化剂中痕量铂、钯、铑的测定，相对标准偏差在1.2～2.1%之间, 加标回收率在94～105%之间，结果令人满意。
关键词 高效液相色谱，对二乙氨基苯基亚甲基若丹宁 (DEABR)，铂、钯、铑

1. 引 言
铂、钯、铑是汽车尾气催化剂中的活性元素。由于铂族金属价格昂贵且资源贫乏，必须进行再生回收。其回收利用价值又在很大程度上取决于样品中铂、钯、铑的准确测定 [1,2]。但是贵金属元素性质相似，在样品中容易共生且含量很低，常规方法测定时样品前处理很复杂且误差大。近几年来高效液相色谱法在无机分析中的应用研究取得了迅速发展，痕量金属离子与有机试剂形成稳定的有色络合物，用高效液相色谱分离，紫外-可见光度检测器测定金属离子，克服了光度分析选择性差的缺点，可实现多元素同时测定，方法简便快速 [3-6]。若丹宁类试剂在光度分析中得到了广泛应用，但是用于无机元素的高效液相色谱测定报道较少。我们研究了用对二乙氨基苯基亚甲基若丹宁 (DEABR)为柱前衍生试剂，ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm, 1.8 mm)快速分离柱为固定相分离铂、钯、铑的络合物，并结合微波消化样品和二极管矩阵检测器检测建立了一种高效液相色谱测定铂、钯、铑的方法。该方法中3种元素络合物的分离只需2.0 min，和常规高效液相色谱法相比，大大缩短了分析时间。

2 实验部分
2.1主要仪器和试剂
美国Waters高效液相色谱仪，包括2690 Alliance分离系统（四元泵及自动进样器），996 (PAD)紫外二极管矩阵检测器，Millennium32色谱管理软件；美国CEM公司MWD-2型微波通用消解装置，配50 mL聚四氟乙烯消化罐。
铂、钯、铑标准储备液，1.0 mg/mL，购于国家标准物质研制中心，使用时稀释成 2.0 mg/mL标准工作液；pH为 3.6 的醋酸-醋酸钠缓冲液，0.5 mol/L；DEABR按文献[7]的方法合成，使用时用乙醇配成1.0×10-4 mol/L溶液；甲醇：高效液相色谱专用（Fisher公司生产）；水为二次蒸馏水，并用Milli-Q50超纯水仪(美国Millipore公司) 处理，电阻³ 18 MW .cm；所用试剂除作特殊说明外均为分析纯。
2.2 色谱条件
色谱柱为ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm, 1.8 mm) 快速分离柱；流动相为85％的甲醇 (内含0.5%的醋酸)，流速为2.0 mL/min, 进样体积10 m L。在上述色谱条件下，标样和样品在540 nm处的色谱图见图1。

图1 标样和催化剂样品色谱图
Fig.1 The chromatogram of standard samples (a) and catalyst samples (b)

2.3 实验方法
取适当的标样或样品溶液于 25 mL容量瓶中。加入4 mL pH 3.6 的醋酸-醋酸钠缓冲液，5.0 mL 1×10-4 mol/L DEABR溶液，定容到25 mL, 摇匀，放置10 min，取5 mL用0.45 m m针头过滤器过滤，进样10 mL分析。

3 结果与讨论
3.1 柱前衍生条件
DEABR与铂、钯、铑在弱酸性介质中显色，最佳显色pH为：铂 1.2-4.8，钯 0.8-4.6，铑1.6- 4.2，因此实验选用pH＝3.6 醋酸-醋酸钠缓冲溶液控制显色酸度，用量在4.0 mL左右可把pH控制在适宜范围。试验表明，1×10-4 mol/L DEABR用量在1.0 mL以上即可分别完全络合含量为10 m g的铂、钯、铑；由于实际样品中还有其它元素也会与DEABR络合而消耗试剂，需加入过量的试剂，因此实验选用加入5.0 mL的DEABR溶液；各元素的络合物在生成后至少可稳定4 h。
3.2 铂、钯、铑的定性及检测波长的选择
样品中铂、钯、铑均由其保留时间及二极管矩阵检测器350-600 nm波长扫描所得紫外光谱图与标样对照确认，由二极管矩阵检测器所记录光谱图可知： Pt-DEABR络合物最大吸收波长为542 nm，Pd-DEABR络合物最大吸收波长为538 nm，Rh-DEABR络合物最大吸收波长为530 nm，为了达到最佳灵敏度，各组分均在最大波长下检测定量。
3.3色谱条件
用水和甲醇为流动分离DEABR与铂、钯、铑生成的络合物，当甲醇的比例为85%时各络合物均可达到基线分离且分离时间短，因此实验选用85%的甲醇为流动相。DEABR与铂、钯、铑生成的络合物在弱酸性条件下稳定，因此实验选择在流动相中含0.5%的醋酸。
3.4干扰实验
在弱酸性条件下，除铂、钯、铑外，其它元素Au3+，Hg2+，Pb，Cu2+，Ag+也与DEABR生成络合物，因此我们做了干扰实验，对于2 mg的铂、钯、铑，50倍的Hg2+，Pb2+，Cu2+ 和10倍的 Au3+，Ag+不干扰测定，方法选择性较好。
3.5工作曲线及检出限
用峰面积定量法得工作曲线，结果见表1，根据信噪比S/N=3，算得各组分的检出限，结果见表1。表中A为峰面积，C单位为 (mg/L)。

表1 回归方程、相关系数及检出限
Table 1 Regression Equation, Coefficient and Detect limit

组分
Components
回归方程
Regression Equation
线性范围Linear Range (mg/L)
相关系数 Coefficient
检出限
Detect limit (mg/L)

Pt-DEABR
A=3.58×104 C - 367
5-1200
r=0.9991
1.2

Pd-DEABR
A=3.06×104 C - 115
4-1100
r=0.9993
1.0

Rh-DEABR
A=2.96×104 C + 431
6-900
r=0.9992
1.0

3.6样品分析结果
样品分析时每样平行测定5次，准确称取已磨细至120-200目的试样称取0.2 g (精确到0.0001 g)于聚四氟乙烯消化罐中，加3 mL的浓盐酸和1.0 mL的过氧化氢，立即盖上罐内盖，旋紧外盖，于微波消化炉中用800 W的功率消解10 min；消解完后于电热板上加热蒸发到近干，用10 mL 5 %的盐酸溶解残渣，转入25 mL的容量瓶中定容，依样品含量高低，酌情取适当体积试液于25 mL的容量瓶中，按实验方法测定，另取相同样品一份，加入0.2 mg 的Pt、0.05 mg的Pd和Rh，按上述方法消化后按实验方法测定，用加标样品测出量减去未加标样品测出量再除以标准加入量计算加标回收率，用5次平行测定的结果计算相对标准偏差，结果见表-2。用电感偶合等离子体质谱法作对照，结果见表3。

表2 本方法样品分析结果 (mg/g)
Table 2 Determination results (mg/g) of the sample with the proposed method

组分
Components
样品 Samples
RSD％
(n=5)
回收率％recovery%

CHJ0623
CHJ0625
CHJ0626
CHJ0629

Pt
1.22
0.947
1.18
1.54
1.2-1.8
96-101

Pd
0.356
0.218
0.311
0.284
1.4-1.9
98-104

Rh
0.122
0.076
0.148
0.053
1.6-2.1
94-105

表3 ICP-MS法样品分析结果 (mg/g)
Table 3 Determination results (mg/g) of the sample with ICP-MS method

组分
Components
样品 Samples
RSD％
(n=5)
加标回收率recovery%

CHJ0623
CHJ0625
CHJ0626
CHJ0629

Pt
1.16
0.952
1.22
1.51
1.7-2.2
94-102

Pd
0.377
0.222
0.317
0.291
2.0-2.5
98-108

Rh
0.125
0.074
0.151
0.051
2.1-2.7
97-109

4 结 论
本方法把若丹宁类试剂应用到高效液相色谱测定无机元素中，采用对二乙氨基苯基亚甲基若丹宁为柱前衍生试剂，快速分离柱高效液相色谱法测定铂、钯、铑，3种贵金属元素的络合物在2.0 min内可达到基线分离，分析时间比常规色谱柱(10-20 min)相比大大缩短。方法检出限达m g/L 级，具有较高的灵敏度。本方法采用微波消化样品，消解一批样品只需10 min，和常规方法相比大大缩短了样品消解时间，而且密闭的微波消化环境污染大大降低。总之本方的建立为汽车尾气催化剂中痕量铂、钯和铑的快速准确测定提供了方法。

9. 怎样用原子吸收法测样品中的铁

1．原理

每种元素的原子能够吸收特定波长的光能，而吸收的能量值与该光路中该元素的原子数目成正比。用特定波长的光照射这些原子，测量该波长的光被吸收的量，与标准溶液制成的效正曲线对比，求出被测元素的含量。

2．仪器

原子吸收光谱分光光度计。

3．试剂

①混合酸消化液：硝酸和高氯酸4+1混合。

②O．5 mol·L_。H＼03溶液。

③O．12 mol·L叫HCl；

④去离子水：80(kQ)以上。

⑤标准贮备液：准确称取0．4979 g硫酸亚铁(FeS()4·7H。O)溶于100 mi。水中，加入5mI。浓硫酸微热，溶解即滴加2％高锰酸钾溶液，至最后一滴红色不褪色为止，用水定容至1 000 mI。，摇匀，得标准贮备液，Fe。+浓度为100ug／mI。

4．测定方法

①样品消化：实验操作需在无元素污染的环境中进行。准确称取样品干样O．3～0．7 g，湿样1．O g左右，饮料等其他液体样品1．O～2．O mL，然后将其放人50 mI。消化管中，加混合酸15 mI．(油样或含糖量高的食品可多加些酸)，过夜。次日，将消化管放入消化炉中，消化开始时将温度调低(约130℃左右)，然后逐步将温度调高(最终调至240℃左右)进行消化，一直消化到样品冒白烟，液体变成无色或黄绿色为止。若样品未消化好可再加几毫升混酸，直到消化完全。消化完后，放冷，加5 mL去离子水，继续加热，直到消化管中的液体约剩2 mI。左右，取下放冷，然后转移至lO mL试管中，再用去离子水冲洗消化管2～3次，并最终定容为10 mI。此为试样溶液。样品消化时，取与样品相同量的混合酸按同上操作方法做试剂空白消化。

②测定：分别吸取0．5、1．0、2．O、4．O mI．的标准贮备液于四个100 mL容量瓶中，用O．5tool·I．叫HN03溶液稀释至刻度，得浓度为o．5、1．O、2．0、4．O弘g·mI。1的标准工作液。在波长为248．3nm，仪器狭缝为0．2nm，灯位置、灯电流按仪器说明调至最佳状态的条件下点火准备测定。首先测定标准系列工作液，绘制标准曲线，然后测定试剂空白液和样品。

5．计算

6．说明

样品处理要防止污染，所用器皿均应使用塑料或玻璃制品，使用的试管和器皿都应在使用前酸泡，并用去离子水冲洗干净，干燥后使用。样品消化时注意酸不要烧干，以免发生危险。