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日常常用什么方法来判断是否染菌

发布时间:2022-08-31 06:08:00

如何判断液体培养基是不是染菌,有哪些方法可以检测

除了镜检,还有更为放心的,就是将属于正常的菌体的引物来做16s的PCR作为对照,然后将通用引物来做所有菌的16s的PCR,让上述一起跑胶,看看是几条条带,如果是一条且在同一位置就是纯菌,其他的均为染菌了

⑵ 怎样判断细胞是否染菌

细胞培养里面是否染菌还是主要靠显微镜观察.直接观察细胞培养瓶的细胞,若发现有密集的小点,还在动的.多半是细菌.400倍镜下就能看出来了.很明显.还有有细菌的情况下,培养基很容易变黄.很容易浑浊.静止一段时间后,会了沙沙的沉淀.都是比较明显的.我们一直这样判断.

⑶ 初始污染菌的检测方法

您试过镜检的方式吗?可以结合染色。通过观察培养物形态来判断是否有污染,需要有微污染菌种的对照样。
再者,可以通过监测培养液溶氧量、pH变化的曲线来判断是否有污染,也需要有未污染的培养批次的数据曲线对照。

⑷ 检测一个样品的时候,为什么要做细菌培养培养出细菌来,证明样品里面就有细菌吗直接用显微镜看可以吗

直接用显微镜容易出现实验误差
因为样品里的细菌数量太少,在显微镜下不一定找的到,容易造成结果是假的,因此需要做细菌培养,如果样品不含细菌,是培养不出来细菌的,如果样品有细菌,通过培养,可以扩大细菌数量,容易在培养基上直接看到或者用显微镜也容易找到

⑸ 跑琼脂糖电泳可否判断细胞是否染菌

根据我多年的经验,少年,你的胶背景亮说明你的UV开得太亮了,正常时候不需要这么强光就能看到条带。从你胶的样子可以看出,你跑胶的时间太长了,看样子你用的是SYBR green,这种染料在你电泳的时候是会向条带相反方向移动的,跑时间太长,造成你的胶这样下面一部分已经看不到marker和背景亮光了。而过长时间跑胶造成的温度升高(拿在手里热乎乎的软软的,听起来像便便。。。),使胶中的样品和染料很多都扩散出去了,造成你的maker和条带整个的不够亮。从你marker的位置可可以看出你跑胶的时间很长,因为最大的条带的位置比较低了。 即使你的背景这么强,也可以看出在你样品孔的下方很近的地方有条带,我不知道你样品的大小和来源,但是可以给出以下几个可能原因:你的loading buffer不正确,造成样品条带异常移动最可能原因是你的样品中DNA就那么大。如果你是提取质粒的话,你做错某步,把细菌的核DNA提取出来了,所以才那么大。你做错的可能是裂解那步,裂解时间超过5分钟了或者你剧烈混合裂解液和细菌了,只有invert就可以了。你上样量也要保证,测一下浓度,一般200ng的条带就非常亮了。 跑胶时候,电压一般80-120,可以低,也可以高到200,但是室温下推荐80-100。时长20-60分钟为宜,一般推荐30分钟,不过你可以跑一段时间拿出来UV照一下,这时候你可以看到条带,如果分得不够开,再放回去跑一会就好了。如果实在需要长时间跑,放4度跑。

⑹ 怎样检验制作的培养基是否染菌

放在你要养的细菌所适宜的温度下12-24h,不长菌就可以了。

怎么样判断菌落是革兰氏阴性菌还是阳性菌

用革兰氏染色法来判断.
革兰氏染色法,能够把细菌分为两大类:采用这种染色方法,是先用龙胆紫(亦称结晶紫)来染菌,所有细菌都染成了紫色,然后再涂以革兰氏碘液,来加强染料与菌体的结合,再用95%的酒精来脱色20~30秒钟,有些细菌不被脱色,仍保留紫色,有些细菌被脱色变成无色,最后再用复红或沙黄复染1分钟,结果已被脱色的细菌被染成红色,未脱色的细菌仍然保持紫色,不再着色.这样凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌(G﹢菌);染成红色的称为革兰氏阴性菌(Gˉ菌)。
大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。常见的革兰氏阳性菌有:葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等;常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌及脑膜炎双球菌等。在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感);而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感),而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,在选择抗生素方面意义重大。

⑻ 糖发酵管中的指示剂常用什么

你所说得发酵指示剂是指判断是否染菌吗?如果是这样,就要看你的发酵本身ph值变化大不大,如果发酵过程本身ph变化不大,就可以寻找合适的指示剂判断是否染菌,如果发酵过程本身ph变化比较大,就不行了

⑼ 酒精发酵工段如何判断发酵醪液是否染菌,如果染菌如何处理

在酒精发酵过程中,判断杂菌感染,一个重要的指标是挥发酸。挥发酸是微生物代谢过程中产生的有机酸类,它直接反映了发酵醪被杂菌感染的程度。未感染杂菌时挥发酸一般在0.012%以下。酒精发酵醪液酸度如果大于这个值,就有染菌的可能。杂菌大多是醋酸菌或乳酸菌。
如果是发酵早期染菌,尽早判断,尽早实消,对发酵醪液进行高温灭菌,灭菌时最好进行搅拌。冷却后再加入酒母进行发酵。

如果是中期染菌,是最不好办的。中止发酵不合算,不中止发酵可能损失更大。通常如果含糖还较高,酒精不多,加热灭菌,一罐分成两罐,补充新料,再发酵。如果已经有相当量的酒精了,直接进提取(蒸馏)吧。
如果是后期染菌,直接中止发酵,进蒸馏工段。其实,很多酒精发酵时后期多少都会染些杂菌的。

⑽ 怎么判断发酵过程的染菌是由哪种微生物引起的

发酵染菌原因分析

第一部分:基础知识

1)杂菌的类型

空气中的微生物大多数是细菌和芽孢,还有一定数量的霉菌、酵母和病毒。细菌的大小有零点几微米至几个微米,见表5-3。

根据以上特点我们应得出如下结论:

A:这些微生物在空气中极少单独游离存在,基本上是附着于灰尘、液滴等微粒的表面上。 B:介质过滤除菌就是把空气中的各种微粒和极少量的游离微生物捕集起来予以除掉。 因此我们通常所用的空气过滤器为什么0.3u可以保证无菌发酵生产的原因。 2)无菌检查与染菌的处理

在抗生素生产过程中,为了及早发现染菌并进行恰当处理,保证生产正常进行,对菌种制备、种子罐、发酵罐的接种前后和培养过程中,须要按工艺规程要求按时取样,进行无菌检验。 A:无菌检查

培养液是否污染杂菌可从三个方面进行分析:

a:无菌试验

b:培养液的显微镜拉查 c:培养液的生化指标变化情况。 其中无菌试验是判断染菌的主要依据。

无菌试验

现在采用的无菌试验方法有肉汤培养法、双碟培养法、斜面培养法。其中以酚红肉汤培养法和双碟培养法结合起来进行无菌检查用的较多。

(1)肉汤培养法 直接用装有酚红肉汤的无菌试管取样,然后放入37℃恒温室(箱)内培养。定时观察试管内肉汤培养基的颜色变化,同时进行显微镜观察。

(2)斜面培养法 先用空白无菌试管取样,然后在无菌条件下接种于斜面培养基上,置于37℃恒温室(箱)内培养。定时观察有无杂菌菌落生长。。

(3)双碟培养法 种子罐样品先取入肉汤培养基中,然后在无茵条件下在双碟培养基上面划线,剩下的肉汤培养物在恒温室(箱)内培养6小时后复划线一次,发酵罐培养液直接取入空白无菌试管中,于37℃下培养6小时后在双碟培养基上划线。24小时内的双碟定时在灯光下检查有无杂菌生长。24小时~48小时的双碟1天检查一次,以防生长缓慢的杂菌漏检。正常生产过程中,种子罐和发酵罐每隔8小时取样一次,进行无菌检查。该方法经常用于单菌落挑选,可以从染有杂菌的培养液中经多次划线挑取单菌落进行分离培养,得到纯种的种子。

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