1. 动物组织加了裂解液要冰上裂解吗
裂解液不需要冰上裂解。
RIPA主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考附录。
2. 细胞裂解液怎么配制
裂解细胞的话：
新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:
先配150 mM NaCL
+ 1% NP-40 (去垢剂) + 0.1% SDS (去垢剂)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)或1 mM PMSF (蛋白酶抑制剂)+1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制剂)+1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制剂)
以上所有试剂均按比例溶于150 mM NaCL溶液中，冰上操作。
裂解细菌就简单多了，用碱裂解法
3. 组织ripa必须按比例加吗
裂解30min后4度冷冻高速离心20min,弃沉淀,上清按比例加入5Xloading buffer沸水煮15min,即可上样,或-20度保存,用的时候沸水煮5min就行
4. 有了ripa裂解液怎么提取蛋白
不太推荐
从提取蛋白自身的角度来考虑，ripa裂解液可以使蛋白质的空间结构破坏，即破坏蛋白质分子的二级和三级结构，从而使抗原决定簇得以充分暴露在外，更有利于被检测出来；
而从试剂盒本身的角度来考虑，以双抗体夹心法为例，提取的蛋白中含有ripa裂解液，当加入到包被的孔板当中时，可能同样会对孔板中的包被的抗体起到了裂解作用（如sds），从而使其失去该有的特异性，这方面可能需要考虑在内的
5. ripa裂解液解冻可以放水浴吗
不能。不能使用水浴，RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规Western，IP等。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强，中，弱三类。
6. 细胞裂解液怎么配制
裂解细胞的话：
新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:
先配150 mM NaCL
+ 1% NP-40 (去垢剂) + 0.1% SDS (去垢剂)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)或1 mM PMSF (蛋白酶抑制剂)+1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制剂)+1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制剂)
以上所有试剂均按比例溶于150 mM NaCL溶液中,冰上操作.
裂解细菌就简单多了,用碱裂解法
7. 请问细胞裂解液如何配制，谢谢了先！
博凌科为生物科技-为你解答：一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:150 mM NaCL1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂)2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)1 mM PMSF (蛋白酶抑制剂)1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制剂)1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制剂)(任选)以上所有试剂均按比例溶于150 mM NaCL溶液中。2、冷的PBS 中加入 1 mM PMSF1.5 mM EDTA1mM NaVanadate （钒酸钠）(任选)3、对数期生长状态佳的细胞，75cm至少3-4瓶（90%以上生长面积）。二、实验步骤1、将长满细胞的培养瓶放置在冰上， 用吸液管吸出培养液。加入足够的冷的 PBS在培养瓶中充分洗涤细胞表面，以洗去瓶中残留的培养基，倒掉PBS ，重复以上操作2-3遍。在最后一次洗涤中尽可能吸干残留的PBS，尽量在冰上操作。2、 向培养瓶中加入冷的RIPA 裂解缓冲液 (每75cm2 培养瓶加1ml). 然后用细胞刮子沿着瓶壁开始刮细胞，如果所需要刮的同种细胞有多瓶，则将第一瓶刮下的细胞液吸出转入下一瓶中继续刮 (由于处理后的细胞裂解液较粘稠，所以宜用直径大点的吸液管吸取)。3、 吸出刮好的细胞裂解液置于14ml 离心管中 （置于冰上），然后重复步骤2以刮取剩下的细胞。4、 尽可能将多的细胞裂解液收集到14ml的离心管中，样品插入冰盒进行超声，超声强度以不产生泡沫为准，超声每次2-3秒，重复3-4次。如仍有细胞碎片或沉淀，应离心10000rpm,10分钟，留取上清。5、 取出小量细胞裂解液测其蛋白浓度（用Biorad Bradford 试剂盒或紫外分光光度计，在A280测定），分装保存在 -70℃。
8. RIPA裂解液(强)怎么融解,应该在多少温度下融解
一般都是室温溶解的啊，你实在不放心的话用之前早点放4度吧