‘壹’ 叶绿体色素用什么方法可以提取与分离
叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）两大类。它们与类囊体膜上的蛋白质相结合，而成为色素蛋白复合体，这两类色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。提取液可用色层分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各成分在两相（流动相和固定相）间具有不同的分配系数，所以它们的移动速度不同，经过一定时间层析后，便将混合色素分离。
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‘贰’ 为什么要用到酒精洗叶绿体
:因为叶片经过酒精加温后叶绿体将会死亡，叶绿体就会停止分泌叶绿素.因为叶片进行了光合作用，滴碘液的时候，叶片颜色会变蓝。如果不将叶片做褪色处理，那么碘液的蓝色将不那么明显。叶片会变成黄色.
‘叁’ 叶绿体分离的实验原理是什么在分离叶绿体时应注意些什么问题
将植物组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、稠密度，也与离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。
然后在3000 r/min的条件下离心5min，即可获得沉淀的叶绿体(混有部分细胞核)。分离过程最好在0～4℃的条件下进行；如果在室温下，要迅速分离和观察。
‘肆’ 分离叶绿体中常用的方法是
（1）分离叶绿体中的色素常用的方法是纸层析法．由于胡萝卜素易溶于有机溶剂，因此常用有机溶剂来萃取胡萝卜素．
（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵．常用的对培养皿进行灭菌的方法是干热灭菌法．
（3）微生物的鉴定常用鉴别培养基，在尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂．
（4）纯化菌种和统计某活菌的数目时，计数方法一般有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于所产生的菌落可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少．
故答案为：
（1）纸层析法 萃取
（2）防止外来杂菌的入侵 干热灭菌法
（3）以尿素为唯一氮源的 酚红
（4）稀释涂布平板法 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
‘伍’ 昆虫肠道微生物 怎样分离叶绿体
叶绿体的分离
【原理】
研磨叶片得到的匀浆，经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱，分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中，0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降，因此，分离工作尽可能在短时间内完成。
【仪器与用具】
冰箱；离心机；扭力天平；显微镜；pH计；研钵；量筒；移液管；离心管；脱脂纱布等。分离器皿都须在0℃下预冷。
【试剂】
①分离介质
含0.33mol/L 山梨醇，50mmol/L Tris-HCl（或Tricine） pH7.6，5mmol/L MgCl2，10mmol/L NaCl，2mmol/L EDTA，2mmol/L 异抗坏血酸钠。
配法：称60g山梨醇、6.06g Tris、1g MgCl2·6H2O、0.6g NaCl、0.77g EDTA-Na2、0.4g异抗坏血酸钠，溶解后用1mol/L HCl调pH至7.6，定容至1000ml。
②悬浮和测定介质Ⅰ
0.66mol/L 山梨醇，2mmol/L MgCl2， 2mmol/L MnCl2，4mmol/L EDTA，10mmol/L焦磷酸钠，100mmol/L Tris-HCl pH7.6。
配法：称60g山梨醇、0.2g MgCl2·6H2O、0.2g MnCl2·4H2O、0.75g EDTANa2、2.23g Na4P2O7·10H2O、6.06g Tris，溶解后用1mol/L HCl调pH至7.6，定容至500ml。
③悬浮和测定介质Ⅱ：测定介质Ⅰ稀释1倍。
【方法】
1. 选用生长健壮，最好是连续几个晴天下生长的菠菜叶片，洗净后去除中脉，放入0~4℃冰箱或冰瓶中预冷。
2. 分离介质30~50ml，置于研钵中，并在冰箱中预冷至现薄冰。
3. 取冷却的菠菜叶片10~20g，撕碎后放入研钵，用手工快速研磨0.30~1min，注意不要用力过猛，也不必研磨过细，以叶片磨成小块时即可，研磨后将匀浆用两层新纱布过滤。
4. 将滤液装入预冷过的二个离心管，经天平平衡后，用离心机以1000r/min离心2min。
5. 倾去上层液，沉淀即为叶绿体。随后每管加2ml悬浮和测定介质Ⅱ，并用吸管冲散沉淀。叶绿体悬浮液合并后放冰瓶中备用。
6. 用滴管吸取少量叶绿体，加少量悬浮和测定介质Ⅱ稀释，置显微镜（400~600倍）下，观察叶绿体的形态。
上述是机械法从叶片中分离叶绿体，此外也可从原生质体中分离高活性的叶绿体，具体方法可参照《生物生产力和光合作用测定技术》（科学出版社，1986）一书。
‘陆’ 将叶绿体等各种细胞器从叶肉细胞中分离出来，常用的方法是___。叶片充分研磨后用..……提取色素，得
差速离心法，无水乙醇，层析液，扩散速率不同色素在叶片中的含量不同。
‘柒’ 叶绿体和线粒体分离的方法是什么，其原理是什么
线粒体的增殖是通过已有的线粒体的分裂，有以下几种形式：
1、间壁分离，分裂时先由内膜向中心皱褶，将线粒体分类两个,常见于鼠肝和植物产生组织中。
2、收缩后分离，分裂时通过线粒体中部缢缩并向两端不断拉长然后分裂为两个，见于蕨类和酵母线粒体中。
3、出芽，见于酵母和藓类植物，线粒体出现小芽，脱落后长大，发育为线粒体。
在个体发育中叶绿体由原质体发育而来，原质体存在于根和芽的分生组织中，由双层被膜包围，含有DNA，一些小泡和淀粉颗粒的结构，但不含片层结构，小泡是由质体双层膜的内膜内折形成的。
1、在有光条件原质体的小泡数目增加并相互融合形成片层，多个片层平行排列成行,在某些区域增殖，形成基粒，变成绿色原质体发育成叶绿体。
2、在黑暗性长时，原质体小泡融合速度减慢，并转变为排列成网格的小管的三维晶格结构，称为原片层，这种质体称为黄色体，黄色体在有光的情况下原片层弥散形成类囊体，进一步发育出基粒，变为叶绿体。
3、叶绿体能靠分裂而增殖，这各分裂是靠中部缢缩而实现的，在发育7天的幼叶的基部2-2.5cm处很容易看到幼龄叶绿体呈哑铃形状，从菠菜幼叶含叶绿体少，ctDNA多,老叶含叶绿体多，每个叶绿体含ctDNA少的现象也可以看出叶绿体是以分裂的方式增殖的，成熟叶绿体正常情况下一般不再分裂或很少分裂。
‘捌’ 提取叶绿体色素的常用方法是
（1）用纸层析法分离叶绿体的色素，用萃取法提取胡萝卜素，水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法．
（2）在DNA的粗提取与鉴定实验中，提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点；鉴定DNA可利用二苯胺试剂．
（3）从土壤中分离出尿素分解菌，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的氮源，培养基中加入指示剂酚红，培养后若变红则鉴定其中含有所需细菌．
（4）纯化菌种和统计某活菌的数目，宜采用的接种方法是稀释涂布平板法．该方法统计的菌落数比活菌的数目偏低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到只是一个菌落．
故答案为：
（1）纸层析法 萃取法 水蒸气蒸馏
（2）不溶于酒精 二苯胺
（3）酚红
（4）稀释涂布平板法 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到只是一个菌落
‘玖’ 叶绿体和线粒体分离的方法是什么,其原理是什么
可以利用差速离心法把叶绿体和线粒体分离。
原理是利用叶绿体和线粒体的质量和密度不同，通过不同转速的离心使叶绿体和线粒体分离。
‘拾’ 叶绿体分离的实验原理是什么在分离叶绿体时应注意些什么问题
将植物组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、稠密度，也与离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。叶绿体的分离应在等渗溶液(0.35mol/L
氯化钠或0.4mol/L
蔗糖溶液)中进行，以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。将匀浆液在1000
r/min
的条件下离心2min，以去除其中的组织残渣和一些末被破碎的完整细胞。然后在3000
r/min的条件下离心5min，即可获得沉淀的叶绿体(混有部分细胞核)。分离过程最好在0～4℃的条件下进行；如果在室温下，要迅速分离和观察。
2.
某些物质一定短波长的光（如紫外光）的照射下吸收光能进入激发态，由激发态回到基态时，就能在极短的时间内放出比照射光波长更长的光（如可见光），这种光就称为荧光。若停止供能荧光现象立即停止。有些生物体内的物质受激发态光的照射后可以直接发出荧光，称为自发荧光（或直接荧光），如叶绿体的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。这些物质本身不发光，但他它吸收荧光染料后同样也能发出荧光，这种荧光称为次生荧光（或间接荧光），如叶绿体吸附吖啶橙后可以发出桔红色荧光。