❶ 微生物学常用的接种技术有哪些各有何特点
细菌的接种方法有很多种,如划线法、涂布法、倾注法、斜面接种法、液体培养基接种法、螺旋接种法等,其方法和应用各有不同。
一、划线法:
此法主要用于菌种分纯,获得单菌落.
由接种环沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。
优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离。
缺点:不能用于菌落计数。
二、涂布法:
此法主要用于菌落总数计数.
先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,然后用无菌吸管吸取0.1ml 菌液接种在已凝固的琼脂平板上。再用无菌L 型玻璃棒将菌液在平板上涂抹均匀,将涂抹好的平板平放于桌上20~30min,使菌液渗透入培养基内,然后将平板倒转,保温培养,至长出菌落后即可计数。
优点:可以计数,可以观察菌落特征。
缺点:接种前需梯度稀释,吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。
三、倾倒法:
此法主要用于菌落总数的计数.
吸取1ml 菌液加入平板中,倒入已融化并冷却至45~50℃的细菌培养基,轻轻转动平板,使菌液与培养基混合均匀,冷疑后倒置,适温培养。至长出菌落后即可计数。
优点:可以计数,较方便。
缺点:接种前需梯度稀释,不能观察菌落特征,不适用于严格好氧菌和热敏感菌。
四、斜面接种法:
此法主要用于保存菌种,或观察细菌的某些生化特性和动力.
用接种环或接种针伸入菌种管内,挑取用来移种的菌落。伸入斜面培养管内,先从斜面底部到顶端拖一条接种线,再自下而上蜿蜒划线,或直接自下而上地蜿蜒划线。接种完成之后,用火焰灭菌培养管口,并塞上棉塞,置于37℃培养。
五、液体培养基接种法:
此法主要用于菌液比浊实验
用灭菌接种环挑取菌落或标本,在试管内壁与液面交界处轻轻研磨,使细菌均匀得散落在液体培养基中。
六、螺旋接种法:
此法主要用于菌落总数计数
可以在无任何全部或中间稀释的情况下快速细菌接种。对数减少的样品容量以阿基米德螺旋线的形式被自动分注在旋转式培养基表面。培养基上每一点的容量可以被知晓和校准。菌液的浓度可以通过培养皿上一定区域的菌落数量除以同区域样品分注量来计算。
优点:螺旋接种法菌液无需稀释(其他接种方法均需经过梯度稀释才能计菌落数),自动化接种,效率高,可节省3/4 的耗材和时间。
缺点:产品成本高,适用于样品量比较大的实验。
❷ 常用于细菌和酵母菌接种的工具为
应该是接种针或接种环。
接种针和接种环是细菌培养时常用的接种工具,广泛应用在微生物检测、细胞微生物、分子生物学等众多学科领域。通常是用钢丝,铂金丝或者镍铬合金丝制成的。
接种针和接种环均可用于缴生物培养时的划线法、点植法、穿刺法、浸洗法,及以上方法的组合、衍生方法等微生物接种操作。
接种针和接种环
❸ 微生物接种方法有哪几种
接种常见方法有:平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、液体接种法。
一、平板划线分离法
平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
二、斜面接种法
该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。
三、穿刺接种法
穿刺培养,是指将带有欲培养微生物的接种针深插至半固体培养基(琼脂含量0.2%〜1.0%)中接种,并进行微生物固体深层培养的一种方法,主要用于厌氧或兼性厌氧微生物的培养。
四、液体接种法
液体培养,是指将微生物直接接种于液体培养基中,并不断振荡或搅拌,使微生物均匀地在液体培养基中生长繁殖的一种培养方法。液体培养适用于好氧微生物和植物组织培养,以迅速得到大量繁殖体为目的。
五、涂布接种法
微生物学实验中的一种操作方法。由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,而且采用稀释倒平台法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长,因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。
(3)接种棒使用方法扩展阅读:
接种注意事项
1、每次接种时间最长不得连续超过2小时。
2、操作时,接种工具尖端和种块不能接触到管口和外部其它物体。工具尖端碰到外面物体要重换工具,种块碰到外面物体则作废。
3、一般用种量:每支试管母种可扩繁一级种100支左右;扩接原种6~8瓶。
参考资料:搜狗网络-接种
参考资料:搜狗网络-平板划线分离法
参考资料:搜狗网络-涂布平板法
参考资料:搜狗网络-穿刺培养
参考资料:搜狗网络-斜面法
参考资料:搜狗网络-液体接种
❹ 适合秋冬季接种的平菇类型,附种植方法
1、广温偏低型平菇:这种类型的平菇适宜出菇的的温度较广,一种是纯白色平菇,在温度2-30°C范围内都能正常出菇,最适宜的出菇范围是8-25°C。另一种是灰色的平菇,在2-32°C的范围内比较适宜出菇。2、广温偏高型平菇品种类型:这种平菇的外观有些呈现灰黑色有些呈灰白色,灰黑色平菇出菇的温度范围在6-33°C,灰白色平菇出菇温度在4-34°C,这两种颜色的平菇最适宜的出菇温度在10-29°C。❺ 食用菌接种时,接种棒要在酒精灯上来回灼烧灭菌,可是这样接种棒也会变烫,对菌丝完全没影响么
如果接种工具太烫的话,就会烫伤菌丝。灼烧灭菌以后可以稍作冷却。也可以用酒精棉球擦拭冷却。然后再接种就没事了。
❻ 蘑菇菌棒怎么用
菌棒是接种的手段之一,不同蘑菇的菌棒使用方法不一样,以下为蘑菇菌棒的使用方法:
1、配料
将杂木屑等硬质材料进行预湿,使其充分吸收水分。
注意事项:
经过接种的菌棒,在高温季节来临前,应选择通风散热条件好的场所完成菌棒的散堆,移堆工作。在高温期间,严禁翻动菌棒,以防香菇菌棒受振动而增加菌丝呼吸作用而使堆温上升,引起"烧菌"。
❼ 连续划线法操作步骤
连续划线法步骤:从平板边缘一点开始,连续作波浪式划线直到平板的另一端为止,当中不需灼烧接种环上的菌。接种环于酒精灯外焰烧至红透,接种棒也要充分灼烧,最后再集中烧接种环至红。
1、轻轻摇匀待接种试管,左手手心托待接种试管底侧部,右手执接种环,右手小指拔下试管塞,于酒精灯附近将接种环伸进试管,稍候,再插入待接接种液中,蘸一下,取满一环,抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。
或将接种环通过稍打开皿盖的缝隙伸入平板,在平板边缘空白处接触一下使接种环冷却,然后以无菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。
2、靠近酒精灯处打开平皿盖约30°,右手将环伸进平皿,将菌种点种在平板边缘一处,轻轻涂布于琼脂培养基边缘,抽出接种环,盖上平皿盖,然后将接种环上多余的培养液在火焰中灼烧,打开平皿盖约30°伸入接种环。
3、待接种环冷却后,再与接种液处轻轻接触,开始在平板表面轻巧滑动划线,接种环不要嵌入培养基内划破培养基,线条要平行密集,充分利用平板表面积,注意勿使前后两条线重叠,划线完毕,关上皿盖。灼烧接种环,待冷却后放置接种架上。
培养皿倒置于适温的恒温箱内培养(以免培养过程皿盖冷凝水滴下,冲散已分离的菌落)。培养后在划线平板上观察沿划线处长出的菌落形态,镜检后再接种斜面。
划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种。
分区划线法分离时平板分四个区,故又称四分区划线法。划线时每次将平板转动60~70°划线,每换一次角度,应将接种环上的菌烧死后,再通过上次划线处划线。
其中第4区是单菌落的主要分布区,故其划线面积应最大。为防止第4区内划线与1、2、3区线条相接触,应使4区线条与1区线条相平行,这样区与区间线条夹角最好保持120°左右。
1、先将接种环沾取少量菌在平板1区划3~5条平行线,取出接种环,左手关上皿盖,将平板转动60~70°,右手把接种环上多余菌体烧死,将烧红的接种环在平板边缘冷却,再按以上方法以1区划线的菌体为菌源,由1区向2区作第2次平行划线。
2、第2次划线完毕,同时再把平皿转动约60~70°,同样依次在3、4区划线。划线完毕,灼烧接种环,关上皿盖,同上法培养,在划线区观察单菌落。