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分离微生物的常用方法

发布时间:2022-01-10 14:23:46

Ⅰ 自然界分离微生物的一般操作步骤

先制作培养物,然后用划线法把混合的微生物种到培养物上,恒温培养二十四小时以上,就可把微生物分离开

Ⅱ 微生物分离的方法及其评价 急求

1、涂布法:制备菌悬液,进行涂布,选择单菌落。一般是从混杂的菌群中,分离单菌落。
2、划线法:用接种针(或接种铲)进行划线处理,具体方法有:分区划线,之字划线等。适用于分离单菌落。一般是后期使用。
3、点接法:在培养基点样,培养。利于观查。
4、 另外,可以在培养基上加入抗其他类菌落生长的试剂或化合物。来抑制其他不需要微生物的生长,进行分离。即选择培养基的使用。

Ⅲ 好气微生物分离的常用方法哪些 他们的原理如何

稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备,
分离纯化效果好

Ⅳ 微生物纯种分离的方法有哪些

自然界中的微生物总是杂居在一起 即使一粒土或一滴水中也生存着多种微生物 要研究其中某一种微生物 首先必须将它分离出来 下面介绍几种纯种微生物的分离方法
平板划线分离 将已经熔化的培养基倒入培养皿中制成平板 用接种环沾取少量待分离的材料 在培养基表面平行或分区划线(图5-5)然后 将培养皿放入恒温箱里培养 在线的开始部分 微生物往往连在一起生长 随着线的延伸 菌数逐渐减少 最后可能形成纯种的单个菌落
液体稀释法 将待分离的样品经过大量稀释后 取稀释液均匀地涂布在培养皿中的培养基表面 培养后就可能得到单个菌落
利用选择培养基进行分离 不同的微生物对不同的试剂 染料 抗生素等具有不同的抵抗能力 利用这些特点可配制出适合某种微生物生长而限制其他微生物生长的选择培养基 用这种培养基来培养微生物就可以达到纯种分离的目的
菌丝尖端切割 这种方法适于丝状真菌 用无菌的解剖刀切取位于菌落边缘的菌丝的尖端 将它们移到合适的培养基上培养后 就能得到新菌落

Ⅳ 微生物的分离

想明白这个问题,先要了解固体培养基分离都有哪些方法:1.1 稀释倒平板法 首先把微生物悬液作一系列的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。 1.2 涂布平板法 因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长,因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿,制成无菌平板,冷却凝固后,将一定量的微生物悬液滴加在平板表面,再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面,经培养后挑取单个菌落(图1)。 图1 涂布平板法 1.3 平板划线法 最简单的分离微生物的方法是平板划线法,即用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行连续划线(图2),微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的,故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。 图2 平板划线法 1.4 稀释摇管法 用固体培养基分离严格厌氧菌有特殊性,如果该微生物暴露于空气中不立即死亡,可以采用通常的方法制备平板,然后置放在封闭的容器中培养,容器中的氧气可采用化学、物理或生物的方法清除。对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物,纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行,它是稀释倒平板法的一种变通形式。先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右,将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释,试管迅速摇动均匀,冷凝后,在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物,将培养基和空气隔开。培养后,菌落形成在琼脂柱的中间。进行单菌落的挑取和移植,需先用一只灭菌针将液体石蜡--石蜡盖取出,再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间,吹入无菌无氧气体,将琼脂柱吸出,置放在培养皿中,用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。 这四种方法都用其不同用途,但是涂布和划线经常要一起做才能确保,我个人意见是涂布容易再污染,并且遇到未知样时,往往不知道其菌含量大小,菌含量大的是涂布出来的,而且涂布需要准备的平板数大于划线,划线要求技术熟练,简单再污染几率小于涂布,但是往往要做很多才能得到,时间太长

Ⅵ 分离纯化微生物的方法有哪些各方法适用分离什么菌种

主要有:划线法、倒平板法、涂布法,根据分离的菌种选择不同的培养基。

稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备,分离纯化效果好。

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离。

分离技术

主要是稀释和选择培养,稀释是在液体中或在固体表面上高度稀释微生物群体,使单位体积或单位面积仅存留一个单细胞,并使此单细胞增殖为一个新的群体。最常用的为平板划线法。

如果所要分离的微生物在混杂的微生物群体中数量极少或者增殖过慢而难以稀释分离时,需要结合使用选择培养法,即选用仅适合于所要分离的微生物生长繁殖的特殊培养条件来培养混杂菌体,改变群体中各类微生物的比例,以达到分离的目的。为保证分离到的微生物是纯培养,分离时必须用。

以上内容参考:网络-微生物分离纯化

Ⅶ 微生物的分离与纯化的常用方法有哪些

分离:

稀释倒平皿法

平板划线法

单细胞挑取法

利用选择培养基分离法

纯化:

1、若是你不知道你所要纯化的微生物的特征,最简单的不知道它的菌落特征和形态大小,那现根据你要分离菌的特性,找适合的初筛培养基,找到你要纯化的菌。如纤维素菌,你在培养基中加纤维素粉或CMC-Na作碳源,这样就可以筛选出分解纤维素的菌。然后再用下面的方法继续纯化。

2、若你知道目标菌的形态,可以直接挑混合菌划平板,直到长出当个菌落,并且在镜下没有杂菌即可;或者挑菌稀释涂布得到当个菌落也行。

Ⅷ 微生物分离纯化常用的方法有哪些

稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备, 分离纯化效果好

Ⅸ 试述常用的细菌分离方法及其用途

分离纯化的目的,都是为了获得特定的、纯的微生物
方法有以下几种,其实只要掌握简单的固体培养基分离纯化就够你使用了,其他的可以了解一下,我是这样认为
因为具体方法内容太多,所以只列出了方法名称。

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
1、用固体培养基分离和纯化
1.1 稀释倒平板法
1.2 涂布平板法
1.3 平板划线法
1.4 稀释摇管法
2、用液体培养基分离和纯化
3、单细胞(孢子)分离
4、选择培养分离
4.1 利用选择平板进行直接分离
4.2 富集培养
5、二元培养物

Ⅹ 微生物各种分离方法的优缺点

最常用的两种方法:
1.平板划线分离法
把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种
优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离。
缺点:不能计数,一般用于从菌种的分离纯化。
例如:筛选大肠杆菌菌种。
2.稀释涂布平板法
将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。
优点:可以计数,可以观察菌落特征。
缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。一般用于平板培养基的回收率计数。
例如:测定纯净水中大肠杆菌的含量。

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