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致炎造模常用方法

发布时间:2022-07-21 00:48:38

1. 跟腱炎的治疗方法

跟腱炎指的是跟腱发生了炎症,通常来说,跟腱炎是在运动的过程中,小腿腓肠肌和跟腱承受了太大的压力导致的,例如跑步、除此之外,突然增加锻炼的强度以及频率也是会引起跟腱炎的发生的,配合中医膏药调理是可以的。

跟腱炎的预防措施

1、运动前,做好热身伸展运动。筋骨活动开,小腿肌肉绷得太紧或过于疲劳,那么运动产生的冲击力传到跟腱,就有可能引起跟腱炎。

2、加强力量,重负荷小腿运动能够让跟腱承受更大的力量。身体强化,增强式训练可以提高小腿和踝关节处的肌肉、肌腱和韧带的运动水平。伸展运动,小腿伸展运动可以提高肌腱的柔韧性。平衡能力,进行一些提高你身体平衡能力的运动,锻炼你的身体感受能力。

3、挑选合适的鞋子,如果鞋子过大,人往往会弯曲脚趾抠住鞋底,这个动作会过度使用跖腱膜和相关组织,导致局部肌腱劳损,引发跟腱炎。

4、跑步距离增加过快、训练过量,会给跟腱带来更大的冲击力。在进行身体锻炼时,一定要循序渐进。

5、走跑场地太硬、跑鞋太硬等都有可能引发跟腱炎症。在鞋跟内加一层垫帮助减缓跟腱紧张。

2. 痛风如何降低尿酸

如何快速降低尿酸。

1、水

其实水是我们吃的最多的营养素,以至于我们说到营养的时候经常忘了水。尿酸是通过肾脏溶解在水里排出来的,所以饮水量对排出尿酸作用巨大。建议高尿酸的朋友要多喝水,每天至少2000毫升以上,而且要分多次喝。

2、小苏打。

小苏打,又名碳酸氢钠可以使碱化尿液,促进尿酸排出。小苏打加入水中,就成了苏打水。注意是苏打水,不是碳酸饮料,事实上碳酸饮料中的碳酸和糖分都会升高尿酸。小苏打配合多喝水,效果几天就看出来了。

3、蔬菜、水果、海藻类食物

大部分蔬菜、水果、海藻类食物嘌呤含量都比较少,同时钾、钠、钙、镁等呈碱性的元素比较多,能促进尿酸排泄。每天保证1到2斤蔬菜,一个水果,对降低尿酸的作用是非常明显的。只有少数蔬菜含嘌呤较高,如豌豆、黄豆、扁豆、菠菜、蘑菇、菜花等,高尿酸血症及痛风患者尽量少吃这些蔬菜。还有,强调一点,喝果汁会升高血尿酸水平,因为果汁富含果糖。一杯橙汁包含了三四个橙子的果糖,却丢失了大部分的维生素和膳食纤维。

4、维生素C

很早就有研究发现,维生素C具有促进肾脏排出尿酸的作用。临床上也发现,增加维生素C摄入可降低血尿酸水平。这也是多吃蔬菜水果能降低尿酸的原因之一。含维生素C较多的水果蔬菜包括:鲜枣、刺梨、酸枣、番石榴、猕猴桃、各种辣椒菜椒、大白菜等。也可以在医生和营养师指导下服用适量的维生素C补充剂。

5、脱脂牛奶、酸奶

奶类本身的嘌呤含量低,不会增加尿酸负荷。牛奶中所含的酪蛋白、乳清蛋白具有促尿酸排泄作用,有研究表明,牛奶喝得越多血尿酸水平越低。但是全脂奶中脂肪含量较高,可能会提高痛风风险,所以建议高尿酸的盆友喝脱脂奶。同样,脱脂酸奶也会降低痛风的发病风险。

6、少吃高嘌呤食物

高嘌呤食物包括:食动物内脏、含糖饮料、啤酒黄酒、红肉、海鲜、豆制品。为了补充蛋白质,建议多喝牛奶,多吃鸡蛋。另外碳酸饮料和甜点虽然嘌呤不高,但是会升高血尿酸。

对于那些不能吃呢?

少吃的:鱼、内脏、肉汤、贝类、虾蟹、芹菜、菜花、菠菜、扁豆、豌豆、蘑菇、辛辣、咖啡、啤酒、浓茶。

烹调方法多用煮、熬、蒸,少用煎、炸。

总结

尿酸与肾脏疾病关系密切。除尿酸结晶沉积导致肾小动脉和慢性间质炎症使肾损害加重以外,许多流行病学调查和动物研究显示,尿酸可直接使肾小球入球小动脉发生微血管病变,导致慢性肾脏疾病,因此,即使血尿酸在正常范围内,随着尿酸水平的升高,肾功能下降也非常明显,所以,高尿酸血症到一定程度,可以导致各种各样的肾病,比如说:尿酸性肾病、糖尿病肾病、肾结石、急慢性肾衰、终末期肾病等等。如果肾脏糟糕到一定程度,那么,如果你有钱的话,就等着排队换一个别人的肾脏吧!

其实现在尿酸高和痛风已经不在只属于高龄人,

这些有痛风的尿酸高的他们都有一个特征,就是爱喝酒,喝起酒不要命的。

那会有人问为啥有人喝酒多了没事呢?尿酸也不高啊?

其实这个也要跟你的肾有关。

所以说量力而行。

3. 哪里可以提供类风湿关节炎(RA)动物模型是用什么方法造模的啊

威斯腾生物的信用很好的,我们这边很多实验都交给他做,动物模型是他们的拳头产品,不过他们建议的是整体实验外包,保证提供真实可靠的实验结果。

4. 中药药理的研究内容

中药药理学研究主要包括主要药效学研究和一般药理学研究。 中药新药主要药效学研究应遵循中医药理论,运用现代科学方法,制定具有中医药特色的试验计划,根据新药的功能主治,选用或建立与中医“证”或“病”相符或相近的动物模型和试验方法,对新药的有效性做出科学的评价。主要药效学研究包括下面几个方面。
中药药理学 (1)主要药效学研究设计依据和要求
中药具有成分复杂,药理作用广泛的特点,在实验设计时应根据新药主治(病或证),参考其功能,选择能够反映其疗效本质的主要药效进行重点研究;间接证实其药效的辅助试验可酌情选作,要分清主次。如主治风湿痹证(类风湿性关节炎)的新药,应以免疫性关节肿、细胞免疫和镇痛作用为主要试验,特别是免疫性关节炎为重中之重。如新药对二型胶原(常用不完全性佐剂代替)性关节炎的继发肿胀没有抑制作用,其他试验结果再明显也是没有用的。此外、主要药效试验应从多方面进行论证,至少应选用两种或两种以上模型加以证实,且以整体试验为主。要求实验方法可靠、技术先进、操作规范、结果可信。
(2)选择实验方法
药理实验方法主要分为在体试验和体外试验两大类。两者互相补充,可以从不同角度,不同深度研究中药新药药效。两种方法各有所长。
体外试验包括离体器官、组织、细胞、酶、受体、细胞内信息及基因等实验。其可以按要求严格控制实验条件,具有重复性好,用药量少、节省动物等优点,且可排出体内神经体液等各种复杂因素的干扰,可进行直接观察,获得准确结果。所得结果较易分析。在1、5、7类中药新药的研制中,因含杂质较少,可以配合一定的体外试验。但在进行体外试验时,应充分估计到中药粗制剂中杂质和理化性质对实验结果的影响,如药液的酸碱度、各种电解质和鞣质等的干扰,所得结果常常不能反映临床疗效。例如在试管内抗菌作用较强的中药,常常在体内不一定表现出强大的抗菌作用;某些中药含有大量钾离子、钙离子,其粗制剂在麦氏浴槽中表现出对离体平滑肌、心肌有明显的药理活性,但口服后不一定产生相应作用。
体内试验也称在体试验,其比较接近于临床状态,适于综合性研究,所得结果较为可信,可以直接反映临床疗效。中医药学以整体思想体系为基础,重视宏观调控。中药具有多成分多靶点的特点,整体试验能较全面的反映药物的作用。特别是中药新药2类药材、6类复方制剂大多属粗制剂,更应强调以体内试验为主。要证实新药具有某种药理作用必须通过体内试验证明有效。体外试验仅起辅助作用。具体试验方法请参考相关方法学书籍。近年来开展的中药血清药理试验方法是一种新的体外试验方法,其将受试药物经口给与动物后,取其血清作为药源加入体外反应系统中研究其药理作用。此种方法尽管目前仍存在很多问题,尚待解决,但对中药粗制剂的体外试验具有重要价值。严格说来,采用血清药理试验方法,给药方案需要进行大量的预试验,才能找出最佳给药方案。给药方案包括给药剂量,每天给药次数,连续给药时间,给药后采血时间以及血清中所含相关活性物质的灭活条件。李氏根据近些年来所掌握中药有效成分大量药代动力学数据,提出通法如下:将受试药物每天给药两次,连续给药3天,末次给药后1小时采血;给药剂量为临床等效剂量。按此通法方案进行,理论上中药或其复方所含80%以上的成分于给药后1小时处于达到或接近峰值。血清中活性物质对所含药物作用有干扰,如何排出干扰是一项十分复杂的问题。一般排出酶活性及补体干扰,常采用56℃条件下放置30min,这是最简便的方法。但不能列为通法。因为干扰因素不同,排出干扰的条件差异会很大。
(3)选择动物模型和指标
研究药物的作用仅仅在正常动物身上进行还不够,还需要制备各种动物病理模型,因为病理模型模拟疾病状态,比正常机体更接近病人的机能状态,有些药理作用在正常动物身上观察不到,如抗胃粘膜损伤药,抗菌、抗病毒药,抗恶性肿瘤药,解热、镇痛、抗炎药等均必须在相应的病理模型上才能观察到相应的作用。因此,病理模型在新药研究中占有重要地位。病理模型的选择应首选符合中医临床证或病的动物模型。如研究补虚药对免疫功能的影响,应首选免疫功能低下的虚症模型,按照中医辩证施治原则“虚则补之”,凡是正气虚衰病人,才有免疫功能低下表现,用补益药可使其免疫功能增强。进一步根据药物类型,选择相应病理模型。如治疗脾虚症的新药,宜选用脾虚症的动物模型,治疗血虚证的新药,应选择血虚证的动物模型。但目前制造完全模拟中医病或证的病理模型尚有困难。现有模型与临床证候相距甚远,故研究中药新药也常常采用一般化学药物所常用的病理模型,如高血压、糖尿病、中风、冠心病、肝炎、肝硬化等病理模型。观察指标应选用特异性强、敏感性高、重现性好、客观、定量或半定量的指标进行观察。如在治疗冠心病心绞痛的中药新药进行疗效研究时,制备心肌缺血模型时,可供选择的方法很多,其中以阻断小型猪或犬冠状动脉所致的局限性心肌缺血模型与临床更为相似,较为合理,且可定位、定量、定性、较准确地评价药效,可作为首选的实验模型。
(4)对不同类别新药的药效学研究要求 药理实验中药新药第1-5类、6类及7类的主要药效研究,应从多方面证实其主要药效,以及较重要的辅助治疗作用。其中1类和5类和7类新药,含杂质较少,应在更高的技术水平上,通过体内、体外多种试验方法论证其药效。6传统中药复方及11类已有国家标准的中成药制剂,可免做主要药效学试验。
(5)实验动物
a) 应根据各种试验的具体要求,合理选择实验动物,对其种属、品系、性别、年龄、体重、健康状态、饲养条件及动物来源,合格证号,均应按试验要求严格选择,并详细记录。
b) 选用与人体的结构、机能、代谢、疾病特点相近似的实验动物。如研究催吐药宜选用鸽子、犬、猫等动物,它们对呕吐反应敏感;不宜选用家兔和鼠类,因后者无呕吐中枢或无呕吐反应;再如进行降压药研究时,宜选用犬、猫和大鼠,它们对降压药反应较敏感,与人类接近;不宜选用家兔,因家兔血压不稳定,对有些药物不敏感。
c) 选用遗传背景明确,指标稳定且显着,解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物。
d) 宜选用2—3种动物进行药效试验,动物模型与临床有区别,特别是中医证的模型与临床差异更大,因此“动物点头”临床不一定疗效就好。人与动物既有共性又有差异。如在不同种属动物身上均作出与临床疗效相似的结果,可信度就大。故在进行药效研究时不要只选用一种动物,用2—3种动物的实验结果可信度更大。
e) 此外,还应考虑实验动物品种、品系、质量,受试动物是否易得,是否经济、是否容易饲养和管理。
(6)受试药物对受试药物的要求应注意下列问题:
a) 受试中药药材应经过生药专家鉴定,确定品种、产地、药用部位和采收季节。饮片炮制方法要固定。
b) 中药制剂生产工艺条件要经过严格的选择,选用最佳工艺条件,制剂应合格,稳定性好,质量可控,剂型和质量标准应与临床用药基本相同。药效试验可选用不含赋形剂的中药提取物。
c) 6类中药复方制剂处方必须固定,处方组成药味必须符合法定标准,且组方符合中医药理论,对中西药合方或方中含天然药材者,应进行组方分析。
d) 此外,中药新药制剂应符合卫生标准,制剂来源、批号最好一致。
(7)对照组
a) 正常对照组,又称“空白对照组”或“阴性对照组”,指在正常条件下进行观察和对照。正常对照组必须与给药组进行相同的处理,如常用溶剂灌胃,用生理盐水注射。正常对照组设置目的,可用来观察造模是否成功;在药物作用下观察给药组指标是否恢复正常。
b) 阳性药对照组,阳性药对照组可选用药典收载的,正式批准生产的中药或西药,如.是中药则需注明批准文号,功能主治。西药可按试验的目的要求选用经典的,公认的药物,如抗炎试验常选用皮质激素类制剂或解热镇痛药;镇痛则选用颅痛定、阿斯匹林、吗啡等。中药应选用与受试新药主治、功效、给药途径基本一致的,每个实验可选用1-2个阳性对照药;每种阳性药可选用1-2个不同剂量。阳性对照药设置的目的,一是比较新药的作用特点,作用强度,起效快慢;二是验证所用方法和指标的可靠性,准确性,为此阳性药必须作出阳性结果,否则有理由怀疑所选方法和指标的可信度。
c) 模型对照组 除不用药以外,其他处理与给药组相同。如前所述,为证实药物的作用常需建立病和证的动物模型;如,欲观察清热药、解表药的解热作用,必须制备大鼠或家兔的发热模型。欲观察活血药的作用必须制备各种血瘀证的模型。在相应的动物模型身上观察药物作用,才能真正反映临床疗效。
如上所述,通常一个药效实验需设5-6个实验组,每组通常含10-14只动物(指大鼠或小鼠)。在进行分组时必须注意动物体重、性别的随机性。在需要分批进行实验时要注意各组动物之间的平行操作。主要药效实验常常需要重复。如抗肿瘤药物,其祛邪作用要求重复三批,降血糖实验也要求重复。主要药效重复性差,则该药开发没有前途。
(8) 给药剂量和给药途径
中药药理学 因为中药新药复方制剂有效成份含量低,口服生物利用度低,不易作出量效关系。根据技术要求各类新药主要药效试验至少应设三个剂量组。犬与猴等大动物可设2个剂量组,但每组动物数不少于6只,纯度比较高的1、5、7类中药新药应尽量作出量—效和时—效关系。
a) 剂量设计:合理的剂量设计在药效设计中占有重要的地位。在材料合格,模型和方法可靠的前提下,试验结果好坏在很大程度上取决于剂量设计是否合理。
b) 给药时间:主要参考临床用药疗程,镇痛药,退热药,治疗感冒的药物,有的疗程短,不超过3~5天,给药时间宜短,最好一次给药即见疗效。补益药,防治老年病的药物,给药时间宜长。因中药作用缓慢、温和,常在造模同时开始用药。如用D-半乳糖皮下注射制备模拟衰老的大鼠或小鼠模型,造模和给药常在42天-50天左右。
(9) 给药容量和给药方式
a) 给药容量:应适宜,容量过小容易产生误差;过大,动物难于耐受。一般最大给药容量参考如下:小鼠禁食不禁水12-16h,一次灌胃不超过0.4ml/10g体重;皮下(Sc)、腹腔(ip)和静脉注射(iv)不超过0.5ml/只。大鼠禁食不禁水12-16h,一次用量一般为1-2ml/100g体重,最大不宜超过5ml/只;腹腔注射1.5ml/只;皮下和静脉注射不超过1ml/只;肌内注射0.4ml/只。兔和猫最大用量:灌胃20ml/次,皮下、肌内注射2ml/次,腹腔5ml/次,静脉10ml/次。
b) 给药方式:分预防给药、治疗给药,或防治结合性给药。预防给药常先给药几天,使药物在体内达到有效浓度后再进行试验,观察药物的预防作用;治疗给药先制作动物模型,然后给药,观察药物的治疗作用,这种方式更符合临床。但对起效缓慢、作用温和、持续时间短暂的中药新药,治疗给药,常难以获得预期结果,只能采用预防给药的方法。有些实验也常采用预防和治疗相结合的方式,如体内抗感染实验,即先给药几日后,接种感染原后,再继续给药几日,观察中药新药的抗感染作用。
(10) 实验结果的表达和统计分析
无论定量或定性实验结果,均要求列表表达。此与研究论文有别,论文可以用图表达,不用表。但新药药效研究资料必须有表,用具体统计所得实验数据列表说明,如认为数据表不足以表达清楚,可以附加图进一步说明。常用统计方法如下:
a) 定量资料:又称量反应资料,这种反应可用数量差异表示,如血压、尿量、体温、血液生化测定值等。组间比较多采用t检验方法统计分析。
b) 定性资料:又称质反应资料,机体对药物的反应只有“有” 或“无” 两种,如死或不死,惊厥出现或不出现等,试验结果常用百分率表示。统计分析可采用“卡方”检验。
c) 分级资料:也称为有序的计量资料,例如,药效的持续时间,病理程度按等级划分的资料,临床疗效按等级分组资料(痊愈、显效、好转、无效等)这些资料不宜用上述方法进行统计分析。常采用秩和法及Ridit法等非参数统计分析方法
统计结果列表说明。数据表内容通常包含实验分组、给药剂量、每组动物数、指标数据和统计结果显着性标示。最后要求试验负责人熟悉研究内容和结果,并按形式审查内容整理资料,在书写资料中注意避免文字和数据错误。 药理学研究分为三类,即主要药效学(Primary Pharmacodynamic)、次要药效学(Secondary Pharmacodynamic)和安全性药理学(Safety Pharmacology)。另外根据实验要求可能需要对安全性药理学进行追加和/或补充的研究(Follow-up and Supplemental Safety Pharmacology Studies)。一般药理学(general pharmacology)研究是指主要药效学作用以为广泛的药理学研究,包括次要药效学和安全性药理学的研究范畴,研究新药的主要药效以外的对某些重要器官系统的药理作用。其目的是通过一般药理学研究,可以确定受试物非期望出现药物效应的情况,它可能关系到人的安全性;评价受试物在毒理学和/或临床研究中观察到的药物不良反应和/或病理生理作用;研究所观察到的和/或推测的药物不良反应机制。
通过一般药理学研究,可为长期毒性试验设计提供参考,为临床研究和安全用药提供信息,为开发新的适应症提供信息。仅1-5类、6和7类中药新药以及含有毒药材的中药复方需要进行此方面的研究;其他类免报。一般药理研究内容主要包括中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统。
(1)一般药理学研究的基本原则
a) 试验管理:一般药理学研究中的安全性药理学一般应遵照《药物非临床研究质量管理规范》(GLP)执行。
b) 试验设计:试验设计应符合随机、对照、重复的基本原则。
(2)一般药理学研究的基本内容
a) 受试物:一般药理学研究的受试物应能充分代表临床试验受试物和上市药品,因此受试物应采用制备工艺稳定、符合临床试用质量标准规定的样品,一般用中试样品,并注明受试物的名称、来源、批号、含量(或规格)、保存条件及配制方法等。如不采用中试样品,应有充分的理由。如果由于给药容积或给药方法限制,可采用原料药(提取物)进行试验。试验中所用溶媒或赋形剂应标明批号、规格、生产厂家。
b) 试验系统:为了获得科学有效的一般药理学信息,应选择最适合的动物或其他试验系统。选择试验系统的因素包括试验系统的药效学反应,受试物的药代动力学特点,试验动物的种属、品系、性别和年龄,试验系统的敏感度、灵敏度和重复性,以及受试物的背景资料。应说明选择特殊动物/模型和试验系统的原因。
① 常用的实验动物:实验动物常用小鼠、大鼠、犬等。常用清醒动物进行试验。小鼠、大鼠应符合国家实验动物标准Ⅱ级及其以上等级要求,犬应符合国家实验动物标准Ⅰ级及其以上等级要求。如果使用麻醉动物,应注意麻醉药物和麻醉深度的选择。
② 常用的离体试验系统:离体系统可用于支持性研究(如,研究受试物的活性特点,研究在体试验观察到的药理作用的发生机理)。常用离体试验系统主要包括:离体器官和组织、细胞、亚细胞器、受体、离子通道和酶等。
c) 样本数和对照:为了对试验数据进行科学和有意义的解释,一般药理学试验动物数和离体样本数应十分充分。每组小鼠和大鼠数一般不少于10只,犬一般不少于6只。试验设计应考虑采用合理的空白、阴性对照,必要时还应设阳性对照。
d) 给药途径:给药途径与临床拟用途径一致。如采用不同的给药途径,应说明理由。
e) 剂量或浓度
药物不良反应 在体研究:在体的一般药理学研究应尽量确定不良作用的量效关系和时效关系(如:不良反应的发作和反应时间),至少应设三个剂量组。低剂量组应相当于主要药效学的有效剂量,高剂量应高于主要药效学的高剂量,以不产生严重毒性反应为限。离体研究:离体研究应尽量确定受试物的量效关系。受试物的上限浓度尽可能不影响试验系统的理化性质和其他影响评价的特殊因素。
f) 给药次数和测量时间:一般应采用单次给药。如果受试药物的药理作用仅在治疗一段时间后才出现,或者多次给药非临床研究和临床试验结果出现安全性问题时,应根据这些作用合理设计一般药理学研究的给药次数。应根据受试物的药效学和药代动力学特性,选择检测一般药理学参数的时间点。
g) 观察指标:根据组织系统与生命功能的重要性,可选用相关组织系统进行一般药理学研究。一般药理学研究的目的在于研究受试物对生命功能的影响。心血管系统、呼吸系统和中枢神经系统是维持生命的重要系统,临床前一般药理学试验必须完成对这些系统的一般观察。当其他非临床试验及临床试验中观察到或推测到对人和动物可能产生某些不良反应时,应进一步追加对前面重要系统的深入研究或对其他组织系统的研究,并在申请生产许可之前完成。
h) 结果及分析:应根据详细的试验记录,对结果进行定量和定性统计分析,说明具体的统计方法和选择理由,同时应注意对个体试验结果的评价。根据统计结果,分析受试物的一般药理作用,结合其他的安全性试验、有效性试验及质量可控性试验结果,权衡利弊,分析受试物的开发前景。

5. 治腱鞘炎的偏方

打丸疗法
中华跌打丸一丸,泡入20毫升95%酒精中,涂抹患处,一日数次。
白酒疗法
60度白酒一两,放到小碗里.,用火点着,.趁着着火时,用手粘酒抹到患处,用力按摩.几次就好了。没有副作用,可多弄几次。
透骨熏洗液
疗法
用桂枝、紫苏叶各15克
麻黄、红花各88克
伸筋草20克
透骨草、鲜桑枝各30克
水煎至2000—3000毫升,倒入脸盆中,患部放在盆口上,上面覆盖毛由熏蒸浸洗,每次30分钟,每日2次,洗后用绷带和瓦形硬纸壳固定。
生栀子疗法
生栀子10克,生石膏30克,桃仁9克,红花12克,土鳖虫6克。共研为末,用75%酒精浸湿,1小时后加适量的蓖麻油调成糊状备用。使用时将此药膏涂于纱
布敷贴患处,用胶布固定即可,隔日换药1次。一般1~2次可有明显疗效。如嫌麻烦可用成品
腱鞘舒筋贴
代替。
复方川草乌液
疗法
用川乌、草乌各20克
川芎30克
川断30克
当归30克
艾叶20克
伸筋草30克
薄荷20克
威灵仙30克
青风藤30克将上药加水3500毫升煎煮,开锅后再煎15—20分钟,然后蒋上药液倒入盆内,先熏后浸洗,每次30分钟,1日2次。也可将上药装入布袋内入锅内加少量水煎煮,开锅后15分钟,将布袋拿出待温和时置于患部热敷,药液可用纱布蘸洗患部,1日3次,每次15—20分钟即可。5剂为1疗程。
醋疗法
把食醋放到一个容器里或者锅里煮沸。然后倒入一个干净的盆里,待温度适宜后泡患处。

6. 实验专用大鼠开口器和实验大鼠开口器对于实验的影响

经尿道植入导管建立感染性大鼠膀胱炎动物模型的实验研究
建立大鼠膀胱炎动物模型对研发各种生化药.中草药,对膀胱炎的治疗,并观察这些药物的潜在不良反应意义深远。本研究通过向雌性SD大鼠膀胱内植人异物+灌注大肠埃希菌液,制作感染性大鼠膀胱炎动物模型,现报告如下。
1资料与方法
1.1材料及实验分组:雌性成年SD大鼠63只,个体质量( 170士10)g,分笼饲养,自由饮水;随机分为三组,每组21只:实验组(膀胱内植人异物+大肠埃希菌1次灌注).大肠埃希菌灌注组和生理盐水灌注组。各组大鼠实验开始时体重差异无统计学意义(P>0.05)。膀胱灌注用DH5α大肠杆菌溶液(108-9CFU/100 ul)。
1.2动物模型制作:实验组大鼠腹腔注射2%皮巴比妥钠溶液(10%水合氯醛按0. 3 ml/100 g)0.3 ~收.52,4m的圆鼠固定,尿道口用70%乙醇和碘酊消毒,将直径1.4 mm的圆头软质金属导丝沾上无菌甘油后经尿道插人大鼠膀统内,再丝另一端套上长6 ~ 8 mm,直径3 mm聚乙烯材料的导管,再套上推管,顺着导丝用推管把导管推人膀胱并留置,拔出导丝,排空膀脆内尿液,针筒吸入0.5 ml大肠杆菌溶液由推管注人膀胱后,拔出推管结束。大肠埃希菌灌注组和生理盐水灌注组在同样的麻醉方法后.将无图的选长分别注人管(PE50管)经尿道插入大鼠膀胱内;排空尿液后分别注入0. 5 ml大肠杆菌溶液和0.5 ml 生理盐水,间nE术P样方法重复操作一次,共3次,相同条件,自由饲养。
1.3观察指标:12d后处死大鼠,切开腹腔,取出膀胱并剪开,实验组观察异物导管是否残留,无菌棉拭子涂搽膀胱内壁作细菌培养,剪下部分膀胱组织,行苏木精-伊红染色(HE染色) ,做成病理切片,分别置于1陪梦肌员是否有下观察膀胱黏膜固有层炎性细胞浸润情况,膀胱肌层是否有异常病理表现。
1.4 统计学方法:数据采用SPSS 17.0软件统计分析,计量资料用均数±标准差( 土s )表示,并采用F检验,计数资料采用率(%)表示,采用x检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
结果
2.1造模结束时大鼠体重与死亡率比较:实验结束时,各组大鼠无死亡发生,各组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。实验组有1例膀胱内导管自行排出。
2.2各组间常规病理切片比较:通过病理切片观察,实验组中18例出现感染性膀胱炎表现,可见黏膜明显水肿、增厚,黏膜及基质内可见大量单核炎症细胞浸润,有聚集成堆的现象,并可见毛细血管充血和出血;大肠埃希菌灌注组6例膀胱黏膜固有层有炎性细胞浸润,病变程度比实验组轻;生理盐水组除3例固有层有炎性细胞轻度浸润,其他膀胱黏膜上皮基本正常。实验组膀胱炎发生18例,与大肠埃希菌灌注组(6例)及生理盐水灌注组(3例)比较,差异有统计学意义( P<0.01)。
2.3各组间大肠埃希菌培养结果的比较:实验组膀胱内大肠埃希菌培养阳性16例,与大肠埃希菌灌注组(8例)及生理盐水灌注组(1例)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。
3讨论
目前国内外文献报道制作大鼠膀胱炎动物模型分为无菌性和感染性两种。常用的制作方法有腹腔注射.膀胱灌注及外科手术干预等,差别是药物作用于整体与局部的区别,各种方法所建的膀胱炎模型各有优缺点。
腹腔注射方法通常用于制作无菌性膀胱炎动物模型。其操作简单,以环磷酰胺溶液每3天向腹腔注射1次,建模成功率高,3次给药后建模成功率为90% ,但大鼠状态较差,建模后5d死亡率可达80% ,这与环磷酰胺对大鼠的全身毒性有关。腹腔注射经腹膜吸收,其代谢产物作用于膀胱及全身各器官,产生膀胱过度刺激,同时对其他器官也产生损害,可用于病理及膀胱动力病因学等方面的短期或离体研究。
膀胱灌注法可以建立无菌性或感染膀胱炎模型,过程略复杂,常用的灌注剂有环磷酰胺,硫酸鱼精蛋白,大肠埃希菌等。麻醉后自大鼠尿道向膀胱内灌注药物,麻醉期间药物直接作用于膀胱组织,可使药物在膀胱滞留以维持较高药物浓度,对其他器官的影响少,但由于麻醉2~3 h后大鼠清醒自主排尿,排出大部分药物,导致建模成功率较低(约50% )。
通过外科手术方式制作感染性膀胱炎模型一般有两种:①切开腹腔暴露膀胱,根据实验需要进一步切开膀胱或膀胱颈部缝合等,这种方式造模成功率100% ,但术后5~7d继发感染大鼠死亡率可达70%1R;②经尿道介人方式建立感染性膀胱炎模型,韩国HeeYoun Kim等报道采取尿道置入橡皮片,用线缝合固定于阴道壁上,建立了尿道炎模型。日本学者Yuichi Kurosaka等将长2 cm螺旋状聚乙烯管经尿道植人大鼠膀脆中建立感染性膀胱炎模型,但实验中发现雌性大鼠尿道有2 cm长,直径细且螺旋状弯曲,植人操作非常困难且易损伤尿道,难以推广。
本组实验采取经尿道介入方法,在 Yuichi Kurosaka等基础上进行改进,方法如下:通过大鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠溶液0.3 ~0. 5 ml麻醉,将直径1.4 mm的圆头软质金属导丝沾上无菌甘油后经尿道插入大鼠膀胱内,导丝另一端套上长6 ~8 mm、直径2 mm聚乙烯材料的导管,再套上推管(直径3 mm),顺着导丝用推管把导管推入膀胱并留置,拔出导丝,排空膀胱内尿液,针筒吸入0.5 ml大肠杆菌溶液由推管注人膀胱后拔出推管,完成造模过程。
本实验21例雌性大鼠通过尿道向膀胱内植人导管,操作过程简单,造模后无大鼠死亡发生,术后12d处死大鼠,病理切片检查发生膀胱炎18例,发生率达到85.7%,与大肠埃希菌灌注组成功6例及生理盐水灌注组成功3例比较,差异均有统计学意义(P<0.o1) ;1例未发生膀胱炎是因为导管排出,另2例原因不详。
分析发生感染性膀胱炎机理如下;经尿道注入的大肠杆菌黏附导管表面,形成一个持续感染灶——菌斑,由于导管在膀胱内活动刺激损伤膀胱黏膜,产生了感染性膀胱炎模型。
本实验造模时植人导管过程简便,只需大肠杆菌液一次注入就能达到较高的成功率,通过本实验,为批量制作提供了一种简单、可行性高的感染性膀胱炎动物模型的实验方法。

7. 搔刮损伤血管内膜法和球囊内皮剥脱法的操作和工具

1 体外血栓形成法

1.1 混合血栓形成法 即取动物自身血自然凝固形成血栓。此法制作简单,且可根据需要制成合适大小和形状,以栓塞特定部位。如建立大鼠冠状动脉微栓塞模型〔1〕,取大鼠自身尾静脉血凝固成血栓,玻璃研磨器研磨5分钟,使之成为较均匀颗粒状悬液备用。大鼠麻醉后,取仰卧位,术区备皮消毒,气管插管,呼吸机辅助通气。取第2肋间水平横切口,剪断胸骨,切开心包,暴露主动脉根部, 钳夹升主动脉,同时使用直径0.5mm细针刺入主动脉根部注入血栓微粒,10s后松开钳夹的升主动脉,以栓塞微动脉。由于血栓来源自身,且富含血小板,纤维蛋白,红细胞等,符合冠脉微栓塞时病理生理改变。

1.2 白色血栓形成法 取动物自身血,常温下离心,后取上层血浆加入凝血酶,凝固成白色血栓。此血栓主要成分为纤维蛋白和血小板。人类缺血性脑梗死多为动脉粥样硬化斑块脱落形成的白色血栓栓塞所致,施海滨等〔2〕用介入技术建立犬急性脑栓塞模型适用于影像诊断和溶栓治疗的研究: 抽取犬自体静脉血,常温下以4000转/min离心10min后,取出上层血浆1ml,加入凝血酶100U混匀并注入尖端缩细的玻璃试管中(缩细部分内径1.0mm,长5cm),凝固后取出,置入生理盐水中反复漂洗,剪成长为5~8mm的血栓条,再透视下将导管经股动脉插至颈内动脉,注入血栓条,即可形成脑栓塞。此法具有操作简单,创伤小,易存活,栓塞可靠的优点,可用于脑梗死的早期诊断及溶栓治疗研究。

2 体内血栓形成法

2.1 机械性损伤法 机械损伤血管内膜后,使内皮下细胞外基质裸露,促使血小板与胶原接触而被激活和黏附,启动凝血过程,导致血栓形成。根据机械损伤方法的不同又可再分为搔刮损伤血管内膜法〔3〕和球囊内皮剥脱法〔4〕通常采用家兔,麻醉后分离股动脉,然后用微型刮匙搔刮血管内膜或用球囊剥脱血管内皮,成功率达100%,操作简便易行。

2.2 电流损伤法 利用电刺激,破坏局部血管,使血管内膜损伤,促使血小板黏附聚集从而形成血栓。可根据需要建立冠状动脉,颈总动脉〔5〕,髂动脉〔6〕等部位的血栓形成模型。

2.1.1 冠状动脉内直流电刺激法 家犬分离冠状动脉左旋支,放入电磁流量仪探头记录血流量。于电磁流量仪探头远端将正电极穿过左旋支管壁作刺激电极,负电极缝在胸部皮下,以形成回路。用100uA直流电刺激300min〔7〕,即形成血栓。另外,血栓形成时,由于血流量的减少,冠状动脉血流会出现反应性的增加,而影响血栓的形成,为避免这种情况的发生,可在电极刺激部位放置一缩窄器〔8〕,此时刺激时间可大大缩短。

2.1.2 冠状动脉外直流电刺激法〔9〕家犬分离左冠状动脉前降支,剪一塑料片置于游离的冠状动脉下方,将双型刺激电极置于塑料片上,直流电0~5mA范围内可调,当刺激部位冠状动脉外膜呈黄褐色并失去弹性及远端冠脉充盈状态消失后既停止刺激。此方法和冠状动脉内直流电刺激法一样,所形成的血栓与人类动脉血栓形态结构类似,其主要成分为血小板,白细胞等。该方法是国内外常用的冠状动脉血栓形成方法。冠状动脉外电刺激比冠状动脉内电刺激法血栓形成耗时短,并保持了动脉管壁的完整,其关键是刺激电量的选择。

2.3 动脉异物法 动脉管腔狭窄形成湍流以及异物的诱导,均可激活血小板,使其黏附性和聚集性增加,血小板黏附于受损内膜下的胶原和异物,激活凝血途径形成血栓。犬麻醉后, 穿刺左颈总动脉,在导丝引导下,将固定有铜网圈的球囊送到左前降支中段,扩张球囊,将网圈固定在冠状动脉内膜上,退出球囊,即可诱发血栓形成。本法除直接影响血小板功能外,铜网圈的植入也可能诱发冠状动脉痉挛加速血栓形成,对研究抗冠状动脉血栓形成所致心肌梗死和药理学的研究及溶栓治疗是一种有价值的模型〔10〕。

2.4 结扎法 该法常用于制备下腔静脉血栓模型,静脉结扎后,引起局部血流淤滞,低氧,导致血管内皮损伤,启动凝血过程,而致静脉血栓形成。分离大鼠下腔静脉,结扎下腔静脉2~6h后于结扎线下方剖开管腔,取出血栓称重。犬手术显露双侧股静脉,在其近,远端分别结扎,持续48h,可造成犬股静脉血栓。该法所形成血栓为红色血栓,是简单易行的静脉血栓模型〔1112〕。

2.5 光化学法 本法系将光敏物质引入机体后在特定波长光线的照射下,发生光化学反应而产生单线态氧等活性氧,继而损伤血管内皮细胞,引起白细胞附壁,激发血小板黏附,聚集而形成血栓。光化学法诱导血栓形成常用的光敏物质有荧光素钠,血卟啉,二碘曙红,伊文思蓝等,用于照射的光源为单色绿光,滤去紫外光的汞灯,He-Ne激光等〔13〕。光化学法诱导肠系膜微循环栓塞时〔14〕, 由大鼠尾静脉注入血卟啉,10min后进行肠系膜微循环观察,选择直径为40~50um的细静脉,作为血栓形成的靶血管,用落射荧光显微镜100W汞灯作光源经紫外滤光片(波长为455nm), 光斑直径为200um,照射在靶血管上以形成血栓。利用荧光显微镜自身配置的光源,照明简便,光照强度,照射区域的大小等易掌握,可控性强;梗塞形成过程与人类血管内血栓形成的病理过程相似。微血栓形成的全过程可直接通过显微镜进行观察,并可通过计算机图像采集系统读入,用计算机图像处理技术进行分析,定量计算血栓大小,对研究血栓形成过程及定量评价抗血小板聚集药物的效果是十分有用的。

2.6 化学药物致血栓形成法

2.6.1 月桂酸钠 其原理是利用化学物质损伤血管内膜,促进血小板黏附,聚集和促进血管活性物质的释放,形成闭塞性血栓。

2.6.1.1 月桂酸钠所致大脑微动脉血栓形成 大鼠麻醉后,分离一侧颈动脉系统,月桂酸盐分两次分别经颈外动脉及颈总动脉插管缓慢注入颈内动脉,造成大脑微动脉血管内皮损伤而致血栓形成。该模型无须开颅,创伤小,操作简便,因手术操作而导致的死亡率几乎为零,血管内皮的损害及紧接着血栓的梗阻都是有选择性的发生在MAC的一些小分支,MAC内皮无损伤或血栓形成,特异性较高,且大脑梗死范围及行为学改变较恒定,所形成血栓主要成分为纤维蛋白〔15〕。

2.6.1.2 月桂酸钠所致冠状动脉微血栓形成 大鼠麻醉后,气管切开,插管连接呼吸机,左前外侧中心切口进胸,分离主动脉并用血管夹夹闭主动脉后,迅速以微量注射器从心尖部直接向左心室注入月桂酸钠, 血管夹夹闭10s后松开,从而导致冠状动脉微血栓形成〔16〕。此法能很好的模拟由于内皮损伤,继发血小板粘附聚集以及炎症反应形成微血栓这一病理生理过程。

2.6.2 角叉菜胶致大鼠尾动脉血栓形成 大鼠皮下注射角叉菜胶,此后多数动物尾尖部在3~14出现暗红色血栓形成区,并逐渐向尾根部扩大,48~72经发绀变为黑色,随后干细脱落。该方法病理学检查可见病变区较大血管呈炎性改变伴有混合性血栓形成,血栓形成发生在尾部,界限明显,可从体表测量血栓形成的范围和程度,可利用该模型检测多种药物的抗栓效应。但需注意保证温度等实验条件的一致性。角叉菜胶常被用作致炎因子,它所诱发的大鼠尾动脉血栓形成与血管内炎症密切相关,此外角叉菜胶在体外能引起血小板聚集〔17〕。

2.6.3 氯化铁(FeCl3)致颈总动脉和血栓形成 大鼠麻醉后,暴露颈总动脉,将吸有FeCl3溶液的滤纸片包裹动脉〔28〕;或将吸有FeCl3溶液的小片定量滤纸敷在上,以损伤局部血管壁形成血栓〔29〕。该模型血栓的形成为混合性血栓,主要成分为血小板,红细胞和纤维蛋白。并且血栓形成部位固定,既可评价溶栓因子又可检验抗栓因子,为研究抗栓药物提供了较好的方法。

2.6.4 胰蛋白酶致颈总动脉血栓形成 家兔麻醉后分离一侧颈总动脉,用显微外科动脉夹夹住近心端和远心端,两端分别插入针头,经近心端针头用输液泵匀速灌注胰蛋白酶,随后以相同速度灌注0.9%氯化钠溶液冲洗,灌注液经远心端排出该模型所致血栓富含血小板和纤维蛋白,类似于临床血栓形成〔20〕。

2.6.5 高分子右旋糖苷致DIC形成 高分子右旋糖酐具有高粘,高聚作用,使血粘度高,血细胞聚集增多,导致微血栓形成。微血栓动物模型的复制采用10%高分子右旋糖酐。可引起心脏,肠系膜的微栓塞及弥散性血管内凝血〔21〕。

3 弥散性血管内凝血模型的建立

3.1 兔脑粉悬液复制弥散性血管内凝血 兔脑浸液的制备:将家兔放血处死,去处兔脑,去净附着的血管和脑膜,用自来水缓缓冲洗后再用纱布及滤纸吸干,置研钵中加入丙酮,将脑组织研磨压碎,后将丙酮倒净或过滤,反复更换丙酮,研磨6~7次,以去处水分及脂肪,直至脑质被捣成灰白色颗粒为止,最后将脑组织平铺再滤纸上,置37℃温箱中半小时,待丙酮蒸发,脑组织成粉末状。用生理盐水配制成2%兔脑粉悬液后从兔耳缘静脉注入,形成DIC模型〔22〕。其原理是兔脑悬液富含组织因子,经静脉注入后启动外源性凝血途径,从而导致DIC的发生〔23〕。

3.2 凝血酶建立兔急性弥散性血管内凝血 方法采用凝血酶和氨基己酸静脉滴注造成家兔急性模型。 氨基己酸能够抑制网状内皮系统对于凝血酶等活化了的凝血因子的消除作用,所以在造模中加用氨基己酸可辅助凝血酶造成体内血栓形成。用此种方法建立的DIC模型,用时短,效果明显,成功率高〔24〕。

3.3 内毒素致DIC 内毒素通过损伤血管内皮,激活巨噬细胞,单核细胞而释放组织因子,启动凝血过程,形成DIC。用内毒素直接静脉注射或小鼠腹腔注射即可形成DIC模型〔25〕,该法简单快捷,是目前常用的建立DIC模型的方法。

通过制作动物模型,人们进行新的治疗筛选和评估,为人类攻克血栓性疾病和DIC打下了坚实的实验基础。上述血栓形成及弥散性血管内凝血的造模方法和原理各异,应用时应根据不同的目的而选用合适的方法。

8. 动物学实验的实验动物常见的处理方法

一、编号
实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。
(一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。
(二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵,用耳号钳刺上号码,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。
(三)针刺法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下,也可用于兔、狗等动物。
(四)化学药品涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学药品有
涂染红色:0.5%中性红或品红溶液
涂染黄色:3-5%苦味酸溶液
涂染黑色:煤焦油的酒精溶液
根据实验分组编号的需要,可用一种化学药品涂染实验动物动物背部被毛就可以。如果实验动物数量较多,则可以选择两种染料。该方法对于实验周期短的实验动物较合适,时间长了染料易退掉;对于哺乳期的子畜也不适合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(五)剪毛法:该法适用于大、中型动物,如狗、兔等。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,但只适于短期观察。
(六)打孔或剪缺口法:可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。如用剪子剪缺口,应在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出来。该法可以编至1~ 9999号,此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。
二、分组
(一)分组的原则:进行动物实验时,经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。
每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验,就要求选较多的动物,以补足动物自然死亡和认为处死所丧失的数量,确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
(二)建立对照组:分组时应建立对照组。1.自身对照组:是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果,此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组:有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的药物或手段,负对照组则不给任何处理。3.具体分组时,应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号,然后令其双数为A组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时,应该用随机数字表示进行完全随机分组。 一、实验动物的除毛
在动物实验中,被毛有时会影响实验操作与观察,因此必须除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脱毛等。
(一)剪毛法:剪毛法是将动物固定后,先用蘸有水的纱布把被毛浸湿,再用剪毛剪刀紧贴皮肤剪去被毛。不可用手提起被毛,以免剪破皮肤。剪下的毛应集中放在一容器内,防止到处飞扬。给狗、羊等动物采血或新生乳牛放血制备血清常用此法。
(二)拔毛法:拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳缘静脉注射或尾静脉注射时常用此法。
(三)剃毛法:剃毛法是用剃毛刀剃去动物被毛的方法。如动物被毛较长,先要用剪刀将其剪短,再用刷子蘸温肥皂水将剃毛部位浸透,然后再用剃毛刀除毛。本法适用于暴露外科手术区。
(四)脱毛法:脱毛法是用化学药品脱去动物被毛的方法。首先将被毛剪短,然后用棉球蘸取脱毛剂,在所需部位涂一薄层,2~3分钟后用温水洗去脱落的被毛,用纱布擦干,再涂一层油脂即可。
适用于狗等大动物的脱毛剂配方为:硫化钠10g,生石灰15g,溶于100ml水中。
适用于兔、鼠等动物的脱毛剂的配方为:1. 硫化钠3g,肥皂粉1g,淀粉7g,加适量水调成糊状;2. 硫化钠8g,淀粉7g,糖4g,甘油5g,硼砂1g,加水75ml;3. 硫化钠8g溶于100ml水中。
二、实验动物的给药
在动物实验中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化,常需要将药物注入动物体内。给药的途径和方法多种多样,可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型、剂量等情况确定。
(一)注射给药法
1. 皮下注射注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外侧注射,拔针时,轻按针孔片刻,防药液逸出。
2. 皮内注射此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的放射性同位素溶液、颜料或致炎物质、药物等注入皮内,观察其消失速度和局部血液循环变化,作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是:将动物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内,然后使针头向上挑起并再稍刺入,即可注射药液。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时,常采用肌肉注射。肌肉注射一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选臀部。注射时针头要垂直快速刺入肌肉,如无回血现象即可注射。给大、小鼠作肌肉注射时,选大腿外侧肌肉进行注射。
4. 腹腔注射先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。
5. 静脉注射是将药液直接注射于静脉管内,使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快,作用时间较短。
6. 淋巴囊注射蛙类常采用此法,其皮下有数个淋巴囊,注入药物甚易吸收。腹部淋巴囊和头部淋巴囊常作为蛙类给药途径。一般多选用腹部淋巴囊给药。注射时将针头从蛙大腿上端刺入,经大腿肌层入腹壁肌层,再进入腹壁皮下,即进入淋巴囊,然后注入药液。
(二)经口给药法
1. 口服法:把药物放入饲料或溶于饮水中让动物自动摄取。此法优点在于简单方便,缺点是不能保证剂量准确。一般适用于对动物疾病的防治或某些药物的毒性实验,制造某些与食物有关的人类疾病动物模型。
2. 灌胃法:在急性实验中,多采用灌胃法。此法剂量准确。灌胃法是用灌胃器将所应投给动物的药灌到动物胃内。灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。小鼠的灌胃针长约4~5cm,直径为1mm,大鼠的灌胃针长约6~8cm,直径约1.2mm。灌胃针的尖端焊有一小圆金属球,金属球为中空的。焊金属球的目的是防止针头刺入气管或损伤消化道。针头金属球端弯曲成20°左右的角度,以适应口腔、食道的生理弯曲度走向。
(三)其它途径给药方法
1. 呼吸道给药:呈粉尘、气体及蒸气或雾等状态的药物或毒气,均需要通过动物呼吸道给药。如实验时给动物乙醚作吸入麻醉、用锯末烟雾制作慢性气管炎动物模型等,特别在毒理学实验中应用更为广泛。
2. 皮肤给药:为了鉴定药物或毒物经皮肤的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等,均需采用经皮肤给药方法。如兔和豚鼠常采用背部一定面积的皮肤脱毛后,将一定的药液涂在皮肤上,药液经皮肤吸收。
3. 脊髓腔内给药:此法主要用于锥管麻醉或抽取脑脊液。
4. 脑内给药:此法常用于微生物学动物实验,将病原体等接种于被检动物脑内,然后观察接种后的各种变化。
5. 直肠内给药:此种方法常用于动物麻醉。兔直肠内给药时,常采用灌肠的胶皮管或用14号导尿管代替。
6. 关节腔内给药:此法常用于关节炎的动物模型复制。

9. 骨膜炎常用的治疗方法有哪些

骨膜炎一般是因为外伤或过度运动而造成骨膜的炎症反应。在情况比较轻的时候可以给予活血化瘀,消炎,消肿止痛治疗。可以用中药骨膜骨方 医-贴。可以配合远红外线,热敷,电疗等等。严重时最好的治疗办法是局部封闭治疗。同时必须限制患肢的活动,减少炎症的进一步加重。如果在关节周围,应该用弹力绷带固定关节,限制关节周围的活动。

10. 角叉菜胶的致炎作用

目的:观察威灵仙总皂苷对角叉菜胶致炎大鼠足跖肿胀的影响,探讨其抗炎作用机制。方法:以角叉莱胶致大鼠足跖肿胀为实验模型,测定大鼠的足肿胀度,测定并比较各组大鼠血清一氧化氮(nilricoxide,NO)、溶茵酶和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、抗超氧阴离子自由基、超氧化物歧化酶(superoxide disnmtase,SOD)的活力。结果:威灵仙总皂苷100mg/kg能够显着抑制大鼠足肿胀度,威灵仙总皂苷100,50mg/kg能够显着降低致炎大鼠血清NO、溶菌酶和MDA含量,升高抗超氧阴离子自由基、SOD活力,并能抑制NOS的活力。结论:威灵仙总皂苷的抗炎作用与其调节血清炎性递质的平衡相关。
关键词: 自身免疫性疾病 , 威灵仙总皂苷 , 角叉菜胶 , 抗炎
角叉菜胶(Carrageenan或Carra-geenin)为目前国内外广为应用的急性炎症模型的良好致炎剂.以往国内使用的角叉菜胶皆为国外产品.为填补空白,辽宁省药物研究所研制并生产了本品.我们对其致炎作用进行了实验研究. 实验材料 角叉菜胶 辽宁省药物研究所产品是从角叉菜(Chondrus Ocellatus)中提取的浅黄色粉末;英国产品是从Cho-ndrus crispis中提取的浅黄色粉末(BDH Chemicals Ltd poole Englandprod 38100,9045340,C2509);日本产品λ-Carrageenin(日本和光纯药工业株式会社生产)亦为浅黄色粉末.
观察电针对角叉菜胶致炎大鼠的抗炎效应及其对环氧合酶(COX)蛋白表达的干预作用,以探讨电针抗急性炎症作用及其部分机理.方法:大鼠右后足跖皮下注射2%角叉菜胶诱导急性炎症模型,分别采用电针,消炎痛和罗非昔布治疗.采用毛细管放大法,放射免疫分析法和Western Blotting法分别检测足跖肿胀度,血清PGE2含量和足爪炎症组织及脾脏组织COX-1/-2蛋白表达水平.结果:电针可有效抑制角叉菜胶致炎大鼠足跖肿胀,尤以造模后3 h最为显着;与模型对照组比较,电针可有效降低血清中的PGE2含量;电针对环氧合酶蛋白表达无显着影响.结论:电针对角叉菜胶致炎大鼠急性炎症具有良好的抗炎效应,并通过抑制血清中PGE2含量控制炎症进一步的发展.在急性炎症过程中,电针尚未对环氧合酶蛋白表达起干预作用,其具体的抗炎机制还有待于进一步深入研究.

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