细胞计数板使用方法

A. 血球计数板的使用方法

（1）构造：血球计数板是一块特制的载玻片，它的上表面有4条下凹的槽，构成3个平台，中间的平台又被一短横槽隔为两半，每半边各有一个方格网，每个方格网上有9个大小相等的大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用，这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3。

（2）规格：

一种是大方格内分为25中方格，每一中格又分为16小方格；另一种是大方格内分为16中方格，每一中方格又分为25小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图：

（3）使用方法

①取清洁干燥的血球计数板，加盖玻片盖住网格和两边的槽。

②将待测菌液充分摇匀后，用无菌吸管吸少许，由盖玻片边缘或槽内加入计数板，使其自行渗入计数室内，计数室内不能有气泡。静置5-10分钟。

③在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。即数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。

④计数时，若使用刻度为25中方格×16小方格的计数板，计数四个角的4个中方格，及中央1个中方格的菌数（即80小方格）；若使用刻度为16中方格×25小方格的计数板，就数四个角的4个中方格（即100小方格）内的菌数。每小方格中菌数以5-10个为宜，如菌液过浓可适当稀释。

⑤每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。

刻度为25中方格×16小方格的计数板：

刻度为16中方格×25小方格的计数板：

⑥试验结束后要清洗和整理试验用具，特别注意血球计数板不能用试管刷蘸洗涤剂擦洗，正确的做法是浸泡和冲洗，洗后自行晾干或用吹风机吹干。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。

B. 细胞计数板的计数方法，有4×4小格的4个大格

每个大格桉顺序依次计数，记左不计右，记上不记下。再4个大格的数相加除以四最后乘以每个大格的体积

C. 血球计数板使用条件是什么

血球计数板使用条件的话是在一定条件下，比如说空腹啊或者是其他的环境。

D. 血球计数板的使用方法

使用方法如下：

1.视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。

2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。

3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。

4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。

5．计数时若计数区是由16个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100小格）的菌数。如果是25个中方格组成的计数区，除数上述四个中方格外，还需数中央1个中方格的。

菌数（即80个小格）。为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。即位于本格上线和左线上的细胞计入本格，本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。见右图：即本格中计数细胞为3个。

6．对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品重复计数2-3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），按公式计算出每mL（g）菌悬液所含细胞数量。

7．测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。

(4)细胞计数板使用方法扩展阅读:

计数公式

红细胞数(RBCs)/L=N/5×25×10×106×200

N为：五个中方格的RBC总数

N/5为：5个中方格（粉红色区域）的平均RBC数量（然后推及至中央大方格中每一个中方格RBC的数量）

N/5×25为：中央大方格RBC总数（即：0.1mm3（ul）的RBC总数）

N/5×25×10为：1mm3（ul）RBC总数

N/5×25×10×106为：1L的RBC总数

200为：血液的稀释倍数

公式简化后：红细胞数/L=N×5×107×稀释倍数

公式前面部分都是换算成每微升血多少该计数细胞；最后都是由微升换算到升，乘以10的6次方

(1)目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微尺格数

(2)以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度.

(3)如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数.若更换物镜,目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定.

参考资料:血球计数板-网络

E. 高中血球计数板怎么用 简洁些

计数板上的待测菌悬液中的细胞稳定后，按对角线方位，数左上，坐下，右上，右下，四个大方格的菌数

F. 细胞计数板

盖玻片上的计数板（池）网格总面积：3 mm x 3 mm 或 9 sq mm，总面积分成9个大方格，每个为1 mm x 1 mm，四个角区的大方格被划分成16个小方格（每个方格为1/16 sq mm）。中央大方格被划分成100个小方格（每个为0.1 mm X 0.1mm），用于红细胞、血小板和精子计数；

G. 用细胞计数板怎么控制细胞计数在一定范围呢

计数板本来就是用于计数细胞的，并不是用于控制细胞数量的。
如果你希望让液体中的细胞含量在某个范围，可以通过计数板计数细胞含量，然后根据计算出的细胞量大致算一下需要稀释多少，然后加生理盐水或实验需要的溶液进行稀释就可以了。当然因为计数板计数结果存在比较大的不确定性，最好逐渐尝试稀释。

H. 细胞计数板怎么数细胞

实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：
1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：
细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104
说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：
1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）

I. 用血细胞计数板计数的方法叫什么

用血细胞计数板计数的方法叫直接计数法。
解析：1.细菌数量的统计方法一般包括：直接计数法和间接计数法。
2.直接计数法：利用特定的细菌计数板或者血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量。一般用血细胞计数板对酵母菌进行计数。
3.间接计数法：一般是指稀释涂布平板法。