❶ 如何正确使用移液器
第一步:移液器枪头的安装调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。装配枪头(吸液嘴)的在将枪头套上移液枪时,正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。移液的方法移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。移液器的正确放置使用完毕,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧
❸ 移液器使用规范
1、安装枪头
在将枪头(pipette tips)套上移弯孙液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是埋岁链将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
2、量程设定
操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10~100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35~100%量程范围内操作。
量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。
3、润洗
粘稠液体可以通过吸头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出, 吸头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打 出液体的体积会很精确。
用雀伍同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。
4、吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°
5、吸头浸入深度
6、吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
7、吸液速度
匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
8、排液及吹液
先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。
排液四种方式:
9、手温
移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
移液枪使用诀窍
1、影响移液枪精度因素
(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差; (2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差;
(3)吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头;
(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差;
解决办法:反复抽吸4~5次就可改善。
2、使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气;
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为,吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差;
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定;
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g;
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器;
(6)移液器未装吸头时,切莫移液;
(7)在设置量程时,请注意,旋转到所需量程,数字清楚显示在窗中,所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则,会卡住机械装置,损坏移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
移液器的自行检测
移液器在使用过程中,如果怀疑其精确度,可根据以下提示自行检测:
怀疑一:移液器是否有漏气?
1、自行检测:目视法检测:将吸取液体后的移液器垂直静置15秒,观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出,说明有漏气现象。压力泵检测:使用专用的压力泵,检测压力情况,判断是否漏气。
2、 可能的原因:
(1)吸头是否匹配?—— 使用原装匹配的吸头
(2)装配吸头时有无上紧?
(3)移液器内部气密性不好?
怀疑二:液体、移液器、吸头以及环境的温度差异是否会影响移液器的准确度?
移取液体的温度与吸头和移液器的温度不一致的情况下,液体温度高于吸头的,移取的液体体积会偏大,液体温度低于吸头的,移取的液体体积会偏小。
怀疑三:液体样品的密度和水是否有非常明显的区别?
大部分移液器出厂前的校准是用水作为标准液进行测试的,如果所操作的液体与水的比重有很大差异,所给出的不精确度和不准确度就不能满足,从而产生误差。
怀疑四:吸液速度太快,是否会导致移液体积不准确?
吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确。
ps:移液器长时间不用时建议将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,延长移液器的使用寿命。
移液器错误操作及处理方法
错误:吸液时,移液器倾斜吸液;正确:垂直吸液;
分析:倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响;
错误:用大量程的移液器移取小体积的液体;
正确:移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求;
分析:因为空气垫的存在,是造成移液器不准确度的主要原因。移液器的选择应该是最大量程,最接近目的液体转移量的选型原则;
错误:吸液速度和放液速度过快;
正确:慢吸慢放;
分析:快吸对于1mL及以上量程的移液器,很容易造成液体上冲,过快的放液会增加液体的残留量。
❹ 移液枪的正确使用方法和注意事项
移液枪使用方法如下:
1、用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮,使数字窗口出现所需容量体积的数字。在取液器的下端插入塑料吸头,拧紧以确保气密。然后,四指对齐,拿着取液器的上部,用大拇指按住计划杆前端的按钮,向下推到第一个停止点,取出轮此取液器的吸引头插入对象的溶液中,慢慢松开按钮。
2、吸液停留1~2秒(粘性较大的溶液可以延长停留时间),将芯片沿着容器壁从容器中取出,用吸水纸擦拭可能附着在芯片表面的液体,排液时吸头接触知桐唤倾斜的器壁,先将按钮按到第一停点,停留一秒钟。
3、按到第二个停止点吹出尖端的剩余溶液时吸头安装对于单道移液器,移液器末端垂直插入吸头,轻压左右微微转动即可上紧;对于多道移液器,移液器的第一道对准第一个吸头,倾斜插入,前后稍许摇动上紧即可。
使用移液枪的特别注意事项:
在吸取液体的时候一定缓慢并且非常平稳地将拇指松开,千万不可以突然松开,避免溶液吸入过快而冲入到取液器当中造成漏气。当液体的浓度非常大的时候,会产生误差,需要用试验确定补搭凯偿量。
❺ 移液枪的正确使用方法是什么
移液枪的使用量程的调节:
在调节量程时,用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时。
则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
枪头的装配:
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散。
甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
移液的方法:
移液之前,要保证移液枪、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,四指并拢握住移液枪上部,用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,移液枪保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间)。
将吸头沿器壁滑出容器,排液时吸头接触倾斜的器壁。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。最后按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸。
两种移液方法:
1、一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
2、二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。
先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。
❻ 连续可调微量移液枪的使用方法
一、标准操作
适用的液体:水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液。
1)按到第一档,垂直进入液面几毫米。
2)缓慢松开控制按钮,否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸人移液器内部吸人体积减少。
3)打出液体时贴壁并有一定角度,先按到第一档,稍微停顿1s后,待剩余液体聚集后,再按到第二档将剩余液体全部压出。
二、黏稠或易挥发液体的移取
在移取黏稠或易挥发的液体时,很容易导致体积误差较大。为了提高移液准确性,建议采取以下方法:
1)移液前先用液体预湿吸头内部,即反复吸打液体几次使吸头预湿,吸液或排出液体时最好多停留几秒。尤其对于移取体积大的液体(如1000~1),建议将吸头预湿后再移取。
2)采用反相移液法:吸液时按到第二档,慢慢松开控制按钮,打液时按到第二档,部分液体残留在吸头内。
三、常见的错误操作
1)吸液时,移液器本身倾斜,导致移液不准确(应该垂直吸液,慢吸慢放)。
2)装配吸头时,用力过猛,导致吸头难以脱卸(无需用力过猛,选择与移液器匹配的吸头)。
3)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。
4)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。
5)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)。
6)使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器(应该参照正确清洗方法操作)。