① 糖化血红蛋白的检测方法
1、阳离子交换色谱法
原理:糖化导致血红蛋白分子表面阳离子丢失。在弱的阳离子交换剂中,例如Biorex70,伴有增加的离子浓度和(或)pH下降,糖化血红蛋白在非糖化血红蛋白前先洗脱。这现象产生了糖化血红蛋白最初的术语“快速血红蛋白”。阳离子交换色谱法可用于小型、微型或大型柱层析方法或部分或全自动的PHLC/FPLC方法。因为,其他翻译后修饰血红蛋白,例如醛亚胺型、甲酰化、乙酰化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和异常血红蛋白电荷交换也不同于正常的HbA0,所以已经列出了许多阳离子交换层析法的干扰因素。使用常规HPLC的方法。分离糖化血红蛋白亚组分是能达到满足需求的临床精密度。然而,已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血红蛋白部分。少数糖化血红蛋白也整合到HbA0主峰中。通过使用特殊的柱原料(poly-CATA)和30~40 min分离时间可以改善分离效果。这些方法可以作为参考步骤但不适合常规使用。所有的阳离子交换色谱法对pH和温度的变化敏感,因此要控制pH和温度。
说明:根据红细胞代谢动力学推测初始HbA1c值大约每日破坏1/120(≈0.83%)。因为糖化在合适的治疗下甚至健康人也产生,故这个理论值在体外不能达到。控制不理想的糖尿病患者通过加强治疗而达到血糖量正常,可以发现HbA1c值最大下降率以大约每10 d下降正常血糖的1%(绝对的)。由于测定糖化血红蛋白方法的精确性,两次测定值HbA1c的差异大约1%就可认为具有临床相关性。因为这些原因,在HbA1c两次测定间至少有2周的时间,推荐4~6周的间隔。
因为升高的糖化血红蛋白值是长期高糖血症的糖尿病患者相当可靠的指示剂,因而是可能诊断糖尿病的。在未治疗的个体,正常的糖化血红蛋白值临床上可以排除明显的糖尿病。但由于它不能检测糖耐量受损,所以作为诊断和(或)筛选目的唯一的参数,使用糖化血红蛋白是存在问题的。
2、电泳法
原理:相比于非糖化血红蛋白,因糖化而变化的总电荷和糖化血红蛋白的等电点变化是琼脂糖凝胶或者pH梯度5.0~6.5的凝胶等电聚焦电泳分离的基础。琼脂糖凝胶电泳的血红蛋白亚组分分辨率很小,而等电聚焦可以更好地使亚组分分离。可能由于试验的自动化程度不足,重要性已经下降。
3、亲和层析法
原理:硼酸结合顺式-羟基。商品化的m-氨基苯硼酸琼脂糖共价结合的亲和柱已可用于微柱分析检测。将血样本中的血红蛋白加到层析柱后,所有的糖化血红蛋白(HbA1和旁链糖化的血红蛋白;总糖化血红蛋白)与硼酸结合而非糖化血红蛋白通过层析柱可被测量。在加入高浓度也包含顺式-羟基的多羟基复合物,例如山梨醇后,糖化血红蛋白与硼酸的结合被替换而从柱子上洗脱下来。亲和层析法对经翻译以后修饰的血红蛋白和病理血红蛋白的影响相对不敏感。利用亲和层析法,仅能测定总糖化血红蛋白。广泛使用的亲和层析方法,允许用经验算法从总糖化血红蛋白值计算出“标准的HbA1c”。
4、免疫分析法
在缬氨酸β-N-末端糖化的血红蛋白提供了一个容易被抗体识别的抗原表位。可以用单克隆抗体或多克隆抗体进行放射免疫分析和免疫酶学分析测定,抗体特异识别β链N-末端糖化的血红蛋白最后4~8个氨基酸组成的抗原表位。异常的血红蛋白或翻译后经修饰的血红蛋白无干扰。
目前的免疫化学试验不仅检测HbA1c,通常也同时检测HbA2c,因为血红蛋白A2糖化δ链的表位是相同的。抗体直接抗β-链的最后四个氨基酸的糖化表位的免疫化学试验也可用进行检测,例如HbS1c。在大多数情况下HbA2c意义不大,虽然镰刀细胞病时可以准确地测定缬氨酸β-N-氨基末端糖化程度,但它仍不能100%代表HbA1c。
5、离子层析法
离子层析法精密度高、重复性好且操作简单, 被临床广泛采用。检测原理由于血红蛋白β-链N 末端缬氨酸糖化后所带电荷不同, 在偏酸溶液中总糖化血红蛋白( GH b) 及H bA 均具有阳离子的特性, 因此经过阳离子交换层析柱时可被偏酸的缓冲液平衡过的树脂来吸附, 但二者吸附率不同, GH b正电荷较少吸附率较低, H bA 正电荷较多吸附率较高。用不同pH 的磷酸盐缓冲液可以分次洗脱出GH b 和H bA, 用KCN 可将H b转化为高铁氰化血红蛋白, 用分光光度计测定。或者得到相应的H b层析谱, 其横坐标是时间, 纵坐标是百分比。HbA1c值以百分率来表示。现在大部分都用全自动测定仪测定。
6、等电点聚集法
是测定GH b的新技术, 它是在聚丙烯酞凝胶中加人载体两性介质的薄板上形成一个由阳极到阴极逐渐增加的pH 梯度, 溶血液中各个组份将移动到各自的等电点的pH 位置上, 这样就得到比一般电泳法更好的分划效果和比较集中的色带, 通过分辨率高的微量光密度仪扫描, 可以准确地测定出各自组份的含量。由于它能够分辨出一级结构不同的HbA、HbAc、HbF、HbS 及HbC等, 可完全避开各种物质的干扰。
7、化学发光法
采用离子捕捉免疫分析法, 应用抗原抗体反应原理, 联以荧光标记物, 通过连接带负电的多阴离子复合物, 吸附到带正电的纤维表面, 经过一系列彻底清洗等步骤后, 测定荧光强度变化率, 计算浓度。采用专用试剂包和免疫发光分析仪,其检测系统易于规范和重复, 可减少操作技术误差, 检测的灵敏度和特异性高, 批内、批间变异系数小, 回收率高, 准确度高, 交叉污染率小, 影响因素少。
8、酶法
原理为用特殊蛋白酶分解Hb, 3~ 5 min内果糖基氨基酸从H b分离, 果糖基氨基酸氧化酶( FAOD )从果糖基氨基酸产生H2O2, H2O2经POD与DA- 64反应, 选择751 nm 测吸光度改变求得GHb浓度。
② 诊断糖尿病的新指标,是糖化血红蛋白大于多少
要回答这个问题,我们先来了解一下什么是糖化血红蛋白。糖化血红蛋白是红细胞中的血红蛋白与血糖结合产生的,一旦结合就不能共享。由于红细胞的寿命为120天,糖化血红蛋白可以反映近三年血糖的平均水平。
综上所述,糖化血红蛋白水平可以用来判断疾病控制的质量和并发症的风险,也是调整用药的重要依据,但它不能反映瞬时血糖水平的波动,也不能确定是否发生了低血糖。因此,在国内不建议使用糖化血红蛋白(HbA1c)诊断糖尿病。当然,随着我国糖化血红蛋白检测方法的加速标准化,对糖化血红蛋白的研究进一步深入,也许有一天糖化血红蛋白可以作为糖尿病的诊断标准。
③ 糖化血红蛋白是否可以在一天任何时间内化验
血红蛋白a1c可以在一天中的任何时候检查,不需要禁食。由于红细胞在血液循环中的寿命约为120天,hba1c反映了病人在过去8-12周内的平均血糖水平。Hba1c受检测方法、贫血和异常血红蛋白疾病、红细胞转换率、年龄等诸多因素影响,不能反映瞬时血糖水平和血糖波动,也不能判断是否发生低血糖。
检验所使用的Bio-Rad VARIANT ⅱ系列Hba1C检测系统是根据国际临床化学联盟(IFCC)的参考方法进行校正,经美国NATIONAL HBA1C标准化计划(NGSP)认证,并可追溯到美国糖尿病控制和并发症的临床试验。其特点是快速、简单、精致、准确。今年该实验室还参加了上海多家参考实验室的室间比对。其检测结果准确、稳定,为临床医生的诊断和治疗提供了可靠的数据。
④ 拜安时的快速检测HbA1c的优势
HbA1c,即糖化血红蛋白,是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。血糖与血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应,并与血糖浓度成正比。糖化血红蛋白可以稳定可靠地反映出检测前120天内的平均血糖水平。
糖化血红蛋白是评价长期血糖控制的“金标准”。DCCT、UKPDS等国际大规模临床试验结果表明,HbA1c与糖尿病并发症的发生风险之间存在密切联系。国际糖尿病联合会(IDF)、美国糖尿病协会(ADA)和中国医学会糖尿病学分会(CDS)等国内外权威学术机构均推荐糖尿病患者应定期检测糖化血红蛋白。
目前应用于临床实践中的HbA1c检测为实验室检查方法,患者往往需要2-3天才能获得检测结果,医生无法即时根据HbA1c检测结果对治疗方案进行调整,影响了患者就诊的效果。
快速检测HbA1c,即时获得HbA1c结果的优势:
对于医生:快速而有效的HbA1c 水平使医生和患者能够及时就病情进行探讨,对患者进行HbA1c控制及达标教育,并增强了患者及保健医生之间的合作关系;
对于患者:即时的、面对面的关于HbA1c结果的咨询可以帮助患者将医嘱坚持到底,增强了患者对其疾病的管理能力;
此外,快速检测的临床收益得到证实。一项回顾性分析显示,当场将HbA1c结果告知患者可以使其未来的HbA1c水平下降1%,而HbA1c 每降低1%,眼、肾及神经病变的发生风险会有明显下降:
·微血管并发症如肾脏疾病和失明发生率下降37%
·截肢或致命性周围血管病变发生率下降43%
·糖尿病相关死亡发生率下降21%
·心肌梗死发生率下降14%
·中风发生率下降12%
⑤ 临床常用测血糖的方法有哪些
实时血糖情况可以采空腹血清2ml,测葡萄糖(GLU)。如果要评估过去2-3个月的平均血糖水平,或用于糖尿病诊断和疗效观察,可以检测糖化血红蛋白(HbA1C),要使用EDTA抗凝管采血2ml。
市面上卖的床头的血糖仪也可以测血糖。
⑥ 糖化血红蛋白是什么
糖化血红蛋白是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。血糖和血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应,并与血糖浓度成正比,且保持120天左右,所以可以观测到120天之前的血糖浓度。糖化血红蛋白的英文代号为HbA1c。糖化血红蛋白测试通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情况。
血糖测定可以评估收集血样时糖尿病患者的碳水化合物代谢情况。相反的,糖化血红蛋白和果糖胺可以回顾性地评价血糖,很大程度上它们不依赖于病人的生理节奏模式、饮食及其他短暂性的葡萄糖浓度波动,而综合了几天或几周过程内这种波动。
葡萄糖及其他单糖和蛋白质的自由氨基反应,取决于它们的浓度。另一方面,就蛋白质而言,各氨基的Pk和邻近的多肽结构是反应的关键限速步骤。这种不可逆的、非酶催化的反应称为糖基化。除血浆蛋白的半衰期和浓度不同以及有时体内波动相对大之外,糖化血红蛋白作为一个长期的参数评定血糖浓度特别适合。血红蛋白的半衰期定义为红细胞存活时间,相对恒定在100~120 d。除血红蛋白半衰期的影响外,糖化程度基本取决于血糖升高的程度以及持续时间。糖化是不可逆的,并且降解血红蛋白糖化位点的酶系也未知。
总的糖化血清蛋白的检测分析,因葡萄糖-蛋白复合物中的酮胺结构,又称果糖胺。测定单一糖化蛋白(主要白蛋白),这些试剂已经商品化。由于存在许多分析和解释的问题,果糖胺的测定通常不用来监测糖尿病。因此该试验不在这里详细讨论。在一些病例中,糖化血红蛋白的测定并不可靠或价值有限,果糖胺的测定短时间内可作为长期血糖监测的一种替代方法。
糖化血红蛋白(GHb)是血液葡萄糖通过非酶作用,经细胞膜与红细胞内血红蛋白-链颉氨酸结合形成的产物,其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比。糖化血红蛋白的形成是不可逆的,其浓度与红细胞寿命(平均120天)和该时期内血糖的平均浓度有关,不受每天血浆葡萄糖浓度大小波动而变化,也不受运动或食物的影响,因此糖化血红蛋白是反映过去6~8周的平均血糖浓度,这可为评估血糖的控制情况提供可靠的实验室指标。
1993年美国1型糖尿病控制及并发症试验(Diabetes Control and Complication Trial, DCCT)和英国大规模的2型糖尿病控制与并发症关系研究(UKPDS)的研究中把GHb作为糖尿病控制的一个观察指标。1996年4月起在日本GHb被纳入老年人保健法中糖尿病筛选的检查项目。2002年美国糖尿病协会(ADA)已将其作为监测糖尿病血糖控制的金标准,对其应用也做出了明确的规定:即所有糖尿病患者均应常规测定糖化血红蛋白。糖化血红蛋白测定的重要性已在糖尿病治疗领域达到共识。国外有研究显示HbAlc与糖尿病并发心脑血管疾病有密切联系,在预测心脑血管并发症方面具有广泛的价值。
⑦ 目前糖尿病的常规筛检方法有
在进行糖尿病测试前,应禁食至少8-12h。如果结果显示低于100 mg/dl(5.6 mmol/L),则表示血糖正常。如果结果范围为100-125 mg/dl(5.6-6.9 mmol/L),则表示处于糖尿病前期,而结果超过126 mg/dl(7 mmol/L)时,则表明患有糖尿病。
A1C测试
这是确定糖尿病的最佳方法之一。糖化血红蛋白测试(即HbA1C测试)可在不需要禁食的情况下进行,并且可以反应两到三个月前的血糖水平。
如果结果低于5.7%,表示无糖尿病。如果结果为5.7%-6.4%之间,则指示前驱糖尿病,而若结果≥6.5%,则有糖尿病的指标。
OGTT(口服葡萄糖耐量试验)
OGTT测试是一项为期两小时的测试,包括空腹血糖水平检查和75g 2h葡萄糖耐量试验。
当两小时血糖≥200mg/dl,可诊断为糖尿病。当测试结果为140-199mg/dl时,属于前驱糖尿病,而当结果<140mg/dl时,血糖正常。
⑧ 十万火急 麻烦哪位高人解释下糖化血红蛋白酶法检测中THb试剂和GHb试剂。万谢
饭前餐后监测血糖未必精确 糖化血红蛋白才是“金标准”
饭前或餐后监测血糖,未必精确,因此,临床上有70%的Ⅱ型糖尿病人血糖未达标,导致心脏病、失明、肾病、截肢等并发症上升。内分泌专家提出,应使用国际“金标准”——糖化血红蛋白,每3至6个月检查一次来长期监测血糖,防止慢性并发症尤其是心脑血管并发症的产生。
糖化血红蛋白是“金标准”
上海市第六人民医院副院长、内分泌科主任、上海市糖尿病研究所常务副所长贾伟平告诉记者,很多患者认为监控了餐后或空腹血糖就足够了,但是空腹和餐后血糖的测定,只反映患者的某一具体时间血糖水平,并且容易受饮食、心情和糖代谢等各种因素影响,对血糖波动大的Ⅰ型糖尿病和注射胰岛素的Ⅱ型糖尿病患者来说,仅根据用餐前后的血糖状况来制定合理治疗方案,存在相当大的困难。
国际糖尿病联盟推出了新版的亚太糖尿病防治指南,明确规定糖化血红蛋白是国际公认的糖尿病监控“金标准”,必须控制在6.5%以下,患者应该每3至6个月到医院检测一次糖化血红蛋白。贾伟平表示,糖化血红蛋白是血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物,指标越高说明糖尿病病情越重。糖化血红蛋白的比例,能反应测定前1至2个月的平均血糖水平,因而检查糖化血红蛋白是了解糖尿病长期控制情况的重要依据。
仅30%患者长期监控
在临床中,只有30%左右的患者能做到定期监控糖化血红蛋白。专家表示,良好的血糖控制是预防并发症的关键,而血糖监控在很大程度上取决于患者本人的认知和行动。
由于大部分患者选择可靠性不高的日常监测手段,目前超过60%的Ⅱ型糖尿病患者的糖化血红蛋白含量超过标准。糖化血红蛋白的增高对人体的影响是多方面的,它会改变红细胞对氧的亲和力,加速心脑血管并发症的形成;如果眼睛内的晶体被糖化,则会引发白内障;此外,它可引起肾小球基底膜增厚,诱发糖尿病肾病,并引起血脂和血黏度增高,糖化血红蛋白升高,是心肌梗死、脑卒中死亡的一个高危因素。在男性患者中,糖化血红蛋白每增加1%,死亡率的相对危险率增加24%,女性患者增加28%。一旦糖化血红蛋白超过7%,发生心脑血管疾病的危险性就增加50%以上。
双监测可减少并发症
如果在发现糖化血红蛋白太高时,就及时治疗,可大大减少发生中风、心脏疾病、肾衰竭、失明以及截肢手术的风险。平均每下降1个百分点的糖化血红蛋白,就会使糖尿病的死亡率下降21%,心肌梗塞和心脏病的危险性下降14%,糖尿病微血管症的危险性下降37%。为此,专家提醒,糖化血红蛋白应每3至6个月检查一次,糖尿病病人最好控制在6.5%以下,一旦超过7%,发生并发症的危险性就会增大。
在临床治疗时,如能同时测定血糖与糖化血红蛋白,可以更好地全面判断病情,及时调整治疗方案。当空腹血糖超过患者糖化血红蛋白对应的预测值时,则显示近期血糖控制不好,可能与采血时紧张、劳累、晚餐进食过多、治疗不当、急性并发症等有关,需要调整治疗方案。相反,如果空腹血糖低于对应的预测值,甚至达到正常标准,则显示近期血糖控制良好,治疗对症。
水果中含有大量的维生素、纤维素和矿物质,这些对糖尿病人是有益的。只不过吃水果要有一定的科学讲究。不能不吃,也不能多吃、乱吃。
首先,糖尿病患者应在血糖控制达标的情况下适量食用水果。即糖化血红蛋白<6.5%、空腹血糖<7mmol/L、餐后血糖<10mmol/L,满足这几个条件,糖尿病患者是完全可以适量食用一些水果的。
刘国良介绍,目前糖尿病患者常用的血糖监测指标有空腹血糖和餐后血糖。由于这两种测试方法只能反映瞬时血糖水平变化,需长期反复监测才能综合反映患者的血糖水平,耐受性差,存在局限性。长期依赖这样的血糖检测方法,不利于患者正确了解治疗效果和真实的血糖水平,影响治疗的有效性。
刘教授表示,糖化血红蛋白被称为是评估血糖控制的金标准,与传统血糖检测手段相比,糖化血红蛋白能够反映患者在较长一段时间里的血糖控制水平,具有更准确的临床意义。糖化血红蛋白测定与常规自我血糖监测的有机结合,有助于指导糖尿病患者和医师制定合理的治疗方案,从而使血糖得到较好的控制,最终减少糖尿病并发症发生的危险性。
另外,在选择水果的时候应注意选择含糖量少的水果。比如草莓、猕猴桃、苹果等都可以吃,而香瓜、香蕉、葡萄等含糖量较高,则是糖尿病患者的大忌。每次吃水果的时候可以参照一个苹果大小的量来食用,比如草莓,每次食用2-3两即可,不要贪多。吃完水果后,糖尿病患者应在下一餐中适量减少一点主食,以保证饮食平衡
糖化血红蛋白检测的方法
糖化血红蛋白(HbA1c)检测的方法很多,测定方法主要有四类:色谱法、电泳法、免疫法和化学法。色谱法主要有离子交换层析法、高效液相色谱法(HPLC)和亲和层析法等。
由于糖化血红蛋白的测定方法众多,还缺乏标准化参考方法,国际上正建立这类参考方法。目前最常用的HbA1c测定方法是离子交换层析法和电泳法。前者精密度高、重复性好且操作简单,已被临床广泛采用。国内主要采用Bio-Rex70阳离子树脂微柱层析法,其微柱可重复使用多次。正常参考值:HbA1c:X±2s=6.5±1.5%;>8.0%为HbA1c增高。
离子交换层析法,分手工和仪器两种。手工微柱有Bio-Rad和西班牙BIOSYSYEMS等多家公司产品,手工微柱操作会受到人工因素影响,可能会洗脱不完全或过度洗脱,并受外界环境温度的影响,而某些血红蛋白如HbF异常增加时,也会与糖化血红蛋白同时洗脱,从而使结果产生偏差。相应的仪器以英国DREW SCIENTIFIC公司DS5糖化血红蛋白仪为例(BIO-RAD公司DIASTA亦为同一产品),采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱技术可全自动分离血红蛋白的变异体与亚型,除可测定糖化血红蛋白外,还可同时检测出HbS与HbC的存在与否,在计算糖化血红蛋白值时会自动扣除变异体产生的影响,从而使结果更为准确,可靠,CV值小于2%。同时该仪器配有专门的稀释溶血器,可直接进行全血操作,5分钟即可报告结果,并自动储存样品检测结果,层析柱价格也较为低廉,适合于较多标本的医院检测。更大型的仪器有DREW SCIENTIFIC公司的Hb-Gold,除可全自动测定糖化血红蛋白外,还可分离检测血红蛋白的600多种变异体和亚型,用于地中海贫血等疾病的诊断。
亲和层析是目前糖化血红蛋白检测的新方法,该方法特异性强,不受异常血红蛋白的干扰。英国DREW SCIENTIFIC公司的DSI糖化血红蛋白分析仪日前刚刚获得美国食品药品管理署(FDA)的认可获准上市,作为目前世界唯一的快速床边糖化血红蛋白仪,它采用硼酸亲和层析法,只需10ul全血即可在4分钟内快速分离检测糖化血红蛋白,为临床提供即时的化验结果,从而使医生在患者就诊的第一时间明确诊断并制定相应的治疗方案,特别适合于临床科室使用,尤其对于小儿患者而言更有优势。其检测结果也完全达到并超过临床要求,CV值在5%以内。
高压液相方法的仪器有Bio-Rad公司的VariantⅡ等,可全自动分离测定糖化血红蛋白及血红蛋白的变异体和亚型,但仪器的操作保养要求较高。
免疫凝集法的原理是糖化血红蛋白与相应的单抗结合进而发生凝集反应,通过测定吸光度来表示凝集量,可用于全自动生化分析仪上进行测定。专用的仪器也有Bayer的DCA-2000,要求对样品成批试验,每次试验均应使用一个新试剂盒,操作前应注意混匀试剂。需要指出的是免疫凝集法测定糖化血红蛋白,精密度较差,CV值一般大于6%。
离子捕获法亦是新近发展起来的新方法,代表仪器有Abbott的IMX,其原理是糖化血红蛋白与相应抗体结合后,联以荧光标记物,形成一反应复合物,再联结带负电荷的多聚阴离子复合物,而在IMX反应孔中的玻璃纤维预先包被了高分子的四胺合物,使纤维表面带正电,使前述的反应复合物吸附在纤维表面,经过一系列清洗后测定其荧光强度,从而得到糖化血红蛋白的浓度,该方法适用于成批糖化血红蛋白标本的检测。
电泳方法如毛细管电泳也能分离检测糖化血红蛋白和血红蛋白的变异体,但目前尚无商品化,具有批量样本通过能力的仪器面世,相当程度地限制了该方法的临床应用。
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⑨ 糖化血红蛋白正常值,你认为是多少
血液中的葡萄糖和血红蛋白可以不可逆地结合。糖化血红蛋白是指与葡萄糖连接的血红蛋白的一部分。当血糖浓度较高时,糖化血红蛋白的含量也会相对较高。人类红细胞的寿命通常为三个月。此时血糖水平下对血糖的反应是即时的,并且与乙醇酸血红蛋白有一定的相关性。血红蛋白糖基化的测量结果取决于血糖水平。几十年来,许多研究表明,糖基化血红蛋白与平均血糖、空腹血糖和餐后血糖具有良好的相关性。
随着对糖尿病知识的逐渐了解,大多数TEM患者意识到空腹和餐后2H血糖监测的重要性,并经常将您的测量值作为血糖控制的标准。因此,糖尿病患者每天密切关注“空腹血糖”和“餐后血糖”的变化。糖尿病患者知道他们不仅应该监测血糖水平,还应该定期监测血糖。许多人不明白为什么他们应该关注糖基化血红蛋白。首先,糖基化血红蛋白和血糖之间没有相应的数值关系,但糖基化血红蛋白的水平可能反映了血液中最近的血糖控制水平。
⑩ 糖化血红蛋白色谱法和金标法哪个准
糖化血红蛋白指的是血糖和血红蛋白直接的结合程度,如果糖化血红蛋白数值越高,就代表病情越重。该指标能精确反映糖化血红蛋白在一段时间内糖尿病患者的血糖控制情况。那么如何对该指标进行测定呢?目前检验科常用的主要有以下几种方法。
1、高效液相离子层析法。这是目前被公认的金标法。该方法具有精密度高、操作简单、重复性好的特点,在临床上使用频率最高,而且准确度高。
2、微柱法离子交换层析法。这也是目前广泛使用的另一种方法。在计算血液中的糖化血红蛋白数值时,可以自动扣除血红蛋白变异体对数值产生的影响,使得检测结果更见准确、可信。而且该项技术检测速度比较快,适合检验标本量较多的大型综合性医院。
根据上述讲解内容,如何测定糖化血红蛋白?小编已经为你介绍几种糖化血红蛋白的测定方法。糖化血红蛋白是反映糖尿病患者最近一段时间内血糖的变化情况,是临床上重要的检测指标。该指标的检测方法比较多,但各存在一定的缺点。目前临床上使用最多的该指标的检测方法为高效液相离子层析法和微柱法离子交换层析法。
目前临床实验室中应用的糖化血红蛋白检测方法主要有两大类: 一类方法基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带的电荷不同, 如离子层析法、电泳等方法; 另一类方法基于血红蛋白上糖化基团的结构特点, 如亲和层析、离子捕获法和免疫法等。其中高效液相离子层析法(HPLC )被公认为金标法。
1. 离子层析法 离子层析法精密度高、重复性好且操作简单, 被临床广泛采用。检测原理由于血红蛋白β 链N 末端缬氨酸糖化后所带电荷不同, 在偏酸溶液中总糖化血红蛋白( GH b) 及H bA 均具有阳离子的特性, 因此经过阳离子交换层析柱时可被偏酸的缓冲液平衡过的树脂来吸附, 但二者吸附率不同, GH b正电荷较少吸附率较低, HbA 正电荷较多吸附率较高。用不同pH 的磷酸盐缓冲液可以分次洗脱出GH b 和H bA, 用KCN 可将H b转化为高铁氰化血红蛋白, 用分光光度计测定。或者得到相应的H b层析谱, 其横坐标是时间, 纵坐标是百分比。HbA1c值以百分率来表示。现在大部分都用全自动测定仪测定,如日本TOSOH 公司生产的全自动糖化血红蛋白分析仪曾应用于美国糖尿病控制和并发证试验( DCCT) 研究, 其离子交换H PLC法是H bA1c检测的金标准。当前推出的HLC- 723G7从开机到报告第一个结果仅需3. 6 m in, 标本无需前处理, 操作维护都非常方便, 是目前测试GH b精密度、准确性最高的方法。国内主要采用Bio- Rex70阳离子树脂微柱层析法, 其微柱可重复使用多次,更大型的仪器有SCIENTIFIC公司的Hb- Gold, 除可全自动测定糖化血红蛋白外, 还可分离检测血红蛋白的600多种变异体和亚型, 用于地中海贫血等疾病的诊断。但其缺点是价格昂贵, 仅在一些发达国家使用, 且容易受到如下干扰: 胎儿血红蛋白(H B -F)与HbA1 c的带电性很相近, 在离子交换HPLC分析图上可能呈现一个独立的H b- F 峰, 也可能与H bA1c 峰重叠( 视离子交换柱的分辨能力而定)。