口腔黏膜的正确提取方法

① 小孩子如何提取口腔试纸做亲子鉴定多久有效

北美亲子鉴定中心为您讲述提取口腔粘膜DNA方法 1． 用清水漱口，使口腔清洁。 2． 盒内有两管和取样小棍, 1号平底及2号尖底. 取出1号管，立于桌上, 等盖上溶液集中到管底。小心地把盖打开。 3． 取出带齿的DNA收集小棍， 伸入口腔内侧的颊部（位于上下牙齿之间的部位），由后向前不同部位刮六次，再刮另一侧的粘膜取DNA样品。 4． 将有DNA样品的小棍浸入1号管的溶液中，转动数次，将DNA细胞洗到溶液中。 上下转动可使上端残留也收集到管中。 5． 为保证提取足量的DNA样品，建议用清水洗涤小棍后再用以上方法再刮一次收集到1号管中。此时，溶液应呈混浊。把取样小棍弃掉。 6． 取出2号管，小心等盖上、瓶比壁溶液都收集到管中（可轻轻甩动）。将1号管中的溶液全部倒入2号管中，盖上2号管的螺旋盖并拧紧，上下用力摇10次。 7． 将2号管置入样品袋中寄回本公司指定的收集站。 注意：勿将DNA收集小棍浸到2号管中。 如发生此类事件，请用清水反复洗涤口收集小棍后方可再用。

② 一般做亲子鉴定取空腔黏膜需要注意哪些事项

1.准备工具 单头医用棉签、信封或白纸 2.采样步骤 （1）、手持棉签，伸进口腔，从口腔内侧颊粘膜处（腮帮子内侧）反复擦拭20次以上（不时旋转棉棒），取出棉签，放在干净白纸上阴干。 （2）、选择不同的口腔壁以同样的方法采集第二根棉签，每个人至少要提取三根棉签。 （3）、将采集好的样本放入信封或用白纸包好，标记好样本所属人的身份和姓名，注意将不同当事人的样本单独放置，不能相互接触。 3.注意事项 避免用手触及棉签头，采集前请先用清水漱口。上述方法采集的样本，可以在干燥环境下保存2—3个月。 4.方法优点 无痛、便捷 参考资料：http://jiangsu.akbchina.com/news/44.html

③ 口腔粘膜DNA的提取方法

提取口腔粘膜DNA方法

1． 用清水漱口，使口腔清洁。
2． 盒内有两管和取样小棍, 1号平底及2号尖底. 取出1号管，立于桌上, 等盖上溶液集中到管底。小心地把盖打开。
3． 取出带齿的DNA收集小棍，
伸入口腔内侧的颊部（位于上下牙齿之间的部位），由后向前不同部位刮六次，再刮另一侧的粘膜取DNA样品。
4． 将有DNA样品的小棍浸入1号管的溶液中，转动数次，将DNA细胞洗到溶液中。 上下转动可使上端残留也收集到管中。
5．
为保证提取足量的DNA样品，建议用清水洗涤小棍后再用以上方法再刮一次收集到1号管中。此时，溶液应呈混浊。把取样小棍弃掉。
6．
取出2号管，小心等盖上、瓶比壁溶液都收集到管中（可轻轻甩动）。将1号管中的溶液全部倒入2号管中，盖上2号管的螺旋盖并拧紧，上下用力摇10次。
7． 将2号管置入样品袋中寄回本公司指定的收集站。
注意：勿将DNA收集小棍浸到2号管中。 如发生此类事件，请用清水反复洗涤口收集小棍后方可再用。

④ 口腔拭子DNA提取的方法

DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有；硅质材料、阴离子交换树脂等。

提取DNA总的原则:

1.保证核酸一级结构的完整性；

2.核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；

3.其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；

4.其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。

例如 : 用酶法提取

DNA提取分为三个基本步骤，每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。

工具/原料: 研磨棒、研磨仪或者组织破碎仪 , 氯仿：异戊醇（24:1）或者蛋白酶 , RNA酶 , 酒精 , 冰箱

方法/步骤 :

• 使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞，加入去污剂，如sds等，除去膜脂。

• 去除细胞内的蛋白质，包括与DNA结合的组蛋白，通过加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚／氯仿抽提等方法去除。

• 加入RNA酶去除RNA，如实验不严密，可省略此步。

• 沉淀DNA，需在冷乙醇或异丙醇中沉淀，放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。

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总结: DNA提取方法有下面⑦种

一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb

二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

四.异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）

五.表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。

六.加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。

七.碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。

⑤ 刮取口腔黏膜基因检测不成功

是不是刮取的方法不正确呀，可以采用唾液进行检验，只需要2ml,方法如下：(中源-协和基因)

⑥ 一般做亲子鉴定取空腔黏膜需要注意哪些事项

用于亲子鉴定的样本口腔拭子的采集方法：用干净的棉签在口腔内壁上下檫拭旋转，让口腔粘膜细胞充分附着在棉签的棉花上，这种带有口腔粘膜细胞的棉签就是口腔拭子。采集口腔拭子需要注意的事项有：
1、如有吃母乳的小孩，需要在吃完母乳半小时后采集。因母亲乳汁中含有母亲的DNA信息，吃完半小时后采集，是以防采集到母亲的乳汁，使得检测出的DNA信息是两者间的混合DNA信息。
2、采集的时候不能涑口，涑口会稀释口腔黏膜细胞的溶度，使得棉签的棉花头吸附不到用于亲子鉴定足够的DNA量。
3、吸烟者不建议采集口腔拭子，有些吸烟者口腔很干燥，棉签的棉花头部吸附不到足够多的用于亲子鉴定的DNA量。
4、数量上，最好采集五根口腔拭子。一般一根棉签是可以做一次实验，但是根据亲子鉴定的标准：肯定的是需要做两次实验，则需要两根口腔拭子，否定的需要做四次实验，则需要四根口腔拭子。五根口腔拭子一般能满足实验以及重复实验的需要，补充样本的可能性较少。

⑦ 家庭如何使用口腔拭子采集

在吐唾液之前，放松脸颊，轻揉30秒以产生唾液。 唾液DNA样本采集管 采集方法
1，向唾液收集器的椭圆形收集口中轻轻吐入口腔内分泌的唾液，收集唾液时应注意尽量避免出现过多的泡沫。
2，收集唾液直至收集管中的唾液与上层泡沫之间的分层界面达到2ml所示的刻度线。
3，将装有保存液的收集器盖子均匀的扣到椭圆形收集口上，扣下时有轻微的喀塔声，同时保存液均匀的流入收集管，则表明盖子已扣好，否则，需要轻轻的打开收集器的盖子，然后再次均匀的扣上，直至保存液均匀流入收集管。
4，轻轻甩动唾液收集器，使保存液更加完全的流入收集管。
5，确认收集管中液体与上层泡沫之间的分层界面达到4ml所示的刻度线。

⑧ 基因检测唾液采样方法是怎样的

唾液采样检测法，更加方便快捷，容易操作。流程如下：

1、唾液采集前30分钟内不得进食、饮水、吸烟、饮酒或嚼口香糖等，用饮用水漱口。

2、取出采样管，打开漏斗盖，通过漏斗将唾液收集到采样管中，直至采样管上标签所示位置。
3、盖上漏斗盖，让漏斗盖里的保存液充分流到收集管。
4、旋下漏斗，盖上小盖子，上下颠倒摇匀，使唾液与保存液充分混匀。
5、将采样管和填好的资料放回盒子中，寄回基因检测中心。