㈠ 高中生物实验哪些用到差速离心法,哪些用到梯度离心法。
高中生物实验哪些用到差速离心法,哪些用到梯度离心法。?观察线粒体、叶绿体、蛋白质的结构时用到了差速离心法。
利用同位素标记法观察DNA时用到了梯度离心法。
密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的;差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离。
密度梯度离心只用一个离心转速,而差速离心用两个甚至更多的转速。密度梯度离心的物质是密度有一定差异的,而差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。
(1)dna同位素标记用了哪些方法扩展阅读:
使用密度梯度离心法时,注意离心前将样品小心铺放在密度梯度溶液表面,离心形成区带。离心后不同大小、不同形状、有一定沉降系数差异的颗粒在密度梯度液中形成若干条界面清楚的不连续区带。再通过虹吸、穿刺或切割离心管的方法将不同区带中的颗粒分开收集,得到所需的物质。
注意事项:
1、梯度介质应具备足够大的溶解度,以形成所需的密度梯度范围。
2、梯度介质不会与样品中的组分发生反应。
3、梯度介质也不会引起样品中组分的凝集、变性或失活。
4、若离心时间过长由于颗粒的扩散作用,会使区带越来越宽。为此,应适当增大离心力、缩短离心时间,可以减少由于扩散而导致的区带扩宽现象。
㈡ 检测染色体DNA上插入了目的基因的方法
分子杂交技术。但是,可以用同位素标记的核酸探针与染色体dna杂交,将通过检测同位素的放射性,判断探针是否与染色体结合,结合则是插入目的基因。这也用到同位素标记了,但现在也有用荧光物质标记的探针,所以在两种技术选一的情况下,是分子杂交技术。
真纠结啊,那就信书吧。其实检测方法很多,不只课本那一种。
具体步骤:用同位素标记的目的基因的单链做探针与可能插入目的基因的染色体dna杂交(也是单链),洗去未结合的探针,结合的不被洗去。再通过同位素的放射性,如果存在杂交,将在显影的胶片上将呈现痕迹,则是插入目的基因了;如果没有杂交,探针都被洗去,胶片不出现特定痕迹,那么就可以判断目的基因未插入染色体。
㈢ 有几种核酸标记的方法
通过核酸标记技术可将细胞因子cDNA作为基因探钊检测细胞内细胞因子 基因组 DNA或mRNA。主要有以下几种方法:
1.应用同位素(或非同位素)标记的cDNA探针,检测经Northern blot后细胞因子mRNA水平或采用打点杂交法。
2.应用标记cDNA探钊与细胞或组织切片进行原位杂交,然后进行放射自显影。
3.细胞因子mRNA经反转录为cDNA,用特异性细胞因子引物经聚合酶链反应(PCR)扩增细胞因子cDNA,Southern blot后用标记探针检测特异细胞因子DNA水平。