免疫水针检测igg的方法有哪些

1. IGE测定是什么

病情分析:IGE测定即系免疫球蛋白测定,正常人的的血清当中仅含有少量的IGE球蛋白,当超过一定数量是,可以引起超敏反应,表现为各种各样的皮肤病,如慢性湿疹意见建议:IGE测定是皮肤科常用的实验室诊断项目,可以指导临床用药.建议遵循医生建议,做个IGE测定生活护理:慢性皮肤病,如湿疹之类的~一定要戒口,鱼蟹虾尽量不要吃~还有居住环境,一定要干燥凉爽~ 日常心情保持舒畅~注意休息 最重要的是坚持用药,有规律用药!

2. 体液免疫的检测

临床上一个反复发作的化脓感染，常使医生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原发免疫缺陷发病年龄很小，而继发免疫缺陷病人多在30岁以上。绝大多数免疫缺陷病人多表现为体液和细胞免疫同时受损，所以应全面检查这两方面的功能。遗憾的是，目前应用的检测方法的局限性，其结果常难以得出明确结论。 1．血清免疫球蛋白的测定血清免疫球蛋白（Ig）的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。由于目前还没有发现由IgD和IgE缺陷所致疾病，所以通常检测IgG、IgM、IgA，这三类Ig就可以代表血清Ig的水平（表20-2）。检测发现三类Ig水平均明显低下，就可考虑体液免疫缺陷。但在分析儿童Ig水平时，应注意Ig的水平随年龄而变化。体液免疫功能缺陷首先考虑患者血清Ig水平，如果所有类别Ig水平均降低，即称为一般性联低丙种球蛋白血症。如果免疫球蛋白水平极度低下，或IgG、IgM、IgA，三类Ig总量低于2mg/ml则称为严重低丙种球蛋白血症或无丙种球蛋白血症（agammaglobulinemia）。如果只一种或两种Ig水平降低，则称为异常丙种球蛋白血症（dysgammaglobulinemia）。一般性低丙种球蛋白血症多见于继发性免疫缺陷病。无丙种球蛋白血症常见于原发免疫缺陷病。但是常有约50%IgA缺陷病人无临床症状，伴有反复感染的IgA缺陷病人常同时有IgG的缺陷。常规的定量检测血中Ig的方法是单向免疫扩散和免疫比浊法。
2．分泌型IgA(SIgA）的测定 SIgA是粘膜抗感染的重要因素，但是粘膜抗感染还包括少量渗出的IgM和IgG，还有细胞免疫的作用。由SIgA缺陷病人常可检测出针对牛奶或其他食物蛋白的沉淀抗体和自身抗体，说明机体对抗原蛋白质吸收异常，同时也存在免疫调节系统的功能紊乱。一般来说血清IgA缺陷病人常伴有SIgA缺陷，反之亦然。说明在机体中血清IgA和SIgA之间有某种生物相关性。最近也有报导少数SIgA缺陷病人的血清IgA水平正常，因而分别检查血清中和分泌液中IgA水平还是有必要的。目前用免疫比浊法可较精确地测定分泌液中IgA时和IgM和IgC水平。在用单向免疫扩散和免疫比浊法定量IgA时，因抗血清是针对这两型共有的α链的，故不能区分SIgA和血清来源的IgA。而应用抗分泌小体的抗体用酶免疫分析法，可区分血清IgA和分泌型IgA，并可对SIgA进行定量。常见抗体的测定检测体液免疫功能的另一种方法是定量测定正常人体内的几种常见的抗体水平。常见的抗体通常是指嗜异性凝集素、抗溶血素O抗体以及麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒的抗体。
在严重免疫缺陷病人缺乏上述抗体，常见抗体的缺损可验证或支持免疫蛋白测定的结果。然而对于比较复杂的免疫缺陷，由于这类抗体主要反映过去的免疫应答能力，此外这种初次应答能力持续期短，易于消退，所以对新近发生的继发性免疫缺陷的诊断帮助不大。 原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍，细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失，蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用，病毒感染（艾滋病）等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中可检查B细胞的数目和功能以确定造成缺损的原因。
1．外周血B细胞数目的检测首先进行常规的外周血白细胞总数和分类计数检查，这些结果是评价病人免疫系统功能状态的基本资料。由于在全血中淋巴细胞所占比例很少，而T细胞和B细胞不能藉形态学特征分类，所以外周血B细胞数检测需先从全血分离出富含淋巴细胞的单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBM）。再依靠B细胞表面有免疫球蛋白分子或其他特征来检查B细胞。常用的方法是将待检者的PBM用FITC标记的免疫抗人Ig作直接免疫荧光染色，在荧光显微镜下显荧光的细胞为带有表面免疫球蛋白的B细胞。正常人B细胞的约占PBM的10%。
2．外周血B细胞功能的检测 分离受检者血液PBM细胞，体外培养时加入B细胞刺激物如RWM（美洲商陆刺激素）或SAC（金黄色莆萄球菌来源的刺激物）后由B细胞变成Ig分泌细胞的数量。体液免疫功能缺损患者，其PBM对PWM和SACA刺激的反应降低，产生Ig分泌细胞数正常人显着减少。在进一步检查这种免疫缺损的原因，则应检查是由B细胞或TH细胞缺损所致，还是由于TS细胞数量或活性增强引起的。
抗体形成细胞计数：检查人类Ig分泌细胞是用反向溶血空斑检测（reversed hemolyticplaque assay）法。将待检人的PBM、用SPA包被的SRBC（SPA-SRBC）、兔抗人Ig抗体、补体四种成分混合，灌入用两张玻片做成的小室，密封好，放入温箱培养1-3小时，，在此期间，作为抗人Ig抗体的免疫IgG的FC段可与SRBC表面SPA结合，当Ig分细胞分泌出游离的Ig分子时，这些人Ig分子与SRBC表面的抗人Ig抗体结合形成免疫复合物，即可活化补体，使SPA-SRBC溶解，因此在Ig分泌细胞周围形成一个圆形的溶血区，称为溶血空斑，每一个溶血的空斑就代表一个Ig分泌细胞。
检查小鼠Ig分泌细胞应用的溶血空斑试验比较简单，即SRBC免疫注射小鼠，4天后取脾制成单个细胞悬液，加入一定量SRBC（靶细胞）混合，在补体参加下，产生抗体的细胞分泌出的Ig与SRBC（抗原）结合在补体作用下，溶血，表现肉眼可见的溶血空斑。计数空斑数代表分泌抗体的细胞数。

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4. 猪病常用的血清学诊断方法有哪些

抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应，这种反应称为抗原抗体反应，习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应，体外的抗原抗体反应称为血清学反应，因为抗体主要存在于血清中。

血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原，也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理，设计了许多血清学诊断方法，不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物，或其抗原性成分，而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时，可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统，使其变为可见或可测状态。

目前已知的血清学诊断方法很多，现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法：

（1）凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种：

①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原（经分离培养后）的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原（丹毒杆菌的纯培养液）测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下：

a.材料猪丹毒凝集抗原，玻片，9号针头，酒精棉球，酒精灯，铂耳（取血环）等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴，置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头，铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉，以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合，在2～3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集，为阳性反应。否则为阴性。

②试管凝集试验是一种定量法，用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价，可做临床的辅助诊断，或用于流行病学监测。在猪场中，本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。

A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原（1∶20倍稀释），布氏杆菌病阳性血清、阴性血清（1∶25倍稀释），稀释液（0.5 %石炭酸生理盐水），灭菌小试管，1毫升吸管，试管架，待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上，设阳性和阴性血清及抗原对照各1支，测定管4支，以后每增加1个样品，只需增加4支测定管。

按表10示意稀释血清，加抗原，完成后每支试管内应含1毫升液体。

5. 病毒的血清学技术有什么作用

这是检测病毒的有效办法。血清学诊断和鉴定病毒的方法很多，常见的有ELISA（酶联免疫吸附法）、免疫电镜、琼脂双扩散、免疫电泳等。其中，ELISA（酶联免疫吸附法）为世界公认的植物病毒检测方法。应用抗血清鉴定植物病毒的亲缘关系，检测花卉的种子、鳞球茎和苗木中传带的病毒，是植物病毒检疫和检测上常用的快速鉴定和检验技术，经常和生物学、电镜技术等配合使用。

血清学反应的原理是人或高等动物对于侵入自身的有些异体物质产生免疫反应，即异体物质刺激淋巴组织产生相应的球蛋白称为抗体，能刺激机体产生抗体的异物称为抗原，抗原与其相对应抗体可以在机体内或机体外进行特异性反应，这种反应可以被用来预防疾病（人或动物）、鉴定和检测病原物。

抗原的分子具有许多化学活性基团，称为抗原决定簇，它们的一定结构决定了抗原的特异性。一般来说，抗原决定簇数目愈多，抗原性就愈强。植物病毒是核蛋白，外壳由许多亚基组成，抗原决定簇位于亚基上。植物病毒是良好的抗原，其蛋白外壳，尤其是外壳的表面起着抗原的作用；单链核酸虽不能作为抗原，但它与外壳蛋白同时存在时，能增强外壳在动物体内的免疫反应；一般来说，植物病毒比其寄主的正常植物蛋白有更强的抗原性。

抗体是动物机体受到抗原刺激后，由动物机体的免疫活性细胞产生的免疫球蛋白，通常以“Ig”来表示。在抗体中至少含有5种免疫球蛋白，即IgG，IgM，IgD和IgE，其中以IgG最主要，约占70%～90%。IgG为易弯曲的Y形分子。由4条多肽链（2条重链和2条轻链）借4个2硫链连接组成。链的一端为氨基端，另一端为羧基端，酶可以降解IgG成为断片。常用木瓜酶和胃酶。前者将IgG降解成Fab和Fc两种片段；后者降解为F（ab）2和FC两种片段。Fab片段有抗体活性，1个Fab与1个抗原分子结合；F（ab）2为双体，可与2个抗原分子结合。抗体存在于免疫动物的血清或体液中。

植物病毒的抗血清，是将病毒的提纯液作为抗原，一般以家兔，有时也以小鼠或母鸡等为免疫动物，通过静脉、肌肉或腹腔等途径，逐渐增加剂量，多次注射抗原。待抗体产生后，采血，取出其血清即为该病毒的抗血清。免疫家兔产生的抗血清称为兔抗体；免疫小鼠产生含特异抗体的腹水，采收的腹水，内含“腹水抗体”；免疫母鸡，产生含抗体的鸡蛋，从蛋黄中提取的抗体称为“蛋黄抗体”。运用细胞融合技术，将小鼠骨髓瘤细胞和小鼠脾细胞杂交，产生杂交瘤细胞，其增殖能力很强，可在体外连续培养产生抗体。选择其中能产生某单一抗体的细胞株，所产抗体称“单克隆抗体”。单克隆抗体开创了在动物体外产生抗体的新时代。

这里介绍几种常用的血清学检测技术。

1 免疫双扩散法

又称奥氏琼脂双扩散法。琼脂在水中加热溶解，冷却时成为凝胶平板，在上打数孔，分别放入抗原和抗体，它们各自向凝胶中扩散，于抗原和抗体比例最适的位置上形成沉淀反应。

具体步骤：按每1～2g（一般用1.2g）琼脂粉，于100ml生理盐水中，置沸水浴或家用高压锅中溶化，配成1%～2%琼脂，加0.1%叠氮化钠，防腐，用吸管或其他物品，将琼脂均匀地铺于洁净的玻璃平板（可用载玻片或裁制成的大小一致的玻板）上，以热的琼脂液刚铺满为限，约1.5～2mm厚，静止待凝固，制成的琼脂板置保湿器皿中待用。检测时，琼脂板下放一“孔排列图”，用打孔器按图样打孔。孔的排列方式很多，有梅花形，有7孔，即中间1孔，四周6孔；方阵形，有5孔，即中间1孔，四周4孔（图1）。打出孔后，用针或吸器将孔中凝胶圆片取出，在孔中加适宜稀释度的抗原或抗体，抗原孔中应包括已知阳性抗原、待测抗原和健株对照，可以用病健株的汁液或提纯病毒液。加满各孔，持平放于保湿器中数小时或放置至次日，在有黑背景的散射或斜射灯光上方观察沉淀线。抗原和抗体的适宜浓度是影响反应结果的主要因素，因此必须注意：第一，孔径和孔距（相邻两孔边的最短距离）要适宜，两者之比以2∶1为宜，即孔距等于孔的半径，孔距过大，沉淀线便不能出现或变模糊，并且反应时间拉长，不能很快见到结果；第二，掌握反应物的最适浓度，为此，对所用抗体或抗原，分别作倍比稀释，先测知两者反应的最适浓度后，再进行正式反应。

图1 打孔图样